臨床常用免疫學(xué)檢驗課件

臨床常用免疫學(xué)檢驗11、不為五斗米折腰。12、芳菊開林耀，青松冠巖列。懷此貞秀姿，卓為霜下杰。13、歸去來兮，田蜀將蕪胡不歸。14、酒能祛百慮，菊為制頹齡。15、春蠶收長絲，秋熟靡王稅。臨床常用免疫學(xué)檢驗臨床常用免疫學(xué)檢驗11、不為五斗米折腰。12、芳菊開林耀，青松冠巖列。懷此貞秀姿，卓為霜下杰。13、歸去來兮，田蜀將蕪胡不歸。14、酒能祛百慮，菊為制頹齡。15、春蠶收長絲，秋熟靡王稅。臨床常用免疫學(xué)檢驗

1.免疫功能檢驗

體液免疫細(xì)胞免疫

2.感染免疫學(xué)診斷試驗

病毒性肝炎；AIDS;STD;其它傳染病；CRP

3.自身免疫病的檢驗

4.腫瘤標(biāo)志物檢驗3/28/2021免疫學(xué)檢驗2檢驗醫(yī)學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)檢驗醫(yī)學(xué)（laboratorymedicine）是一門臨床學(xué)科，它運用不斷發(fā)展的自然科學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)技術(shù)對患者血液、尿液和各種體液標(biāo)本進(jìn)行檢驗，并以發(fā)展檢驗技術(shù)、提高檢驗質(zhì)量為重點，達(dá)到對患者疾病的診斷、病情觀察和預(yù)后判斷等目的。3/28/2021免疫學(xué)檢驗3二、循證檢驗醫(yī)學(xué)——新世紀(jì)檢驗診斷高質(zhì)量發(fā)展的新天地

定義循證醫(yī)學(xué)（evidence-basedmedicine，EBM）指：在對患者作出新的醫(yī)療決策的過程中，必須審慎、明確和明智地運用當(dāng)前所能獲得的最佳證據(jù)。這里，“最佳證據(jù)”指不僅可以否定迄今已被視為臨床診斷或輔助診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”，并且其本身也可被未來的更準(zhǔn)確、更有效新證據(jù)所取代。

7/1/20236免疫學(xué)檢驗?zāi)康闹饕牵孩俨粩嗯寮膊〉牟∫蚝桶l(fā)病危險因素的證據(jù)，為臨床診斷和預(yù)防提供最為可靠的依據(jù)。②提高疾病的早期診斷率，繼而提高疾病的治愈率。③改善患者的預(yù)后，提高患者的生存質(zhì)量。④提高臨床醫(yī)療管理和決策水平。⑤精選臨床檢查和治療方案，降低醫(yī)、患雙方的醫(yī)療費用，使患者得到最合理的臨床醫(yī)療服務(wù)。⑥促進(jìn)臨床醫(yī)學(xué)教學(xué)水平，培養(yǎng)業(yè)務(wù)精湛、醫(yī)德高尚的臨床醫(yī)學(xué)人才。

7/1/20237免疫學(xué)檢驗現(xiàn)行傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)是以經(jīng)驗醫(yī)學(xué)為主，而EBM則要求選用最新的、經(jīng)過臨床研究機(jī)構(gòu)科學(xué)評價過的、更為準(zhǔn)確的新證據(jù)，而不采用尚未經(jīng)過嚴(yán)格評價的、目前仍處于基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究階段的所謂“新證據(jù)”。

7/1/20238免疫學(xué)檢驗概念：循證檢驗醫(yī)學(xué)（evidence-basedlaboratorymedicine，EBLM）就是按照循證醫(yī)學(xué)“以當(dāng)前最佳證據(jù)為基礎(chǔ)”的原則，用臨床流行病學(xué)的方法學(xué)規(guī)范檢驗醫(yī)學(xué)的研究、設(shè)計和文獻(xiàn)評價，其任務(wù)是向臨床醫(yī)師提供反映患者真實情況的檢驗證據(jù)。7/1/20239免疫學(xué)檢驗

循證醫(yī)學(xué)同樣也給檢驗醫(yī)學(xué)帶來了發(fā)展機(jī)遇。循證檢驗醫(yī)學(xué)要求檢驗醫(yī)師不僅向臨床醫(yī)師解釋檢驗項目的意義，而且要幫助他們選擇正確的檢驗項目，合理地利用實驗室資源。這是因為有時候臨床醫(yī)師并不一定熟悉這些新的診斷指標(biāo)，相反，過多的檢查會提供一些不必要的信息和消耗不必要的費用，從而干擾診斷、治療和醫(yī)療經(jīng)濟(jì)的合理分配。檢驗醫(yī)師還必須使用綜合分析方法對診斷指標(biāo)進(jìn)行評價。

7/1/202310免疫學(xué)檢驗一些專家認(rèn)為，目前應(yīng)用的實驗室檢查項目，在臨床應(yīng)用前并未給予充分的評價。Jaeshke等認(rèn)為，判斷一項診斷試驗是否有用的最終標(biāo)準(zhǔn)是：試驗是否增加了有用的診斷信息。Burke認(rèn)為,如果一項試驗主要用于篩檢，其敏感性一定要高，但易出現(xiàn)假陽性。任何新的檢驗只有在充分評價其可靠性、準(zhǔn)確性后才能用于臨床實踐。而現(xiàn)實是，由于制造商的熱情提供試劑、臨床醫(yī)師和檢驗人員的欣然接受，許多新檢驗項目在未被評價充分之前，就已被積極的推向了臨床應(yīng)用。

7/1/202311免疫學(xué)檢驗

第一章免疫功能檢驗

(ImmunologicalFunctionTest)

免疫功能檢驗分為細(xì)胞免疫功能檢驗和體液免疫功能檢驗，對于了解患者的免疫狀態(tài)，以及細(xì)胞的各種功能，為深入研究和認(rèn)識機(jī)體免疫系統(tǒng)的生理、病理改變，闡明某些疾病的發(fā)病機(jī)制和臨床診斷與治療將提供有利的信息。下面簡單介紹臨床常用的一些免疫檢驗項目。7/1/202312免疫學(xué)檢驗

一.IgG、IgA、IgM測定

免疫球蛋白（Immunoglobulin，Ig)是一組具有抗體活性的蛋白。存在于機(jī)體的血液、體液、外分泌液及某些細(xì)胞的膜上，分為IgG、IgA、IgM、IgD、和IgE五類。其中IgG、IgA、IgM含量較多，一般應(yīng)用單向免疫擴(kuò)散法、免疫比濁法和速率散射比濁法測定。

7/1/202313免疫學(xué)檢驗〖參考值〗依年齡、性別、地區(qū)等因素有差異。

IgG：6.94－16.18g/L

IgA：0.68－3.78g/L

IgM：0.60－2.63g/L

〖臨床意義〗

1.Ig含量減低：一種或多種Ig水平減少，分原發(fā)性和繼發(fā)性。見于各種先天性或獲得性免疫缺陷病。繼發(fā)性常與免疫抑制劑應(yīng)用、射線、蛋白質(zhì)丟失、營養(yǎng)不良等有關(guān)。也可見于細(xì)胞毒藥物治療后。

