抗生育膠囊對成年大鼠生育調(diào)控作用物質(zhì)基礎研究

抗生育膠囊對成年大鼠生育調(diào)控作用物質(zhì)基礎研究【摘要】目的觀察抗生育膠囊抗生育情況。方法通過應用口服中草藥節(jié)育膠囊對雄性育齡大鼠進行用藥前后睪丸生殖上皮細胞形態(tài)變化和血漿睪丸酮測定，觀察藥物抗生育情況。結(jié)果挑選出用藥前生育率達到100%的雌雄大鼠，觀察用藥后生育情況，結(jié)果生育率明顯下降，只有12%。血清睪酮用藥組較對照組明顯下降。結(jié)論說明中草藥抗生育膠囊生育調(diào)控作用確切，有一定研究價值。

【關鍵詞】中草藥；生育調(diào)控；物質(zhì)基礎研究

當前，伴隨著世界人口結(jié)構(gòu)的變化和我國計劃生育政策的逐漸實施，推廣應用安全有效、簡便經(jīng)濟的新型節(jié)育技術、新方法和避孕藥物，開發(fā)和利用傳統(tǒng)中草藥避孕方劑，提高避孕普及率、有效率和安全性，對男女生殖生育領域的研究已經(jīng)逐漸成為社會發(fā)展領域科技發(fā)展重點、熱點。然而我國傳統(tǒng)方法上節(jié)育環(huán)、口服激素類避孕藥等都把負擔加在婦女身上，有時不適應者還有一定副作用，給夫妻生活帶來許多不便。如炔諾酮類避孕藥長期使用，毒副反應甚多。為了尋找有效、無毒、方便的避孕藥，近10年來，很多學者進行了中草藥抗生育藥理研究，從中發(fā)掘出了很多有效的抗生育單味中草藥，中藥藥理作用研究表明一些單味中藥具有干擾精子生成或殺滅精子的作用，而復方中草藥抗生育研究國內(nèi)外都是空白，為此開展男性抗生育研究以尋求安全可靠、副作用小的不含激素的中草藥復方制劑，以便更好地提高夫妻生活質(zhì)量，進一步推進我國計劃生育政策。

1器材與方法1節(jié)育膠囊組方及制備節(jié)育膠囊由蛇床子、烏梅、苦參、川楝子等數(shù)味中藥按君臣佐使組方而成。按現(xiàn)代工藝提取，濃縮干燥制成膠囊備用。2動物選取性成熟Wister大鼠40只，其中雌鼠10只，雄鼠30只，體重280～330g。自北京軍事醫(yī)學科學院動物養(yǎng)殖中心購進，本院動物房常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲食，1周后用于實驗。3給藥方法按雄大鼠體重灌胃給藥，對照組灌服生理鹽水，按體重1ml·-1·d-1灌服；用藥組灌服節(jié)育膠囊，按體重1ml·-1·d-1灌服。4生育率觀察用藥前后雌雄以1∶1合籠交配(21d為1個生育周期)，計算生育率。5組織學觀察對照組與用藥組分別取睪丸、附睪和輸精管等組織進行大體標本觀察，然后將標本放入10%甲醛中固定，脫水，包埋，常規(guī)HE染色,光鏡觀察。6用藥前后血清睪酮測定給藥前與給藥后分別取大鼠尾靜脈血，放免法測定血清睪丸酮的水平。7試劑戊巴比妥鈉、多聚甲醛、甲醛、血清睪丸酮試劑盒，購自解放軍總院開發(fā)中心放免所。8儀器回旋切片機、離心機、電子天平、722分光光度計、光學顯微鏡、Olympus顯微鏡、放免儀等。

2結(jié)果

光鏡觀察結(jié)果對照組大鼠曲精細管生精細胞排列整齊；用藥組大鼠曲精細管生精細胞排列紊亂，腔內(nèi)有少量脫落的生精細胞，并見多核巨噬細胞的形成，偶見變態(tài)期精子細胞頭部增大深染。發(fā)現(xiàn)部分睪丸曲精細管上皮出現(xiàn)排列紊亂，層次減少，精子細胞內(nèi)出現(xiàn)較大的空泡，線粒體腫脹，變態(tài)期精子頂體膜增厚，皺縮。精子數(shù)量減少，活力下降，畸變率增高，說明節(jié)育膠囊對雄性大鼠有較強的抗生育的能力。

