血漿蛋白質(zhì)與含氮化合物的生物化學(xué)檢驗(yàn)

關(guān)于血漿蛋白質(zhì)與含氮化合物的生物化學(xué)檢驗(yàn)第1頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三2本章內(nèi)容概要：第二節(jié)氨基酸代謝紊亂的生物化學(xué)檢驗(yàn)第一節(jié)血漿蛋白質(zhì)的生物化學(xué)檢驗(yàn)第三節(jié)嘌呤核苷酸代謝紊亂的生物化學(xué)檢驗(yàn)第2頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三31、掌握急性時(shí)相反應(yīng)蛋白的概念及臨床意義；重要血漿蛋白質(zhì)的測定方法、參考值和臨床意義；嘌呤核苷酸代謝紊亂—高尿酸血癥及痛風(fēng)2、熟悉血清蛋白電泳圖譜與異常帶型、血漿蛋白質(zhì)的理化性質(zhì)和功能

3、了解氨基酸代謝紊亂、血清特定蛋白質(zhì)的檢測方法本章教學(xué)要求：第3頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三4第一節(jié)血漿蛋白質(zhì)的生物化學(xué)檢驗(yàn)機(jī)體蛋白質(zhì)：體液蛋白質(zhì)的檢測：機(jī)體主要的生物大分子含量：人體固體成分的45%種類：10萬，3000~5000種/單細(xì)胞功能：生長，代謝、血凝、運(yùn)動、免疫、信息傳遞等疾病發(fā)生體液蛋白質(zhì)異常第4頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三5要判斷異常首先要清楚正常的血漿蛋白質(zhì)組成，功能，分類及特點(diǎn)一、血漿蛋白質(zhì)的組成、功能及分類組成：種類：1000種已研究500種已分離200種含量：μgmgg來源：肝臟是蛋白質(zhì)主要的加工廠第5頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三6功能：①營養(yǎng)作用，修補(bǔ)組織蛋白;②維持血漿膠體滲透壓③作為PH緩沖系統(tǒng)的一部分④作為激素、維生素、脂類、代謝產(chǎn)物、離子、藥物等的載體；⑤體液免疫防御系統(tǒng)⑥催化作用⑦代謝調(diào)控作用⑧參與凝血與纖維蛋白溶解第6頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三7分類：依據(jù)來源、分離方法和生理功能來源肝生成：絕大多數(shù)血漿蛋白質(zhì)其他組織細(xì)胞生成：免疫球蛋白和蛋白類激素第7頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三8分離方法鹽析法：白蛋白/球蛋白（pH7.0半飽和的硫酸銨溶液）電泳法：醋酸纖維素薄膜電泳：6種瓊脂糖凝膠電泳：13種聚丙烯酰胺凝膠電泳：30種SDS聚丙烯酰胺凝膠等電雙向電泳：300種分辨率增高--+醋酸纖維素薄膜第8頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三9功能分類:第9頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三10二、重要的血漿蛋白質(zhì)和血清蛋白質(zhì)電泳正常血清蛋白電泳圖譜示意圖及其掃描曲線第10頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三11電泳區(qū)帶蛋白質(zhì)種類成人參考值（g/L）半壽期（d）分子量（kD）等電點(diǎn)含糖量(%)功能前清蛋白前清蛋白0.2~0.41.9554.70.5營養(yǎng)、運(yùn)載清蛋白

