自身抗體的檢測(cè)在風(fēng)濕病中的診斷意義

關(guān)于自身抗體的檢測(cè)在風(fēng)濕病中的診斷意義第1頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三第2頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三第3頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三風(fēng)濕病的概念

風(fēng)濕病是以皮膚、關(guān)節(jié)、血管及多系統(tǒng)損害為主或伴免疫功能異常的一類疾病。

風(fēng)濕病的發(fā)生多與自身免疫異常有關(guān)。第4頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三骨科呼吸腎內(nèi)消化風(fēng)濕病免疫學(xué)皮膚血液風(fēng)濕病的相關(guān)學(xué)科急診大量誤診病例第5頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三風(fēng)濕病的診斷臨床特征

癥狀：發(fā)熱、雷諾現(xiàn)象、晨僵等體征：關(guān)節(jié)腫脹、皮疹、肌無力等輔助檢查

自身抗體(ANA、dsDNA、RF、AnuA)

免疫球蛋白、補(bǔ)體及常規(guī)化驗(yàn)影像學(xué)等概述第6頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三自身抗體和風(fēng)濕病的關(guān)系風(fēng)濕病的概念風(fēng)濕病是以皮膚、關(guān)節(jié)、血管及多系統(tǒng)損害為主或伴免疫功能異常的一類疾病。風(fēng)濕病的發(fā)生多與自身免疫異常有關(guān)。風(fēng)濕病為內(nèi)科的一類疑難雜癥，風(fēng)濕病的相關(guān)學(xué)科：腎內(nèi)科，皮膚科，呼吸科，血液科，骨科，消化科……促使風(fēng)濕科的形成

第7頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三

自身抗體的概念

(conceptionofautoantibodies)

由各種原因造成的機(jī)體B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生針對(duì)自身組織、細(xì)胞及其成分的抗體，稱為自身抗體。自身抗體可以是生理性的，也可以是病理性的。正常人群中生理性的自身抗體的存在相當(dāng)普遍，其作用之一就是凈化體內(nèi)衰老及死亡的細(xì)胞。

生理性的自身抗體往往滴度很低，與相應(yīng)抗原的親和力弱，大多為IgM型，且受免疫抑制功能控制，含量低，一般不造成病理性的損害。

病理性的自身抗體滴度高，與相應(yīng)抗原的親和力強(qiáng)，大多為IgG型，體內(nèi)含量高，往往造成病理性的損害。第8頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三

自身抗體檢測(cè)的臨床意義

自身免疫性疾病患者中，有相當(dāng)一部份病人的血清或其它體液中可檢測(cè)到一種或多種高效價(jià)的自身抗體。自身抗體是自身免疫性疾病的重要標(biāo)志，每種疾病都伴有特征性的自身抗體譜。自身抗體的檢測(cè)能為自身免疫性疾病的診斷提供非常有價(jià)傎的依據(jù)。臨床疾病診斷、鑒別診斷----疾病標(biāo)記性抗體或特異性抗體。判斷疾病的活動(dòng)性及預(yù)后，觀察療效，指導(dǎo)臨床治療。進(jìn)一步研究和闡明自身免疫性疾病的發(fā)病機(jī)制。第9頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三國內(nèi)現(xiàn)狀自身抗體的測(cè)定不普遍欠規(guī)范對(duì)其意義了解尚少缺乏研究第10頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三

自身抗體種類繁多常見自身抗體：抗核抗體譜(ANAS)檢測(cè)抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體（ANCA）檢測(cè)類風(fēng)濕因子和抗CCP抗體自身免疫性肝病相關(guān)自身抗體檢測(cè)第11頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三常見的與自身抗體關(guān)系較大的風(fēng)濕病結(jié)締組織病：類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎R(shí)A

