提取分離色譜法

提取分離色譜法第1頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月4、用結(jié)晶法純化固體物質(zhì)時(shí)，所選擇的溶劑應(yīng)該是對欲純化成分熱時(shí)溶解度___,冷時(shí)溶解度___,而對雜質(zhì)的溶解度冷熱都___或都____。5、分餾法是利用混合物中各成分的____差異進(jìn)行分離的，適用于分離_____混合物。6、在濃縮的水提液中加入一定量乙醇，不能除去的成分是（）A．淀粉B．樹膠C．黏液質(zhì)D．蛋白質(zhì)E．樹脂7、結(jié)晶法的原理是（）A．相似相溶B．溶解度差異C．分配系數(shù)差異D．溫度差異E．極性差異第2頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月第一章總論第三節(jié)色譜法第3頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月1、簡述色譜法的作用，試說出其分類形式。2、記憶色譜法中常用的術(shù)語

(相、固定相、流動相、支持劑)。3、熟悉薄層吸附色譜的原理和色譜條件。4、討論、分析、記憶吸附強(qiáng)度與被分離成分的極性之間的相互關(guān)系。5、熟記常見官能團(tuán)的極性大小順序

【課堂目標(biāo)】：第4頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月1.色譜法常用術(shù)語：相，固定相，流動相，支持劑

2．色譜法的分類

3．吸附色譜法的原理及色譜條件的選擇4．常見官能團(tuán)極性大小順序【教學(xué)重點(diǎn)】：【教學(xué)難點(diǎn)】：1.色譜法常用術(shù)語：相，固定相，流動相，支持劑

2．吸附色譜法的原理及色譜條件的選擇

第5頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月碳酸鈣（固定相）

色素混合液

石油醚

(流動相）1906年，Tsweet

發(fā)現(xiàn)色譜分離現(xiàn)象

色譜柱色帶色譜的起源第6頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月植物色素分離圖示

第7頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月色譜法的發(fā)展1、歷史30年代茨維特分離綠葉色素，產(chǎn)生固液吸附色譜40年代液—液分配色譜法、TLC、紙色譜50年代GC出現(xiàn)使色譜具備分離和在線分析功能60年代推出了色譜－質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GC-MS）

70年代HPLC出現(xiàn)使色譜分析范圍進(jìn)一步擴(kuò)大80年代出現(xiàn)了超臨界流體色譜法、毛細(xì)管電泳法90年代崛起的電色譜法，兼有毛細(xì)管電泳法與微微填充柱色譜法的優(yōu)點(diǎn)21世紀(jì)色譜科學(xué)將在生命科學(xué)等的前沿發(fā)揮他不可替代的重要作用

第8頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月（一）色譜法的定義定義：色譜法(chromatography)，是一種物理或物理化學(xué)的分離分析方法。原理：利用物質(zhì)在固定相和流動相中的親和力不同，使混合物中的各組分分離。對比：以前學(xué)過的分離方法有：

1.

沉淀法是利用物質(zhì)溶解度的不同而進(jìn)行分離。

2.蒸餾法是利用有機(jī)物沸點(diǎn)的差異進(jìn)行分離。

3.萃取法

是利用組分在水相和有機(jī)相（互不相溶）中的分配素?cái)?shù)不同進(jìn)行而分離。

7.色譜法（層析法、色離法）第9頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月色譜法基本術(shù)語1、相：一種均勻的體系氣相水相油相油水2、固定相：固定在支持物（劑）上的體系3、流動相：一種與固定相互不相溶的氣體或液體。4、支持劑（擔(dān)體）：用于固定固體相，而其自身不參與色譜行為的化學(xué)物質(zhì)。氧化鋁第10頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）色譜分離技術(shù)的應(yīng)用1、分離混合物：適用于分離結(jié)構(gòu)相近、性質(zhì)相似的復(fù)雜化合物2、定量分離：可用于檢測混合物中各成分的含量3、鑒定化合物：適于純物質(zhì)的鑒定第11頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）色譜法的用途

用途：色譜法已廣泛用于各個(gè)領(lǐng)域，是多組分混合物首選的分離分析方法。以《中國藥典》2005版為例，一部收載中藥1146個(gè)品種，用薄層色譜進(jìn)行鑒別或含量測定的有1523項(xiàng)，用高效液相色譜進(jìn)行定量分析的有479種518項(xiàng)，用氣相色譜進(jìn)行檢測的有47種。二部收載的有1967，采用高效液相色譜法的品種有848，現(xiàn)在色譜法已形成一門專門的科學(xué)。第12頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月（四）色譜法的分類

1．按兩相分子的聚集狀態(tài)分類流動相固定相類型液相色譜液體固體液-固色譜

液體液體液-液色譜

氣體固體氣-固色譜

氣體液體氣-液色譜

氣相色譜超臨界流體色譜法——流動相為超臨界流體第13頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月2．按固定相的固定方式分類3．按分離機(jī)制分類平面色譜