7/1/202314免疫學(xué)檢驗

2.Ig含量增高：

(1)多克隆性增高，見于各種慢性感染、慢性肝病、某些自身免疫病，如SLE、RA、SS等；也見于寄生蟲疾病、結(jié)節(jié)病等。

(2)單克隆性增高，又稱“M”蛋白，主要見于免疫增殖性疾病，如多發(fā)性骨髓瘤、重鏈病、輕鏈病，巨球蛋白血癥等。

7/1/202315免疫學(xué)檢驗〖注意事項〗

Ig水平與年齡、性別有一定的關(guān)系，Ig含量因檢測方法不同而有差別，各地區(qū)參考值也不相同，在判斷結(jié)果時應(yīng)綜合考慮。如有“M蛋白”，可進(jìn)一步作血清或尿液免疫電泳，檢測輕鏈和重鏈。

7/1/202316免疫學(xué)檢驗

二.血清總IgE測定

IgE為血清中含量極少的一種免疫球蛋白，與過敏性疾病和寄生蟲感染有關(guān)。目前檢測方法有多種，包括ELISA、間接血凝試驗（indirecthemoagglutinationassayIHA）、RIA、電化學(xué)發(fā)光法（electrochemiluminescenceimmunoassay，ECLIA，）、IFA等。

〖參考值〗0.1-150IU/ml

7/1/202317免疫學(xué)檢驗〖臨床意義〗

1.IgE增高：見于IgE型多發(fā)性骨髓瘤、特應(yīng)性哮喘、特應(yīng)性皮炎、過敏性鼻炎、寄生蟲感染、熱帶嗜酸細(xì)胞增多癥、SLE、RA及某些霉菌病等。

2.IgE減低：一般無意義?？梢娪谠l(fā)性無丙種球蛋白血癥、惡性腫瘤及細(xì)胞毒藥物治療后。

7/1/202318免疫學(xué)檢驗〖注意事項〗

年齡、性別均可影響總IgE水平。一般男性高于女性；新生兒水平低，青春期水平最高，30歲以后逐漸下降。不同種族血清總IgE水平也有差別，混血人種比白人高3－4倍，黑人水平更高，黃種人水平也較高?？侷gE水平高不一定是過敏；過敏者總IgE也不一定高。因此，在評價總IgE結(jié)果時要考慮到以上因素。

7/1/202319免疫學(xué)檢驗

三.特異性IgE抗體（sIgE)的檢測

過敏患者的血清中存在著具有變應(yīng)原特異性的IgE稱之為特異性IgE,如對牛奶過敏者則有針對牛奶變應(yīng)原的IgE；對蒿草花粉過敏者，則有針對該花粉的IgE，該抗體只能與該變應(yīng)原特異性結(jié)合。

7/1/202320免疫學(xué)檢驗sIgE的測定在變態(tài)反應(yīng)體外診斷中占有重要地位。在呼吸疾病中，過敏性哮喘，過敏性鼻炎，職業(yè)性哮喘等患者血清中均能檢出sIgE。sIgE檢測方法有許多種，目前臨床上常用的有ELISA，F(xiàn)EIA，免疫印跡等。隨著sIgE測定技術(shù)的完善，此項測定已日趨商品化，開發(fā)了各種檢測系統(tǒng)，如CAP過敏原檢測系統(tǒng)，Master過敏原檢測系統(tǒng)，Px過敏原檢測系統(tǒng)等，這些測定系統(tǒng)包括了儀器、試劑、計算機(jī)軟件處理系統(tǒng)。國內(nèi)目前應(yīng)用最多的是CAP檢測系統(tǒng)。

7/1/202321免疫學(xué)檢驗1.CAP檢測系統(tǒng)

〖原理〗CAP，一個很小的塑料帽狀物，其內(nèi)置有多孔性、彈性和親水性的纖維素粒，此粒多孔，吸咐了更多的變應(yīng)原，加入血清，血清中的sIgE就會和變應(yīng)原結(jié)合，再加入酶標(biāo)抗人IgE，再加入熒光顯色系統(tǒng)，在熒光分光光度計上測定熒光強度，計算機(jī)提供相應(yīng)軟件，自動計算出結(jié)果。報告sIgE含量。

7/1/202322免疫學(xué)檢驗〖適應(yīng)征〗

（1）臨床懷疑過敏性疾病，支氣管哮喘等；

（2）不適宜作皮內(nèi)試驗的患者；

（3）脫敏治療的病人觀察療效。

（4）抗組胺等對癥治療藥物影響皮膚反應(yīng)者；

（5）皮試可能發(fā)生危險者；

7/1/202323免疫學(xué)檢驗（6）不能用于皮試的變應(yīng)原，如毒素，非水溶性或高度致敏性物質(zhì)；

（7）食物過敏，皮試結(jié)果不可靠者。

（8）皮試結(jié)果可疑者。

〖方法〗RASTFEIA

〖參考值〗CAP系統(tǒng)結(jié)果報告。一般報告sIgE含量。單位ku/L。正常人<0.35ku/L，為陽性。sIgE的分級標(biāo)準(zhǔn)見表。7/1/202324免疫學(xué)檢驗

表1.特異性IgE的分級標(biāo)準(zhǔn)

_______________________________________________________________

RAST分級sIgE含量(ku/L)sIgE水平臨床意義

O<0.35無或不能檢出不過敏

I0.35-低可疑或輕度

II0.70-中輕度過敏

III3.5-高中度過敏

IV17.5-特高（I）中度到重度

V50-特高（II）重度過敏

VI>100特高（III）特別嚴(yán)重之過敏___________________________________________________________________例如：報告格式：sIgE（d1）81.3ku/L（Ⅴ級）

其中d1代表屋塵螨。每一過敏原均有代號，可查閱相關(guān)資料7/1/202325免疫學(xué)檢驗

〖臨床意義〗

sIgE測定是體外檢測變應(yīng)原的重要手段。其試驗的靈敏度及特異性都很高、特別是對花粉、螨類、寵物皮屑、牛奶、雞蛋、堅果等變應(yīng)原的sIgE測定，靈敏度和特異性都在90％以上，有的甚至接近100％。根據(jù)sIgE含量可確定患者變應(yīng)原種類，可評價患者過敏狀態(tài)，脫敏治療的療效，對哮喘的診斷和鑒別診斷有重要幫助。CAP吸咐變應(yīng)原有單價，有多價，如多價霉菌，多價食物（Fx5E，含6種食物過敏原），多價羽毛等，多價變應(yīng)原陽性后，再進(jìn)一步確定單個變應(yīng)原成分。

7/1/202326免疫學(xué)檢驗〖注意事項〗

（1）有明顯的地域性，該法所使用的均系進(jìn)口產(chǎn)品生產(chǎn)國的與我國的不一定完全符合。我國常見的變應(yīng)原，國外不一定有。因此，評價結(jié)果應(yīng)注意區(qū)別。

7/1/202327免疫學(xué)檢驗（2）某些小分子的變應(yīng)原，sIgE測定的靈敏度不高，如青霉素降解物，對這些變應(yīng)原，如測不出sIgE并不除外過敏的可能性。

7/1/202328免疫學(xué)檢驗（3）要結(jié)合臨床癥狀，體格檢查，常規(guī)化驗，當(dāng)?shù)氐膶嶋H條件，體內(nèi)試驗以及體外試驗的結(jié)果綜合考慮，才能得出比較正確的結(jié)論。

