如何規(guī)范病原體檢測及結果的正確解讀

如何規(guī)范病原體檢測及結果的正確解讀演示文稿本文檔共43頁；當前第1頁；編輯于星期日\12點37分（優(yōu)選）如何規(guī)范病原體檢測及結果的正確解讀本文檔共43頁；當前第2頁；編輯于星期日\12點37分一.病原體檢測的目的本文檔共43頁；當前第3頁；編輯于星期日\12點37分抗感染治療經(jīng)驗治療(empiricaltherapy)推測可能的病原體及敏感性選用藥物；建立在流行病學資料之上（重要參考耐藥監(jiān)測資料）；建立在概率權衡上，為保證有效概率常常以選用廣譜、強效抗菌藥為代價；治療初始的必然選擇，亦用于非重癥感染。病原治療(目標治療，targettherapy)根據(jù)病原學診斷、藥敏選擇藥物，是理想之選；醫(yī)院感染、重癥社區(qū)感染應確保達到病原治療；臨床微生物室起關鍵作用；培養(yǎng)結果的準確解讀。本文檔共43頁；當前第4頁；編輯于星期日\12點37分臨床病原體檢查目的1.感染性疾病的明確診斷；2.通過藥敏試驗指導臨床合理用藥；3.病原體監(jiān)控和耐藥性監(jiān)控。本文檔共43頁；當前第5頁；編輯于星期日\12點37分臨床病原體檢查的意義病原學檢測是抗感染治療的基石，對提高療效、改善預后、降低費用和減少不良反應極其重要；臨床微生物實驗室是臨床的重要“情報部門”，是抗感染治療的“眼睛”；臨床與實驗室的充分溝通有助于改善雙方工作。本文檔共43頁；當前第6頁；編輯于星期日\12點37分協(xié)助明確疾病診斷推測病程進展

制定治療措施觀察病情病原體檢測的意義本文檔共43頁；當前第7頁；編輯于星期日\12點37分各種不同病原體的實驗診斷方法遵循以下基本原則1.正確、規(guī)范采集和運送標本。2.直接顯微鏡查見病原體或檢出病原體抗原，借助分子生物學的方法檢測病原體核酸，結合病人的病史、癥狀或體征，快速作出初步診斷。本文檔共43頁；當前第8頁；編輯于星期日\12點37分各種不同病原體的實驗診斷方法遵循以下基本原則3.初步診斷同時，對病原體進行分離與鑒定。4.檢測機體對病原體的免疫產(chǎn)物。5.參與臨床選擇抗菌藥物，指導和監(jiān)控微生物的治療方案，避免耐藥菌株的產(chǎn)生。本文檔共43頁；當前第9頁；編輯于星期日\12點37分二.臨床標本的正確采集本文檔共43頁；當前第10頁；編輯于星期日\12點37分臨床病原體檢查的基本程序醫(yī)生、護士、病人、檢驗師：正確采集運送標本。檢驗科：直接鏡檢、免疫學和分子生物檢測、病原體分離培養(yǎng)鑒定、藥敏實驗——報告結果。醫(yī)生：明確診斷、合理用藥。有資料顯示，微生物室的誤差71%是實驗前因素造成的。本文檔共43頁；當前第11頁；編輯于星期日\12點37分標本采集的基本原則無菌、及時、按照要求、標注清晰根據(jù)病史與臨床表現(xiàn)確定標本采集的類型與部位，盡量采集病變明顯部位標本。在發(fā)病的早期或急性期采集標本，最好在抗菌藥物使用前（如使用過抗菌藥物應在申請單上注明）。采集標本防止污染，并置于無菌容器，加蓋密封、立即送檢。標本必須貼上標簽，與檢驗申請單同時送檢。本文檔共43頁；當前第12頁；編輯于星期日\12點37分標本送檢標本要求在30min內(nèi)送檢，否則影響陽性率。烈性傳染病標本需專人護送。本文檔共43頁；當前第13頁；編輯于星期日\12點37分

