實(shí)驗(yàn)三透析實(shí)驗(yàn)一蛋白質(zhì)的透析_第1頁(yè)
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關(guān)于實(shí)驗(yàn)三透析實(shí)驗(yàn)一蛋白質(zhì)的透析第1頁(yè)，講稿共7頁(yè)，2023年5月2日，星期三實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆胀肝龅幕驹砗筒僮?；了解透析袋的使用方法。?頁(yè)，講稿共7頁(yè)，2023年5月2日，星期三實(shí)驗(yàn)原理透析是利用小分子能通過(guò)而大分子不能通過(guò)半透膜的原理把它們分開(kāi)的一種重要手段，是生物化學(xué)分離提純過(guò)程經(jīng)常使用的基本操作技術(shù)之一。蛋白質(zhì)作為生物分子物質(zhì)，不能透過(guò)透析膜而小分子物質(zhì)（比如離子等）可以自由通過(guò)。第3頁(yè)，講稿共7頁(yè)，2023年5月2日，星期三器具與試劑燒杯；玻棒；試管；試管架；透析袋（寬26cm，長(zhǎng)8-10cm），線。0.5mol/LEDTA；2%NaHCO3；1％AgNO3溶液；10%HNO3，10%NaOH；1%CuSO4；雞蛋清-NaCl溶液第4頁(yè)，講稿共7頁(yè)，2023年5月2日，星期三實(shí)驗(yàn)步驟透析袋的前處理。將蛋白質(zhì)溶液做雙縮脲反應(yīng)。取出透析袋，用三級(jí)水清洗透析袋內(nèi)外，并檢查透析袋是否有損壞。用線將透析袋靠近末端的地方綁緊。取8ml蛋白質(zhì)溶液放入透析袋中，并將開(kāi)口端同樣用線綁住并放入盛有蒸餾水的燒杯中。隨時(shí)用玻棒攪拌液體。每30min從燒杯中取水1ml，用10%HNO3酸化溶液，再加入1%AgNO31-2d,檢查氯離子的存在。另外取出1-2ml做雙縮脲反應(yīng)，檢查燒杯中是否有蛋白質(zhì)存在。每0.5h更換一次燒杯中的三級(jí)水以加速透析過(guò)程。直到數(shù)小時(shí)后，燒杯中的水不能檢出氯離子的存在時(shí)，停止透析。并觀察和檢測(cè)透析袋內(nèi)容物是否有蛋白質(zhì)或者氯離子存在。第5頁(yè)，講稿共7頁(yè)，2023年5月2日，星期三附：透析袋的處理方法用2%NaHCO3和10mM的EDTA煮沸10min后，用蒸餾水清洗透析袋內(nèi)外，重新置于1mM的EDTA溶液中煮沸10min，保存于4℃冰箱中。第6頁(yè)，講稿共7頁(yè)，20

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