系統(tǒng)性紅斑狼瘡SLE

硬皮病SD

皮肌炎PM、DM

干燥綜合征SS

混合性結(jié)締組織病MCTD

血管炎AS第12頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三抗核抗體譜檢測(cè)抗核抗體(ANA)概念A(yù)NA：指抗細(xì)胞核成分（DNA，RNA，蛋白質(zhì)和酶）的抗體。ANA存在一個(gè)譜ANA新概念：抗核酸（Nucleicacid）和核蛋白（Nucleoprotein）抗體的總稱。對(duì)ANA的理解已不再局限于核成分,它指的是抗細(xì)胞內(nèi)所有成分的自身抗體的總稱。靶抗原分布:細(xì)胞核--細(xì)胞核,細(xì)胞漿,細(xì)胞骨架,細(xì)胞分裂周期。第13頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三抗核抗體的分類1.抗DNA抗體抗雙鏈DNA(dsDNA)抗體抗單鏈DNA(ssDNA)抗體2.抗組蛋白抗體3.抗非組蛋白抗體

抗可溶性核抗原(ENA)抗體：Sm、U1RNPrRNP、SSA、SSB、Scl70、Jo-1、pM-1、PCNA、RANA、Ku、Mi-1、-2抗體、DNP抗體等。

抗著絲點(diǎn)抗體(ACA)4.抗核仁抗體:

抗5rRNA、核小體、U3nRNP、Nor-90抗體。5.抗其它細(xì)胞成分:

線粒體、中心體等?？购丝贵w第14頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三ANA分類根據(jù)細(xì)胞內(nèi)靶抗原的理化特性和分布：抗DNA（dsDNA,ssDNA)抗組蛋白（Histone)抗非組蛋白（抗可溶性核抗原抗體anti-extractablenuclearantigenantibodies,ENA和抗著絲點(diǎn)抗體ACA）抗核仁（Nucleolus）第15頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三ANA的檢測(cè)通過兩級(jí)實(shí)驗(yàn)完成

IIF法檢測(cè)總ANA-----”水平1測(cè)定”篩選實(shí)驗(yàn)

dsDNA、抗ENA抗體------“水平2測(cè)定”特異性實(shí)驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)一步確認(rèn)許多抗原不易純化，且許多抗體確切抗原至今未知，實(shí)際上只有一部份的ANA能進(jìn)行進(jìn)一步的特異性檢測(cè)，單獨(dú)的“水平2測(cè)定”將會(huì)漏掉某些ANA，故應(yīng)同時(shí)進(jìn)行“水平1測(cè)定”。第16頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三ANA的篩選：間接免疫熒光法++抗原抗體（血清）抗原—抗體第二抗體第17頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三ANA的篩選：間接免疫熒光法第18頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三熒光顯微鏡下ANA的染色型別均質(zhì)型：與抗組蛋白和抗DNA有關(guān)顆粒（斑點(diǎn)）型：與抗ENA有關(guān)周邊型：與抗dsDNA有關(guān)核仁型：4-6sRNA著絲點(diǎn)型：在SD及CREST中出現(xiàn)但大部份還須作進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證確定是哪一種特異性抗體，哪一種自身免疫性疾病的可能性較大第19頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三ANA：均質(zhì)型EUROIMMUN抗核抗體第20頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三小結(jié)ANA是診斷彌漫性結(jié)締組織病的重要依據(jù)。各種抗原在其分子量、結(jié)構(gòu)、功能上有所不同?？乖珼NA的轉(zhuǎn)錄、拼接、復(fù)制、翻譯等作用有關(guān)。研究ANA有利于對(duì)結(jié)締組織病發(fā)病機(jī)理的了解ANA滴度不一定與疾病活動(dòng)性相平行，正常人、尤其老年人可有低滴度ANA。感染性疾病、腫瘤也可陽性第21頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三ANA在各種自身免疫性疾病中的陽性率

自身免疫性疾病

ANA陽性率

系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)

活動(dòng)期95%-100%

非活動(dòng)期80%-100%

藥物誘導(dǎo)性紅斑狼瘡(DLE)100%

混合結(jié)締組織病(MCTD)100%

類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)20%-40%

進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥(PSS)85%-95%

多發(fā)性肌炎及皮肌炎(PM/DM)30%-50%

干燥綜合癥(SS)70%-80%

慢性活動(dòng)性肝炎(CAH)30%-40%

潰瘍性結(jié)腸炎(UC)26%第22頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三抗可溶性核抗原(ENA)抗體檢測(cè)

