超高壓液相色譜

超高壓液相色譜第一頁(yè)，共十三頁(yè)，編輯于2023年，星期五第二頁(yè)，共十三頁(yè)，編輯于2023年，星期五基本內(nèi)容概述

原理特點(diǎn)

應(yīng)用

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不足第三頁(yè)，共十三頁(yè)，編輯于2023年，星期五超高壓液相色譜（UPLC）

超高壓液相色譜（UPLC）是指一種采用小粒徑填料色譜柱(<2μm)和超高壓系統(tǒng)(>100MPa)的新型液相色譜技術(shù)，可顯著改善色譜的分離度和檢測(cè)靈敏度，同時(shí)大大縮短分析周期，特別適用于微量復(fù)雜混合物的分離和高通量研究。

組成：進(jìn)樣系統(tǒng)、輸液系統(tǒng)、分離系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)第四頁(yè)，共十三頁(yè)，編輯于2023年，星期五第五頁(yè)，共十三頁(yè)，編輯于2023年，星期五原理UPLC保持了傳統(tǒng)HPLC的基本原理，但其分離效能和分析速度卻得到了全面提升，這歸功于其獨(dú)特的小顆粒色譜填料技術(shù)。在HPLC的速率理論中，VanDeemter方程可簡(jiǎn)化為：

H=A+B／v+Cv(1)其中：

H—理論塔板高度v—流動(dòng)相的平均線(xiàn)速第六頁(yè)，共十三頁(yè)，編輯于2023年，星期五A、B、C均為常數(shù)，其中：A—渦流擴(kuò)散項(xiàng)系數(shù)B—分子擴(kuò)散項(xiàng)系數(shù)C—傳質(zhì)阻力項(xiàng)系數(shù)各項(xiàng)均與固定相粒度(dp)相關(guān)如僅考慮dp對(duì)H的影響，(1)式可表示為：H=a(dp)+b／v+c(dp)2v(2)第七頁(yè)，共十三頁(yè)，編輯于2023年，星期五由（2）H=a(dp)+b／v+c(dp)2v可知：在相同線(xiàn)速度下，填料粒徑（dp）越小，理論塔板高度越小，柱效越高。

小顆粒填料的另一個(gè)重要特征是：當(dāng)增加流量(線(xiàn)速度)時(shí)塔板高度沒(méi)有明顯的增大，且維持在一定范圍內(nèi)，即在較大流量范圍內(nèi)保持較高的柱效。因此，可以通過(guò)增加流量來(lái)加快分離速度，同時(shí)維持較高的柱效和良好的分離效果。第八頁(yè)，共十三頁(yè)，編輯于2023年，星期五特點(diǎn)與其他液相色譜相比較，UPLC具有以下幾個(gè)特點(diǎn)：1、填料粒徑小，壓力大UPLCHPLC粒徑<2um5~10um壓力>100MPa30~60MPa2、檢測(cè)靈敏度高，重現(xiàn)性好。如采用UPLC／MS／MS分析大鼠血漿中的混合藥物時(shí)靈敏度提高了５～１０倍。第九頁(yè)，共十三頁(yè)，編輯于2023年，星期五3、快速、高效、高分辨的色譜模式4、進(jìn)樣系統(tǒng)一般常采用靜態(tài)切割、壓力平衡（采用一強(qiáng)一弱的雙溶劑進(jìn)樣）和自動(dòng)進(jìn)樣三種方式；5、輸液系統(tǒng)具有耐壓性能、各部分之間要有良好的密封；6、檢測(cè)系統(tǒng)使用高頻檢測(cè)器（短時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)的許多色譜峰需要更快的數(shù)據(jù)采集速率相適應(yīng)；需要降低樣品在檢測(cè)池內(nèi)的駐留時(shí)間）。第十頁(yè)，共十三頁(yè)，編輯于2023年，星期五應(yīng)用超高壓液相色譜（UPLC）是一種新型的色譜分析技術(shù)，可以單獨(dú)使用，也可以和其他色譜如質(zhì)譜聯(lián)用（UPLC／MS）。主要應(yīng)用有：中藥復(fù)雜成分的分析，環(huán)境監(jiān)測(cè)，農(nóng)藥殘留物的檢測(cè)及蛋謝組學(xué)等領(lǐng)域，且具有很好的推廣價(jià)值。第十一頁(yè)，共十三頁(yè)，編輯于2023年，星期五一、壓力高，溶劑的粘度會(huì)上升，流量降低（可根據(jù)設(shè)定的流量與實(shí)際流量進(jìn)行流量補(bǔ)償）二、流動(dòng)相以較高速度流過(guò)固定相時(shí)，因摩擦可產(chǎn)生熱量，加之流動(dòng)相和固定相的導(dǎo)熱性能較差，可導(dǎo)致溫度梯度的出現(xiàn)，造成峰展寬和柱效的下降（流動(dòng)相預(yù)冷）。三、在超高壓下運(yùn)行的色譜柱可能發(fā)生液體噴射和管壁迸裂。（不常發(fā)生）