項目維生素的測定

食品中維生素的測定Determinationofvitamininfoods測定食品中維生素在營養(yǎng)分析方面具有重要的意義。1、可評價食品的營養(yǎng)價值2、監(jiān)督維生素強化食品的劑量，以防攝入過多的維生素而引起中毒引言橙汁中VC的測定2.6--二氯靛酚滴定法學(xué)習(xí)目標(biāo)知識目標(biāo)：1.能解讀國家標(biāo)準(zhǔn)水果、蔬菜中維生素C含量的測定；2.能解釋2,6-二氯靛酚法測定的維生素C僅為還原型的原因；3.能說出提取劑必須為草酸或偏磷酸的原因；4.能解釋不同方法測定食品中VC含量原理。技能目標(biāo)：1.能依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行食品中VC含量測定實驗準(zhǔn)備；2.會準(zhǔn)確標(biāo)定2,6-二氯靛酚溶液，正確進(jìn)行VC的測定；3.會分析實驗結(jié)果、規(guī)范書寫分析報告，安全操作，真實記錄。素質(zhì)目標(biāo)：1.培養(yǎng)學(xué)生嚴(yán)謹(jǐn)、務(wù)實的學(xué)習(xí)精神；2.培養(yǎng)學(xué)生開拓創(chuàng)新、團(tuán)結(jié)協(xié)作的職業(yè)素質(zhì)。

基礎(chǔ)知識

維生素C是一種己糖醛基酸，有抗壞血病的作用，所以又稱作抗壞血酸。維生素C廣泛存在于植物組織中，新鮮的水果、蔬菜，特別是棗、辣椒、苦瓜、柿子葉、獼猴桃、柑桔等食品中含量尤豐富。維生素C通常采用草酸、草酸—醋酸、偏磷酸—醋酸溶液直接提取。在一定濃度的酸性介質(zhì)中，可以消除某些還原性雜質(zhì)對維生素C的破壞作用。2.6--二氯靛酚滴定法測定原理

還原型抗壞血酸可以還原染料2，6-二氯靛酚。該染料在酸性溶液中是粉紅色（在中性或堿性溶液中呈藍(lán)色），被還原后顏色消失；還原型抗壞血酸還原染料后，本身被氧化成脫氫抗壞血酸。在沒有雜質(zhì)干擾時，一定量的樣品提取液還原標(biāo)準(zhǔn)染料液的量，與樣品中抗杯血酸含量成正比。具體工作任務(wù)分解任務(wù)3：樣品VC含量測定

任務(wù)2：樣品預(yù)處理

任務(wù)4：分析結(jié)果數(shù)據(jù)處理

任務(wù)1：儀器設(shè)備及試劑的準(zhǔn)備任務(wù)5：填寫檢驗報告單

任務(wù)一：儀器設(shè)備及試劑的準(zhǔn)備儀器錐形瓶：150mL；容量瓶：100mL；酸式滴定管：25mL；燒杯；移液管：10mL；量筒：50mL試劑1％草酸溶液2％草酸溶液2,6-二氯酚靛酚溶液：配制好后保存在冰箱中。每次使用前，用標(biāo)準(zhǔn)抗壞血酸標(biāo)定其滴定度?？箟难針?biāo)準(zhǔn)液：稱取100mg純抗壞血酸溶解于100mL20g/L的草酸溶液中，此溶液每毫升相當(dāng)于1mg抗壞血酸。任務(wù)二：樣品預(yù)處理

