山綠茶不同炮制品中總黃酮的含量測(cè)定

山綠茶不同炮制品中總黃酮的含量測(cè)定

【關(guān)鍵詞】山綠茶；總黃酮；蘆??；紫外分光光度法

摘要：目的建立山綠茶不同炮制品的質(zhì)量研究方法。方法以蘆丁為對(duì)照品，采用紫外分光光度法測(cè)定山綠茶不同炮制品中總黃酮的含量。結(jié)果蘆丁濃度在～之間與吸光度值呈良好的線(xiàn)性關(guān)系，回歸方程為C=5A+7，r=0。平均回收率為%，RSD=%。結(jié)論該測(cè)定方法靈敏，簡(jiǎn)便，重現(xiàn)性好，可用于山綠茶不同炮制品的質(zhì)量控制。

關(guān)鍵詞：山綠茶；總黃酮；蘆??；紫外分光光度法

DeterminationofTotalFlavonoidsinDifferentProcessedProductsofIlexhainanensisMerr

Abstract：ObjectiveToestablishtheevidenceforqualityofdifferentprocessedproductsofIlexhainanensisasthestandardandusingultravioletspectrophotometertodeterminethecontentoftotalflavonoidsinIlexhainanensisMerr.ResultsThelinearrelateionshipofrutinwasgoodfrom(μg/ml)to(μg/ml),C=+,r=0.Theaveragerecoverywas%(RSD＝%).ConclusionThismethodisaccurate,simpleandreproducible,andcanbeappliedtothequalitycontrolofthedifferentprocessedproductsofIlexhainanensisMerr.

Keywords：IlexhainanensisMerr.;Totalflavonoids;Rutin;UV

山綠茶為冬青科冬青屬植物海南冬青IlexhainanensisMerr的干燥葉,含黃酮類(lèi)、三萜酸類(lèi)、綠原酸、鞣酸及山綠茶苷等成分［1，2］，具有清熱解毒、平肝潛陽(yáng)、活血化瘀的功效，臨床上用于治療高血壓?。?，2］，文獻(xiàn)報(bào)道，山綠茶降壓片治療原發(fā)性高血壓病的總有效率明顯高于復(fù)方羅布麻片［3］。山綠茶在廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)中收載的炮制方法有兩種，一種為按綠茶加工方式進(jìn)行，即將鮮葉盡快地用260～280℃翻炒殺青，接著在揉搓臺(tái)上用手揉搓，然后復(fù)炒復(fù)揉2～3次，至葉色呈暗綠色，帶有銀灰綠色，略有光澤為度，取出，放涼；另一種方法為原藥材鮮葉直接曬干。黃酮類(lèi)成分能保持毛細(xì)血管正常的抵抗力，減少血管的通透性，可使毛細(xì)血管恢復(fù)正常彈性，故有軟化血管、增加血管彈性，對(duì)動(dòng)脈硬化有軟化作用，對(duì)高血壓病、糖尿病、視網(wǎng)膜炎有防治作用。為了控制山綠茶不同炮制品的質(zhì)量，對(duì)山綠茶不同炮制品中的總黃酮進(jìn)行了含量測(cè)定，現(xiàn)報(bào)道如下。

1儀器與試藥

Agilent8453紫外分光光度計(jì)；BP211D電子分析天平；AE100S電子分析天平(梅特勒托利多儀器上海有限公司)；SB3200T超聲波清洗器；101A2型電熱鼓風(fēng)干燥箱。蘆丁對(duì)照品；山綠茶不同炮制品為：上林藥材、80℃干燥2h藥材、80℃干燥h藥材、80℃干燥1h藥材、70℃干燥2h藥材、70℃干燥藥材、70℃干燥1h藥材、60℃干燥2h藥材、60℃干燥h藥材、60℃干燥1h藥材、晾干藥材、自炒藥材，以上原藥材均購(gòu)于上林縣，并經(jīng)廣西中醫(yī)學(xué)院陳勇教授鑒定符合廣西中藥材標(biāo)準(zhǔn)山綠茶項(xiàng)下藥材品種，確定為冬青科冬青屬植物海南冬青IlexhainanensisMerr.的干燥葉，所用試劑均為分析純。

2方法與結(jié)果

對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取120℃干燥至恒重的蘆丁對(duì)照品約25mg，置25ml量瓶中，加70%乙醇適量，置水浴上微熱使溶解，放冷，加70%乙醇至刻度，搖勻。精密量取10ml，置50ml量瓶中，加70%乙醇至刻度，搖勻，即得。

檢測(cè)波長(zhǎng)的測(cè)定精密量取上述對(duì)照品溶液2ml于25ml量瓶中,加水至6ml，分別加5%亞硝酸鈉溶液1ml，搖勻，靜置6min，加10%硝酸鋁溶液1ml，搖勻，靜置6min，加氫氧化鈉試液10ml，再加水至刻度，搖勻，放置15min。以相應(yīng)試劑作空白，照分光光度法［3］，在400～800nm測(cè)定吸收光譜圖，其最大吸收波長(zhǎng)為502nm［3］。光譜圖見(jiàn)圖1。

圖1蘆丁對(duì)照品吸收光譜圖

標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備精密吸取對(duì)照品溶液，，，，，ml，分別置于25ml量瓶中，各加水至6ml，分別加5%亞硝酸鈉溶液1ml，搖勻，靜置6min，加10%硝酸鋁溶液1ml，搖勻，靜置6min，加氫氧化鈉試液10ml，再加水至刻度，搖勻，放置15min，照分光光度法［3］，在502nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度。以濃度為縱坐標(biāo)，吸收度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，得回歸方程為C=5A+7，r=0。結(jié)果表明蘆丁濃度～μg/ml之間與吸光度值呈良好的線(xiàn)性關(guān)系。標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)見(jiàn)圖2。

圖2蘆丁對(duì)照品標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)

供試品溶液的制備取本品粗粉約g，精密稱(chēng)定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇25ml，稱(chēng)定重量，超聲處理1h，放冷，再稱(chēng)定重量，用70%乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，精密量取續(xù)濾液2ml，置25ml量瓶中，照標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制備項(xiàng)下方法，自“加水至6ml”起依法測(cè)定吸收度，用回歸方程求出供試品溶液中總黃酮的含量(mg)，計(jì)算，即得。

精密度實(shí)驗(yàn)取同一供試品溶液重復(fù)測(cè)定6次，平均吸收度為，RSD為%，表明精密度良好。

穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)對(duì)同一份供試品每間隔6min測(cè)定吸光度，在30min內(nèi)平均吸收度為,RSD=%，說(shuō)明在30min內(nèi)顯色基本穩(wěn)定。

重復(fù)性實(shí)驗(yàn)取同一批藥材，平行測(cè)定6次，平均含量為mg/g，RSD為%，表明重復(fù)性良好。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

加樣回收率實(shí)驗(yàn)取已測(cè)知含量的樣品約g，精密稱(chēng)定，分別加入一定量的蘆丁對(duì)照品，照供試品溶液制備方法處理并測(cè)定含量。結(jié)果見(jiàn)表2。

表2總黃酮回收率測(cè)定結(jié)果

樣品測(cè)定取藥材粉末g，精密稱(chēng)定，照供試品溶液的制備方法處理并測(cè)定。結(jié)果見(jiàn)表3。

［1］《全國(guó)中草藥匯編》編寫(xiě)組.全國(guó)中草藥匯編［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1973：194.

［2］方鼎，沙文蘭，陳秀香，等.廣