遵照醫(yī)囑充分準備

嚴格查對

正確采集

及時送檢標本采集的原則本文檔共43頁；當前第14頁；編輯于星期日\12點37分標本的采集和送檢六原則避免雜菌污染不同期不同標本用抗菌藥物前采集病變明顯部位運送注意保存標本必須新鮮本文檔共43頁；當前第15頁；編輯于星期日\12點37分拒收標本1.樣本上無病患標簽或病患標簽與檢驗申請單不符合。2.樣本以不適當?shù)臏囟取⑦\送培養(yǎng)基及容器運送。3.樣本的量不足、已被防腐劑固定和運送時間過長。4.樣本外漏、容器破損及明顯受污染的樣本。5.樣本的檢驗項目申請不適合進行。6.當日重復送樣本（除血液培養(yǎng)外）。7.已接觸空氣的厭養(yǎng)菌檢測標本。8.被正常厭養(yǎng)菌污染的標本，要求檢測。本文檔共43頁；當前第16頁；編輯于星期日\12點37分三.病原體檢測方法本文檔共43頁；當前第17頁；編輯于星期日\12點37分臨床常見病原體檢查方法直接顯微鏡檢血清學診斷(查特異性抗原/抗體)病原體核酸檢測(PCR.DNA探針)病原體的分離培養(yǎng)和鑒定本文檔共43頁；當前第18頁；編輯于星期日\12點37分致病菌的檢驗程序標本直接涂片染色鏡檢分離培養(yǎng)形態(tài)特征生化試驗血清學試驗動物實驗明確診斷初步診斷血清學診斷細菌的快速鑒定形態(tài)學檢查（常規(guī)培養(yǎng)或特殊培養(yǎng)）（凝集試驗、沉淀反應、免疫標記技術等）(微生物數(shù)字編碼分類鑒定法、血培養(yǎng)自動化檢測系統(tǒng)、核酸雜交技術、PCR技術、DNA芯片技術等）藥物敏感試驗本文檔共43頁；當前第19頁；編輯于星期日\12點37分臨床感染常見病原體檢查細菌形態(tài)學檢查直接觀察法染色標本鏡檢本文檔共43頁；當前第20頁；編輯于星期日\12點37分革蘭氏陽性球菌革蘭氏陰性桿菌本文檔共43頁；當前第21頁；編輯于星期日\12點37分墨汁染色找新型隱球菌

抗酸染色陰性桿菌生長速度快于陽性球菌、念珠菌！本文檔共43頁；當前第22頁；編輯于星期日\12點37分常用的血清學診斷方法類型診斷應用舉例直接凝集試驗傷寒和副傷寒（肥達試驗）、立克次體（外斐試驗）、鉤端螺旋體（顯微凝集試驗）乳膠凝集試驗檢測腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌等抗體沉淀試驗梅毒（VDRL、RPR試驗）補體結合試驗檢測Q熱柯克斯體等抗體中和試驗風濕熱（抗O試驗）ELISA廣泛用于病原體的診斷和流行病學調(diào)查本文檔共43頁；當前第23頁；編輯于星期日\12點37分24病毒感染的微生物學檢查法