量取100mL橙汁飲料→加等量的2％草酸溶液→取20mL→100mL容量瓶→1％草酸稀釋至刻度，混合均勻→過濾備用〖注〗

2％草酸在此作為提取劑，實驗表明：2％草酸提取效率最高，穩(wěn)定性最好。試樣胳的制德備鮮樣洞的制樣備:稱10巨0g鮮樣嚴(yán)，加紡等量絞的2％草濫酸溶待液，芬倒入讓組織膜搗碎擇機中果打成恨勻漿諒。取10～40激g勻漿踩（含1-嶼2m判g(shù)V龍c）于10畜0m遣L容量捉瓶內(nèi)勒，用1％草忘酸稀媽釋至發(fā)刻度親，混構(gòu)合均坦勻。干樣感的制竊備:稱1～4g干樣某（含1-升2m濫gV背c）放預(yù)入乳賴?yán)弮?nèi)福加1％草蘭酸溶斯液磨搭成勻當(dāng)漿，之倒入10發(fā)0m膏l(xiāng)容量盟瓶中驅(qū)，用1％草還酸稀舌釋至天刻度坡。過濾透上述循樣液慮，不含易過啦濾的揚可用紡離心沉機沉銜淀后慎，傾屆出上扭清液設(shè)過濾絮備用恭。任務(wù)丘三：視樣品VC含量谷測定抗壞劑血酸喇標(biāo)準(zhǔn)慈溶液彩標(biāo)定2,厲6-二氯注酚靛協(xié)酚（捧染料譜）標(biāo)儲定樣品亮中維應(yīng)生素C的測游定抗壞漫血酸櫻標(biāo)準(zhǔn)難溶液居標(biāo)定15夾0m顧L錐形雄瓶膚吸取標(biāo)準(zhǔn)盼使用富液2撿mL宏加躺入0輩.5跟mL護(hù)6郊%碘訂化鉀源溶液妙+炊3滴草1%碑淀粉動溶液高0.踢00匆1m男ol研/L菜碘酸梢鉀標(biāo)槐準(zhǔn)溶騙液滴盼定（塑終點唇為淡寨藍(lán)色副）C=淚V1/V2*0古.5油3C—哪—抗拖壞血挑酸標(biāo)撇準(zhǔn)液恩的濃悶度，蔬mg征/m敘LV1——忘滴定砍時消軋耗0押.0精01耗mo倡l/脫L碘倚酸鉀部標(biāo)準(zhǔn)傅溶液計體積找，m蠶LV2——共滴定胞時所艦取抗屯壞血嚴(yán)酸的弦體積莖，樣mL0.提08勝8—壯—1賞m拍L徑0.拳00繡1m殿ol職/L腫碘酸濁鉀標(biāo)省準(zhǔn)溶粘液相市當(dāng)于膽抗壞懷血酸尋的量借，記mg棋/m謀L2,變6-二氯身酚靛潔酚（汪染料秘）標(biāo)厘定25授0m園L錐形毀瓶吸取5m鳴L抗壞浪血酸挺標(biāo)準(zhǔn)尺溶液桿加號入1%草酸爸溶液5mL搖勻脈用2,牙6-二氯岸酚靛毫酚滴慨定至厭粉紅眉色（15睡s不褪識色為滲終點無）。樣品捉中維烘生素C的測焰定3個15帳0m嘉L錐形買瓶臣分傍別吸徐取樣丸品過治濾液5m稈L快速悅滴入2，6二氯緣瑞靛酚勤溶液俗，直拒至紅取色不燭立即撫消失句然后刑一滴抓一滴匙的加凱入2，6二氯牛靛酚粉溶液多，以背呈現(xiàn)貍的粉兔紅色盟在15劫s內(nèi)不牙褪色腔為終辰點1個15鍬0m松L錐形詠瓶丹分只別吸窮取蒸負(fù)餾水5m陵L快速餓滴入2，6二氯襲靛酚靠溶液田，直愚至紅學(xué)色不詳立即坑消失余然后貼一滴金一滴朗的加鳴入2，6二氯勺靛酚炊溶液院，以柜呈現(xiàn)疑的粉雷紅色牢在15巡壽s內(nèi)不腸褪色腥為終初點注:對非悶還原渾抗壞董血酸(如脫戰(zhàn)氫)不能聚測出;易受交還原挪性物跪質(zhì)影情響;適用細(xì)于新穿鮮果照蔬.測定飽過程歷中避邪免金挺屬的導(dǎo)干擾任務(wù)資四：跪分析盡結(jié)果改數(shù)據(jù)慨處理項目名稱食品中維生素C測定樣品名稱接樣日期檢測日期檢驗依據(jù)錐形瓶標(biāo)記(染料標(biāo)定)第一份第二份第三份染料標(biāo)定VVC初VVC終VVCT =1mL染料相當(dāng)于抗壞血酸的毫克數(shù)平均值樣品質(zhì)量m錐形瓶標(biāo)記(樣品滴定)第一份第二份第三份正式滴定V染初V染終V染空白試驗V空計算公式X =維生素C含量（mg/100g）平均值（mg/100g）標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定分析結(jié)果的精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨立測定結(jié)果的絕對差值在維生素C含量大于20mg/l00g時，不得超過2%，小于20mg/100g時不得超過10%。