藥物分析生物堿類藥物的分析

藥物分析生物堿類藥物的分析第1頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（一）概述（二）常見藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第2頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月性狀大部分由C、H、O、N等元素組成多為結(jié)晶或非晶型固體無色，少數(shù)為有色物質(zhì)多具有苦味，個別味極苦而辛辣，一般無臭固體多具有確定的熔點，部分具有揮發(fā)性或升華性。（一）概述第3頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月多具有堿性，受電效應(yīng)及立體效應(yīng)等影響，強弱差異較大。堿性順序為：季銨堿＞脂環(huán)胺和脂肪胺＞芳香脂胺＞氨＞芳胺＞N-芳雜胺＞環(huán)酰胺（近中性）；嗎啡兼有兩性；茶堿顯酸性。堿性的生物堿可利用堿性與酸成鹽，如鹽酸麻黃堿；堿性極弱的生物堿，以游離狀態(tài)存在，如咖啡因和利血平。堿性第4頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月游離生物堿大都不溶或難溶于水，溶于或易溶于有機溶劑堿性生物堿在稀酸溶液中成鹽而溶解。生物堿的鹽類多易溶于水，不溶或難溶于有機溶劑溶解性第5頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月多具旋光性。中國藥典中對許多生物堿都規(guī)定了旋光度測定。旋光性第6頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月藥典收載藥物中國藥典（2010年版）主要收載有麻黃堿、偽麻黃堿、秋水仙堿、阿托品、山莨菪堿、硫酸奎寧、奎尼丁、嗎啡、可待因、小檗堿、士的寧、長春堿、長春新堿、利血平、咖啡因、茶堿、毛果蕓香堿、川芎嗪等常用生物堿類藥物第7頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）常見生物堿類藥物的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.苯烴胺類生物堿2.托烷類生物堿3.喹啉類生物堿4.異喹啉類生物堿5.吲哚類生物堿6.黃嘌呤類生物堿其它種類第8頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月1.苯烴胺類生物堿①藥物結(jié)構(gòu)②理化性質(zhì)鹽酸麻黃堿（ephedrinehydrochloride）鹽酸偽麻黃堿（pseudoephedrinehydrochloride）秋水仙堿（colchicine）一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第9頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月①苯烴胺類藥物結(jié)構(gòu)鹽酸麻黃堿（ephedrinehydrochloride）白色針狀結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，無臭，味苦一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第10頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月鹽酸偽麻黃堿（pseudoephedrinehydrochloride）①苯烴胺類藥物結(jié)構(gòu)白色結(jié)晶性粉末，無臭、味苦一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第11頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月①苯烴胺類藥物結(jié)構(gòu)秋水仙堿（colchicine）淡黃色結(jié)晶性粉末一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第12頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②苯烴胺類藥物理化性質(zhì)性狀及溶解性

堿性氨基醇雙縮脲反應(yīng)

旋光性紫外特征吸收一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第13頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月鹽酸麻黃堿水中易溶，乙醇中溶解，三氯甲烷和乙醚中不溶；鹽酸偽麻黃堿極易溶于水，易溶于乙醇，微溶于三氯甲烷；秋水仙堿無臭，遇光色漸變深，乙醇、三氯甲烷中易溶，水中溶解，乙醚中極微溶。②苯烴胺類藥物理化性質(zhì)性狀及溶解性一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第14頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月麻黃堿和偽麻黃堿，堿性較強，易與酸成鹽；秋水仙堿堿性很弱，不與酸成鹽。②苯烴胺類藥物理化性質(zhì)

堿性一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第15頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月鹽酸麻黃堿和偽麻黃堿具有氨基醇結(jié)構(gòu)，可發(fā)生雙縮脲反應(yīng)。②苯烴胺類藥物理化性質(zhì)氨基醇雙縮脲反應(yīng)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第16頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月鹽酸麻黃堿為左旋體，50mg/ml溶液測定比旋度為－33～－35.5；鹽酸偽麻黃堿為右旋體，50mg/ml溶液測定比旋度為＋61.0～＋62.5；秋水仙堿為左旋體，10mg/ml溶液比旋度為－425～－450。②苯烴胺類藥物理化性質(zhì)

旋光性一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第17頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②苯烴胺類藥物理化性質(zhì)紫外特征吸收鹽酸偽麻黃堿0.5mg/ml溶液在251、257、263nm波長處有最大吸收；秋水仙堿在243與350nm波長處的吸光度比值為1.70～2.00。一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第18頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月2.托烷類生物堿硫酸阿托品（atropinesulfate）