本文檔共43頁；當前第24頁；編輯于星期日\12點37分臨床感染常見病原體檢查真菌感染(fungiinfection)1.直接檢查：孢子與菌絲2.分離培養(yǎng)3.血清學檢測4.分子生物學檢查本文檔共43頁；當前第25頁；編輯于星期日\12點37分G試驗(1-3)-β-D-葡聚糖是真菌的重要組成成份,廣泛存在于除接合菌之外的真菌細胞壁中,占真菌細胞壁成分的50%以上。深部真菌感染時,(1-3)-β-D-葡聚糖可從胞壁中釋放出來,進入血液及其他體液中,即可以檢測到其中的(1-3)-β-D-葡聚糖水平異常升高。而淺表真菌感染或真菌定植時血清(1-3)-β-D-葡聚糖則常不會升高。通過對血清中(1-3)-β-D-葡聚糖的檢測,發(fā)現(xiàn)其對系統(tǒng)性真菌感染的診斷有重要價值,為早期快速確診深部真菌感染提供有力證據(jù)。含量大于50pg/ml判為陽性本文檔共43頁；當前第26頁；編輯于星期日\12點37分GM試驗GM試驗檢測的是半乳甘露聚糖，曲霉菌特有的細胞壁多糖成分是β（1-5）呋喃半乳糖殘基，菌絲生長時，半乳甘露聚糖從薄弱的菌絲頂端釋放，是最早釋放的抗原。GM釋放量與菌量成正比，可以反映感染程度。連續(xù)檢測GM可作為治療療效的監(jiān)測。以下情況可出現(xiàn)假陽性：⑴已使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦；⑵新生兒和兒童；⑶血液透析；⑷自身免疫性肝炎等；⑸食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。以下情況可出現(xiàn)假陰性：⑴釋放入血循環(huán)中的曲霉GM（包括甘露聚糖）并不持續(xù)存在而是會很快清除；⑵以前使用了抗真菌藥物；⑶病情不嚴重；⑷非粒細胞缺乏的患者。陽性：≥0.5本文檔共43頁；當前第27頁；編輯于星期日\12點37分臨床感染常見病原體檢查其他病原體感染：1.支原體檢測：分離培養(yǎng)和分子生物學技術2.螺旋體檢測：暗視野顯微鏡檢、血清學檢測3.立克次體檢測4.衣原體檢測：分離培養(yǎng)5.原蟲檢測螺旋體本文檔共43頁；當前第28頁；編輯于星期日\12點37分四.檢測結果的正確解讀本文檔共43頁；當前第29頁；編輯于星期日\12點37分1.細菌培養(yǎng)的意義培養(yǎng)陽性≠感染排除污染排除定植任何結果都必須結合臨床癥狀及其它相關檢查進行綜合分析本文檔共43頁；當前第30頁；編輯于星期日\12點37分培養(yǎng)陰性≠排除感染標本采集部位和方法是否在使用抗菌藥物時留取的標本？標本運送時間和方法是否正確標本接種、培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法的選擇是否正確是否可能是厭氧菌或其它難培養(yǎng)的細菌感染細菌培養(yǎng)的意義本文檔共43頁；當前第31頁；編輯于星期日\12點37分本文檔共43頁；當前第32頁；編輯于星期日\12點37分當前血培養(yǎng)存在的問題采樣時污染嚴重培養(yǎng)一次陰性作為診斷依據(jù)血液與培養(yǎng)基比例不正確采樣時間不正確少做厭氧培養(yǎng)不能及時報告國際上仍然公認血培養(yǎng)是診斷血流感染的金標準！本文檔共43頁；當前第33頁；編輯于星期日\12點37分痰培養(yǎng)陽性結果分析常見有三種情況第一種情況：患者有典型的呼吸道感染癥狀，按細菌藥敏報告選抗菌藥物療效明顯這類患者的痰標本共同特征：痰涂片革蘭染色:見大量的白細胞，并見白細胞吞噬或伴行大量形態(tài)一致的非上呼吸道正常菌；痰培養(yǎng)：生長大量非上呼吸道正常菌，痰培養(yǎng)與痰涂片所見一致結論：報告的細菌為病原菌。本文檔共43頁；當前第34頁；編輯于星期日\12點37分痰培養(yǎng)陽性結果分析第二種情況：患者有典型的呼吸道感染癥狀，按細菌報告選用的抗菌藥物治療無效，改為憑經(jīng)驗聯(lián)合用藥這類患者痰細菌檢驗時有如下特征：痰涂片：大量白細胞，吞噬或伴行的是革蘭陽性球菌（形似葡萄球菌）、革蘭染色陰陽不定的小球菌或桿菌（形似厭氧菌）、出芽的念珠菌，偶見革蘭陰性桿菌；痰培養(yǎng)：生長大量陰性桿菌，痰涂片所見的大量細菌不生長或少量生長，痰涂片鏡檢與痰培養(yǎng)結果不一致。結論：報告的細菌為定植菌本文檔共43頁；當前第35頁；編輯于星期日\12點37分痰培養(yǎng)陽性結果分析第三種情況：患者的感染已基本治愈，做痰檢的目的是希望得到一張陰性報告作為停止治療、出院的憑證這類患者的痰做細菌檢驗時的特征：痰涂片：顯示標本來自上呼吸道,大量上皮細胞,大量陰性桿菌，少量白細胞。痰培養(yǎng)：生長大量陰性桿菌，較常見的是綠膿桿菌和不動桿菌結論：報告的細菌為定植菌。本文檔共43頁；當前第36頁；編輯于星期日\12點37分痰標本涂片檢查合格痰液標本鱗狀上皮<10個/低倍視野、白細胞>25個/低倍視野不合格痰液標本大量鱗狀上皮細胞未見吞噬細胞本文檔共43頁；當前第37頁；編輯于星期日\12點37分本文檔共43頁；當前第38頁；編輯于星期日\12點37分細菌分離培養(yǎng)與鑒定的結果評價正常人群的無菌體液中檢測到細菌，應考慮細菌為感染的病原體。存在正常菌群的標本檢測到細菌，應結合細菌的量考慮是否為致病菌。如臨床表現(xiàn)支持感染，但培養(yǎng)陰性，應考慮為標本不合格、培養(yǎng)不恰當?shù)纫蛩?。直接鏡檢找到病原體，而培養(yǎng)陰性，應考慮有L細菌、厭氧菌或苛氧菌感染。本文檔共43頁；當前第39頁；編輯于星期日\12點37分2.病毒分離培養(yǎng)與鑒定的意義必須結合流行病學資料、臨床表現(xiàn)、標本來源及病毒種類加以分析。從組織、血液以及腦脊液中分離到病毒可明確診斷。從呼吸道、腸道等分離到病毒，如該病毒人體不能長期攜帶，有診斷價值，如麻疹病毒、流感病毒等。反之需相應的臨床表現(xiàn)，才有病原學意義，如巨細胞病毒，腸道病毒等。陰性不能排除病毒感染。本文檔共43頁；當前第40頁；編輯于星期日\12點37分病原體核酸檢測結果評價是檢測病原體微生物最靈敏的方法，但具有一定的假陽性與假陰性。陽性只表明存在某種病原體的核酸，是否正被感染應結合臨床具體分析。本文檔共43頁；當前第41頁；編輯于星期日\12點