血清睪酮測定結(jié)果見表1。用藥組較正常對照組血清睪酮下降明顯。表1血清睪酮測定結(jié)果

用藥組與正常對照組生育率情況結(jié)果見表2。表2兩組生育率情況比較

3討論

大鼠屬哺乳動物，生育力旺盛，是研究節(jié)育藥物的理想模型，且雌雄容易辨認，但近年研究表明，精子發(fā)生和成熟機理尚未完全闡明，這給精確評價睪丸功能帶來了困難，所以我們選擇方向主要從生殖細胞的改變和激素水平方面來研究，在一定程度上反應了其抗生育的情況。已往研究已經(jīng)證實，筆者用的節(jié)育膠囊中單味藥具有抑制或殺死精子的有效成分，如賈氏［1］用川楝子油給SD大鼠兩側(cè)附睪尾部注射100μl/側(cè)，10d后將上述大鼠分別與有生育力雌鼠進行交配，結(jié)果用藥組及對照組大鼠生育率分別為%和90%。用藥組5周時組織學檢查附睪及輸精管均無梗阻改變、睪丸形態(tài)正常，附睪出現(xiàn)輕度炎癥，6周時睪丸曲細精管口徑縮小，F(xiàn)CM檢查表明川楝子油可抑制睪丸生精細胞的生成，刺激非生精細胞使其合成代謝增加。故而得出附睪注射川楝子油可影響睪丸生精功能，激活睪丸間質(zhì)細胞使其功能增強，產(chǎn)生局部免疫性不育，而不影響雄性大鼠的睪丸酮分泌及性功能。朱氏［2］用蛇床子浸膏粉用生理鹽水配成20%～40%混懸液，離心，取上清液過濾，濾液作殺精實驗，結(jié)果20s內(nèi)抑制人精子的最低有效濃度是30%液，每毫升精液與不同劑量的浸膏粉混合，其抑制精子活動的最低有效劑量為250～300mg。應用掃描及透射電鏡對經(jīng)蛇床子［3］作用后的人類精子結(jié)構(gòu)的變化進行研究，其結(jié)果表明，其對人類精子的表面形態(tài)和超微結(jié)構(gòu)均有明顯的破壞和損傷作用。另外苦參堿［4］可通過抑制和殺死精子發(fā)揮抗生育活性；從中藥烏梅［5］中經(jīng)化學提純、分析、確定其殺精有效成分為枸櫞酸，其最有效殺精濃度為%(mg/ml)，經(jīng)透射電鏡觀察枸櫞酸殺傷精子的主要靶結(jié)構(gòu)在于精子頂體、質(zhì)膜、核膜及線粒體；蚤休乙醇［6］提取物對大鼠精子殺精有效濃度為3mg/ml，小鼠為～3mg/ml。其粗皂苷對大鼠和小鼠精子殺精有效濃度均為30μg/ml，對人精子殺精有效濃度為500～1000μg/ml。這些研究成果為開展中藥復方研究奠定了基礎。經(jīng)初步觀察效果肯定，說明中草藥復方抗生育研究可行。此項研究為尋求安全、可靠、副作用小的非激素類天然抗生育制劑奠定了基礎，對進一步推進我國計劃生育政策有積極意義，具有開發(fā)前景。

【參考文獻】

［1］賈瑞鵬，周性明，周干南.川楝子油對雄性大鼠的抗生育作用［J］.南京鐵道醫(yī)學院學報，1996，15(1)∶1.

［2］朱淑英，韓向陽，任淑君.中藥蛇床子殺精作用的實驗研究［J］.哈爾濱醫(yī)科大學學報，1992，26(2)：155.

［3］張英姿，韓向陽，朱淑英.中藥蛇床子對人類精子超微結(jié)構(gòu)影響的研究［J］.哈爾濱醫(yī)科大學學報，1995，29(1)∶22.

［4］杜俊杰，郭仁興，劉勝家.苦參堿的體外殺精子作用［J］.西安醫(yī)科大