消旋山莨菪堿（raceanisodamine）氫溴酸東莨菪堿（scopolaminehydrobromide）①藥物結(jié)構(gòu)②理化性質(zhì)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第19頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月硫酸阿托品（atropinesulfate）①托烷類藥物結(jié)構(gòu)無色結(jié)晶或白色結(jié)晶性粉末，無臭一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第20頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月消旋山莨菪堿（raceanisodamine）①托烷類藥物結(jié)構(gòu)白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，無臭，味苦一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第21頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月氫溴酸東莨菪堿（scopolaminehydrobromide）①托烷類藥物結(jié)構(gòu)無色結(jié)晶或白色結(jié)晶性粉末，無臭，具有微風(fēng)化性一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第22頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②托烷類藥物理化性質(zhì)溶解性

堿性穩(wěn)定性

旋光性莨菪酸反應(yīng)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第23頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②托烷類藥物理化性質(zhì)溶解性硫酸阿托品水中極易溶解，乙醇中易溶；消旋山莨菪堿在乙醇或鹽酸中易溶，水中溶解；氫溴酸東莨菪堿水中易溶，乙醇中略溶，三氯甲烷中極微溶，乙醚中不溶。一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第24頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②托烷類藥物理化性質(zhì)

堿性托烷類生物堿氮原子位于五元環(huán)內(nèi)，為叔氮堿性較強，易與酸成鹽。一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第25頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月為莨菪醇和莨菪酸組成的酯類物質(zhì)易于發(fā)生水解。②托烷類藥物理化性質(zhì)穩(wěn)定性一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第26頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月氫溴酸東莨菪堿為左旋體，50mg/ml溶液比旋度為－24～－27；硫酸阿托品和消旋山莨菪堿均為消旋體，無旋光。②托烷類藥物理化性質(zhì)

旋光性一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第27頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月水解生成莨菪酸，可為發(fā)煙硝酸硝化，在堿性醇溶液中呈現(xiàn)深紫色，后轉(zhuǎn)暗紅色，最后顏色消失（Vatili反應(yīng)）；亦可與硫酸、重鉻酸鉀在加熱條件下，發(fā)生氧化反應(yīng)而生成具有苦杏仁味的苯甲醛。②托烷類藥物理化性質(zhì)莨菪酸反應(yīng)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第28頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月①藥物結(jié)構(gòu)②理化性質(zhì)3.喹啉類生物堿硫酸奎寧（quininesulfate）硫酸奎尼?。╭uinidinesulfate）

一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第29頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月硫酸奎寧（quininesulfate）

白色細微的針狀結(jié)晶，輕柔，易壓縮，無臭，味極苦，遇光漸變色①喹啉類藥物結(jié)構(gòu)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第30頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月硫酸奎尼?。╭uinidinesulfate）①喹啉類藥物結(jié)構(gòu)白色細針狀結(jié)晶一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第31頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②喹啉類藥物理化性質(zhì)溶解性

堿性

6位含氧的喹啉衍生物

旋光性

熒光特性一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第32頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月溶解性②喹啉類藥物理化性質(zhì)硫酸奎寧，易溶于三氯甲烷-無水乙醇（2∶1）的混合液，水、乙醇、三氯甲烷、乙醚中微溶。硫酸奎尼丁，易溶于沸水，溶于三氯甲烷、乙醇，水中微溶，不溶于乙醚。一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第33頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月

堿性②喹啉類藥物理化性質(zhì)均具有喹啉環(huán)和喹核堿，含有二個氮原子喹啉氮為芳香氮，堿性較弱，不可與酸成鹽；喹核氮為脂環(huán)氮，是叔氮，堿性較強，可與酸成鹽1分子硫酸與2分子藥物成鹽。喹核氮喹啉氮一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第34頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②喹啉類藥物理化性質(zhì)硫酸奎寧和硫酸奎尼丁是對映異構(gòu)體，僅喹核堿部分立體結(jié)構(gòu)不同，硫酸奎寧是左旋體，20mg/ml水溶液比旋度為－237～－244；硫酸奎尼丁為右旋體，20mg/ml水溶液，比旋度為＋275～＋290。