35~5215~1966.24~5.80維持膠壓、運(yùn)載和營養(yǎng)等α1-球蛋白α1-抗胰蛋白酶0.9~2.04524.812蛋白酶抑制劑α1-酸性糖蛋白0.5~1.25402.7~445免疫應(yīng)答修飾劑甲胎蛋白3×10－569胎兒期蛋白高密度脂蛋白1.7~3.25200膽固醇逆轉(zhuǎn)運(yùn)α2-球蛋白結(jié)合珠蛋白0.3~2.0285~4004.112結(jié)合血紅蛋白α2-巨球蛋白1.3~3.057205.48蛋白酶抑制劑銅藍(lán)蛋白0.1~0.44.51324.4鐵氧化酶β-球蛋白轉(zhuǎn)鐵蛋白2.0~3.6779.65.76運(yùn)鐵到胞內(nèi)低密度脂蛋白0.6~1.55300運(yùn)膽固醇到組織C30.9~1.81852補(bǔ)體成分C40.1~0.42067補(bǔ)體成分β2-微球蛋白0.001~0.00211.8纖維蛋白原2.0~4.02.53405.53凝血因子γ-球蛋白IgG7.0~1624144~1506~7.33免疫球蛋白IgA0.7~4.06~1608免疫球蛋白IgM0.4~2.3597012免疫球蛋白C-反應(yīng)蛋白＜5~1156.20炎癥介質(zhì)血漿蛋白質(zhì)的性質(zhì)功能及其與電泳區(qū)帶的關(guān)系第11頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三12圖譜類型TPAlbα1α2βγ低蛋白血癥型↓↓↓↓N↑N↓N↑腎病型↓↓↓↓N↑↑↑↑↓N↑肝硬化型N↓↑↓↓N↓N↓β-γ↑（融合）彌漫性肝損害型N↓↓↓↑↓↑慢性炎癥型↓↑↑↑急性時(shí)相反應(yīng)型N↓N↑↑NM蛋白血癥型在α-γ區(qū)帶中出現(xiàn)M蛋白區(qū)帶高α2(β)-球蛋白血癥型↓↑↑↑妊娠型↓N↓↑↑

N

蛋白質(zhì)缺陷型個(gè)別區(qū)帶出現(xiàn)特征性缺乏異常血清蛋白質(zhì)電泳圖譜的分型及其特征第12頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三13

A正常人B腎病綜合征C肝硬化(β-γ橋)D肝硬化(不典型β-γ橋)

E多發(fā)性骨髓瘤IgA型F多發(fā)性骨髓瘤IgG型典型異常血清蛋白電泳圖譜第13頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三14正常血清蛋白電泳上顯示的寬γ區(qū)帶主要成分:免疫球蛋白(Ig)。漿細(xì)胞病（plasmacelldyscrasia）：異常漿細(xì)胞增殖，產(chǎn)生大量單克隆Ig或其輕鏈或重鏈片段，病人血清或尿液中可出現(xiàn)結(jié)構(gòu)單一的M蛋白（monoclonalprotein）在蛋白電泳時(shí)呈現(xiàn)一個(gè)色澤深染的窄區(qū)帶，此區(qū)帶較多出現(xiàn)在γ或β區(qū)，偶見于α區(qū)。漿細(xì)胞病與M蛋白

第14頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三15三、急性時(shí)相反應(yīng)蛋白

急性的全身或系統(tǒng)性炎癥包括感染、組織損傷（如創(chuàng)傷、手術(shù)、心肌梗死、惡性腫瘤等）、炎癥性疾?。ㄈ缱陨砻庖咝匝装Y）等情況下，肝臟對多種血漿蛋白質(zhì)合成量發(fā)生變化，可有明顯的升高或降低，這些變化的血漿蛋白質(zhì)統(tǒng)稱為急性時(shí)相反應(yīng)蛋白（APRs），增加的蛋白質(zhì)稱為正向APRs，下降的蛋白質(zhì)稱為負(fù)向APRs。第15頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三16正向APRs

CRPPCTSAAAAGAATHp

C4Fg(FIB)C3Cp

PAAlbTRF負(fù)向APRs第16頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三17急性時(shí)相反應(yīng)機(jī)制：當(dāng)機(jī)體受到損傷或炎癥時(shí)釋放小分子蛋白質(zhì)導(dǎo)致肝細(xì)胞中上述蛋白質(zhì)的合成增加或減少。急性時(shí)相反應(yīng)的應(yīng)用：急性時(shí)相反應(yīng)時(shí),血漿蛋白質(zhì)的變化和創(chuàng)傷的時(shí)間進(jìn)程有關(guān)，可用于鑒別急性、亞急性和慢性病理狀態(tài)。第17頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三18四、血漿中幾種主要蛋白質(zhì)（一）血清總蛋白（TP）

血清總蛋白是血漿中所有蛋白質(zhì)含量的總體反映，與肝臟合成蛋白質(zhì)功能及免疫球蛋白合成情況有關(guān)，尤其是結(jié)合血清白蛋白濃度，能大概反映免疫球蛋白的含量。參考值成人：65～85g／L