抗雙鏈ＤＮＡ檢測(cè)（抗dsDNA）抗可溶性核抗原(ENA)抗體：Sm、U1RNP

、SSA、SSB、Scl－70、

Jo-1、rRNP、pM-1、PCNA、RANA、Ku、Mi-1、-2抗體、DNP抗體等第23頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三幾種ENA的由來及同義詞Sm：病人名：SmithRNP:u1RNP或nRNPNuclearRibonucleoproteinSSA:ROSjogren’ssyndromeASSB:La,Ha,Sjogren’ssyndromeBJo-1:病人JohnScL-70:Scleroderma第24頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三小結(jié)抗Sm:是SLE標(biāo)記抗體，幫助前瞻性和回顧性診斷。對(duì)早期、不典型的SLE診斷意義大。經(jīng)治療緩解后SLE回顧性診斷。抗u1RNP(nRNP)

在多種結(jié)締組織病中存在，高效價(jià)的抗u1RNP抗體，且無其它特異性的ANA，是診斷混合結(jié)締組織病的重要血清學(xué)依據(jù)。nRNP抗原與rRNP不同，前者是含尿嘧啶的核糖核蛋白，主要在核內(nèi)，而rRNP是主要在胞漿內(nèi)的磷酸蛋白，抗rRNP抗體與SLE有關(guān)，尤其有精神神經(jīng)癥狀的SLE陽性率較高。第25頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三小結(jié)抗SSA和抗SSB常見于干燥綜合征（Sjogren’sSyndrome，SS）也見于SLE

，兩者同時(shí)出現(xiàn)

與干燥綜合征相關(guān)性大。有研究發(fā)現(xiàn)SSA可造成新生兒狼瘡和先天性心臟傳導(dǎo)阻滯抗ScL-70:硬皮病SD的標(biāo)記抗體但特異性不高抗著絲點(diǎn)抗體（ACA，Centromere）與雷諾現(xiàn)象和CREST綜合征有關(guān)，但并非CREST綜合征(Calcinosis,Raynaud’sphenomena,EsophagealDysmotility,Telangiectasia)的標(biāo)記抗體，在干燥綜合征，某些慢性肝病中亦可陽性第26頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三抗Jo-1是PM/DM的標(biāo)記抗體但特異性不高，抗Jo-1陽性的肌炎患者，伴關(guān)節(jié)炎、“技工手”、雷諾癥、肺間質(zhì)變等稱合成酶抗體綜合征?？菇M蛋白抗體與多種結(jié)締組織病

有關(guān)，有助于藥物性狼瘡的診斷

抗核仁型抗體常與SD有關(guān)小結(jié)第27頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三

抗雙鏈DNA抗體臨床意義為系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)血清學(xué)特異性抗體，SLE的診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。SLE患者中陽性率為30-40%左右?？贵w滴度的變化與SLE疾病活動(dòng)程度相關(guān)，可用于SLE疾病活動(dòng)期判斷和藥物療效觀察。陽性的病人90%以上處在疾病的活動(dòng)期。參與SLE發(fā)病機(jī)理：介導(dǎo)的免疫復(fù)合物病---狼瘡腎炎所致的血管炎---典型的喋形紅斑非SLE和正常人抗ds-DNA多為陰性，有時(shí)其它結(jié)締組織病患者可為陽性，如SS、DIL、MCTD，但陽性率低，含量也低，而且此類病人一般是SLE重疊綜合征?？箂s-DNA

可存在多種自身免疫性疾病中，也可存在于一些非自身免疫性疾病中，對(duì)疾病診斷缺乏特異性，臨床上實(shí)用價(jià)傎不大。第28頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三ANA檢測(cè)的意義有助于疾病的診斷，如抗Sm是SLE標(biāo)記抗體；抗ScL-70是SD的標(biāo)記抗體，抗Jo-1是PM/DM的標(biāo)記抗體觀察疾病活動(dòng)度和治療反應(yīng)，如抗dsDNA研究發(fā)病機(jī)理第29頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三類風(fēng)濕因子