旋光性一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第35頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②喹啉類藥物理化性質(zhì)與氯水、氨水發(fā)生綠奎寧反應(yīng)。6位含氧的喹啉衍生物一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第36頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②喹啉類藥物理化性質(zhì)在稀酸條件下，均顯藍色熒光，可用于鑒別。熒光特性一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第37頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月①藥物結(jié)構(gòu)②理化性質(zhì)4.異喹啉類生物堿硫酸嗎啡（morphinesullfate）鹽酸嗎啡（morphinehydrochloride）磷酸可待因（codeinephosphate）鹽酸小檗堿（berberinehydrochloride）一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第38頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月硫酸嗎啡（morphinesullfate）白色針狀結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，無臭，遇光易變質(zhì)①異喹啉類藥物結(jié)構(gòu)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第39頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月鹽酸嗎啡（morphinehydrochloride）白色，有絲光的針狀結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，無臭，遇光易變質(zhì)①異喹啉類藥物結(jié)構(gòu)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第40頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月磷酸可待因（codeinephosphate）白色細微的針狀結(jié)晶性粉末，無臭，有風(fēng)化性①異喹啉類藥物結(jié)構(gòu)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第41頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月鹽酸小檗堿（berberinehydrochloride）黃色結(jié)晶性粉末，無臭，味極苦①異喹啉類藥物結(jié)構(gòu)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第42頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②異喹啉類生物堿理化性質(zhì)溶解性

酸性和堿性

嗎啡生物堿的特征反應(yīng)

還原性

小檗堿的呈色反應(yīng)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第43頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月溶解性②異喹啉類藥物理化性質(zhì)硫酸嗎啡與鹽酸嗎啡，在水中溶解，乙醇中略溶，三氯甲烷和乙醚中不溶；一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第44頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月

酸性和堿性②異喹啉類藥物理化性質(zhì)嗎啡結(jié)構(gòu)中具有酚羥基和叔氮基團，具有酸堿兩性，可溶于氫氧化鈉溶液和鹽酸溶液，但堿性略強；可待因分子中酚羥基被甲氧化，僅有叔氮基團，堿性較強，不溶于氫氧化鈉溶液；小檗堿具有α-羥胺結(jié)構(gòu)，能形成醇式、季銨式、醛式互變異構(gòu)，季銨式最穩(wěn)定，并離子化呈強堿性，可與酸成鹽。一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第45頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②異喹啉類藥物理化性質(zhì)嗎啡A環(huán)酚羥基具有弱還原性，易被氧化；可待因不具有酚羥基，不易氧化此性質(zhì)可用于區(qū)別嗎啡和可待因。

還原性一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第46頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②異喹啉類藥物理化性質(zhì)與甲醛試液的Marquis反應(yīng)與鉬硫酸試液的Frohde反應(yīng)。

嗎啡生物堿的特征反應(yīng)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第47頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②異喹啉類藥物理化性質(zhì)游離小檗堿可與丙酮結(jié)合為丙酮小檗堿，析出黃色沉淀；220℃加熱可分解為紅色的小檗紅堿；在酸性溶液中加漂白粉（或通氯氣）溶液即顯櫻紅色；與5％沒食子酸水浴加熱，顯翠綠色。小檗堿的呈色反應(yīng)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第48頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月①藥物結(jié)構(gòu)②理化性質(zhì)5.吲哚類生物堿硝酸士的寧（strychninenitrate）利血平（reserpine）硫酸長春堿（vinblastinesulfate）硫酸長春新堿（vincristinesulfate）一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第49頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月硝酸士的寧（strychninenitrate）無色針狀結(jié)晶或白色結(jié)晶性粉末，無臭，味極苦①吲哚類藥物結(jié)構(gòu)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第50頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月利血平（reserpine）白色或淡黃褐色的結(jié)晶或結(jié)晶性粉末，無臭，幾乎無味，遇光色漸變深①吲哚類藥物結(jié)構(gòu)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第51頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月硫酸長春堿（vinblastinesulfate）白色或類白色的結(jié)晶性粉末，無臭，有引濕性，遇光或熱易變黃①吲哚類藥物結(jié)構(gòu)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第52頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月硫酸長春新堿（vincristinesulfate）白色或類白色結(jié)晶性粉末，無臭，有引濕性，遇光或熱易變黃①吲哚類藥物結(jié)構(gòu)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第53頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②吲哚類生物堿理化性質(zhì)溶解性堿性