本次試驗分析結(jié)果的精密度任務(wù)玻五：快填寫課檢驗聲報告枕單樣品名稱產(chǎn)品批號樣品數(shù)量代表數(shù)量生產(chǎn)日期檢驗日期報告日期檢測依據(jù)檢驗項目單位檢測結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)要求檢驗結(jié)論檢驗員復(fù)核人備注1、2，6二氯芬靛酚/抗壞告血酸=1尾mg劇/m凡L的含葡義是志什么駐？2、樣沃品濾紅液顏爪色較畢深會炭影響抓滴定滿終點冰的觀琴察，層該如爸何處負(fù)理？3、本悠方法市測定極的是踢試樣秩中抗尿壞血酸酸總仆量嗎昆？為肢什么洞？4、配虎制好址的染慮料溶新液是青藍(lán)色墨的，禁為什踩么滴漸定終書點卻拉是粉佩紅色逃的？知識續(xù)拓展其他宅測定嚼方法籃簡介1、熒黃光法1．原葡理恢樣品鑄中還泛原型疤抗壞極血酸靠經(jīng)活把性炭悄氧化法成脫妨氫型貍抗壞坦血酸登后，單與鄰苯喪二胺（OP轉(zhuǎn)DA）反濱應(yīng)生況成具這有熒鴉光的割喹喔府啉（qu律in界ox愁al杠in狂e）,其熒該光強念度與途脫氫陣抗壞瓜血酸旅的濃沃度在糟一定源條件斯下成慘正比承，以境此測狼定食夏物中擔(dān)抗壞及血酸純和脫井氫抗與壞血桌酸的狹總量骨。本后方法往的最竹小檢晴出限晝?yōu)?.鹿02鞠2g留/m送l。2．適莖用范賽圍本方雁法適拳用于那蔬菜林、水果及其館制品訓(xùn)中總偏抗壞兵血酸護(hù)的測留定3．儀槽器實驗僻室常肉用設(shè)驢備。囑熒洗光分陜光光繪度計旅或具卻有35尼0n均m及43災(zāi)0n琴m波長沫的熒獨光計受。贈打碎吊機。4.操作鐵步驟4.骨1樣品助制備全部惹實驗攤過程秩應(yīng)避奧光。絞稱罰取10刺0g鮮樣赤，加10場0g偏磷層酸-乙酸蘋溶液挨，倒沖入打昂碎機鑒內(nèi)打階成勻找漿，扯用百罷里酚互藍(lán)指治示劑知調(diào)試欺勻漿版酸堿絹度。4.歡2氧化餃處理分別堵取樣責(zé)品濾抗液及屬標(biāo)準(zhǔn)壇使用充液各10顆0m執(zhí)l于帶及蓋三靠角瓶且中，迷加2g活性休炭，肆用力卷振搖1m流in，過刺濾，啟棄去意最初內(nèi)數(shù)毫抄升濾贏液，過分別臥收集座其余搞全部費濾液音，即荷樣品賺氧化的液和糕標(biāo)準(zhǔn)澡氧化資液，槳待測肢定。4.散3各取5m將l標(biāo)準(zhǔn)房誠氧化鄉(xiāng)豐液于2個50料ml容量還瓶中燃，分宇別標(biāo)冠明"標(biāo)準(zhǔn)"及"標(biāo)準(zhǔn)洞空白"。4.化4各取5m莊l樣品肝氧化剃液于2個50槽ml容量活瓶中河，分山別標(biāo)績明"樣品"及"樣品訂空白"。4.狠5于"標(biāo)準(zhǔn)右空白"及"樣品體空白"溶液親中各語加5m片l硼酸-乙酸盯鈉溶膽液，蓋混合錦搖動15亭mi鎮(zhèn)n，用蒸水稀赴釋至50只ml，在4℃冰箱剃中放柴置2h，取依出備東用。4.渴6于"樣品"及"標(biāo)準(zhǔn)"溶液燦中各微加入5m杰l5就0%乙酸宮鈉溶鳴液，健用水輩稀釋蝴至50菊ml，備謊用。4.童7熒光古反應(yīng)取"標(biāo)準(zhǔn)拿空白"溶液蟻，"樣品區(qū)空白"溶液己及（4.府6）中"樣品"溶液蓋各2m我l，分日別置今于10鏡ml帶蓋殲試管查中。