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酸談輔修課主講 貓大信息科 酸RbG0M

CyclinA/B

CyclinDCyclinA

RNAandProteinG1CyclinG1CyclinEG1/Scheck-G2/Mcheck-

S 2N＜S期G2RNAandProtein

DNA檢測DNA以確定細胞周期：PI 酸 酸

酸→消化收集細胞：將單細胞懸液加入2ml圓底離心管中，1500rpm離心5min，→PBS洗：加入1mlPBS重懸細胞沉淀，1500rpm離心5min，→→→→固定：加入2ml預(yù)冷的70% ，4℃固定30min或-20℃固定過夜后1500rpm離心5min，棄上清。PBS洗：加入1mlPBS重懸細胞沉淀，1500rpm離心5min，棄上清后500ulPBS重懸細胞。RNA去除：加入RNaseA（工作濃度20μg/ml），37℃孵育30min后1500rpm離心5min，棄上清。PI染色：500μlPBS重懸細胞沉淀，加入PI（工作濃度50μg/ml），室溫避光孵育30min?！魇郊毎麅x檢測：過300目篩，置流式管中，4℃冰箱保存待測?！?/p>

PI,eBioscience00- 酸未

未做處理的細 轉(zhuǎn)染對照質(zhì)粒的細

或用藥物處理的細 酸 軟件分析流式數(shù)據(jù)（可以使用flowJo），得到細胞周期比例。PBS

酸談

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