士的寧旋光性利血平的還原性

利血平吲哚環(huán)β-位氫

長春堿與長春新堿一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第54頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月溶解性硝酸士的寧沸水中易溶，水中略溶，微溶于乙醇、三氯甲烷，乙醚中不溶；利血平三氯甲烷中易溶，丙酮或苯中微溶，不溶于水、甲醇、乙醇或乙醚；硫酸長春堿和長春新堿水中易溶，甲醇、三氯甲烷中溶解，乙醇中極微溶解。②吲哚類生物堿理化性質(zhì)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第55頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②吲哚類生物堿理化性質(zhì)結(jié)構(gòu)中均具有吲哚氮和脂環(huán)氮。吲哚氮與芳環(huán)共軛，堿性較弱，不與酸成鹽；士的寧結(jié)構(gòu)中脂環(huán)氮為叔氮，堿性較強，可與硝酸成鹽；利血平結(jié)構(gòu)中的脂環(huán)氮由于鄰近基團存在立體位阻效應(yīng)，堿性較弱，不能與酸成鹽，以游離藥物形式存在；長春堿和長春新堿結(jié)構(gòu)中的脂環(huán)氮有兩個，均具有一定的堿性，故可與一分子二元酸成鹽。堿性

一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第56頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②吲哚類生物堿理化性質(zhì)利血平為左旋體，10mg/ml三氯甲烷液比旋度為－115～－131。旋光性一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第57頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②吲哚類生物堿理化性質(zhì)用硫酸溶解后，可與重鉻酸鉀反應(yīng)呈現(xiàn)紫色。

