輸血科不規(guī)則抗體篩選試驗操作規(guī)程

類別：操作規(guī)程生效日期：2014.10部門：輸血科修改日期：2014.09名稱：輸血科不規(guī)則抗體篩選試驗操作規(guī)程新增：不規(guī)則抗體篩選試驗標準操作規(guī)程【目的】檢測血清中是否存在抗A、抗B以外的不規(guī)則抗體，為交叉配血、ABO血型正確定型（不規(guī)則抗體干擾反定型）以及新生兒溶血病產(chǎn)前、產(chǎn)后診斷提供參考依據(jù)?！痉秶?、有輸血史、妊娠史的患者血標本。2、短期內(nèi)多次輸血的患者的血標本。3、交叉配血不合的患者的血標本。4、有輸血反應(yīng)史的患者的血標本。5、有新生兒溶血病史及流產(chǎn)史的患者的血標本?！韭氊?zé)】實驗室負責(zé)不規(guī)則抗體篩選試驗?！驹怼肯蛭⒅z反應(yīng)卡(簡稱反應(yīng)卡)內(nèi)先后加入篩選細胞和受檢血清，血清中的IgG抗體與相應(yīng)紅細胞抗原結(jié)合后便會和凝膠中的抗人球蛋白再次結(jié)合形成紅細胞凝集塊，因凝膠具有分子篩的作用，從而在離心后紅細胞凝集塊仍留在柱子的上部或中部，此稱為陽性反應(yīng)，表明受檢血清中有IgG抗體；反之，紅細胞沉于柱底，為陰性反應(yīng)，表示受檢血清中沒有IgG抗體?！緲吮静杉吞幚怼?、標本采集：EDTA-K2或EDTA-K3抗凝靜脈血2ml，離心，取上清。2、標本保存：室溫放置不超過8小時，4℃保存不超過72小時，無溶血及明顯乳糜?！驹O(shè)備與試劑】1、抗體篩選紅細胞試劑盒①包裝規(guī)格：每盒內(nèi)裝有Ⅰ號篩選細胞、Ⅱ號篩選細胞、Ⅲ號篩選細胞試劑各一支，5ml/支。②儲存條件及有效期：2-8℃儲存，不能冰凍。不得長期處于室溫或高溫條件下。使用后，應(yīng)立即旋緊瓶蓋并在2-8℃條件下保存。儲存條件下有效期為3個月。2、抗人球蛋白檢測卡（凝膠微柱）①包裝規(guī)格：12卡/盒②儲存條件及有效期：18-25℃避光保存。有效期為自組裝之日起12個月3、BaSo2005-2醫(yī)用低速離心機：珠海貝索生物技術(shù)有限公司4、TD-3A型血型血清學(xué)用離心機：長春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司5、FYQ型免疫微柱孵育器：長春博研科學(xué)儀器有限責(zé)任公司【操作步驟】1、將孵育箱開關(guān)打開，進行預(yù)溫。2、對反應(yīng)卡進行標記，標明紅細胞編號、病人姓名、病區(qū)、床號、住院號和檢查日期。3、按標記將篩選紅細胞Ⅰ-Ⅲ號各1滴（50ul）加入反應(yīng)卡相應(yīng)孔內(nèi)，再各加受檢血清1滴入反應(yīng)卡孔內(nèi)。4、將已加好反應(yīng)物的反應(yīng)卡置孵育箱(37℃)內(nèi)孵育15min，取出后即置TD-3A型血型血清學(xué)用離心機內(nèi)離心5min。5、取出用肉眼觀察，根據(jù)原理中標明的判讀標準判斷反應(yīng)結(jié)果并記錄。6、如篩選結(jié)果陽性，還須用譜細胞對受檢血清進行檢查，以確定抗體的特異性?！咀⒁馐马棥?、紅細胞濃度不可過高，0.8%即可。應(yīng)使用純血清（肝素鈉抗凝管標本），如使用血漿有可能會出現(xiàn)假陽性結(jié)果。2、加樣時加樣器傾斜45°，順柱壁緩緩加入，防止形成氣泡。3、應(yīng)做陽性、陰性及自身對照。對照結(jié)果正確，受檢孔紅細胞滯留于