第18頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三191.凱氏定氮法－參考方法2.雙縮脲法(最好)3.酚試劑法4.散射比濁法5.染料結(jié)合法6.UV法測定方法第19頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三201.凱氏定氮法－參考標(biāo)準(zhǔn)方法(0.05mgN0.3gpro)消化用濃硫酸將蛋白質(zhì)消化為硫酸銨；（耗時(shí)）

蒸餾用堿性溶液堿化消化液并蒸餾揮發(fā)；

吸收用酸性溶液（硼酸）吸收氣態(tài)氨（使[H+]

）滴定用已標(biāo)定的無機(jī)酸滴（使[H+]恢復(fù)），計(jì)算總氮量定蛋白（總氮量-非蛋白氮）×6.25=蛋白含量納氏試劑：碘化汞和碘化鉀的堿性溶液與氨反應(yīng)生成淡黃棕色膠態(tài)化合物，其色度與氨氮含量成正比。

原理：第20頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三21評價(jià)：優(yōu)點(diǎn)：準(zhǔn)確度高，精密度高，靈敏度高，是公認(rèn)的參考方法。缺點(diǎn)：操作復(fù)雜，費(fèi)時(shí)，不適合常規(guī)檢測，血清各蛋白含氮量會有所變化尤其是疾病時(shí)。

應(yīng)用：標(biāo)準(zhǔn)蛋白的標(biāo)定及校正其它常規(guī)方法第21頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三222.雙縮脲法原理：蛋白質(zhì)中的肽鍵（-CONH-）在堿性溶液中能與Cu2+作用而產(chǎn)生紫紅色絡(luò)合物，其顏色的深淺與蛋白質(zhì)的濃度成正比，而與蛋白質(zhì)的分子量及氨基酸成分無關(guān)。條件：至少含兩個(gè)肽鍵（-CONH-）基團(tuán)才能和Cu2+形成絡(luò)合物,氨基酸及二肽無反應(yīng),三肽以上才能反應(yīng)。

雙縮脲生成

加熱＋NH322H－180022222N端C端第22頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三23評價(jià)：優(yōu)點(diǎn)：簡便，準(zhǔn)確，重復(fù)性好，10g-120g/L線性好，特異性與精密度好，批內(nèi)CV%＜2%，顯色穩(wěn)定。缺點(diǎn)：靈敏度較差，對蛋白質(zhì)含量低的體液標(biāo)本不適合。

應(yīng)用：常規(guī)推薦方法。手工或上機(jī)使用。第23頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三243.酚試劑法原理：蛋白質(zhì)分子中的酪氨酸殘基和色氨酸殘基能夠和酚試劑中的磷鎢酸-磷鉬酸反應(yīng)生成藍(lán)色化合物，

Lowry改良法：在酚試劑中加入Cu2+（75%呈色），提高了呈色的靈敏度，為雙縮脲法的100倍左右。第24頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三25評價(jià)及應(yīng)用：優(yōu)點(diǎn)：操作簡單，改良法靈敏度高（10μg-60μg），適合測定蛋白含量少的標(biāo)本。缺點(diǎn)：各種蛋白質(zhì)酪氨酸和色氨酸比例不同，只適合測定單一蛋白質(zhì)。受一些藥物干擾。

第25頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三264.比濁法原理：

評價(jià)及應(yīng)用：優(yōu)點(diǎn)：簡便不需特殊儀器。缺點(diǎn)：濁度形成的干擾因素多（加試劑方法，反應(yīng)溫度，蛋白絮狀沉淀等）

某些酸類（磺基水楊酸等）和血清蛋白質(zhì)結(jié)合產(chǎn)生沉淀，測其濁度，與標(biāo)準(zhǔn)對比，可求蛋白含量。第26頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三275.染料結(jié)合法在酸性環(huán)境下，帶正電的蛋白質(zhì)（-NH3+)與染料的陰離子產(chǎn)生顏色反應(yīng)，使染料的吸收峰改變，可既而用分光光度法比色測定。原理：常用染料：氨基黑，考馬斯亮藍(lán)等評價(jià)及應(yīng)用：優(yōu)點(diǎn)：操作簡便，重復(fù)性好，靈敏度高，且干擾因素少。缺點(diǎn)：特異性不高；不同蛋白質(zhì)和染料的結(jié)合力不一致，標(biāo)準(zhǔn)物不易確定。