士的寧一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第58頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②吲哚類生物堿理化性質(zhì)易于氧化，產(chǎn)物為黃色的3,4-二去氫利血平，伴有黃綠色熒光，進一步可氧化為3,4,5,6-四去氫利血平，具有藍色熒光。利血平的還原性一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第59頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②吲哚類生物堿理化性質(zhì)較活潑，可與芳醛發(fā)生縮合反應(yīng)而顯色。利血平吲哚環(huán)β-位氫一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第60頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月①藥物結(jié)構(gòu)②理化性質(zhì)6.黃嘌呤類生物堿咖啡因（caffeine）茶堿（theophylline）氨茶堿（aminophylline）一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第61頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月咖啡因（caffeine）白色或帶極微黃綠色、有絲光的針狀結(jié)晶，無臭，味苦，有風(fēng)化性①黃嘌呤類藥物結(jié)構(gòu)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第62頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月茶堿（theophylline）白色結(jié)晶性粉末，無臭、味苦①黃嘌呤類藥物結(jié)構(gòu)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第63頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月氨茶堿（aminophylline）白色或微黃色的顆粒或粉末，微有氨臭，味苦①黃嘌呤類藥物結(jié)構(gòu)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第64頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月②黃嘌呤類生物堿理化性質(zhì)溶解性酸性和堿性黃嘌呤生物堿的紫脲酸銨反應(yīng)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第65頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月溶解性咖啡因在熱水或三氯甲烷中易溶，在水、乙醇或丙酮中略溶，乙醚中極微溶；茶堿在乙醇、三氯甲烷中微溶，水中極微溶，氫氧化鉀或氨溶液中易溶；氨茶堿在水中溶解，乙醚中不溶。②黃嘌呤類生物堿理化性質(zhì)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第66頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月酸性和堿性咖啡因不顯酸性；茶堿7位N-H可解離顯酸性，可與乙二胺成氨-茶堿；黃嘌呤環(huán)上N-9堿性極弱，近中性，游離堿可供藥用②黃嘌呤類生物堿理化性質(zhì)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第67頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月黃嘌呤生物堿的紫脲酸銨反應(yīng)咖啡因和茶堿具有黃嘌呤結(jié)構(gòu)，與鹽酸和氯酸鉀水浴蒸干，遇氨氣生成四甲基紫脲酸銨，顯紫色，加氫氧化鈉紫色消失。②黃嘌呤類生物堿理化性質(zhì)一、生物堿類藥物性質(zhì)與結(jié)構(gòu)分析第68頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（一）生物堿一般鑒別試驗1.熔點測定2.生物堿顯色反應(yīng)3.生物堿沉淀反應(yīng)4.紫外分光光度法5.紅外分光光度法6.薄層色譜法二、生物堿類藥物的鑒別試驗第69頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月固體生物堿類藥物大多具有一定的熔點，某些生物堿藥物采用測定游離生物堿熔點的鑒別方法1.熔點測定（一）生物堿一般鑒別試驗二、生物堿類藥物的鑒別試驗第70頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月磷酸可待因的鑒別取本品約0.2g，加水4ml溶解后，在不斷攪拌下滴加20％氫氧化鈉溶液至出現(xiàn)白色沉淀，用玻璃棒摩擦器壁使沉淀完全，濾過；沉淀用水洗凈，在105℃干燥1小時，測定熔點為154～158℃。二、生物堿類藥物的鑒別試驗第71頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月常用顯色試劑有濃硫酸、濃硝酸、鉬硫酸、礬硫酸、甲醛-硫酸、硫酸鈰銨等顯色反應(yīng)的機制可能是脫水、氧化、縮合等。（一）生物堿一般鑒別試驗2.生物堿顯色反應(yīng)二、生物堿類藥物的鑒別試驗第72頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月中國藥典（2010年版）中硝酸士的寧鑒別取硝酸士的寧0.5mg，置蒸發(fā)皿中，加硫酸1滴溶解后，加重鉻酸鉀的結(jié)晶一小粒，周圍即顯紫色二、生物堿類藥物的鑒別試驗第73頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月常見生物堿的顯色鑒別試驗茶堿磷酸可待因鹽酸小檗堿利血平硝酸士的寧硫酸長春新堿硫酸長春堿硫酸奎寧、奎尼丁硝酸毛果蕓香堿表1表2二、生物堿類藥物的鑒別試驗第74頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月常見生物堿的顯色鑒別試驗表1生物堿類藥物鑒別顯色試劑試驗現(xiàn)象茶堿磷酸可待因鹽酸小檗堿利血平硝酸士的寧重氮苯磺酸試液銅-吡啶試液亞硒酸硫酸液5％沒食子酸0.1％鉬酸鈉的硫酸溶液紅色三氯甲烷萃取層綠色即顯綠色，漸變藍色翠綠色即顯黃色，漸變藍色；二、生物堿類藥物的鑒別試驗第75頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月生物堿類藥物鑒別顯色試劑試驗現(xiàn)象硫酸長春新堿硫酸長春堿硫酸奎寧、奎尼丁硝酸毛果蕓香堿重鉻酸鉀1％硫酸鈰銨磷酸液1％硫酸鈰銨磷酸液溴試液、氨試液重鉻酸鉀、過氧化氫紫色即顯藍色，放置后漸變?yōu)樽陷郎达@紫紅色至暗紫紅色翠綠色三氯甲烷萃取層紫色常見生物堿的顯色鑒別試驗表2二、生物堿類藥物的鑒別試驗第76頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月常用的生物堿沉淀劑有：碘化鉍鉀、碘化汞鉀、碘-碘試液、二氯化汞等由于反應(yīng)專屬性不高，中國藥典（2010年版）僅對個別生物堿類藥物的鑒別使用此類反應(yīng)（一）生物堿一般鑒別試驗3.生物堿沉淀反應(yīng)二、生物堿類藥物的鑒別試驗第77頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月生物堿類藥物大都含有芳環(huán)、芳雜環(huán)以及共軛雙鍵結(jié)構(gòu)，具有特征的紫外吸收，可供鑒別。（一）生物堿一般鑒別試驗4.紫外分光光度法中國藥典（2010年版）紫外鑒別方法常見生物堿類藥物的紫外鑒別二、生物堿類藥物的鑒別試驗第78頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月中國藥典（2010年版）紫外鑒別方法（1）對比吸收光譜的特征參數(shù)。（2）對比吸收光譜的一致性。（3）對比吸光度比值的一致性。二、生物堿類藥物的鑒別試驗第79頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月常見生物堿類藥物的紫外鑒別藥物溶劑濃度紫外鑒別秋水仙堿鹽酸偽麻黃堿硫酸嗎啡硫酸長春堿磷酸川芎嗪