紙色譜薄層色譜高分子薄膜色譜柱色譜

填充柱色譜毛細(xì)管柱色譜

分配色譜吸附色譜離子交換色譜空間排阻色譜毛細(xì)管電詠法

毛細(xì)管電色譜法

毛細(xì)管電泳第14頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月一、吸附色譜法吸附力類型：主要物體表面作用力、氫鍵、絡(luò)合、靜電引力、范德華力等（一）基本原理：水以各種固體吸附劑為固定相，利用吸附劑對樣品中各成分吸附能力不同，及流動相對它們的解吸附能力的不同，使各成分達(dá)到分離。紙屑、瓜子殼磚頭、石塊第15頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月吸附強(qiáng)度決定于吸附劑的吸附能力，還受被吸附成分的性質(zhì)影響，更與流動相的性質(zhì)有關(guān)結(jié)論：吸附色譜的色譜條件固定相：吸附劑流動相：展開劑被分離組分：第16頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月1、吸附劑種類：活度：分五級（Ⅰ～Ⅴ）強(qiáng)～弱一般：Ⅱ或Ⅲ選擇原則：顆粒要細(xì)；有適宜的吸附力；不與成分反應(yīng)活性級別

硅膠含水量%

氧化鋁含水量

I

0

0

II

5

3

III

15

6

IV

25

10

V

38

15

①有機(jī)類淀粉、葡萄糖、聚酰胺、纖維素等

②無機(jī)類氧化鋁、硅膠、活性炭、碳酸鈣、硅藻土等

第17頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月概念：活化：一定條件下，加熱吸附劑除去其中的水分，使其吸附力增強(qiáng)的過程。脫活化：常用吸附劑硅膠：適用于中性和酸性成分分離氧化鋁：商品氧化鋁分三種規(guī)格活性炭：非極性吸附劑聚酰胺：高分子聚合物極性吸附劑第18頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月硅膠（SiO2·H2O）結(jié)構(gòu)：內(nèi)部——硅氧交聯(lián)結(jié)構(gòu)→多孔結(jié)構(gòu)表面——有硅醇基→氫鍵作用→吸附活性中心

特性：

1）與極性物質(zhì)或不飽和化合物形成氫鍵物質(zhì)極性↑，吸附能力↑→強(qiáng)極性吸附中心，不易洗脫吸附活性次序：活潑型>束縛型>游離型

2）吸水→失活→105～110OC烘干30分鐘(可逆失水)→吸附力最大→500OC烘干(不可逆失水)→活性喪失，無吸附力適用：適合酸性或中性物質(zhì)

第19頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月氧化鋁類型

制法

PH

適用化合物

分離實(shí)例

堿性氧化鋁

氫氧化鋁脫水

9-10

堿性成分

中性成分

生物堿

甾醇

中性氧化鋁

堿性氧化鋁水洗至中性

7.5

中性成分

酸堿不穩(wěn)定成分

醛、酮、萜

生物堿、皂苷

酸性氧化鋁

工業(yè)氧化鋁用酸、水洗滌

4-4.5

酸性成分

中性耐酸成分

有機(jī)酸

酸性氨基酸

商品氧化鋁吸附劑分類及性能第20頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月活性炭典型的非極性吸附劑，對非極性物質(zhì)具有較強(qiáng)的親和能力，在水溶液中的吸附力最強(qiáng)，在有機(jī)溶劑中吸附力較弱。溶劑的極性越小，活性炭的吸附力就小，成分越容易被洗脫活性炭吸附能力強(qiáng)弱芳香族化合物>脂肪族化合物大分子化合物>小分子化合物第21頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月聚酰胺A:聚酰胺材料簡介：聚酰胺是由酰胺聚合而成的一類高分子物質(zhì)，聚酰胺又稱錦綸、尼龍、種類繁多。色譜常用的為錦綸－6和錦綸－66。其單體物質(zhì)是已內(nèi)酰胺、已二胺和已二酸。分子中的酰胺鍵是其結(jié)構(gòu)的重要部分。酰胺鍵也是與其它極性鍵基團(tuán)產(chǎn)生氫鍵的物質(zhì)基礎(chǔ)。B:分離原理：氫鍵吸附原理

C:與聚酰胺可以形成氫鍵的基團(tuán)：酚羥基、羰基、羧基第22頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月聚酰胺吸附原理示意圖第23頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月（低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑或混合溶劑系統(tǒng)）★注意：流動相的極性必須與分離組分的極性一致(1)常用溶劑：氯仿、乙醚、石油醚或B.A.W溶劑系統(tǒng)（BuOH:HAC:Water)(4:1:5)(2)流動相的選擇用硅膠或氧化鋁作色譜分離時(shí)，如被測成分極性較大，用活性較低的吸附劑，極性較大的沖洗劑；被測成分極性較小，選用活性較強(qiáng)的吸附劑，極性較小的沖洗劑

2.流動相：第24頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）常用溶劑的極性

石油醚<環(huán)己烷<二硫化碳<四氯化碳<三氯乙烷<苯<甲苯<二氯甲烷<乙醚<氯仿<乙酸乙酯<正丁醇<丙酮<乙醇<甲醇<吡啶<酸<水

第25頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月3、被分離組分的性質(zhì)（主要因素）影響化合物極性的因素：

化合物分子母核大?。ㄌ紨?shù)多少）：

分子大、碳數(shù)多，極性?。环肿有?、碳數(shù)少，極性大。(2)取代基極性大小：在化合物母核相同或相近情況下，化合物極性大小主要取決于取代基極性大小。酸＞酚＞醇＞胺＞醛＞酮＞酯＞醚＞烯＞烷。分離組分的極性越大，吸附力越強(qiáng)第26頁，課件共27頁，創(chuàng)作于2023年2月常見官能團(tuán)的吸附能力