7/1/202329免疫學(xué)檢驗2.吸入物變應(yīng)原過篩試驗（phadiotop）。

〖原理〗呼吸道變態(tài)反應(yīng)病在臨床上很常見，有些病很難從臨床上區(qū)別是否過敏，如過敏性鼻炎和血管運動性鼻炎的臨床表現(xiàn)相似，外源性哮喘和內(nèi)源性哮喘也有共同之處；在臨床工作中首先要區(qū)別是否屬于過敏范疇。血清總IgE測定作為過敏性疾病的過篩試驗曾得到廣泛應(yīng)用，但其特異性、敏感性均不高，總IgE高并不一定是過敏，過敏者的總IgE水平也不一定高。過敏與否取決于sIgE的存在。7/1/202330免疫學(xué)檢驗phadiotop是根據(jù)變應(yīng)原吸附原理，將空氣中90％以上的最為常見的變應(yīng)原吸咐到CAP上?；颊哐逯兄灰嗅槍ζ渲兄环N變應(yīng)原的sIgE，即可呈陽性反應(yīng)。據(jù)此可測知患者是否為吸入物變應(yīng)原過敏者。

7/1/202331免疫學(xué)檢驗與sIgE測定不同的是所用CAP為特制的，內(nèi)含多種吸入物變應(yīng)原。結(jié)果報告不是含量，而是比值，即待測血清吸光度與參考血清吸光度之比。

〖參考值〗正常人為陰性，當(dāng)待測血清吸光度大于參考血清吸光度時報告為陽性。根據(jù)比值，可將phadiotop陽性者分為四個等級。弱陽性1－；陽性2－；強陽性20－；特強陽性40－。

7/1/202332免疫學(xué)檢驗〖臨床意義〗

陽性結(jié)果可視為多種sIgE的總和，比值越大，表明體內(nèi)sIgE越多，這可能是某一種變應(yīng)原的sIgE很高，也可能是多種變應(yīng)原sIgE累加的結(jié)果。

7/1/202333免疫學(xué)檢驗〖注意事項〗

phadiotop中未包括律草花粉及蠶絲，這兩種在我國都是很重要的變應(yīng)原，如患者只對律草花粉或蠶絲過敏，phadiotop則為陰性。但如果同時還合并有其它變應(yīng)原過敏，phadiotop仍為陽性。phadiotop陽性只說明患者對常見的空氣中的變應(yīng)原過敏，但對何種變應(yīng)原過敏，仍需進(jìn)一步檢查。phadiotop作為過篩實驗，可篩出非過敏的患者，以免進(jìn)行不必要的特異性變應(yīng)原檢查。由于phadiotop中包被的是國外的抗原，有時臨床診斷與phadiotop結(jié)果有不符的個別現(xiàn)象發(fā)生。

7/1/202334免疫學(xué)檢驗四.血清補體測定

補體（Complement)是血清中的一組具有酶活性的蛋白。它由20多種蛋白組成。當(dāng)機(jī)體受到病原微生物侵襲時，在抗體的存在下，補體參與滅活virus或殺死bacteria的免疫反應(yīng)。在自身免疫病中，complement也能參與破壞自身組織或細(xì)胞而造成免疫病理損傷。測定血清中補體活性或其單一補體成分含量，對于許多疾病的診斷和鑒別診斷、療效觀察以及發(fā)病機(jī)理的研究都有一定的臨床意義。

7/1/202335免疫學(xué)檢驗(一)總補體活性測定（50%hemolyticunitofcomplement，CH50)

Complement可使溶血素(抗體)致敏的SRBC裂解而發(fā)生溶血，補體活性與溶血程度呈正相關(guān)。根據(jù)產(chǎn)生50%溶血所需要的最小補體量，可計算出血清總補體的活性。

7/1/202336免疫學(xué)檢驗〖參考值〗75－160U/ml

〖臨床意義〗

.增高：常見于各種急性炎癥、組織損傷、心肌梗死和某些惡性腫瘤等。

.降低：見于各種免疫復(fù)合物性疾病，如SLE、急、慢性腎小球腎炎、自身免疫性溶血性貧血。也可見于病毒性肝炎、DIC、蛋白丟失性腸病、嚴(yán)重灼傷、急性粒細(xì)胞性白血病等。

7/1/202337免疫學(xué)檢驗〖注意事項〗

待測血清需新鮮、無溶血。測定方法有試管法、微量板法，近來又有生化儀器法等。不同方法具有不同的參考值。

7/1/202338免疫學(xué)檢驗(二)補體C3測定（Complement3，C3)

C3為補體系統(tǒng)各組分中含量最高的組分，是激活補體傳統(tǒng)途徑與旁路途徑的關(guān)鍵成分。檢測方法主要有RID、免疫比濁、速率散射比濁等。

〖參考值〗0.8-1.55g/L

7/1/202339免疫學(xué)檢驗〖臨床意義〗

1.C3增高：見于某些急性炎癥或傳染病早期以及某些惡性腫瘤等。

2.C3降低：見于SLE、RA、急性腎小球腎炎、肝臟疾病、冷球蛋白血癥等。狼瘡腎炎時血清中C3含量降低，當(dāng)病情好轉(zhuǎn)時，含量恢復(fù)正常。

7/1/202340免疫學(xué)檢驗(三),補體C4測定（Complement4，C4)

C4是一種多功能的β1-球蛋白，也是補體系統(tǒng)中的主要成分。在補體傳統(tǒng)活化途徑中發(fā)揮重要作用。裂解后的產(chǎn)物在補體的活化、促進(jìn)吞噬、防止免疫復(fù)合物沉著和中和毒素等方面發(fā)揮很大作用。檢測方法同C3測定。

7/1/202341免疫學(xué)檢驗〖參考值〗0.16～0.47g/L

〖臨床意義〗

1.升高：見于風(fēng)濕熱的急性期、結(jié)節(jié)性動脈周圍炎、皮肌炎、心肌梗死、Reiter綜合征和各種類型的關(guān)節(jié)炎。

2.降低：見于自身免疫病，例如：SLE、RA、慢性活動性肝炎、多發(fā)性硬化癥、IgA型腎病等。在SLE，C4含量下降明顯，并較C3下降為早。

7/1/202342免疫學(xué)檢驗五.循環(huán)免疫復(fù)合物（Circulatingimmunocomplex，CIC,)

CIC是體內(nèi)游離抗原與抗體相結(jié)合的產(chǎn)物。復(fù)合物可分大、中、小三類。大的復(fù)合物(>19s)可被吞噬細(xì)胞吞噬去除；中等復(fù)合物(約等于19s)存在于局部病變部位，如腎基膜、皮膚基底膜、血管內(nèi)膜和關(guān)節(jié)滑膜等；只有小的復(fù)合物(<19s)游離于血液、體液中，為一種可溶的CIC。CIC測定對免疫復(fù)合物病、自身免疫病以及肝病的診斷、療效觀察、預(yù)后判斷均有重要意義。7/1/202343免疫學(xué)檢驗檢測方法有多種，如聚乙二醇沉淀法、C1q結(jié)合法等。PEG可引起蛋白沉淀，蛋白分子愈大沉淀所需PEG濃度愈小。CIC分子量較大，且抗原-抗體結(jié)合后發(fā)生構(gòu)型改變，而被低濃度PEG從液相中析出，PEG還抑制CIC解離，促使CIC聚合成更大的凝聚物而被沉淀，用分光光度計在波長450nm處測定吸光度。計算出濁度值，可知CIC的存在和含量。

7/1/202344免疫學(xué)檢驗〖參考值〗PEG沉淀法：<10U/ml

〖臨床意義〗

1.CIC陽性常見于自身免疫病如SLE、RA等，也可見于血清病、慢性活動性肝炎、細(xì)菌感染、傳染病、惡性腫瘤等。

2.動態(tài)檢測CIC的變化，可監(jiān)測疾病的發(fā)展、判斷療效及預(yù)后。

7/1/202345免疫學(xué)檢驗〖注意事項〗

參考值依方法不同而有差別，此法快速簡便，但特異性較差，只適于篩查。低密度脂蛋白可引起濁度增加，故應(yīng)空腹取血。高γ球蛋白血癥及標(biāo)本反復(fù)凍融易造成假陽性。