水水水0.1mol/LNaOH無水乙醇水10μg/ml0.5mg/ml0.015％0.015％20μg/ml15g/mlA243/A350比值為1.70～2.00251nm、257nm、263nm處有最大吸收285nm處有最大吸收，吸光度為0.65，298nm處有最大吸收，吸光度為1.1215nm、264nm處有最大吸收295nm處有最大吸收二、生物堿類藥物的鑒別試驗第80頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月除硝酸士的寧、磷酸奎尼丁外均采用此法鑒別。（一）生物堿一般鑒別試驗5.紅外分光光度法二、生物堿類藥物的鑒別試驗第81頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（一）生物堿一般鑒別試驗6.薄層色譜法【實例分析】消旋山莨菪堿的鑒別【實例分析】消旋山莨菪堿的鑒別分析①展開劑中添加堿性的氨溶液②顯色方法二、生物堿類藥物的鑒別試驗第82頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（一）生物堿一般鑒別試驗6.薄層色譜法【實例分析】消旋山莨菪堿的鑒別藥典方法取本品與消旋山莨菪堿對照品，分別加甲醇制成每1ml中含1mg的溶液，照薄層色譜法，吸取上述溶液各10μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，用甲醇-丙酮-乙醇-濃氨液（4∶5∶0.6∶0.4）為展開劑，展開后晾干，置紫外燈（254nm）下檢視，供試品溶液所顯主斑點的位置應(yīng)與對照溶液的主斑點相同；二、生物堿類藥物的鑒別試驗第83頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月中和硅膠的弱酸性，防止生物堿在薄層板上吸附太牢，導(dǎo)致嚴重拖尾除氨溶液外，還可使用乙二胺①展開劑中添加堿性的氨溶液二、生物堿類藥物的鑒別試驗第84頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月采用GF254的熒光背景普通硅膠板，可利用生物堿自身的顏色、熒光性質(zhì)以及與生物堿沉淀劑的顯色反應(yīng)顯色②顯色方法二、生物堿類藥物的鑒別試驗第85頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）生物堿特征鑒別試驗1.具有氨基醇結(jié)構(gòu)生物堿的特征反應(yīng)2.托烷生物堿的特征反應(yīng)3.6位含氧喹啉衍生物的特征反應(yīng)4.嗎啡生物堿的特征反應(yīng)5.吲哚生物堿的特征反應(yīng)6.黃嘌呤類生物堿的特征反應(yīng)二、生物堿類藥物的鑒別試驗第86頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）生物堿特征鑒別試驗1.具有氨基醇結(jié)構(gòu)生物堿的特征反應(yīng)雙縮脲反應(yīng)中國藥典（2010年版）鹽酸麻黃堿的鑒別反應(yīng)原理方程式二、生物堿類藥物的鑒別試驗第87頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月反應(yīng)原理Cu2+與仲胺基形成紫堇色配位化合物，溶于乙醚層顯紫紅色，四水配合物溶于水層呈藍色。無水配合物及一水配合物四水配合物乙醚水層二、生物堿類藥物的鑒別試驗第88頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月雙縮脲反應(yīng)方程式二、生物堿類藥物的鑒別試驗第89頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月中國藥典（2010年版）鹽酸麻黃堿的鑒別取鹽酸麻黃堿約10mg，加水1ml溶解后，加硫酸銅試液2滴與20％的氫氧化鈉溶液1ml，即顯藍紫色；加乙醚1ml，振搖后，放置，乙醚層即顯紫紅色，水層變?yōu)樗{色。二、生物堿類藥物的鑒別試驗第90頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月2.托烷生物堿的特征反應(yīng)莨菪酸，與發(fā)煙硝酸和醇制氫氧化鉀發(fā)生特征維他立（Vitali）反應(yīng)。中國藥典（2005年版）對氫溴酸東莨菪堿、消旋山莨菪堿、硫酸阿托品均采用此法鑒別（二）生物堿特征鑒別試驗Vitali反應(yīng)中國藥典附錄III-Vitali反應(yīng)反應(yīng)原理方程式二、生物堿類藥物的鑒別試驗第91頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月Vitali反應(yīng)原理酸性條件下，托烷類生物堿酯鍵水解，生成莨菪酸，莨菪酸為硝酸硝化為三硝基衍生物，在醇制氫氧化鉀堿性條件下，轉(zhuǎn)變?yōu)樽仙孽臀镔|(zhì)。二、生物堿類藥物的鑒別試驗第92頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月Vitali方程式二、生物堿類藥物的鑒別試驗第93頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月中國藥典附錄III-Vitali反應(yīng)取供試品約10mg，加發(fā)煙硝酸5滴，置水浴上蒸干，得黃色的殘渣，放冷，加乙醇2～3滴濕潤，加固體氫氧化鉀一小粒，即顯深紫色。二、生物堿類藥物的鑒別試驗第94頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月奎寧和奎尼丁在酸性溶液中，與溴水（或氯水）及氨水發(fā)生綠奎寧反應(yīng)中國藥典（2010年版）采用此法鑒別上述藥物。（二）生物堿特征鑒別試驗3.6位含氧喹啉衍生物的特征反應(yīng)綠奎寧（Thalleioquin）反應(yīng)中國藥典（2010年版）硫酸奎寧鑒別方程式

