多糖類化合物

化學物質多糖類化合物01分離純化鑒定化學結構就抗腫瘤活性理化特性基本化學結構目錄03050204基本信息多糖類化合物是靈芝所含化學成分之一，現(xiàn)已證明，靈芝多糖類具有抗腫瘤作用、免疫調節(jié)作用、降血糖作用、降血脂作用、抗氧化作用和抗衰老作用，故靈芝多糖類是靈芝的主要有效成分。臨床試驗也證實，靈芝多糖可作為腫瘤化學治療和放射治療的有效輔助治療藥。分離純化鑒定分離純化鑒定靈芝多糖類的分離靈芝多糖類的分離、純化及結構確證的方法及步驟可概括如下：多采用熱水提取、分部沉淀的方式分離靈芝的多糖組分；進一步經(jīng)各種層析如DEAE纖維素柱色譜、SephadexG75柱色譜，凝膠過濾如SepharoseCL—4B凝膠過濾，高壓電泳和聚丙酰胺凝膠電泳等處理可獲純化的多糖；后者經(jīng)酸水解、紙色譜、氣相色譜分析可確定其單糖組分，經(jīng)酶水解可檢測殊碳糖（anomeric）結構；經(jīng)甲基化技術及Smith降解、氣相色譜、氣質聯(lián)用、紫外及紅外光譜分析、核磁共振等可確定多糖的連接方式和基本化學結構。平均分子量多糖的分子量可通過凝膠柱色譜如SephadeaxG—100柱色譜、超離心測沉降系數(shù)等方法測定，一般在測得分子量范圍后，求出平均分子量。理化特性理化特性生物活性有差異由于靈芝的種類、產(chǎn)地、分離提取方法各異，所獲靈芝多糖的理化特性、分子量、單糖組分和連接方式不同，生物活性亦有差異。如Hiroshi等（1985）報道，赤芝子實體熱水提取物經(jīng)濃縮、透析及系列色譜后獲得兩種多糖ganoderanA和B。ganoderanA的分子量9300，旋光度[α]D+58.8°，ganoderanB分子量3600，旋光度[α]+33.3°，二者對小鼠均具降血糖作用。兩個降血糖有效成分隨后，他們又從赤芝子實體中分離出兩個降血糖有效成分ganoderanB和C，均為糖肽，分子量分別為7400和5800。物理化學和化學研究證明，ganoderanB含吡喃葡萄糖酰基β-1→3主鏈和β-1→6側鏈，ganoderanC則含D-吡喃葡萄糖?；?1→3和β-1→6連接和D-吡喃半乳糖?；?1→6連接。Mizuno等（1986）報告，赤芝子實體經(jīng)85%乙醇（80℃），熱水（100℃），3%草酸銨（100℃）和5%氫氧化鈉（30℃）提取后，殘渣再用5%氫氧化鈉（含0.1%硼氫化鈉，80℃），20%氫氧化鈉（含0.1%硼氫化鈉，30℃）和5%氯化鋰（溶于二甲醋酸銨中，70℃）提取，獲多糖組分A、B、C?；瘜W結構化學結構均一體化學結構分子量BN3BBN3B1β（1→6）β（1→3）葡聚糖3.50×104BN3B2β（1→6）β（1→3）阿拉伯半乳聚糖基本化學結構基本化學結構Mizuno等（1982）經(jīng)熱水提取，乙醇分部沉淀，并經(jīng)離子交換色譜，pH依賴的Cetavlon處理、凝膠過濾以及ConA-SepharoseGL-4B親和色譜等純化，從人工培養(yǎng)的平蓋靈芝菌絲體中得到一個多糖組分。進一步通過甲基化、核磁共振、過碘酸氧化、Smith降解和β-D-葡聚糖酶（β-D-glucanase）分解等技術研究多糖的化學結構。α-葡聚糖組分具有α（1→4）葡萄糖苷主鏈，主鏈上每9～12個殘基連接α（1→6）支鏈，該組分僅有微弱抗腫瘤活性。β-葡聚糖組分具有β（1→3）葡萄糖苷主鏈，主鏈上每12個殘基通過β（1→6）連接一個單糖苷支鏈。其中之一顯示顯著的抗小鼠S180活性，50%抑瘤劑量為0.74mg/kg。Mizuno和Miyasaki等分別從赤芝、平蓋靈芝和紫芝加哥提取出具有抗腫瘤活性的多糖。并確證其基本化學結構。就抗腫瘤活性就抗腫瘤活性靈芝多糖并無種間差異，它們和從其他真菌中所獲多糖一樣，具有以下三個特性：1.初級結構的分子量在3×10^5以上。2.多聚物的連接方式均有β-1-3-D-殘基的主鏈和β-1-6-D-葡萄糖側鏈殘基。但從不同真菌提取的多糖的β-1-6-D-葡萄糖的分支程度不等，靈芝多糖的主鏈殘基與側鏈殘基的比例為5∶2