第27頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三286.紫外分光光度法

蛋白質(zhì)分子中的酪氨酸和色氨酸等芳香族氨基酸可使蛋白質(zhì)溶液在280nm處有一吸收峰?？捎糜跍y定蛋白質(zhì)但需避免核酸干擾。（1）Lowry-Kalcker公式蛋白質(zhì)濃度（mg/ml）=1.45A280-0.74A260

（2）Warburg-Christian公式蛋白質(zhì)濃度（mg/ml）=1.55A280-0.76A260

原理：第28頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三29評價(jià)及應(yīng)用：優(yōu)點(diǎn)：敏感而簡便，可保留蛋白生物活性，常用與較純的酶和免疫球蛋白。需紫外分光光度計(jì)及石英比色皿。缺點(diǎn)：各種蛋白質(zhì)中芳香族氨基酸含量和比例不同；在280nm測定易受游離色aa和酪aa以及尿酸和膽紅素的干擾；導(dǎo)致準(zhǔn)確性和特異性受影響。措施：在220-225nm波長區(qū)域，用0.15mol/l的NaCl稀釋1000-2000倍可消除干擾。第29頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三30結(jié)構(gòu)：也稱白蛋白，585個(gè)aa殘基構(gòu)成的單鏈多肽，MW=66458，含17個(gè)二硫鍵。理化性質(zhì)：pI=4－5.8，肝細(xì)胞合成但不儲存，半衰期為15-19天，占總蛋白的40%－60%，pＨ7.4時(shí)帶負(fù)電。測定方法：色素結(jié)合法:溴甲酚綠（BCG），溴甲酚紫（BCP）,鹽析等。（二）清蛋白（ALB）

急性時(shí)相反應(yīng)蛋白

參考值成人：40～55g／L

第30頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三31臨床意義：白蛋白升高：白蛋白降低：肝功能下降：慢性肝病白蛋白丟失：由尿中、胃腸道、皮膚丟失白蛋白分解代謝增加：組織損傷及組織分解增加白蛋白分布異常：肝硬化等先天性ALB缺乏病：極少見的遺傳性疾病蛋白質(zhì)營養(yǎng)不良或吸收不良的評價(jià)指標(biāo)真性升高：未見假性升高：機(jī)體明顯失水，或治療輸入過多白蛋白第31頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三32＞35g/L正常28～34g/L輕度缺乏21～27g/L中度缺乏＜21g/L嚴(yán)重缺乏低于28g/L時(shí)會出現(xiàn)組織水腫血漿Alb作為營養(yǎng)指標(biāo)的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)第32頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三33方法：間接法:TP-ALB=GLB直接法:乙醛酸比色法(GLB中的色氨酸遠(yuǎn)大于ALB中的色氨酸含量)色氨酸+乙醛酸紫色化合物H+Hopkins-Cole反應(yīng):

成人20－40g/L.A/G：1.2－2.4球蛋白（GLB）參考值第33頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三34臨床意義：球蛋白升高：球蛋白降低：合成減少、低或無γ-球蛋白血癥

真性升高（常見）：自身免疫性疾病、感染反應(yīng)、多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥。假性升高（少見）：機(jī)體明顯失水。第34頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三35結(jié)構(gòu)：MW=54000，四個(gè)相同亞基構(gòu)成的四聚體。理化性質(zhì)：pＩ＝4.7，肝細(xì)胞合成，半壽期12小時(shí)。測定方法：免疫比濁法／免疫擴(kuò)散技術(shù)。（三）前白蛋白（PA，TTR）急性時(shí)相反應(yīng)蛋白

即甲狀腺素轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白（TTR），50%--70%的TTR與視黃醇結(jié)合蛋白（RBP）組成復(fù)合體，由于TTR電泳位置在白蛋白之前故命其為PA。TTR和RBP均由肝臟合成，為運(yùn)載和營養(yǎng)蛋白。第35頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三36功能：營養(yǎng)指標(biāo)，載體功能（甲狀腺素／維生素Ａ）。參考值：0.2—0.4g/L臨床意義：PA下降是肝功能不全的靈敏指標(biāo)；降低：營養(yǎng)不良，急性炎癥，惡性腫瘤，肝硬化及腎炎時(shí)。第36頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三37結(jié)構(gòu)：394個(gè)aa殘基構(gòu)成的單鏈多肽，含10％～12%的糖MW=5.5萬。也稱絲氨酸蛋白酶抑制物。理化性質(zhì)：pI值為4.8，占α1-球蛋白區(qū)帶顯色的90％。測定方法：免疫化學(xué)法，電泳（酸性凝膠電泳或等電聚焦電泳），利用蛋白酶抑制能力測定等。功能：蛋白酶抑制物（具有90％的抑制蛋白酶活力）。如糜蛋白酶，彈性蛋白酶，但此抑制作用有明顯的pＨ依賴性。（四）α1-抗胰蛋白酶（AAT）