二、生物堿類藥物的鑒別試驗第95頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月中國藥典（2010年版）硫酸奎寧鑒別取本品約20mg，加水20ml溶解后，分取溶液5ml，加溴試液3滴與氨試液1ml，即顯翠綠色二、生物堿類藥物的鑒別試驗第96頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月綠奎寧反應(yīng)方程式（翠綠色）二、生物堿類藥物的鑒別試驗第97頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）生物堿特征鑒別試驗4.嗎啡生物堿的特征反應(yīng)（1）Marquis反應(yīng)（2）Frohde反應(yīng)（3）還原反應(yīng)二、生物堿類藥物的鑒別試驗第98頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月嗎啡為含有酚羥基的異喹啉類生物堿，可與甲醛－硫酸反應(yīng)，產(chǎn)物為具有特征紫紅色的醌式化合物。（1）Marquis反應(yīng)方法：取本品約1mg，加甲醛硫酸試液1滴，即顯紫堇色二、生物堿類藥物的鑒別試驗第99頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月嗎啡與鉬硫酸試液發(fā)生顯色反應(yīng)，呈紫色-藍色-棕綠色的漸變。靈敏度為0.05μg。（2）Frohde反應(yīng)方法：取本品約1mg，加鉬硫酸試液0.5ml，即顯紫色，繼變?yōu)樗{色，最后變?yōu)樽鼐G色。二、生物堿類藥物的鑒別試驗第100頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）還原反應(yīng)原理反應(yīng)式方法二、生物堿類藥物的鑒別試驗第101頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月原理嗎啡酚羥基鄰位C2具有弱還原性，鐵氰化鉀試液可將其氧化生成偽嗎啡，自身被還原為亞鐵氰化鉀，再與三氯化鐵反應(yīng)生成普魯士藍（亞鐵氰化鐵）二、生物堿類藥物的鑒別試驗第102頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月反應(yīng)式二、生物堿類藥物的鑒別試驗返回第103頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月方法方法：取本品約1mg，加水1ml溶解后，加稀鐵氰化鉀試液1滴，即顯藍綠色（與可待因區(qū)別）二、生物堿類藥物的鑒別試驗第104頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月利血平吲哚環(huán)上的β-氫原子較活潑，可與香草醛縮合顯玫瑰紅色，與對-二甲氨基苯甲醛縮合顯綠色（二）生物堿特征鑒別試驗5.吲哚生物堿的特征反應(yīng)官能團反應(yīng)二、生物堿類藥物的鑒別試驗第105頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月黃嘌呤生物堿與鹽酸及氯酸鉀加熱后，咪唑環(huán)開環(huán)，遇氨氣即縮合生成四甲基紫脲酸銨，顯紫色（二）生物堿特征鑒別試驗6.黃嘌呤類生物堿的特征反應(yīng)紫脲酸銨反應(yīng)方程式反應(yīng)方法二、生物堿類藥物的鑒別試驗第106頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月紫脲酸銨方程式二、生物堿類藥物的鑒別試驗第107頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月反應(yīng)方法方法：取本品約10mg，加鹽酸1ml與氯酸鉀0.1g，置水浴上蒸干，遺留淺紅色的殘渣，遇氨氣即變?yōu)樽仙?；再加氫氧化鈉試液數(shù)滴，紫色即消失二、生物堿類藥物的鑒別試驗第108頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月【相關(guān)鏈接】無機酸根鑒別試驗藥典附錄III（一般鑒別實驗）如硝酸士的寧應(yīng)顯硝酸鹽的鑒別反應(yīng)鹽酸麻黃堿應(yīng)顯氯化物的鑒別反應(yīng)硫酸阿托品應(yīng)顯硫酸鹽的鑒別反應(yīng)磷酸川芎嗪應(yīng)顯磷酸鹽的鑒別反應(yīng)等二、生物堿類藥物的鑒別試驗第109頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月1.氯化物的鑒別反應(yīng)2.硫酸鹽的鑒別反應(yīng)3.硝酸鹽的鑒別反應(yīng)4.溴化物的鑒別反應(yīng)5.磷酸鹽的鑒別反應(yīng)

