病毒性疾病標(biāo)本采集要求

關(guān)于病毒性疾病標(biāo)本采集要求第1頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三主要內(nèi)容采集臨床標(biāo)本對于實(shí)驗(yàn)室檢測的意義臨床標(biāo)本的采集及種類采集技術(shù)要求標(biāo)本采集情況及存在的問題建議、要求第2頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三一、臨床標(biāo)本對實(shí)驗(yàn)室監(jiān)測的作用和意義血清學(xué)監(jiān)測：（IgM/IgG）早期診斷(發(fā)熱出疹癥候群、腦膜腦炎癥候群等)人群免疫狀況評價(jià)、疫苗效果評價(jià)病毒學(xué)監(jiān)測：病毒學(xué)監(jiān)測與流行病調(diào)查資料結(jié)合在一起，可以:追溯病毒傳播途徑鑒定病毒來源，確定本土還是輸入?yún)^(qū)分疫苗、野毒引起的疑似病例（麻疹；VDPV等）監(jiān)測病毒的變異，開發(fā)新疫苗第3頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三二、臨床標(biāo)本采集的基本要求標(biāo)本是進(jìn)行一起實(shí)驗(yàn)室檢測的基礎(chǔ)標(biāo)本采集質(zhì)量（采集時(shí)間、部位）影響實(shí)驗(yàn)室檢測的結(jié)果標(biāo)本采集應(yīng)根據(jù)不同癥候群采集不同種類的標(biāo)本標(biāo)本具有不再獲得性，采集的量應(yīng)充分滿足檢測工作需要采集的標(biāo)本應(yīng)有明確標(biāo)示，并包含疾病所有的基本信息標(biāo)本的采集、運(yùn)送、保存都應(yīng)符合生物安全要求第4頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三臨床診斷標(biāo)本種類血液鼻/咽拭子糞便尿液皰疹液含漱液腦脊液疑似麻疹√√√疑似風(fēng)疹√√√（CRS）疑似腮腺炎√√√√疑似水痘√√腸道病毒（疑似脊灰）√√疑似肝炎√疑似乙腦√√用于病毒學(xué)檢測疑似病例標(biāo)本采集種類第5頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三（一）、麻疹、風(fēng)疹、腮腺炎標(biāo)本的采集要求三、標(biāo)本的采集要求第6頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三071421283542-7-14-210246810RashOnse出疹tDaysafterrashonset出疹天數(shù)IgGIgMInfection感染Relativelevelsofantibody相對抗體水平必要日期:最后接種日期出疹日期出生日期IgMsensitivity~70%IgM敏感性—70%virusexcretion排泄病毒用于IgM檢測的血清標(biāo)本要在初次接觸病人時(shí)馬上采集。用于病毒分離及核酸檢測檢測的標(biāo)本需在岀疹后5天內(nèi)采集。對于岀疹3天內(nèi)的血清標(biāo)本：大約30%的病例因未產(chǎn)生IgM抗體不能檢測到，需要采集第二份血標(biāo)本或采用熒光定量PCR檢測病毒核酸。麻疹病毒感染人體后抗體動(dòng)態(tài)和病毒的排泄第7頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三1、合格血標(biāo)本的基本要求是：出疹后28日內(nèi)采集，血清量不少于0.5ml，無溶血，無污染；2～8℃條件下保存、運(yùn)送。

2、監(jiān)測病例血標(biāo)本采集率達(dá)到80%以上；出疹后3日內(nèi)血標(biāo)本麻疹、風(fēng)疹I(lǐng)gM陰性者，應(yīng)在出疹后4-28天內(nèi)采集第二份血，與第一份血采集時(shí)間相隔10-20天。第2份血標(biāo)本的比例達(dá)到80%以上。

3、麻疹、風(fēng)疹暴發(fā)疫情實(shí)驗(yàn)室確診率達(dá)到90%上。

4、技術(shù)要求：采集病例出疹后28日內(nèi)靜脈血2～3ml，加入到無菌試管中，標(biāo)明采集日期和病例姓名、編號(hào)。1、血標(biāo)本的采集、運(yùn)送、保存要求（2014版麻疹監(jiān)測方案）第8頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三5、1500rpm/20分鐘離心機(jī)分離血清。如果沒有離心機(jī)，在室溫下凝固分離血清，或2-8°C過夜直到血清完全析出。6、血清標(biāo)本運(yùn)送前應(yīng)可在2～8℃保存，如果7日內(nèi)不能運(yùn)送的，應(yīng)置-20℃以下保存，避免反復(fù)凍融（會(huì)對IgM抗體的穩(wěn)定性產(chǎn)生不利影響）。7、全血標(biāo)本不能凍結(jié)。8、標(biāo)本送檢要符合生物安全條件要求。1、血標(biāo)本的采集、運(yùn)送、保存要求（2014版麻疹監(jiān)測方案）第9頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三2、咽拭子、尿液標(biāo)本的采集、運(yùn)送、保存要求