7/1/202346免疫學(xué)檢驗六.T淋巴細(xì)胞亞群（Tcellsubpopulation)測定

Tcell因功能不同可將其分為若干亞群，如T輔助/誘導(dǎo)細(xì)胞；T抑制/細(xì)胞毒性細(xì)胞等。也可根據(jù)T細(xì)胞表面分化抗原(CD)不同劃分為相應(yīng)的亞群，如CD3；CD4；CD8等。同一CD表型的細(xì)胞功能可能不同。如CD8細(xì)胞中既有T抑制細(xì)胞，也有細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞。T細(xì)胞各亞群的相互協(xié)調(diào)，穩(wěn)定地調(diào)節(jié)著機(jī)體的免疫應(yīng)答反應(yīng)。7/1/202347免疫學(xué)檢驗應(yīng)用抗CD抗原的單克隆抗體，如抗CD3、抗CD4、抗CD8等，對外周血單個核細(xì)胞進(jìn)行檢測，依據(jù)各單抗的陽性率，判定各Tcell亞群，并算出CD4/CD8的比值。測定方法有IFA、IEA、APAAP法、流式細(xì)胞儀法等。

7/1/202348免疫學(xué)檢驗〖參考值〗（IFA法）總T細(xì)胞（CD3+）53-88%；CD4+細(xì)胞32-60%；CD8+細(xì)胞20-40%。CD4+/CD8+1.5-2.0。

（流式細(xì)胞儀法）

總T細(xì)胞（CD3+）955-2860/μl；CD4+細(xì)胞27-51%，550-1440μl；CD8+細(xì)胞15-44%，320-1250μl。CD4+/CD8+0.64-2.85。

7/1/202349免疫學(xué)檢驗〖臨床意義〗

Tcell亞群在許多臨床疾病中可發(fā)生異常改變，特別是免疫功能受損病人。測定Tcell亞群變化對了解疾病的發(fā)病機(jī)制、指導(dǎo)臨床治療、控制疾病的發(fā)生發(fā)展均有重要意義。

7/1/202350免疫學(xué)檢驗1.在自身免疫病中，如SLE、RA、自身免疫性溶血性貧血，以及乙型肝炎病人常表現(xiàn)為CD8＋細(xì)胞的數(shù)量及功能低下，有時也有CD4＋細(xì)胞增高，CD4+/CD8+比值升高。

2.免疫缺陷病患者CD4+/CD8+比值減少，如AIDS病人，CD4+顯著減少，常出現(xiàn)CD4+/CD8+比值倒置。常作為HIV感染者的監(jiān)測指標(biāo)。

7/1/202352免疫學(xué)檢驗3.感染性疾病患者免疫抑制功能增強，表現(xiàn)為CD8+細(xì)胞的數(shù)量及功能都異常增高。病毒感染時，CD3+、CD4+細(xì)胞減少，CD8+細(xì)胞增多，CD4+/CD8+比值降低。

4.腫瘤病人CD3+，CD4+細(xì)胞明顯減少，CD8+明顯增加，CD4+/CD8+比值明顯下降。據(jù)此，可了解機(jī)體的免疫狀態(tài)，指導(dǎo)免疫調(diào)節(jié)劑及治療藥物的應(yīng)用。

7/1/202354免疫學(xué)檢驗5.支氣管哮喘病人，在過敏原激發(fā)后，外周血CD4+T細(xì)胞迅速降低，支氣管肺泡灌洗液中CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞則增高。過敏性鼻炎患者CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞均比正常人低。

6.血液系統(tǒng)疾病Tcell亞群也有相應(yīng)變化，如再生障礙性貧血、粒細(xì)胞減少癥時CD4+細(xì)胞減少，CD8+細(xì)胞增多，CD3+/CD8+比值下降。

〖注意事項〗

Tcell亞群檢測方法很多，參考值也不盡相同，在判斷結(jié)果時要全面考慮，結(jié)合臨床及其他檢查。此外，利用上法也可測定B細(xì)胞、NK細(xì)胞等。流式細(xì)胞儀法，B細(xì)胞絕對值為90-560/μl，百分?jǐn)?shù)為5-18%，NK細(xì)胞絕對數(shù)為150-1100/μl，百分?jǐn)?shù)為7-40%。華人較其他種族有較高的NK細(xì)胞值。

7/1/202357免疫學(xué)檢驗七.細(xì)胞因子（Cytokine，CK)及其受體（receptor)測定

CK是由多種細(xì)胞產(chǎn)生的免疫功能調(diào)節(jié)因子，其中主要包括：淋巴因子（Lymphokine，LK)，單核因子（Monokine，MK)以及其他由非淋巴細(xì)胞及非單核細(xì)胞產(chǎn)生的CK。白細(xì)胞介素（Interleukin，IL)是體內(nèi)一大類細(xì)胞因子。7/1/202358免疫學(xué)檢驗CK在調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能方面發(fā)揮著重大作用。新的CK不斷被發(fā)現(xiàn)。各種CK需與各自的receptor特異結(jié)合才能起作用。CK受體存在于被作用的細(xì)胞膜上或細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，目前所知不是太多。迄今所發(fā)現(xiàn)的CK近百種，其中多數(shù)仍處于研究和探索階段。

檢測CK及其receptor的產(chǎn)生和免疫細(xì)胞對其反應(yīng)能力，可以了解淋巴細(xì)胞及其他細(xì)胞的免疫功能。目前臨床上用于測定CK及其受體的方法有生物活性測定法、RIA法和ELISA等，并且已有試劑盒供應(yīng)。如IL－2、IL－4、IL－6、IL－8、TNF－α、干擾素、粒細(xì)胞集落刺激因子(GCSF)、促紅細(xì)胞生成素(EPO)等等。7/1/202360免疫學(xué)檢驗近來，DNA分析法已經(jīng)用于CK的研究，應(yīng)用分子雜交法檢測CK的基因；應(yīng)用PCR技術(shù)測定CK的mRNA表達(dá)等。目前，利用PCR技術(shù)已建立了定量測定TGF、IL－2、IL－1、TNF等CK的方法。

（四）寄生蟲病的檢測

1、豬囊蟲抗體測定

Cysticercosis（囊蟲病）又稱CysticercosisCelluosae（豬囊尾蚴?。?是人和豬共患的一種寄生蟲病。又分為肌肉型、中樞神經(jīng)型等。主要檢測方法有ELISA、IHA（間接血凝試驗）等。用以檢測病人體內(nèi)特異性IgG抗體。對臨床診斷及血清流行病學(xué)調(diào)查均有實用價值。

7/1/202362免疫學(xué)檢驗〖參考值〗一般陰性

ELISA：P/N〈2.1

〖臨床意義〗

囊蟲IgG抗體陽性，多見于腦囊蟲病?？勺餮搴湍X脊液囊蟲抗體檢查。應(yīng)結(jié)合臨床表現(xiàn)和CT、核磁檢查結(jié)合作出判斷。

7/1/202363免疫學(xué)檢驗2、血吸蟲抗體測定

日本血吸蟲病早期宿主對血吸蟲可發(fā)生特異性免疫反應(yīng)。血清中產(chǎn)生IgM,IgG,IgE抗體。IgM,IgE抗體陽性可作為日本血吸蟲病的早期診斷指標(biāo)。IgG抗體陽性表明病人處在恢復(fù)期。抗體檢測有助于臨床診斷和流行病學(xué)研究，主要方法有ELISA、乳膠凝集試驗、環(huán)卵沉淀試驗等。