急性時(shí)相反應(yīng)蛋白

第37頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三38常染色體共顯性遺傳，有多種遺傳表型現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)至少有75種基因變體主要根據(jù)電泳遷移率分類移動快的AAT變體用字母表前面的字母表示，移動最慢的基因以PiZ表示。F型--fast,M型--middle,S型—slow具有正常功能的是PiMM型，最常見的缺陷變體為Z和S型，表現(xiàn)為以下基因型：ZZ、SS、SZ、MZ、MS。ATT基因的遺傳表型

第38頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三39降低：（1）見于AAT缺陷：PiZZ型、PiSS型甚至PiMS型常伴有早年（20～30歲）出現(xiàn)的肺氣腫低血漿AAT可發(fā)現(xiàn)于胎兒呼吸窘迫綜合征ZZ蛋白聚集在肝細(xì)胞，導(dǎo)致肝硬化PiZZ表型的新生兒中10%～20%在出生數(shù)周后易患肝炎，最后因活動性肝硬化致死PiZZ表型的某些成人會發(fā)生肝損害（2）腎病綜合征，胃腸道疾病升高：AAT屬急性時(shí)相蛋白，在炎癥、感染、腫瘤、肝病時(shí)均顯著增加。參考值：0.9－2.0g/L臨床意義：第39頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三40應(yīng)用評價(jià)：

慢性阻塞性肺疾病全球計(jì)劃推薦，具有家族病史且45歲前發(fā)病的慢性阻塞性肺病患者，需要檢測ATT。α1蛋白區(qū)帶的顯色成分主要是ATT，若α1區(qū)帶減少，建議進(jìn)行ATT定量檢測。AAT<0.7g/L應(yīng)做ATT基因型檢測，PiZZ型通常在0.1--0.5g/L。美國食品和藥品管理局推薦當(dāng)<0.56g/L時(shí)采用每周輸注一次ATT的替代治療。第40頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三41結(jié)構(gòu)：181個(gè)aa殘基構(gòu)成的單鏈多肽，MW=3.5-4萬，含45%的糖，其中唾液酸占11%－12%。理化性質(zhì)：pI值2.7－3.5，肝細(xì)胞合成，膿毒癥時(shí)粒細(xì)胞和單核細(xì)胞及某些腫瘤組織也可合成。位于α1-球蛋白區(qū)帶。測定方法：免疫化學(xué)法（擴(kuò)散,濁度）,化學(xué)法（間接法），ELISA法等（五）α1-酸性糖蛋白（AAG）

急性時(shí)相反應(yīng)蛋白

第41頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三42功能：與免疫防御功能有關(guān)，機(jī)制不詳；抑制血小板凝集影響膠原纖維形成；參與脂類運(yùn)輸。參考值：０.5－1.2g/L。第42頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三43臨床意義：AAG增高（1）急性時(shí)相反應(yīng)指標(biāo)：在風(fēng)濕病、惡性腫瘤及心肌梗死等炎癥或組織壞死時(shí)一般增加3～4倍。AAG增高是活動性潰瘍性結(jié)腸炎最可靠的指標(biāo)之一。（2）糖皮質(zhì)激素增加，包括內(nèi)源性的庫欣綜合征和外源性強(qiáng)的松、地塞米松等藥物治療時(shí)，AAG降低：（1）營養(yǎng)不良、嚴(yán)重肝損害、腎病綜合征以及胃腸道疾病致蛋白嚴(yán)重丟失等（2）雌激素可使AAG降低。第43頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三44結(jié)構(gòu)：分子量720KDa,是血漿中最大的蛋白質(zhì)，由四個(gè)相同的亞基組成，含糖量約８％。理化性質(zhì)：肝細(xì)胞與單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)中合成，半壽期5天。測定方法：免疫化學(xué)等功能：與多種分子和離子結(jié)合，影響蛋白水解酶活性（主要的蛋白酶抑制劑,具有選擇性保護(hù)某些酶的作用）。（六）α2-巨球蛋白(AMG)