（2014版麻疹監(jiān)測方案）1、采集出疹后5天內(nèi)病例咽拭子或尿液標(biāo)本，用于病毒分離或病毒核酸檢測。2、努力采集每例散發(fā)監(jiān)測病例病原學(xué)標(biāo)本。當(dāng)確認(rèn)為麻疹或風(fēng)疹暴發(fā)疫情時(shí)，應(yīng)至少采集疫情早期5例病例的病原學(xué)標(biāo)本，病例數(shù)小于5例者應(yīng)全部采集。3、麻疹、風(fēng)疹暴發(fā)疫情實(shí)驗(yàn)室確診率達(dá)到90%以上；麻疹、風(fēng)疹暴發(fā)疫情采集病原學(xué)起數(shù)占暴發(fā)疫情總起數(shù)的比例達(dá)到80%以上。第10頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三2、咽拭子、尿液標(biāo)本的采集、運(yùn)送、保存要求

（2014版麻疹監(jiān)測方案）4、技術(shù)要點(diǎn)：（1）出疹當(dāng)日至出疹后5日采集。（2）用無菌棉拭子適度用力在咽后部及兩側(cè)，反復(fù)擦拭，獲得上皮細(xì)胞。（3）把拭子放入有外螺旋蓋并裝有2ml病毒運(yùn)輸液的凍存管中。（4）常用的病毒運(yùn)輸液（商用）：pH7.4～7.6的Hank’s液：在90ml蒸餾水中加入10mlHank’s，然后加入10ml牛血清和0.2ml0.4％酚紅溶液，過濾消毒。加1ml青/鏈霉素溶液。分裝到無菌管中，于4℃儲(chǔ)存?zhèn)溆?。?xì)胞培養(yǎng)液：含2％-5%胎牛血清DMEM第11頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三2、咽拭子、尿液標(biāo)本的采集、運(yùn)送、保存要求

（2014版麻疹監(jiān)測方案）5、咽拭子等標(biāo)本采集后48小時(shí)內(nèi)能送達(dá)市級(jí)實(shí)驗(yàn)室者，可在2～8℃保存，否則-70℃保存。無-70℃保存條件者，可在-20℃保存并在1周內(nèi)送達(dá)。6、尿液標(biāo)本采集：出疹后5天內(nèi)，最好采集晨尿（其他時(shí)段也可），用50ml無菌離心管采集30～50ml尿液。采集后的標(biāo)本在2-4°C保存，必需在24h內(nèi)離心處理（1500rpm/20min）,用3～5ml病毒保存液懸浮沉渣，轉(zhuǎn)移到咽拭子保存管，-70℃保存。未經(jīng)離心處理不得直接凍存。第12頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三3、腮腺炎疑似病例標(biāo)本采集1、血清標(biāo)本采集同上。2、采集時(shí)間：發(fā)病5天內(nèi)采集咽拭子、腺管分泌液。3、方法：咽拭子采集同麻疹。

腺管分泌液采集：用無菌棉拭子，放患者口腔兩邊腮腺管開口處，放置10min后，取出放裝有病毒保存管中。4、標(biāo)本保存、運(yùn)送要求同麻疹。采集后盡快送省級(jí)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病毒分離。第13頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三1、血清標(biāo)本：散發(fā)病例，每年以市為單位血清標(biāo)本合格采集數(shù)不少于100份、水皰液標(biāo)本采集數(shù)不少于10份；若散發(fā)病例少于100例，血清標(biāo)本合格采集率應(yīng)達(dá)病例總數(shù)的80%以上。2、暴發(fā)病例，采集暴發(fā)早期5～10例病例血清標(biāo)本進(jìn)行確診，同時(shí)還要采集3～5例病例水皰液標(biāo)本，進(jìn)行病毒分離。3、水泡液采集（用于病毒分離及核酸檢測）：選擇患者5～10個(gè)充盈度較好的水皰，在無菌條件下用注射器抽取皰液，保存于裝有2-3mL標(biāo)本保存液標(biāo)本管中(同麻疹)。4、皰疹液采集后應(yīng)在4℃條件下24小時(shí)內(nèi)運(yùn)送至省級(jí)實(shí)驗(yàn)室，未能24小時(shí)內(nèi)送達(dá)的，應(yīng)置-70℃或以下保存，并于標(biāo)本采集后7天內(nèi)送達(dá)省級(jí)實(shí)驗(yàn)室。（二）、水痘-帶狀皰疹標(biāo)本的采集、運(yùn)送、保存要求第14頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三一、AFP病例標(biāo)本的采集1.