〖參考值〗陰性

ELISA：P/N〈2.1

〖臨床意義〗

（1）血清中IgM抗體陽性提示疾病處于早期。

（2）血清中IgG抗體陽性表示疾病處于恢復(fù)期，P/N值的大小表示抗體效價的高低，部分患者感染后IgG抗體可持續(xù)數(shù)年。

7/1/202364免疫學(xué)檢驗〖注意事項〗

血吸蟲抗體的將測可以達(dá)到診斷病人的目的，但不能區(qū)分血吸蟲現(xiàn)癥病人和過去感染者，早期慢性和晚期血吸蟲病患者，未治愈的血吸蟲病人及新感染和既往感染的混合病人。此外用于考核療效尚不夠理想。目前，不少學(xué)者應(yīng)用單克隆抗體ELISA檢測循環(huán)抗原用于診斷和考核療效。但仍存在不少問題，仍需改進(jìn)。

7/1/202365免疫學(xué)檢驗3、肝吸蟲抗體測定

肝吸蟲病又稱華支睪吸蟲病，是由華支睪吸蟲寄生于人體肝膽管內(nèi)所引起的寄生蟲病。主要依靠臨床流行病學(xué)、病原學(xué)檢查、免疫學(xué)檢查結(jié)合臨床表現(xiàn)作出診斷。因病原學(xué)檢查受到排卵量和排卵規(guī)律的影響，以及受所用方法敏感性的限制，很難查到蟲卵。因此應(yīng)用免疫學(xué)診斷具有重要意義。宿主感染華支睪吸蟲后，在抗原刺激下，誘發(fā)產(chǎn)生特異性抗體，主要是IgM,IgA,IgE和IgG。一般抗體檢出時間均明顯早于糞便中蟲卵出現(xiàn)的時間。檢測肝吸蟲抗體方法主要有皮內(nèi)試驗、ELISA、IFA等。

7/1/202366免疫學(xué)檢驗〖參考值〗陰性

ELISA：P/N〈2.1

〖臨床意義〗

目前所查多為IgG抗體，P/N>2.1為陽性。數(shù)值越大，表明患者體內(nèi)抗體效價越高，表明患者為華支睪吸蟲感染。如能測到IgM抗體，對于早期診斷有很大幫助。如有可能，可檢測循環(huán)抗原以考核療效和早期診斷。

7/1/202367免疫學(xué)檢驗4、肺吸蟲抗體測定

肺吸蟲病又稱并殖吸蟲病，是由并殖吸蟲引起的自身免疫源性疾病。臨床表現(xiàn)多種多樣，可分肺型和肺外型。診斷主要結(jié)合流行病學(xué)。臨床癥狀及實驗室檢查。其中免疫學(xué)檢查對臨床診斷有很重要意義。人感染肺吸蟲后，可出現(xiàn)抗肺吸蟲抗體，以IgG型為主。血清中IgE水平也可升高。IgM、IgE型抗體檢方法主要有ELISA、IFA、皮內(nèi)試驗等。

〖參考值〗陰性

ELISA：P/N〈2.1

7/1/202368免疫學(xué)檢驗

〖臨床意義〗

抗體陽性表明患者為肺吸蟲感染者，結(jié)合其他檢查和臨床表現(xiàn)可作出診斷。在判斷結(jié)果時應(yīng)該注意。其它寄生蟲病，如血吸蟲病、囊蟲病與此有輕度的交叉反應(yīng)。此外還可應(yīng)用雙抗體夾心ELISA法檢測循環(huán)抗原用于診斷和流行病學(xué)調(diào)查。目前應(yīng)用尚不廣泛。

7/1/202369免疫學(xué)檢驗第三章

自身免疫病和風(fēng)濕病的免疫學(xué)檢驗

7/1/202370免疫學(xué)檢驗

自身免疫病（AID)是指由于過度而持久的自身免疫反應(yīng)導(dǎo)致組織器官損傷并引起相應(yīng)器官病變或臨床癥狀的一類疾病。風(fēng)濕病是一類涉及到關(guān)節(jié)、軟骨、肌肉等結(jié)締組織的慢性疾病。7/1/202371免疫學(xué)檢驗實驗室檢查特別是免疫學(xué)檢查對AID和風(fēng)濕病的診斷是及其重要的。有些檢查可作為診斷指標(biāo)之一；有些檢查可作為病情進(jìn)展和預(yù)后判斷的監(jiān)測指標(biāo)；有些檢查可作為藥物療效的考核指標(biāo)之一。隨著免疫學(xué)技術(shù)的發(fā)展以及分子生物學(xué)的應(yīng)用，各種自身抗體的檢查越來越多地應(yīng)用于臨床。作為臨床醫(yī)生，應(yīng)該熟悉這些檢驗的意義，并能結(jié)合臨床及其他檢查，客觀地運用這些指標(biāo)，協(xié)助診斷，了解病情，指導(dǎo)治療。這里僅介紹臨床常用的一些自身抗體的檢測。

7/1/202373免疫學(xué)檢驗1.抗核抗體測定

（Antinuclearantibody,ANA)ANA是抗細(xì)胞核多種成分的自身抗體，無種屬及器官特異性。ANA可分為抗DNA抗體、抗組蛋白抗體、抗非組蛋白抗體、抗核仁抗體及其他細(xì)胞成分抗體。這些抗體共同組成ANA譜。7/1/202374免疫學(xué)檢驗抗核抗體（ANA）的檢查最常用于篩查全身性風(fēng)濕病和自身免疫病。ANA的檢查可觀察到能與細(xì)胞核內(nèi)的核酸和蛋白抗原起反應(yīng)的自身抗體。細(xì)胞內(nèi)可能存在對多種抗原起反應(yīng)的抗體。只有某種抗體的效價很高時，IFA才能加以鑒別。

7/1/202375免疫學(xué)檢驗homogenous（均質(zhì)型）

又稱彌散型，相應(yīng)的抗原是雙鏈DNA和組蛋白復(fù)合物。常見于SLE，特別是腎臟受累病人。也可見于其它結(jié)締組織病，如：風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，MCTD，干燥綜合征，硬皮病，慢性活動性肝炎及原發(fā)性膽汁性肝硬變。

Peripheral(周邊型)

相應(yīng)的抗原為雙鏈DNA，多見于活動性SLE病人。

7/1/202376免疫學(xué)檢驗Speckle(斑點型)

主要是針對ENA的抗體，包括Sm，RNP，SSA，SSB，Scl-70。一般認(rèn)為低效價的斑點型ANA不是結(jié)締組織病特有的，實際上不代表臨床異常。高效價的抗Sm抗體多與SLE有關(guān)。高效價的抗RNP自身抗體見于MCTD，但也見于SLE。抗SSA和抗SSB抗體，見于S.S，也可見于SLE。當(dāng)病人有抗SSA抗體時，通常以皮膚表現(xiàn)和光過敏為主。，也存在于ANA陰性狼瘡和新生兒狼瘡。Scl-70抗體與硬皮病有關(guān)。

7/1/202377免疫學(xué)檢驗Nucleoli(核仁型)