零在暗垮室中疏迅速堵向各禍管中裳加入5m快l鄰苯春二胺販，振敏搖混造合，成在室原溫下雖反應(yīng)35擾mi援n，用狀激發(fā)趁光波催長33抓8n智m、發(fā)糖射光蜻波長42敞0n錯m測定罪熒光浸強度煌。標(biāo)如準(zhǔn)系柱列熒仍光強擔(dān)度分喝別減券去標(biāo)斃準(zhǔn)空細(xì)白熒赤光強悉度為奧縱坐慢標(biāo)，悅對應(yīng)遵的抗旺壞血束酸含頃量為牛橫坐昨標(biāo)，判繪制筐標(biāo)準(zhǔn)盟曲線口或進(jìn)閱行相挎關(guān)計潤算，這其直姐線回攝歸方侍程供蓋計算匹時使溝用。5.計算X=（c×只V/腸m）×F等×(懼10飽0/沫10畢00毅)式中嫩：X—雨—樣品睛中抗壞按血酸及脫烤氫抗?jié){壞血填酸總君含量鉤，mg勤/1趕00善g；c批——由標(biāo)肯準(zhǔn)曲潛線查眾得或傭由回歡歸方愧程算朝得樣現(xiàn)品溶纖液濃個度，μg/m季l；m求——試樣紗質(zhì)量過，g；F寫——樣品聽溶液牌的稀映釋倍庸數(shù)；V申——熒光瓜反應(yīng)這所用身試樣排體積哲，ml。6.注意智事項6.債1大多涼數(shù)植襲物組李織內(nèi)蛇含有籍一種腳能破宰壞抗輛壞血民酸的郊氧化胸酶，樣因此臉，抗瞧壞血臘酸的角測定結(jié)應(yīng)采汪用新澡鮮樣蘭品并心盡快豎用偏舞磷酸-醋酸擱提取攔液將富樣品外制成賠勻漿五以保朱存維晴生素C。6.掘2某些果膠含量訂高的切樣品帳不易截過濾至，可艘采用絡(luò)抽濾小的方耽法，退也可所先離訪心，衣再取危上清攪液過憂濾。6.提3活性仍炭可堂將抗熄壞血棵酸氧宋化為見脫氫或抗壞袖血酸加，但很它也反有吸嘴附抗壞扭血酸的作謹(jǐn)用，遠(yuǎn)故活每性炭沿用量籍應(yīng)適緩當(dāng)與笛準(zhǔn)確或，所特以，橡應(yīng)用替天平脹稱量里。我針們的晉實驗票結(jié)果鋸證明秧，用2g活性隊炭能使稅測定苗樣品秋中還誰原型慘抗壞刮血酸稻完全混氧化然為脫股氫型腸，其約吸附指影響植不明育顯。2、高粉效液仗相色熱譜法可以含同時漆測得激抗壞增血酸恥和脫快氫抗情壞血世酸的剛含量鐮，具簽有干僻擾少做，準(zhǔn)膏確度翠高，生重現(xiàn)體性好煩，靈符敏、緩簡便伐、快嫌速等哭優(yōu)點拐，是肯上述屈幾種燈方法細(xì)中最腿先進(jìn)鎮(zhèn)、可靠羅的方未法。仍但分孫析成外本較棚高。3、2，4—二硝栽基苯絲式肼比湊色法1.原理足：樣品繪中還憂原糖信型抗蜜壞血姿酸經(jīng)偉活性幫炭氧取化為語脫氫淚抗壞鼻血酸呀，再張與2，4—二硝湖基苯事肼作鵝用生茫成紅裁色的早脎，遷根據(jù)復(fù)脎在徒硫酸獸溶液柏中的碎含量袖與總津抗壞齡血酸裙含量粥成正漁比，林進(jìn)行防比色攝定量院。2．適蛛用范震圍本方掛法適肥用于管蔬菜擊、水牌果及您其制爐品中倦總抗霉壞血駕酸的尚測定孝。3.儀器3.加1恒溫昆箱：37云±0劍.5犁℃亡3.閃2可見-紫外凈分光釘光度客計3.叛3打碎符機4.操作匙步驟4.壇1樣品管預(yù)處析理量取10統(tǒng)0m啞L橙汁辜飲料順→加密等量聰?shù)?％草鮮酸溶缺液→朝取20蛛mL盾→1棟00士mL容量瞧瓶→1％草爺酸稀并釋至輛刻度平，混塊合均腦勻。4.代2氧化棕脫氫見處理取25待mL濾液朽→加節(jié)入2g活性券炭→親振搖lm尸in→過濾趁→棄癥去數(shù)吉毫升牲初濾頂液→螞取10走mL此氧總化提叼取液宿→加良入10課mL籠2粗0g捷/L的硫拿脲溶埋液→碧混勻5.群1樣品豎制備晶全盜部實茅驗過保程應(yīng)綠避光山。4.日3呈色猾反應(yīng)取三疏個試伸管→歷各加謝入4m耳L經(jīng)氧材化脫匯氫后系的樣袋品稀鬧釋液輸→在熊其中砌兩個駁試管蜂中加侵入1.各0m瞎L訓(xùn)20傲g／L抵2，4-二硝盆基苯紅肼溶刊液，1個試近管作止