2023年生物技術(shù)期末復(fù)習(xí)-基因工程原理（生物技術(shù)）考試歷年真題集錦附帶答案

2023年生物技術(shù)期末復(fù)習(xí)-基因工程原理（生物技術(shù)）考試歷年真題集錦加答案（圖片大小可自由調(diào)整）題型一二三四五六七總分得分第1卷一.參考題庫(共30題)1.重組DNA技術(shù)中常用的限制性內(nèi)切酶為A、I類限制性內(nèi)切酶B、II類限制性內(nèi)切酶C、III類限制性內(nèi)切酶D、IV類限制性內(nèi)切酶2.除了常規(guī)PCR外，還有一些特殊的PCR，常見的有反向PCR、反轉(zhuǎn)錄PCR、______________、多重PCR、巢式PCR。3.DNA經(jīng)限制性內(nèi)切酶切割后可產(chǎn)生兩種末端：___________和平頭末端。4.大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)是目前使用最為廣泛的原核表達(dá)系統(tǒng)。5.II型限制性核酸內(nèi)切酶在發(fā)揮作用時需要ATP和Mg2+。6._________成為國際國內(nèi)人體健康戰(zhàn)略的重中之重。7.基因工程是_________年代發(fā)展起來的遺傳學(xué)的一個分支學(xué)科。8.誘導(dǎo)型啟動子9.就克隆一個基因(DNA片段)來說，最簡單的質(zhì)粒載體也必需包括三個部分：復(fù)制區(qū)；________；克隆位點。10.連接反應(yīng)中，下列哪項物質(zhì)是T4DNA連接酶所必須的輔助因子A、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP11.基因工程中使用的II類限制性內(nèi)切核酸酶不僅有內(nèi)切核酸酶的活性，而且有甲基化酶的活性。12.分離既定組織或者細(xì)胞的_____________是構(gòu)建cDNA文庫的首要步驟。13.Nick和Gap的含義是不同的，前者指DNA的單鏈中有較小的缺失，后者僅是斷開了一個磷酸二酯鍵。14.雙鏈DNA中一段自我互補的序列被稱為回文序列，這種序列一般具有哪些特征。A、有對稱軸B、兩條鏈的5’→3’方向的序列相同C、是Ⅱ類酶的識別序列D、可增強基因的表達(dá)E、是I類酶的識別序列15.雙酶切或多酶切時，一般先用低鹽濃度的酶切，再用高鹽濃度的酶切。16.在眾多的植物轉(zhuǎn)基因方法中，下列哪種方法應(yīng)用最多、最廣泛A、農(nóng)桿菌介導(dǎo)法B、植物病毒DNA介導(dǎo)法C、基因槍法D、原生質(zhì)體法17.T4DNA連接酶和E．coli連接酶都能催化雙鏈DNA和單鏈DNA的連接。18.你在做Southern印跡分析，并且剛完成了凝膠電泳這一步。根據(jù)方案，下面一步驟是用NaOH溶液浸泡凝膠，使DNA變性為單鏈。為了節(jié)省時間，你略過了這一步，直接將DNA從凝膠轉(zhuǎn)至硝酸纖維素膜上。然后用標(biāo)記探針雜交，最后發(fā)現(xiàn)放射自顯影片是空白。錯在哪里？19.下列哪一種結(jié)構(gòu)形態(tài)的外源蛋白表達(dá)量高A、包涵體型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、復(fù)合蛋白20.Cre-loxP系統(tǒng)中兩個loxP位點位于同一條DNA鏈上且方向相反，Cre重組酶誘導(dǎo)loxP間的序列翻轉(zhuǎn)21.大腸桿菌作為外源基因表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)點是A、繁殖迅速B、操作方便C、基因克隆機表達(dá)系統(tǒng)成熟完善D、全基因組測序完成E、被美FDA批準(zhǔn)為安全的基因工程受體生物22.怎樣制備目的基因？23.試述分子雜交技術(shù)的原理？24.利用反義RNA、核酶等反義技術(shù)及RNA干擾技術(shù)等能特異地封閉基因表達(dá)的特性，抑制一些有害基因的表達(dá)，以達(dá)到治療疾病的目的。