麻痹出現(xiàn)后14天內(nèi)采集；雙份大便；采集時(shí)間至少間隔24小時(shí)。2.每份標(biāo)本重量≥5克（約為成人的大拇指末節(jié)大小）。3.麻痹時(shí)間超過3個(gè)月，可不采集大便標(biāo)本。4.

-20℃冰箱儲(chǔ)存，冷藏運(yùn)送至實(shí)驗(yàn)室。（三）、脊髓灰質(zhì)炎標(biāo)本采集、

運(yùn)輸要求第15頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三標(biāo)本的采集-2二、AFP病例接觸者標(biāo)本的采集

以下情況應(yīng)采集AFP病例的5名接觸者（原則上5歲以下）大便標(biāo)本1.每年AFP病例大便標(biāo)本數(shù)少于150份的省。2.未采集到合格大便標(biāo)本的AFP病例。3.根據(jù)臨床或流行病學(xué)資料高度懷疑為脊灰的AFP病例。4.死亡的AFP病例。第16頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三標(biāo)本的采集-3三、高變異株AFP病例、VDPV病例、輸入性脊灰野病毒病例接觸者：

標(biāo)本采集要求見《輸入性脊灰野病毒病例和脊灰疫苗衍生病毒循環(huán)病例應(yīng)急處理預(yù)案》第17頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三脊灰標(biāo)本的運(yùn)送

1.采集后7天內(nèi)送達(dá)省級(jí)脊灰實(shí)驗(yàn)室。2.冷藏運(yùn)送，運(yùn)送時(shí)冰袋不少于4個(gè)，在送達(dá)省脊灰實(shí)驗(yàn)室時(shí)應(yīng)帶冰且包裝完整。3.標(biāo)本的運(yùn)送同時(shí)要符合實(shí)驗(yàn)室生物安全有關(guān)要求。4.采集的標(biāo)本應(yīng)有完整的登記資料（采樣單），一并送達(dá)省脊灰實(shí)驗(yàn)室。第18頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三運(yùn)輸器材

1.單個(gè)病例的標(biāo)本容器應(yīng)單放在盒或塑料袋內(nèi)，并做有效的封閉。2.用于運(yùn)輸標(biāo)本的器材每次用過后毀掉或者消毒后再用。3.Polio標(biāo)本不能和疫苗同放在一個(gè)冷藏器中。4.用于計(jì)免中攜帶疫苗的冷藏箱可用于標(biāo)本運(yùn)輸，但不可再用于裝運(yùn)疫苗。第19頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三1.血清標(biāo)本采集：⑴發(fā)病7天內(nèi)采集，血液標(biāo)本量應(yīng)≥3ml。⑵如第一份血液標(biāo)本在發(fā)病7天內(nèi)采集，且乙腦IgM抗體檢測陰性，應(yīng)于7天后采集第二份血液標(biāo)本。⑶血清裝于帶螺旋蓋的血清管中保存和送檢，血清管上貼好寫有患者個(gè)人資料的標(biāo)簽。⑷血清應(yīng)低溫（-80℃）保存，避免反復(fù)凍融；標(biāo)本要冷藏運(yùn)送（最好用干冰或液氮），同時(shí)要符合實(shí)驗(yàn)室生物安全和相關(guān)運(yùn)輸管理要求。（四）、流行性乙型腦炎檢測標(biāo)本的