第44頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三45參考值：1.3-3.0g/L臨床意義：嬰幼兒及兒童比成人高；升高：見于慢性腎炎、肝疾病、糖尿病、自身免疫性疾病等，雌激素，低蛋白血癥可使其含量升高；降低：胰腺炎及前列腺癌時(shí)。第45頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三46結(jié)構(gòu)：兩對肽鏈形成四聚體，有三種不同的表型，即Hp1(1-1)、Hp2-1、Hp2(2-2)，分子量在85-400KD理化性質(zhì)：肝合成，pI值為4.1，電泳位a2-球蛋白區(qū)帶測定方法：電泳法，免疫化學(xué)法（擴(kuò)散,濁度）,化學(xué)法等（七）結(jié)合珠蛋白(Hp)

急性時(shí)相反應(yīng)蛋白

參考值：0.3-2.0g/L第46頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三47功能：與紅細(xì)胞中釋出自由Hb結(jié)合,防止Hb從尿中丟失而為機(jī)體有效地保存鐵,急性溶血后一周再生恢復(fù)。臨床意義：Hp濃度下降見于：①溶血性疾病如溶血性貧血、輸血反應(yīng)、瘧疾。對于溶血性疾病合適的組合檢測項(xiàng)目包括血漿Hp、LD和游離Hb。血管外溶血不會使Hp發(fā)生變化。②嚴(yán)重肝病患者，其Hp合成減少。Hp濃度升高見于：屬急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，當(dāng)燒傷和腎病綜合征情況下，血Hp常明顯升高。第47頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三48結(jié)構(gòu)：

MW=12-16萬,1046個(gè)aa殘基構(gòu)成的單鏈多肽，含糖約１０％，每分子銅藍(lán)蛋白可結(jié)合６～８個(gè)銅原子。理化性質(zhì)：肝合成,巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞合成少量；pI值為4.4，具遺傳基因多態(tài)性。測定方法：免疫化學(xué)（擴(kuò)散或比濁）等（八）銅藍(lán)蛋白(CER)

急性時(shí)相反應(yīng)蛋白

第48頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三49功能：具鐵氧化酶活性且起抗氧化劑作用，銅的無毒代謝庫臨床意義：增加—感染,創(chuàng)傷,腫瘤;降低--營養(yǎng)不良，嚴(yán)重肝病及腎綜;協(xié)助診斷Wilson病參考值：0.2-0.6g/L第49頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三50結(jié)構(gòu)：MW=7.7萬,單鏈糖蛋白，含糖約６％。理化性質(zhì)：肝細(xì)胞合成，pI值為5.5-5.9,半壽期10.5天，可逆結(jié)合多價(jià)離子如Fe,Cu,Zn,Co等，一分子TRF可結(jié)合兩個(gè)三價(jià)鐵。測定方法：免疫擴(kuò)散法，放免法和免疫比濁法等。（九）轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)

急性時(shí)相反應(yīng)蛋白第50頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三51功能：運(yùn)輸鐵。臨床意義：血TRF濃度受鐵供應(yīng)調(diào)節(jié)，缺鐵TRF升高，鐵治療后恢復(fù)?？捎糜谪氀脑\斷和對治療的監(jiān)測。降低:急性時(shí)相反應(yīng)、慢性肝病、營養(yǎng)不良及蛋白丟失時(shí)；升高：妊娠或雌激素會使其升高;缺鐵性貧血。參考值：2.0--3.6g/L

第51頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三52結(jié)構(gòu)：

MW=11800，100個(gè)aa殘基構(gòu)成的單鏈多肽，分子中含一對二硫鍵，不含糖。理化性質(zhì)：

pI值為5.7，存在于各種有核細(xì)胞表面，可從淋巴和腫瘤細(xì)胞表面釋放入血循環(huán)。半衰期107分鐘，幾乎由腎小管回收。測定方法：放射免疫化學(xué)等。

（十）β2－微球蛋白(BMG)

第52頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三53功能：分子量小，可自由通過腎小球?yàn)V過膜，在腎小管幾乎全部重吸收，可監(jiān)測腎小管功能；是HLAβ鏈的輕鏈部分。臨床意義：增高：腎功能衰竭，炎癥及腫瘤時(shí)。參考值：1.0—2.0mg/L第53頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三54結(jié)構(gòu)：

