體外受精和早期胚胎培養(yǎng)

第二節(jié)體外受精和早期胚胎培養(yǎng)1988年3月10日，我國(guó)首例試管嬰兒我國(guó)試管嬰兒之母張麗珠教授和首例試管嬰兒鄭萌珠

試管嬰兒1978年7月26日，世界首例試管嬰兒“路易斯．布朗”在英國(guó)誕生，現(xiàn)已成為母親。思考問題：1.資料上用到了什么生物技術(shù)？2.試管嬰兒和母親正常懷孕，生產(chǎn)的過程有何異同？試管動(dòng)物技術(shù)

是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后，再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。存在困難：1、引進(jìn)一頭良種成年奶牛需要3萬－5萬元。2、牛的生育率低，一頭牛一胎只產(chǎn)一個(gè)，一生只能生育四五次。（牛的妊娠期約280天）牛的生育率雖然很低，但是牛的卵母細(xì)胞卻相當(dāng)?shù)亩?，其卵巢中卵母?xì)胞數(shù)目要比一生中排卵數(shù)多1000倍左右。公牛產(chǎn)生的精子數(shù)目就更多了（精子數(shù):50億/mL)理論基礎(chǔ)：討論1：是否有可能讓引進(jìn)的良種?？焖俅罅康姆敝常繛槭裁?？試管動(dòng)物技術(shù)快速繁殖動(dòng)物優(yōu)良品種目的：技術(shù)手段：體外受精和早期胚胎培養(yǎng)討論2：如何讓引進(jìn)的良種牛快速大量的繁殖？試管動(dòng)物技術(shù)的三個(gè)基本操作環(huán)節(jié)：第一步：體外受精

第二步：胚胎的早期培養(yǎng)第三步：胚胎移植精子卵子受精卵早期胚胎胚胎①②③新個(gè)體哺乳動(dòng)物個(gè)體發(fā)育過程試管動(dòng)物一、體外受精體外受精：采取雌性動(dòng)物的卵細(xì)胞和雄性動(dòng)物的精子，使其在體外（試管中）受精。過程：卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)、精子的采集和獲能、受精閱讀教材：P69—71思考：1、卵母細(xì)胞的采集有哪些方法？

2、精子的采集有哪些方法？

3、體外受精前需要對(duì)生殖細(xì)胞做哪些處理？

方法1：給供體注射促性腺激素，使一頭母畜的卵巢一次排出比自然情況下多幾倍到十幾倍的卵子（超數(shù)排卵），之后從輸卵管中沖取卵子，直接與獲能的精子在體外受精。1、卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)方法2-1：從屠宰場(chǎng)得到的廢棄牛卵巢中采集卵母細(xì)胞借助超聲波探測(cè)儀、內(nèi)窺鏡或腹腔鏡等的引導(dǎo)，從活母畜卵巢采集卵母細(xì)胞。操作員先將帶有超聲波探頭和吸卵針的采卵器通過生殖道插入子宮，同時(shí)將探頭貼在卵巢上。根據(jù)B超屏幕所顯示的卵泡位置，利用采卵針穿刺卵泡并同時(shí)抽吸卵母細(xì)胞。方法2-2：從活體卵巢中采集卵母細(xì)胞CO2培養(yǎng)箱復(fù)習(xí)：動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件是什么？卵母細(xì)胞的成熟培養(yǎng)操作對(duì)象采集方法培養(yǎng)方法實(shí)驗(yàn)動(dòng)物如鼠、兔以及家畜豬、羊等用促性腺激素處理，使其排出更多的卵子，再?gòu)妮斅压苤袥_取卵子大家畜或大型動(dòng)物1.從剛屠宰的雌性動(dòng)物體內(nèi)摘取卵巢，從卵巢中采集卵母細(xì)胞2.活體采卵：直接從活體動(dòng)物的卵巢中吸取卵母細(xì)胞可直接與獲能的精子體外受精采集的卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)成熟后才能與獲能的精子受精

比較兩種方法采集的卵母細(xì)胞在體外受精前的處理有所不同2.精子的收集和獲能1)收集的方法:假陰道法,手握法和電刺激等2)獲能處理:培養(yǎng)法：把精子放入獲能液中。（嚙齒動(dòng)物、家兔和豬）化學(xué)法：把精子放入一定濃度肝素或鈣離子