這是基因治療策略中的哪一項A、基因修正B、基因增補C、基因激活D、基因失活25.DNA聚合酶I的Klenow大片段是用枯草桿菌蛋白酶切割DNA聚合酶I得到的分子量為76kDa的大片段，具有兩種酶活性:5-3合成酶的活性和3-5________。26.限制性核酸內(nèi)切酶是由細(xì)菌產(chǎn)生的，其生理意義是A、修復(fù)自身的遺傳缺陷B、促進(jìn)自身的基因重組C、強化自身的核酸代謝D、提高自身的防御能力27._________是由磷脂組成的膜狀結(jié)構(gòu)，用它包裝外源DNA分子，然后與植物原生質(zhì)體共保溫。28.在微生物遺傳學(xué)和分子遺傳學(xué)研究領(lǐng)域中的技術(shù)上的三大發(fā)明對基因工程的誕生起到了決定性的作用，這三大發(fā)明是下列哪些A、利用限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶體外切割和連接DNA片段B、遺傳密碼子的破譯C、質(zhì)粒改造成載體以攜帶DNA片段克隆D、逆轉(zhuǎn)錄酶的使用E、明確了DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)和半保留復(fù)制機制29.試述理想質(zhì)粒載體的構(gòu)建原理？30.轉(zhuǎn)錄水平的鑒定是指_________。第1卷參考答案一.參考題庫1.正確答案:B2.正確答案:實時熒光定量PCR3.正確答案:黏性末端4.正確答案:正確5.正確答案:錯誤6.正確答案:轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)7.正確答案:20世紀(jì)70年代8.正確答案:在一定的誘導(dǎo)劑作用下，才能啟動基因的轉(zhuǎn)錄與表達(dá)。9.正確答案:選擇性遺傳標(biāo)記10.正確答案:D11.正確答案:錯誤12.正確答案:mRNA13.正確答案:錯誤14.正確答案:A,B,C15.正確答案:正確16.正確答案:A17.正確答案:錯誤18.正確答案:如果你的雜交探針是雙鏈的，可能因為在加入雜交混合物之前忘記將探針變性而得到空白的放射自顯影結(jié)果。19.正確答案:C20.正確答案:正確21.正確答案:A,B,C,D,E22.正確答案:直接分離法、構(gòu)建基因文庫分離法、PCR擴(kuò)增法、人工合成法等。23.正確答案:將標(biāo)記的核酸探針以堿基互補配對原則與組織細(xì)胞中的待測核酸進(jìn)行特異性的雜交組合，形成探針標(biāo)記與待測核酸的雜交體，然后利用各種標(biāo)記物的顯色技術(shù)，在光學(xué)顯微鏡、熒光顯微鏡或電子顯微鏡下探察待測目標(biāo)核酸的存在及位置。24.正確答案:D25.正確答案:外切核酸酶的活性26.正確答案:D27.正確答案:脂質(zhì)體28.正確答案:A,C,D29.正確答案:選擇合適的原始質(zhì)粒；減少限制性內(nèi)切酶切點；適當(dāng)增加篩選標(biāo)記；選擇或用強復(fù)制起始子代替，提高拷貝數(shù)；滅活或去除nic/born基因及毒性蛋白編碼區(qū)域，提高質(zhì)粒的安全；進(jìn)行性狀表達(dá)的改造。30.正確答案:mRNA檢測第2卷一.參考題庫(共30題)1.________主要是根據(jù)蛋白質(zhì)的氨基酸序列設(shè)計一組混合引物來合成相應(yīng)的基因。2.基因操作的兩大關(guān)鍵技術(shù)是A、工具酶與載體B、轉(zhuǎn)化細(xì)胞和供體細(xì)胞C、基因克隆和基因重組D、克隆載體和表達(dá)載體3.用同一種酶切割載體和目的基因后進(jìn)行連接，連接產(chǎn)物會含大量自身環(huán)化載體，采用下列哪種酶處理，可防止自身環(huán)化A、核酸外切酶B、核苷酸激酶C、末端轉(zhuǎn)移酶D、堿性磷酸酶4.如果PCR的每一次循環(huán)都把上一次循環(huán)中合成的DNA增加了1倍，那么10個循環(huán)就擴(kuò)增了1000 倍，20個循環(huán)就擴(kuò)增了100萬倍，30個循環(huán)就擴(kuò)增了10億倍。