其靶抗原是與RNA分子相關(guān)的核蛋白。多見于硬皮病。

Centromere(著絲點型)

抗著絲點抗體（ACA），多見于全身性硬皮病的CREST綜合征。

7/1/202378免疫學(xué)檢驗常用檢測方法為IFA、ELISA、免疫印跡法、RIA、免疫斑點法、膠體金標(biāo)斑點免疫滲濾法等。其中IFA是應(yīng)用較廣的一種方法。一般采用鼠肝切片或Hep-2細(xì)胞為底物抗原片，當(dāng)加入病人血清時，病人血清中的ANA可與細(xì)胞中相應(yīng)抗原成分結(jié)合。再加入熒光標(biāo)記抗人IgG，在熒光顯微鏡下可見細(xì)胞核內(nèi)亮綠色熒光。

〖參考值〗<1:10或陰性

〖臨床意義〗

NA陽性見于多種疾病，常用于風(fēng)濕病及自身免疫病的診斷。SLE患者陽性率在95％以上，且效價常在1：80以上。在其他風(fēng)濕病如RA、系統(tǒng)性硬化癥、皮肌炎、干燥綜合征(SS)、混合結(jié)締組織病(MCTD)等也可陽性。其他如肝病，病毒感染等也可呈低效價陽性。

7/1/202380免疫學(xué)檢驗〖注意事項〗

在大約1%的正常人的體內(nèi)可測到低效價的非特異性抗核抗體，80歲以上老人的檢出率可高達(dá)50%。高效價的ANA一般與活動期SLE密切相關(guān)。采用Hep-2細(xì)胞檢測ANA，可見到不同的染色模型。

此外，口服避孕藥的婦女也可檢測到ANA。7/1/202382免疫學(xué)檢驗7/1/202383免疫學(xué)檢驗7/1/202384免疫學(xué)檢驗7/1/202385免疫學(xué)檢驗二.可提取性核抗原（ExtractablenuclearantigenENA)抗體

ENA是細(xì)胞內(nèi)許多小分子的RNA和多肽組成的非組蛋白的酸性核蛋白顆粒。分布在細(xì)胞質(zhì)中的稱為小細(xì)胞漿核糖核蛋白(scRNPs)；分布在細(xì)胞核內(nèi)的稱為小細(xì)胞核核糖核蛋白(snRNPs)。目前已發(fā)現(xiàn)的有20余種，其中常用的抗ENA抗體有如下幾種。

7/1/202386免疫學(xué)檢驗（一）抗Sm抗體

Sm是病人Smith的縮寫。Sm抗原屬于SnRNP，由5個RNA和多肽組成，抗原表位在29KD、28KD和13.5KD多肽上，抗Sm抗體是酸性糖蛋白，是SLE的標(biāo)記抗體。

7/1/202387免疫學(xué)檢驗(二)抗nRNP(u1RNP)抗體

u1RNP是u1RNA和蛋白質(zhì)組成的，抗原表位在73KD、32KD和17.5KD多肽上，是MLTD的重要血清標(biāo)志。

7/1/202388免疫學(xué)檢驗（三）抗SSA抗體

SS為干燥綜合征的縮寫。此抗體又稱抗RO抗體。SSA抗原是RNA和蛋白質(zhì)復(fù)合物，抗原表位在52KD多肽上，主要見于原發(fā)性干燥綜合征患者及SLE。

7/1/202389免疫學(xué)檢驗（四）抗SSB抗體

SSB抗體常伴隨SSA抗體同時出現(xiàn)，又稱抗La抗體，SSB抗原屬于SnRNP，是含有RNA和50KD蛋白質(zhì)的復(fù)合物?？乖砦辉?5KD、47KD和48KD多肽上。與SSA抗體并存對診斷SS有特異性。

7/1/202390免疫學(xué)檢驗（五）抗Scl-70抗體

Scl-70抗原表位在86KD、70KD的片段上，是DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I的降解產(chǎn)物，抗Scl-70抗體幾乎僅見于硬皮病，陽性率30%左右。

7/1/202391免疫學(xué)檢驗（六）抗Jo-1抗體

Jo-1抗體是組氨酰tRNA合成酶，抗原表位在55KD多肽，抗Jo-1抗體是多發(fā)性肌炎和皮肌炎的標(biāo)記抗體，陽性率25-40%。

7/1/202392免疫學(xué)檢驗（七）抗核糖體抗體

核糖體在核仁合成，然后轉(zhuǎn)入胞漿，抗原表位在大亞基上的38KD、16KD和15KD多肽上。抗核糖體抗體陽性主要見于SLE，陽性率20-30%。

7/1/202393免疫學(xué)檢驗

檢測以上抗體的方法主要有：對流免疫電泳法(CIE)、雙相免疫擴(kuò)散法，免疫印跡試驗(IBT)，免疫斑點技術(shù)和ELISA法等。一般采用兔胸腺或牛胸腺提取物或細(xì)胞提取物作為抗原。近年來，應(yīng)用分子重組抗原制備的試劑盒已投入市場。

7/1/202394免疫學(xué)檢驗〖參考值〗陰性

〖臨床意義〗

1.抗nRNP抗體：見于35－40％的SLE病人，在MCTD病人中陽性率可達(dá)95－100％，也可見于其他風(fēng)濕性疾病。

2.抗Sm抗體：主要見于SLE及重疊綜合征，急性期病人75％為陽性。一般SLE患者30－40％陽性率。但Sm抗體陽性者90％以上為SLE，故稱之為SLE的標(biāo)記抗體。

7/1/202395免疫學(xué)檢驗

3.抗SSA和抗SSB抗體：見于40－45％的SS病人?？筍SA抗體也可見于25％的SLE病人及其他風(fēng)濕性疾??；抗SSA抗體與新生兒狼瘡和先天性傳導(dǎo)阻滯有關(guān)?？筍SA抗體也可見于病毒感染等非風(fēng)濕性疾病。抗SSB抗體對原發(fā)性干燥綜合征較特異，但陽性率僅27％左右。

7/1/202396免疫學(xué)檢驗4.抗Scl-70抗體：一般僅見于系統(tǒng)性硬化癥病人，陽性率20－60％。

5.抗Jol-1抗體見于30％的多發(fā)性肌炎病人及10％的皮肌炎病人?？笿ol-1抗體與多發(fā)性肌炎病人間質(zhì)性肺炎的發(fā)生率增加有關(guān)。

6.抗rRNP抗體：主要見于SLE患者，陽性率20%左右，與中樞神經(jīng)系統(tǒng)病變有關(guān)，多在疾病活動期出現(xiàn)。

7/1/202397免疫學(xué)檢驗〖注意事項〗

判斷試驗結(jié)果時要結(jié)合臨床表現(xiàn)作出評價，也應(yīng)根據(jù)試驗方法來作出解釋。對流免疫電泳法和雙相擴(kuò)散法敏感性低，但特異性較高；免疫印跡法、斑點免疫法及ELISA方法敏感性提高，但特異性相對減少。

7/1/202398免疫學(xué)檢驗三.抗雙鏈DNA抗體（Antidouble-strandedDNA，A-dsDNA，)

A-dsDNA對SLE有高度特異性，是針對細(xì)胞核脫氧核糖核酸的自身抗體。臨床上常用的檢測方法有：①Farr‘s法：125I－DNA與待檢標(biāo)本中的A-dsDNA形成免疫復(fù)合物，加飽和硫酸銨使復(fù)合物沉淀，以γ計數(shù)器分別測定上清中游離及沉淀物中已結(jié)合的125I－DNA含量，可計算出血清中A－dsDNA的結(jié)合活性。7/1/202399免疫學(xué)檢驗②ELISA法：將小牛胸腺DNA包被在微孔板中，加入病人血清，如有A-dsDNA則結(jié)合到微孔板上，加入酶標(biāo)抗人IgG，加入底物顯色后經(jīng)酶標(biāo)儀比色可知血清中A-dsDNA抗體的量。