載體A23187溶液中。（牛、羊）3.受精在獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤褐型瓿墒芫^程發(fā)育培養(yǎng)液獲能溶液或?qū)Ｓ玫氖芫芤韩@能的精子＋培養(yǎng)成熟的卵子胚胎完成受精二、胚胎的早期培養(yǎng):

應(yīng)用人工創(chuàng)造條件,對(duì)獲取的早期胚胎進(jìn)行體外培養(yǎng)

發(fā)育培養(yǎng)液成分:鹽類:無機(jī)鹽、有機(jī)鹽營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):氨基酸、核苷酸調(diào)節(jié)物質(zhì):維生素、激素特殊物質(zhì):動(dòng)物血清牛、羊：桑椹胚或囊胚小鼠、家兔：卵裂期或囊胚試管嬰兒：8個(gè)或16個(gè)細(xì)胞階段注意：不同動(dòng)物胚胎移植的時(shí)間不同注：目前尚無由受精卵到新生兒的全體外胚胎培養(yǎng)技術(shù)保存剩余的卵子和精子的方法是什么？試管動(dòng)物克隆動(dòng)物生殖方式技術(shù)手段遺傳物質(zhì)來源遺傳規(guī)律有性生殖核移植技術(shù)、胚胎移植遵循體外受精胚胎移植2個(gè)個(gè)體主要來自核供體試比較試管動(dòng)物和克隆動(dòng)物:無性生殖不遵循歸納小結(jié):采集卵母細(xì)胞體外培養(yǎng)采集精子體外獲能體外受精胚胎移植受體（時(shí)期：）方法：假陰道法

手握法

電刺激法（方法，試劑）早期胚胎培養(yǎng)（試劑）（培養(yǎng)條件、目的階段）成熟的卵子獲能的精子MII中期

1）超數(shù)排卵（試劑）

2）活體取卵（儀器）

3）從屠宰的卵巢取卵方法為充分利用屠宰母畜卵巢上的卵母細(xì)胞，不妨將屠宰場(chǎng)和“胚胎工廠”合建。這樣屠宰場(chǎng)的產(chǎn)品就不僅是鮮肉，還會(huì)生產(chǎn)出大量的胚胎和胚胎工程所需的原材料，你看這個(gè)想法可行嗎？奇思妙想“試管?！惫S化生產(chǎn)的技術(shù)流程圖采集良種母牛的卵母細(xì)胞卵母細(xì)胞的體外培養(yǎng)采集良種公牛精子精子體外獲能體外受精良種牛體外受精胚胎胚胎移植受體牛良種犢牛成熟期牛屠宰加工廠市場(chǎng)采集卵巢中的卵母細(xì)胞1999年4月23日晚9時(shí)，在廣州中山醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院出生一健康女嬰，她是我國(guó)首例第三代試管嬰兒，父母身體健康、嬰兒的母親7年前生下一男嬰，孩子一歲后發(fā)病，最后死于腦出血，5年后，她第二次懷孕6個(gè)月時(shí)，到醫(yī)院抽羊水及臍帶血診斷，發(fā)現(xiàn)胎兒是男孩，而且是血友病患者，遂引產(chǎn)。夫婦二人最后來到中山醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院做試管嬰兒。醫(yī)生培養(yǎng)了7個(gè)可做活體檢查的胚胎，并抽取每個(gè)胚胎1－2個(gè)細(xì)胞進(jìn)行檢查后，選擇了兩個(gè)胚胎進(jìn)行移植,最后一個(gè)移植成功。根據(jù)資料回答下列問題:（1）試管嬰兒技術(shù)作為現(xiàn)代生物技術(shù)和母親正常懷孕，生產(chǎn)的過程相同之處是：不同之處是：受精作用在體外，并在體外發(fā)育成早期胚胎進(jìn)行胚胎移植通過有性生殖產(chǎn)生、在母體子宮內(nèi)發(fā)育形成胎兒（2）血友病的遺傳方式為（），如果用B、b分別表示血友病基因和正?；?，則父親、母親的基因型分別是（）和（），如果該夫婦再生一男孩，患血友病的概率是（）隱性遺傳伴X染色體XBY1/2XBXb（3）醫(yī)生抽取活體胚胎的1或2個(gè)細(xì)胞后，可通過觀察（），判斷胎兒的性別，你認(rèn)為醫(yī)生應(yīng)選用（