5.具平末端的DNA片段的連接可以采用________________、同聚物加尾法、銜接物連接法。6.根據(jù)結(jié)構(gòu)和功能特性，可將DNA限制性內(nèi)切酶分為幾類A、I型酶B、II型酶C、III型酶D、IV型酶E、V型酶7.核酸雜交探針可分為兩大類：DNA探針和_______。8.真核生物基因組上有些DNA序列能將基因及基因簇隔開，阻止鄰近基因之間的相互作用，這些功能序列被稱為_________。9.主要用來提高擴(kuò)增特異性的特殊PCR是A、反轉(zhuǎn)錄PCRB、Real-TimePCRC、巢式PCRD、反向PCR10.X-gal顯色反應(yīng)的基本原理是使載體上與受體互補的α肽失活。11.由于DNA是由四種堿基組成的，所以任何限制性內(nèi)切核酸酶的切割頻率的理論值應(yīng)該是_________。12.應(yīng)用基因工程技術(shù)診斷疾病的過程中必須使用基因探針才能達(dá)到檢測疾病的目的。這里的基因探針是指A、人工合成的苯丙氨酸羥化酶的DNA分子B、用放射性同位素或熒光分子等標(biāo)記的蛋白質(zhì)分子C、用放射性同位素或熒光分子等標(biāo)記的DNA分子D、人工合成的免疫球蛋白的DNA分子13.基因工程上常用的限制性內(nèi)切酶是III型酶。14.下列對建立cDNA文庫的描述不正確的是A、從特定組織或細(xì)胞中提取DNA或RNAB、用反轉(zhuǎn)錄酶合成mRNA的對應(yīng)單鏈DNAC、以新合成的單鏈DNA為模板合成雙鏈DNAD、新合成的雙鏈DNA甲基化15.最早建立成功的轉(zhuǎn)基因哺乳動物是A、轉(zhuǎn)基因猴B、轉(zhuǎn)基因小鼠C、轉(zhuǎn)基因綿羊D、轉(zhuǎn)基因豬16.YAC的最大容載能力是_______。17.PCR是利用___________的原則，經(jīng)過高溫變性、低溫復(fù)性、子鏈延伸的不斷循環(huán)，選擇性的特異擴(kuò)增目的基因和目的DNA的一種方法。18.連接反應(yīng)中，為了維持還原環(huán)境，穩(wěn)定酶活性，需在連接緩沖液中添加A、DTTB、Tris-HCLC、MgCl2D、ATP19.藍(lán)白斑篩選重組子時，白色菌落不一定就是陽性克隆。20.藍(lán)白斑篩選是A、表型檢測法B、核酸雜交檢測法C、序列鑒定法D、物理特性檢測法21.為了防止DNA的自身環(huán)化，可用_________去雙鏈DNA_5’端的磷酸基團(tuán)。22.為什么大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)是目前使用最為廣泛的原核表達(dá)系統(tǒng)？23.Northern印跡和Southern印跡的基本原理是一樣的，都是用于檢測結(jié)構(gòu)基因的表達(dá)。24.質(zhì)粒作為載體使用時必須具備如下條件A、拷貝數(shù)較高B、分子量較小C、具有選擇標(biāo)記D、具有較多的限制性酶切位點E、具有復(fù)制起始點25.HIV為逆轉(zhuǎn)錄病毒。26.Southern印跡是用DNA探針檢測DNA片段，而Northern印跡則是A、用RNA探針檢測RNA片段B、用DNA探針檢測RNA片段C、用DNA探針檢測蛋白質(zhì)片段D、用RNA探針檢測DNA片段27.酵母人工染色體要在酵母細(xì)胞中穩(wěn)定存在，必須有哪些基本的結(jié)構(gòu)？28.逆轉(zhuǎn)錄合成第一條鏈時一般采用下列哪一種酶A、鼠源反轉(zhuǎn)錄酶B、雞源反轉(zhuǎn)錄酶C、兔源反轉(zhuǎn)錄酶D、禽源反轉(zhuǎn)錄酶29.作為載體需要具備哪些功能？30.迄今發(fā)現(xiàn)的質(zhì)粒DNA都是環(huán)狀的。第2卷參考答案一.參考題庫1.正確答案:簡并引物PCR2.正確答案:A3.正確答案:D4.正確答案:正確5.正確答案:直接鏈接法6.正確答案:A,B,C7.正確答案:RNA探針8.正確答案:絕緣子9.正確答案:C10.正確答案:正確11.正確答案:4n12.正確答案:C13.正確答案:錯誤14.正確答案:A15.正確答案:B16.