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文檔簡介

生化核酸結構與功能詳解演示文稿本文檔共54頁;當前第1頁;編輯于星期日\19點16分優(yōu)選生化核酸結構與功能本文檔共54頁;當前第2頁;編輯于星期日\19點16分二、核酸的分類及分布

90%以上分布于細胞核,其余分布于核外如線粒體,葉綠體,質粒等。分布于胞核、胞液。(DNA)(RNA)脫氧核糖核酸

核糖核酸攜帶遺傳信息,決定細胞和個體的基因型(genotype)。參與細胞內DNA遺傳信息的表達。某些病毒RNA也可作為遺傳信息的載體。本文檔共54頁;當前第3頁;編輯于星期日\19點16分第一節(jié)核酸的化學組成及一級結構TheChemicalComponentandPrimaryStructureofNucleicAcid本文檔共54頁;當前第4頁;編輯于星期日\19點16分一、核酸的化學組成1.元素組成C、H、O、N、P2.分子組成——堿基(base):嘌呤堿,嘧啶堿——戊糖(ribose):核糖,脫氧核糖——磷酸(phosphate)本文檔共54頁;當前第5頁;編輯于星期日\19點16分嘌呤(purine)腺嘌呤(adenine,A)鳥嘌呤(guanine,G)堿基本文檔共54頁;當前第6頁;編輯于星期日\19點16分嘧啶(pyrimidine)胞嘧啶(cytosine,C)尿嘧啶(uracil,U)胸腺嘧啶(thymine,T)本文檔共54頁;當前第7頁;編輯于星期日\19點16分Pentose本文檔共54頁;當前第8頁;編輯于星期日\19點16分Nucleoside本文檔共54頁;當前第9頁;編輯于星期日\19點16分Nucleotide本文檔共54頁;當前第10頁;編輯于星期日\19點16分本文檔共54頁;當前第11頁;編輯于星期日\19點16分二、核酸的一級結構定義核酸中核苷酸的排列順序,也稱為堿基序列。5′端3′端CGA本文檔共54頁;當前第12頁;編輯于星期日\19點16分AGP5PTPGPCPTPOH3書寫方法5pApCpTpGpCpT-OH

35

ACTGCT

3本文檔共54頁;當前第13頁;編輯于星期日\19點16分第二節(jié)DNA的空間結構與功能DimensionalStructureandFunctionofDNA本文檔共54頁;當前第14頁;編輯于星期日\19點16分一、DNA的二級結構——雙螺旋結構本文檔共54頁;當前第15頁;編輯于星期日\19點16分WATSONCRICK本文檔共54頁;當前第16頁;編輯于星期日\19點16分(一)DNA雙螺旋結構的研究背景

堿基組成分析Chargaff規(guī)則:[A]=

[T][G]

[C]

堿基的理化數據分析A-T、G-C以氫鍵配對較合理DNA纖維的X-線衍射圖譜分析本文檔共54頁;當前第17頁;編輯于星期日\19點16分(二)DNA雙螺旋結構模型要點(Watson,Crick,1953)DNA分子由兩條相互平行但走向相反的脫氧多核苷酸鏈組成,以右手螺旋方式繞同一公共軸盤。螺旋直徑為2.37nm。本文檔共54頁;當前第18頁;編輯于星期日\19點16分堿基垂直螺旋軸居雙螺旋內側,與對側堿基形成氫鍵配對(互補配對形式:A=T;GC)。相鄰堿基平面距離0.34nm,螺旋一圈螺距3.54nm,一圈10.5對堿基。(二)DNA雙螺旋結構模型要點(Watson,Crick,1953)本文檔共54頁;當前第19頁;編輯于星期日\19點16分氫鍵維持雙鏈橫向穩(wěn)定性,堿基堆積力維持雙鏈縱向穩(wěn)定性。(二)DNA雙螺旋結構模型要點(Watson,Crick,1953)本文檔共54頁;當前第20頁;編輯于星期日\19點16分(三)DNA雙螺旋結構的多樣性本文檔共54頁;當前第21頁;編輯于星期日\19點16分二、DNA的超螺旋結構及其在染色質中的組裝(一)DNA的超螺旋結構超螺旋結構DNA雙螺旋鏈再盤繞形成超螺旋結構。正超螺旋

盤繞方向與DNA雙螺旋方同相同負超螺旋盤繞方向與DNA雙螺旋方向相反本文檔共54頁;當前第22頁;編輯于星期日\19點16分本文檔共54頁;當前第23頁;編輯于星期日\19點16分(二)原核生物DNA的高級結構本文檔共54頁;當前第24頁;編輯于星期日\19點16分(三)DNA在真核生物細胞核內的組裝真核生物染色體由DNA和蛋白質構成,其基本單位是核小體(nucleosome)。核小體的組成DNA:約200bp組蛋白:H1H2A,H2BH3H4本文檔共54頁;當前第25頁;編輯于星期日\19點16分本文檔共54頁;當前第26頁;編輯于星期日\19點16分三、DNA的功能DNA的基本功能是以基因的形式荷載遺傳信息,并作為基因復制和轉錄的模板。是生命遺傳的物質基礎,也是個體生命活動的信息基礎?;?指DNA分子中的特定區(qū)段,其中的核苷酸排列順序決定了基因的功能?;蚪M本文檔共54頁;當前第27頁;編輯于星期日\19點16分

第三節(jié)