MW11.5-14萬，分子含５個(gè)相同的亞基，亞基間靠非共價(jià)鍵連接成圓盤狀多聚體。理化性質(zhì)：肝合成，pI值為6.2，電泳位于r區(qū)帶。測定方法：半定量沉淀法（早），免疫化學(xué)法、放免法。

（十一）C-反應(yīng)蛋白質(zhì)(CRP)

急性時(shí)相反應(yīng)蛋白

第54頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三55功能：結(jié)合多糖，磷脂和核酸；激活補(bǔ)體，抗凝。參考值：＜5mg/L

臨床意義：第一個(gè)認(rèn)定的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白,是急性時(shí)相反應(yīng)的一個(gè)敏感指標(biāo)，在ＡＭＩ、創(chuàng)傷、感染、外科手術(shù)時(shí)含量迅速升高，達(dá)到正常的2000倍。第55頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三56CRP是非特異性指標(biāo)，主要用于結(jié)合臨床監(jiān)測疾病①篩選微生物感染②評估炎癥性疾病的活動度和療效監(jiān)控③識別系統(tǒng)性紅斑狼瘡、白血病和外科手術(shù)后并發(fā)的感染④監(jiān)測腎移植后的排斥反應(yīng)⑤新生兒敗血癥和腦膜炎的監(jiān)測第56頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三57（十二）降鈣素原(PCT)急性時(shí)相反應(yīng)蛋白PCT為116個(gè)氨基酸的多肽，是由甲狀腺C細(xì)胞分泌的降鈣素的前體。炎癥反應(yīng)時(shí)，其他組織如肝、腎、胰腺也合成降鈣素原，并且不進(jìn)行裂解，使其血漿濃度從一個(gè)非常低的基線濃度迅速增加，增加速度遠(yuǎn)高于其他APRs。細(xì)菌感染后3h可發(fā)生PCT水平的升高，6-12h達(dá)峰值，體內(nèi)半衰期24h。第57頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三58（十二）降鈣素原(PCT)急性時(shí)相反應(yīng)蛋白臨床應(yīng)用：病毒感染即使在嚴(yán)重的病毒性疾病中，PCT也不會升高。PCT濃度的升高僅見于在合并細(xì)菌重復(fù)感染或膿毒癥PCT濃度的升高標(biāo)志著炎癥反應(yīng)的加重，暗示預(yù)后不良并為持續(xù)存在膿毒癥病灶的一個(gè)線索。PCT濃度下降則表明炎癥反應(yīng)逐步消失，如潛在傳染性病灶的成功治療和膿毒癥感染的控制。第58頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三59臨床意義：1、全身感染/膿毒血癥的鑒別診斷PCT<0.05ng/mL健康人0.05≤PCT≤0.5ng/mL進(jìn)展為重度全身感染/膿毒癥的風(fēng)險(xiǎn)為低度

0.5≤PCT<2.0ng/mL中度風(fēng)險(xiǎn)

2.0≤PCT<10.0ng/mL高度風(fēng)險(xiǎn)PCT≥10.0可確診為膿血癥或膿毒癥休克第59頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三60臨床意義：2、下呼吸道感染的鑒別診斷PCT<0.1ng/mL排除細(xì)菌感染的可能性，強(qiáng)烈不推薦使用抗生素0.1≤PCT<0.25ng/mL細(xì)菌感染可能性小，不推薦使用抗生素0.25≤PCT<0.5ng/mL細(xì)菌感染可能性大，建議開始使用抗生素PCT≥0.5有細(xì)菌感染，強(qiáng)烈推薦使用抗生素第60頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三61（十三）血清淀粉樣蛋白A(SAA)

急性時(shí)相反應(yīng)蛋白

與CRP相仿，用以評估急性相反應(yīng)進(jìn)程。SAA是個(gè)靈敏的參數(shù)，它在炎性反應(yīng)大約8h后開始升高，且超過參考范圍上限時(shí)間早于CRP，但目前，少數(shù)商業(yè)化的檢測方法表現(xiàn)出變異性，一旦WHO提供SAA參考品(目前研制正在進(jìn)行中)，可比性將得到改善。參考值：＜10mg/L

第61頁，講稿共67頁，2023年5月2日，星期三62第