如何評(píng)價(jià)類風(fēng)濕因子是診斷RA的標(biāo)準(zhǔn)之一，不是唯一標(biāo)準(zhǔn)，并非RA特有作為血清陰性脊柱關(guān)節(jié)病區(qū)分標(biāo)準(zhǔn)正常人2%陽性，老年人可達(dá)5%陽性RF與其他蛋白、半抗原有交叉反應(yīng)多種結(jié)締組織?。⊿LE，SD，SS，PM/DM）感染疾?。⊿BE，TB，hepatitis）,肝硬化，彌漫性肺纖維化，結(jié)節(jié)病等均可陽性病后半年才產(chǎn)生，有關(guān)節(jié)外表現(xiàn)者，滴度高。持續(xù)高滴度RF預(yù)示疾病嚴(yán)重，預(yù)后差第30頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三多種自身抗體聯(lián)合檢測(cè)提高RA診斷準(zhǔn)確性抗核周因子-(APF)抗角蛋白抗體-（AKA）抗

Sa抗

體抗RA33/36抗體抗環(huán)瓜氨酸多肽(CCP)抗體：對(duì)RA診斷高度敏感和特異，對(duì)RA的早期診斷和預(yù)后評(píng)估都很有意義第31頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三抗環(huán)瓜氨酸多肽(CCP)抗體

1998年證實(shí)抗filaggrin相關(guān)抗體識(shí)別的主要抗原決定簇成分是瓜氨酸2000年合成環(huán)瓜氨酸肽（CCP），并將抗CCP抗體用于RA檢測(cè)ELISA法檢測(cè)對(duì)RA診斷高度敏感和特異陽性者骨破壞較陰性者嚴(yán)重對(duì)RA的早期診斷和預(yù)后評(píng)估都很有意義第32頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體ANCA

antineutrophilcytoplasmicantibodies

ANCA代表一族抗中性粒細(xì)胞胞漿成分的抗體譜。靶抗原：中性蛋白酶3（PR3），髓過氧化物酶（MPO），殺菌/通透性增高蛋白（BPI），絲氨酸蛋白酶，人白細(xì)胞彈性蛋白酶（HLE），乳鐵蛋白（LF），組織蛋白酶G，β葡萄糖醛酸酶，溶菌酶。根據(jù)ANCA檢測(cè)出的熒光染色模型可分為：胞漿型ANCA－C－ANCA，主要靶抗原為PR3核周型ANCA－P－ANCA，主要靶抗原為MPO

第33頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三ANCA對(duì)系統(tǒng)性血管炎的診斷意義系統(tǒng)性血管炎（SystemicVasculitis）是一組以血管的炎癥與壞死為主要病理改變的炎性疾病。臨床表現(xiàn)因受累血管的類型、大小、部位及病理特點(diǎn)不同而表現(xiàn)各異。其常累及全身多個(gè)系統(tǒng)，引起多系統(tǒng)多臟器功能障礙，但也可局限于某一臟器。系統(tǒng)性血管炎常累及的部位為皮膚、腎臟、肺、神經(jīng)系統(tǒng)等。本組疾病臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣，變化多端，大多數(shù)屬疑難雜癥。第34頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三ANCA相關(guān)血管炎韋格納肉芽腫（Wegener‘sgranulomatosis，WG）－主要出現(xiàn)cANCA，有診斷意義變應(yīng)性肉芽腫性血管炎（Churg-Strausssyndrome，CSS）－出現(xiàn)cANCA

和pANCA顯微鏡下多血管炎(microscopicpolyangiitis)－出現(xiàn)cANCA

和pANCA特發(fā)性壞死性新月體腎小球腎炎－主要出現(xiàn)

pANCA第35頁，講稿共41頁，2023年5月2日，星期三ANCAPR3-ANCA和MPO-ANCA只能在幾種系統(tǒng)性血管炎檢出，包括三種小血管炎和腎血管炎：特發(fā)性壞死性新月體腎小球腎炎。對(duì)于這些疾病，AN