RNA的結構與功能StructureandFunctionofRNA本文檔共54頁;當前第28頁;編輯于星期日\19點16分RNA的種類、分布、功能本文檔共54頁;當前第29頁;編輯于星期日\19點16分一、信使RNA的結構與功能hnRNA內含子(intron)mRNA*mRNA成熟過程

外顯子(exon)本文檔共54頁;當前第30頁;編輯于星期日\19點16分*mRNA結構特點1.大多數真核mRNA的5′末端均在轉錄后加上一個7-甲基鳥苷,同時第一個核苷酸的C′2也是甲基化,形成帽子結構:m7GpppNm-。2.大多數真核mRNA的3′末端有一個多聚腺苷酸(polyA)結構,稱為多聚A尾。本文檔共54頁;當前第31頁;編輯于星期日\19點16分帽子結構本文檔共54頁;當前第32頁;編輯于星期日\19點16分mRNA核內向胞質的轉位mRNA的穩(wěn)定性維系翻譯起始的調控帽子結構和多聚A尾的功能本文檔共54頁;當前第33頁;編輯于星期日\19點16分DNAmRNA蛋白轉錄翻譯*mRNA的功能把DNA所攜帶的遺傳信息,按堿基互補配對原則,抄錄并傳送至核糖體,用以決定其合成蛋白質的氨基酸排列順序。本文檔共54頁;當前第34頁;編輯于星期日\19點16分*

tRNA的一級結構特點核苷酸殘基數在60-90之間;含10~20%稀有堿基,如DHU3′末端為—CCA-OH5′末端大多數為pG二、轉運RNA的結構與功能本文檔共54頁;當前第35頁;編輯于星期日\19點16分

稀有堿基本文檔共54頁;當前第36頁;編輯于星期日\19點16分*tRNA的二級結構——三葉草形

氨基酸臂

DHU環(huán)反密碼環(huán)額外環(huán)

TΨC環(huán)本文檔共54頁;當前第37頁;編輯于星期日\19點16分*tRNA的三級結構——倒L形*tRNA的功能活化、搬運氨基酸到核糖體,參與蛋白質的翻譯。本文檔共54頁;當前第38頁;編輯于星期日\19點16分本文檔共54頁;當前第39頁;編輯于星期日\19點16分*rRNA的結構三、核蛋白體RNA的結構與功能*rRNA的功能參與組成核蛋白體,作為蛋白質生物合成的場所。本文檔共54頁;當前第40頁;編輯于星期日\19點16分*rRNA的種類(根據沉降系數)真核生物5SrRNA28SrRNA5.8SrRNA18SrRNA原核生物5SrRNA23SrRNA16SrRNA本文檔共54頁;當前第41頁;編輯于星期日\19點16分四、其他非編碼RNA除了上述三種RNA外,細胞的不同部位存在的許多其他種類的小分子RNA,統(tǒng)稱為非編碼RNA(non-codingRNAs,nmRNAs)。

ncRNAs本文檔共54頁;當前第42頁;編輯于星期日\19點16分核酸的理化性質ThePhysicalandChemicalCharactersofNucleicAcid第四節(jié)本文檔共54頁;當前第43頁;編輯于星期日\19點16分一.核酸的紫外吸收本文檔共54頁;當前第44頁;編輯于星期日\19點16分1.DNA或RNA的定量OD260=1.0相當于50μg/ml雙鏈DNA40μg/ml單鏈DNA(或RNA)20μg/ml寡核苷酸2.判斷核酸樣品的純度DNA純品:OD260/OD280=1.8RNA純品:OD260/OD280=2.0OD260的應用本文檔共54頁;當前第45頁;編輯于星期日\19點16分二、DNA的變性(denaturation)定義:在某些理化因素作用下,DNA雙鏈解開成兩條單鏈的過程。理化因素:過量酸,堿,加熱,變性試劑如尿素以及某些有機溶劑如乙醇、丙酮等。變性后其它理化性質變化:OD260增高 粘度下降比旋度下降 浮力密度升高酸堿滴定曲線改變 生物活性喪失本文檔共54頁;當前第46頁;編輯于星期日\19點16分DNA變性的本質是雙鏈間氫鍵的斷裂本文檔共54頁;當前第47頁;編輯于星期日\19點16分例:變性引起紫外吸收值的改變DNA的紫外吸收光譜增色效應:DNA變性時其溶液OD260增高的現象。本文檔共54頁;當前第48頁;編輯于星期日\19點16分Tm:紫外光吸收值達到最大變化值的50%時的溫度稱為DNA的解鏈溫度,又稱融解溫度(Tm)。其大小與G+C含量成正比。本文檔共54頁;當前第49頁;編輯于星期日\19點16分三、DNA的復性與分子雜交DNA復性(renaturation)在適當條件下,變性DNA的兩條互補鏈可恢復天然的雙螺旋構象,稱為復性。減色效應DNA復性時,其溶液OD260降低。熱變性的DNA經緩慢冷卻后即可復性,稱為退火(annealing)。本文檔共54頁;當前第50頁;編輯于星期日\19點16分在DNA變性后的復性過程中,將不同種類的DNA單鏈分子或RNA分子放在同一溶液中,只要兩種單鏈分子之間存在著一定程度的堿基配對關系,在適宜的條件(溫度及離子強度)下,就可以在不同的分子間形成雜化雙鏈(heteroduplex)。核酸

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