③免疫熒光法：采用馬疫錐蟲或短膜蟲作為基質(zhì)，加入病人血清。血清中的A-dsDNA與膜上的天然DNA結(jié)合，加入熒光標(biāo)記抗人IgG。馬疫錐蟲和短膜蟲的動基體會發(fā)出綠色熒光。

④金標(biāo)斑點法：雙鏈DNA包被于硝酸纖維膜上，加入病人血清，加入金標(biāo)記抗人IgG，如有A-dsDNA存在，會顯示紅色斑點。

7/1/2023101免疫學(xué)檢驗〖參考值〗依方法不同參考值也有不同。

Farr‘s法：≤0.20

免疫熒光法：<1:10

ELISA法：依試劑盒而定，一般<70u

金標(biāo)法：陰性

7/1/2023102免疫學(xué)檢驗〖臨床意義〗

A-dsDNA陽性對SLE有較高的特異性。大約60％的活動性SLE病人會出現(xiàn)A-dsDNA。其他風(fēng)濕性疾病也會出現(xiàn)，但陽性率非常低，如RA、S.S。

〖注意事項〗

假陽性結(jié)果非常少見，但陰性亦不能排除SLE的診斷。

7/1/2023103免疫學(xué)檢驗四.抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（Antineutrophilcytoplasmicantibody,ANCA)測定

ANCA是針對中性粒細(xì)胞胞漿多種成分的自身抗體，主要有髓過氧化物酶(MPO)和蛋白酶3（Proteinase3，PR3)的抗體。主要用于診斷Wegener肉芽腫和系統(tǒng)性血管炎，特別是伴有腎病、呼吸疾病或其他類型血管炎引起多器官損害的患者。檢測方法有IFA、ELISA、IBT等。

7/1/2023104免疫學(xué)檢驗〖參考值〗陰性。

〖臨床意義〗

免疫熒光法檢查ANCA陽性一般分為兩種熒光類型，一種是胞漿型，稱為cANCA，一種是核周型，稱為pANCA。cANCA產(chǎn)生彌漫性細(xì)胞漿染色，是針對PR3的抗體，一般見于wegener肉芽腫病(WG)，特別是腎和肺受累的病人。pANCA產(chǎn)生核周染色，是針對MPO的抗體，主要見于系統(tǒng)性血管炎病人。7/1/2023105免疫學(xué)檢驗在WG病人中，cANCA陽性率在活動期可達(dá)80％，且有較高的抗體效價。在緩解期抗體陽性率低，且效價下降，或完全消失。

〖注意事項〗

ANCA陽性也可見于Good-Pastare‘s綜合征和SLE病人。WG的診斷不能單純依賴ANCA的結(jié)果，還要結(jié)合其他臨床表現(xiàn)，試驗室檢查和組織病理學(xué)檢查才能確定。ANCA效價不能完全反應(yīng)疾病的活動以及對治療的反應(yīng)。7/1/2023107免疫學(xué)檢驗pANCA陽性不是特異性的抗MPO抗體，也可以是抗粒細(xì)胞胞漿中其他酶的抗體，如彈性蛋白酶，組織蛋白酶G等。ANCA檢測應(yīng)注意排除其他自身抗體的交叉反應(yīng)，如ANA。因其可產(chǎn)生假陽性應(yīng)注意鑒別，并進(jìn)行ANA檢測。

五.抗線粒體抗體（Antimitochondrialantibody,AMA)

AMA是以細(xì)胞漿中的線粒體為抗原的一種自身抗體，無器官和種屬特異性。一般采用大鼠腎及胃作為抗原基質(zhì)，采用IFA檢測，陽性可見大鼠腎和胃的細(xì)胞漿呈現(xiàn)細(xì)顆粒狀熒光。7/1/2023109免疫學(xué)檢驗采用免疫印跡法可將與線粒體抗原的反應(yīng)分為從M1到M9九種類型，高效價的M2和M9型自身抗原與原發(fā)性膽汁性肝硬變相關(guān)。目前已有檢測M2的ELISA試劑盒供應(yīng)。

〖參考值〗陰性

>1：10為陽性

〖臨床意義〗

AMA是原發(fā)性膽汁性肝硬化的標(biāo)記抗體，陽性率達(dá)90%，并且50%患者抗體效價達(dá)1：1280或更高。此外，也可見于慢性活動性肝炎、隱匿性肝硬化。肝外阻塞性黃疸患者AMA常陰性，因此可作為鑒別診斷的一個指標(biāo)。正常人中陽性率<10%，且效價較低。

7/1/2023111免疫學(xué)檢驗六.抗平滑肌抗體（Antismoothmuscleantibody，ASMA)

ASMA是抗肝細(xì)胞膜上一種肌動球蛋白的自身抗體。這種肌動球蛋白與平滑肌有交叉抗原性，因此與平滑肌有反應(yīng)。一般采用IFA法，以大鼠胃作為抗原基質(zhì)，陽性可見胃壁平滑肌呈現(xiàn)亮綠色熒光。

7/1/2023112免疫學(xué)檢驗〖參考值〗陰性，>1：10為陽性

〖臨床意義〗

主要見于明顯活動期的自身免疫性肝炎患者，陽性率在80%以上，效價在1：80以上。急性病毒性肝炎早期ASMA也可陽性，且早于HBsAg出現(xiàn)。其他疾病如傳染性單核細(xì)胞增多癥、SS、RA、支原體肺炎、腫瘤和病毒感染者也有不同程度的陽性率。正常人中僅有2%陽性。

7/1/2023113免疫學(xué)檢驗七.抗甲狀腺球蛋白抗體（ATGA)和抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA)

ATGA是由甲狀腺炎引起的自身抗體，抗原是一種糖蛋白。ATGA有器官特異性而無種屬特異性。ATMA的抗原是甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞胞漿內(nèi)的脂蛋白。常用檢測方法有：IFA、IHA、RIA、ELISA等。

7/1/2023114免疫學(xué)檢驗7/1/2023115免疫學(xué)檢驗〖參考值〗

IHA：血清效價≤1：32，>1：32為陽性，ATGA和ATMA

ELISA：正常為陰性，P/N<2.1，>2.1為陽性,ATGA和ATMA

RIA：ATGA<30%；ATMA<15%

7/1/2023116免疫學(xué)檢驗〖臨床意義〗

主要見于橋本甲狀腺炎、甲亢、甲低患者，也可見于甲狀腺瘤、惡性貧血、重癥肌無力、Edison病和肝臟疾病等。SLE及其他自身免疫病也有一定的陽性率。

7/1/2023117免疫學(xué)檢驗正常人也可檢出這兩種抗體，并且隨著年齡的增長，陽性率增加，特別是40歲以上婦女，可達(dá)18%左右。

應(yīng)該注意到，有的患者ATGA陰性，但ATMA陽性，因此兩種抗體同時檢測可提高抗甲狀腺自身抗體的檢出水平。八.HLA－B27測定

HLA－B27抗原為人類MHCI類抗原B位點的表達(dá)產(chǎn)物，可分為幾種亞型。HLA－B27的檢測方法有多種，補體依賴性微量細(xì)胞毒法(CDMA)；流式細(xì)胞儀法；玫瑰花法；ELISA法；等電聚焦法等。近來應(yīng)用PCR法檢測HLA－B27，敏感而特異，并且可進(jìn)行B27亞型的分析。