正確答案:1000kb17.正確答案:堿基互補配對18.正確答案:A19.正確答案:正確20.正確答案:A21.正確答案:堿性磷酸酶22.正確答案:大腸桿菌基因組較??；表達(dá)系統(tǒng)成熟、完善，菌體繁殖迅速，培養(yǎng)簡單，操作方便，遺傳穩(wěn)定，已被FDA批準(zhǔn)為安全的基因工程受體生物。23.正確答案:錯誤24.正確答案:A,B,C,D,E25.正確答案:正確26.正確答案:B27.正確答案:(1)著絲粒；(2)端粒；(3)ARS序列。28.正確答案:A29.正確答案:為外源基因提供在受體細(xì)胞中的復(fù)制和整合能力；為外源基因提供進(jìn)入受體細(xì)胞的轉(zhuǎn)移能力；為外源基因提供在受體細(xì)胞中的擴(kuò)增和表達(dá)能力，外源基因的擴(kuò)增依賴于載體分子在受體細(xì)胞中高拷貝自主復(fù)制的能力。30.正確答案:錯誤第3卷一.參考題庫(共30題)1.在cDNA的合成中要用到_________，其作用是切除在第二鏈合成時形成的發(fā)夾環(huán)。2._________質(zhì)粒是目前使用較為廣泛的載體。3.為了保證引物有較高的退火溫度，要求引物的G+C含量盡量控制在40%-60%之間。4._________是指編碼產(chǎn)物能夠被快速測定，常用來判斷外源基因是否已經(jīng)成功導(dǎo)入寄主細(xì)胞并檢測其表達(dá)活性的一類特殊用途的基因。5.利用限制性核酸內(nèi)切酶降解基因組DNA，通常選擇幾個堿基識別序列的限制性核酸內(nèi)切酶A、4B、5C、6D、76.能通過分泌或運輸方式定位于細(xì)胞周質(zhì)甚至穿過外膜進(jìn)入培養(yǎng)基中的外源蛋白是A、包涵體型蛋白B、分泌型蛋白C、融合蛋白D、復(fù)合蛋白7.進(jìn)行體外重組時，外源片段和載體分子之間的物質(zhì)的量比值一般為A、（1-5）:1B、（3-10）:1C、1：（3-10）D、1：（1-5）8.常規(guī)PCR反應(yīng)程序中，高溫變性一般設(shè)置多高的溫度A、94℃B、65℃C、55℃D、72℃9.______________也叫做依賴于RNA的DNA聚合酶或RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶。10.把那些沒有可檢測表型的質(zhì)粒稱為_________。11.目前，嚴(yán)重危害人類健康和生命，其死亡率居各類疾病之首的是A、艾滋病B、心血管疾病C、惡性腫瘤D、血友病12.連接酶通常使用的連接反應(yīng)溫度是A、37℃B、20℃C、16℃D、50℃13.通?？稍谌N溫度下保存DNA：4～5℃、-20℃、-70℃，其中以_________最好。14.AIDS是由哪種病毒引起的全身性傳染疾病A、AVB、AAVC、HIVD、HSV15.pGEM質(zhì)粒有幾個啟動子A、0個B、2個C、3個D、4個16.免疫共沉淀技術(shù)是檢測（)的技術(shù)A、RNA－蛋白相互作用B、蛋白－蛋白相互作用C、RNA－RNA相互作用D、DNA－蛋白相互作用17.具有EcoRII末端的外源片段只能以一個方向插入到EcoRII末端的載體中。18.1970年，第一次重組DNA分子轉(zhuǎn)化成功的基因克隆實驗，標(biāo)志著基因工程誕生了。19.下列是構(gòu)建基因組文庫的常用載體，哪一種載體需要用的受體細(xì)胞和其余三種不一樣A、柯斯質(zhì)粒B、YACC、BACD、噬菌體20.高血壓屬于（）類型的疾病A、心血管疾病B、艾滋病C、惡性腫瘤D、血友病21.采用原核細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)的優(yōu)點之一是可以與下面什么過程直接相連A、發(fā)酵工程B、轉(zhuǎn)基因動物C、轉(zhuǎn)基因植物D、基因治療22.基因工程藥物的特點是高技術(shù)，短周期，高投入，高風(fēng)險，高收益。23.下列各常用載體的裝載量排列順序，正確的是A、Cosmid;YAC;PlasmidB、YAC;Cosmid;PlasmidC、Plasmi