采集、保存與運(yùn)輸?shù)?0頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三2、腦脊液標(biāo)本采集：⑴需要專業(yè)的臨床醫(yī)生來完成。⑵發(fā)病1周內(nèi)采集，每份1～2ml。⑶低溫（-80℃）保存，避免反復(fù)凍融；標(biāo)本要冷藏運(yùn)送（最好用干冰或液氮），同時(shí)要符合實(shí)驗(yàn)室生物安全和相關(guān)運(yùn)輸管理要3、蚊蟲樣本采集：⑴地點(diǎn)：人房、豬圈、稻田；時(shí)間：早晨5點(diǎn)之前和傍晚7點(diǎn)之后。⑵鑒定分類：將蚊蟲于-20℃冰箱中冷凍半個(gè)小時(shí)左右，將蚊蟲凍暈，以便分揀；對蚊蟲分類時(shí)，要在冰排上進(jìn)行；分類完畢，50只為一批，迅速裝入凍存管，并立即放入液氮中保存。⑶用液氮進(jìn)行運(yùn)輸。在蚊蟲標(biāo)本采集的整個(gè)過程中都要保持冷鏈，注意補(bǔ)充液氮。（四）、流行性乙型腦炎檢測標(biāo)本的

采集、保存與運(yùn)輸?shù)?1頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三（四）、流行性乙型腦炎檢測標(biāo)本的

采集、保存與運(yùn)輸4、豬血樣本采集：⑴選擇上年11月份以后出生、尚未經(jīng)歷乙腦流行期的仔豬30頭作為觀察對象。⑵每頭豬從流行季節(jié)前的3月份開始，連續(xù)每旬采耳靜脈血一次，直到10月下旬。⑶也可采集屠宰場所宰殺的未經(jīng)過上一次乙腦流行季節(jié)的豬血清，每次不少于30份，從每年的3月份開始采集直到流行季節(jié)結(jié)束。⑷低溫（-20℃）保存，冷藏運(yùn)送。第22頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三四、標(biāo)本采集情況、存在的問題第23頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三市監(jiān)測病例數(shù)年化排除病例報(bào)告發(fā)病率(/10萬)及時(shí)性指標(biāo)特異性指標(biāo)麻疹病毒分離及核酸檢測48小時(shí)完整調(diào)查血清標(biāo)本散發(fā)病例血標(biāo)本采集咽拭子標(biāo)本數(shù)病毒分離陽性數(shù)核酸檢測陽性數(shù)病例數(shù)調(diào)查率3日內(nèi)送達(dá)率結(jié)果4日內(nèi)報(bào)告率病例數(shù)采集率濟(jì)南1521.1113991.4510098.5713190.97青島8407.7783499.2995.195.1582099.6413547111淄博280.462796.4396.8896.772410013511棗莊2145.2321198.691.0481.2820099.548922東營271.442488.8996962488.89828煙臺(tái)941.549196.8196.7797.787796.2540937濰坊2422.0123496.6994.0798.6722796.1970335濟(jì)寧1491.7213187.9287.0295.8312687.546432泰安1503.1813992.6792.1490.39990.831845威海1103.7510999.0998.9596.817984.95712756日照1492.0014295.392.6877.979277.97843349萊蕪130.681292.31100100787.52臨沂310.442890.3285.71802589.292德州2244.9821194.299.5310019295.5228321聊城380.353386.841001002884.85717濱州370.713081.0890.9183.332482.76211菏澤410.222765.8555.1752.942583.33合計(jì)25392.26242295.3994.2893.5220094.55731483952015.1-5麻疹檢測指標(biāo)完成情況第24頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三四、標(biāo)本采集情況、存在的問題第25頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三四、標(biāo)本采集情況、存在的問題第26頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三年份病例數(shù)血標(biāo)本采集數(shù)采集率（%）不同時(shí)間采集數(shù)3天內(nèi)4-28天>28天20145486535697.6364211.99%467087.19%120.20%2015.1-53239306094.4758819.22%246280.46%80.26%2014-2015.5麻疹血清標(biāo)本采集情況第27頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三年份病例數(shù)咽拭子時(shí)間分布采集數(shù)采集率（%）岀疹<5天岀疹>5天20145486183533.45131471.60%43729.23%2015.1-53239128339.61106783.16%21016.84%

2014-2015.5全省麻疹疑似病例咽拭子標(biāo)本采集情況第28頁，講稿共32頁，2023年5月2日，星期三存在問題1、麻疹標(biāo)本的采集情況：近年來麻疹疑似病例標(biāo)本采集率、合格標(biāo)本采集率以及采集質(zhì)量有很大改善，但咽拭子病原學(xué)標(biāo)本整體采集率仍較低，岀疹5天后采集的咽拭子仍占較高的