7/1/2023119免疫學(xué)檢驗〖參考值〗

非洲－美洲人：3－4%；高家索人：6－8%；亞洲人：1%。

〖臨床意義〗

強直性脊柱炎(AS)患者HLA－B27陽性率為90－95%。大約42%的青年類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(JRA)存在HLA－B27，Reiter‘s綜合征患者陽性率大約79%。此外，腸病性關(guān)節(jié)炎、銀屑病性關(guān)節(jié)炎也有一定的陽性率。RA病人陽性率不高。

7/1/2023121免疫學(xué)檢驗〖注意事項〗

在評價HLA－B27陽性結(jié)果時應(yīng)結(jié)合臨床表現(xiàn)綜合考慮，不能單純依靠此結(jié)果作出診斷。

其他自身抗體及檢測7/1/2023123免疫學(xué)檢驗C反應(yīng)蛋白（C-ReactiveProtein，CRP）

CRP是一種急性時相蛋白，由肝細(xì)胞合成，可與肺炎球菌細(xì)胞壁C多糖發(fā)生沉淀反應(yīng)，故稱CRP。在各種炎癥的急性期或組織創(chuàng)傷時，血清CRP濃度急劇升高。CRP不僅可結(jié)合多種細(xì)菌（bacteria）,真菌(fungi)及原蟲（protozoal)體內(nèi)的多糖物質(zhì)，而且在鈣離子存在下，還可以結(jié)合磷脂酰膽堿和核酸。結(jié)合后的復(fù)合體具有激活補體(complement)的作用。常用檢測方法為單相免疫擴(kuò)散（singleimmunodiffusiontest）、乳膠凝集實驗（latexagglutinationtest)、火箭電泳法（rocketimmunoelectrophoresis)、酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linkedimmunosorbentassay，ELISA)、速率散射比濁法（ratenephelometry）等。

〖參考值〗<8mg/L

〖臨床意義〗

血清CRP升高多見于：急性、慢性細(xì)菌感染；組織損傷壞死；急性心肌梗死；各種炎癥；外科手術(shù)；腫瘤浸潤；急性風(fēng)濕熱和活動性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，以及其它關(guān)節(jié)炎性疾病。但病毒性感染一般CRP不升高，因此可作為病毒性感染和細(xì)菌性感染的鑒別指標(biāo)。

7/1/2023126免疫學(xué)檢驗〖注意事項〗

CRP測定方法不同，在判定結(jié)果時應(yīng)予考慮。此外，雌激素、口服避孕藥可使CRP增高，皮質(zhì)激素和抗炎藥可使CRP下降。

附：超敏C反應(yīng)蛋白

（HighSensitivityCReactiveProtein，HS-CRP）

CRP是一種急性期血漿蛋白，在組織損傷、炎癥和感染時可快速增加。CRP是由肝細(xì)胞分泌的，它的合成受細(xì)胞因子（Cytokine）調(diào)節(jié)，特別是IL-6。7/1/2023128免疫學(xué)檢驗近年研究證實CRP濃度與血管內(nèi)皮功能障礙相關(guān)聯(lián)。動脈內(nèi)的炎癥引發(fā)刺激、損傷、愈合，周而復(fù)始，形成斑塊，其結(jié)果是動脈狹窄或粥樣硬化。許多研究認(rèn)為CRP可預(yù)測動脈粥樣硬化病人的危險性，其中一些人日后發(fā)生冠狀動脈病、腦血管病或周圍動脈病變。CRP是炎癥并發(fā)動脈粥樣硬化的良好指標(biāo)，血漿中CRP濃度高說明更易導(dǎo)致動脈粥樣硬化。測定方法為速率散射比濁法。

〖參考值〗＜3mg/l

〖臨床意義〗

HS-CRP測試（檢測低限約為0.2mg/L），再加上血脂如膽固醇監(jiān)測，有助于預(yù)測冠心病的危險性。一般將CRP＞3mg/L以上，總膽固醇＞6.06mmol/L認(rèn)為患心肌梗塞的危險性會增加。未發(fā)生心血管或周圍血管意外的人可使用這指標(biāo)來評估6-10年出現(xiàn)發(fā)作的危險性。

7/1/2023130免疫學(xué)檢驗

類風(fēng)濕因子（RheumatoidFactor，RF）

RF是一種自身抗體，可與變性的IgG發(fā)生反應(yīng)，與IgG的Fc段結(jié)合。RF可分為IgG、IgM、IgA、IgD和IgE五型。凝集試驗檢測的主要為IgM型RF。RF主要見于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（rheumatoidarthritisRA)，也可見于其他結(jié)締組織病及其他疾病。檢測方法有乳膠凝集試驗、致敏羊紅細(xì)胞凝集法、速率散射比濁法、ELISA法等。

7/1/2023131免疫學(xué)檢驗〖參考值〗

乳膠法：陰性或<1：20

速率散射比濁法：<30IU/ml

〖臨床意義〗

RF見于90%以上的RA病人，效價常在1：160以上，含量多>80IU/ml。，一般方法所檢測的大部分是IgM-RF。7/1/2023132免疫學(xué)檢驗關(guān)于RF分型，臨床應(yīng)用尚不廣泛。多數(shù)作者認(rèn)為：IgM－RF效價高低可在一定程度上反映RA的活動性，但無明確的密切關(guān)系；IgG-RF與RA患者的滑膜炎、血管炎和關(guān)節(jié)外癥狀密切相關(guān)；IgA-RF見于RA、硬皮病、Felty綜合征和系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemiclupuserythematosus，SLE)，也是RA臨床活動性的一個指標(biāo)；IgE-RF除RA患者外，也見于Felty綜合征和青年型RA。高水平IgM-RF陽性病人預(yù)后較差。7/1/2023133免疫學(xué)檢驗

從早期RA患者的X線片分析，IgM-RF持續(xù)陽性的病人更易發(fā)生骨侵蝕。IgA-RF在SS病人中陽性率較高；IgE-RF在惡性關(guān)節(jié)炎病人中陽性率較高。在RA病人，高效價RF存在并伴有嚴(yán)重的關(guān)節(jié)功能受限時，常提示預(yù)后不良。

7/1/2023134免疫學(xué)檢驗〖注意事項〗

正常人也可有4％左右的陽性率。隨年齡增加，RF的檢出率會增加。RA病人RF也可陰性，不能單純依靠RF陽性來診斷RA。RF還可見于其它多種疾病，其中最常見的是干燥綜合征（S.S），發(fā)生率在90％以上，且含量一般較高。其它常見的RF陽性的疾病有：SLE、系統(tǒng)性硬化癥、高球蛋白血癥、結(jié)節(jié)病、梅毒、麻風(fēng)、病毒感染、肝硬化等等。有些效價可在1：160以上，含量在80IU/ml以上，在解釋結(jié)果時應(yīng)予注意。

7/1/2023135免疫學(xué)檢驗

冷凝集試驗（Coldagglutinationtest)

冷凝集試驗是用來檢測冷凝集素（coldagglutinin)的試驗。肺炎支原體引起的原發(fā)性非典型肺炎患者血清中常會有冷凝集素。這是一種自身抗體，主要為IgM型，通常具有抗細(xì)胞I抗原特異性，也有少數(shù)是抗P抗