無機酸根鑒別試驗藥典附錄III（一般鑒別實驗）二、生物堿類藥物的鑒別試驗第110頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月①取供試品試液，加硝酸使成酸性后，加硝酸銀試液，即生成白色凝乳狀沉淀；分離，沉淀加氨試液即溶解，再加硝酸，沉淀復(fù)生成。如供試品為生物堿或其他有機堿的鹽酸鹽，須先加氨試液使成堿性，將析出的沉淀濾過除去，取濾液進行試驗。②取供試品少量，置試管中，加等量的二氧化錳，混勻，加硫酸濕潤，緩緩加熱，即發(fā)生氯氣，能使?jié)駶櫟牡饣浀矸墼嚰堬@藍色（三）無機酸根鑒別試驗1.氯化物的鑒別反應(yīng)二、生物堿類藥物的鑒別試驗第111頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月①取供試品溶液，滴加氯化鋇試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在鹽酸或硝酸中均不溶解。②取供試品溶液，滴加醋酸鉛試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在醋酸銨試液或氫氧化鈉試液中溶解。③取供試品溶液，加鹽酸，不生成白色沉淀（與硫代硫酸鹽區(qū)別）（三）無機酸根鑒別試驗2.硫酸鹽的鑒別反應(yīng)二、生物堿類藥物的鑒別試驗第112頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月①取供試品溶液，置試管中，加等量的硫酸，小心混合，冷后，沿管壁加硫酸亞鐵試液，使成兩液層，接界面顯棕色。②取供試品溶液，加硫酸與銅絲，加熱，即發(fā)生紅棕色的蒸汽。③取供試品溶液，滴加高錳酸鉀試液，紫色不應(yīng)褪去（與亞硝酸鹽區(qū)別）（三）無機酸根鑒別試驗3.硝酸鹽的鑒別反應(yīng)二、生物堿類藥物的鑒別試驗第113頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月①取供試品溶液，加硝酸銀試液，即生成淡黃色凝乳狀沉淀；分離，沉淀能在氨試液中微溶，但在硝酸中幾乎不溶。②取供試品溶液，滴加氯試液，溴即游離，加三氯甲烷振搖，三氯甲烷層顯黃色或紅棕色（三）無機酸根鑒別試驗4.溴化物的鑒別反應(yīng)二、生物堿類藥物的鑒別試驗第114頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月①取供試品的中性溶液，加硝酸銀試液即生成淺黃色沉淀；分離，沉淀在氨試液或稀硝酸中均易溶解。②取供試品溶液，加氯化銨鎂試液，即生成白色結(jié)晶性沉淀。③取供試品溶液，加鉬酸銨試液與硝酸后，加熱即生成黃色沉淀；分離，沉淀能在氨試液中溶解。（三）無機酸根鑒別試驗5.磷酸鹽的鑒別反應(yīng)

二、生物堿類藥物的鑒別試驗第115頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月雙縮脲反應(yīng)藍紫色鹽酸麻黃堿Vitali反應(yīng)紫色硫酸阿托品硫酸奎寧翠綠色綠奎寧反應(yīng)鹽酸嗎啡Marquis反應(yīng)紫紅色硝酸士的寧硫酸，重鉻酸鉀紫色－二、生物堿類藥物的鑒別試驗第116頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月1.利用旋光性差異檢查硫酸阿托品中的莨菪堿莨菪堿為左旋體，而阿托品無旋光性，要求硫酸阿托品供試品溶液（50mg/ml）的旋光度不得超過－0.40°三、生物堿類藥物的特殊雜質(zhì)檢查第117頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月檢查硫酸阿托品中的其它生物堿（東莨菪堿、山莨菪堿和樟柳堿等）堿性較阿托品弱，鹽酸鹽可為氨試液置換為游離生物堿，不溶于水，鹽酸阿托品不游離，仍溶解于水。取供試品溶液，加氨試液2ml，振搖，不得立即發(fā)生渾濁。2.利用溶解性差異三、生物堿類藥物的特殊雜質(zhì)檢查第118頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月3.利用光學(xué)性質(zhì)差異檢查利血平中的氧化產(chǎn)物。利血平氧化變質(zhì)，產(chǎn)物具有熒光。將供試品置紫外光燈（365nm）下檢視,不得顯明顯的熒光。三、生物堿類藥物的特殊雜質(zhì)檢查第119頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）利用雜質(zhì)和藥物化學(xué)性質(zhì)區(qū)別進行檢查1.中國藥典（2010年版）鹽酸嗎啡中特殊雜質(zhì)檢查2.中國藥典（2010年版）硝酸士的寧中馬錢子堿的檢查三、生物堿類藥物的特殊雜質(zhì)檢查第120頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月1.中國藥典（2005年版）鹽酸嗎啡中特殊雜質(zhì)檢查

阿撲嗎啡罌粟酸三、生物堿類藥物的特殊雜質(zhì)檢查第121頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月阿撲嗎啡利用阿撲嗎啡具有還原性，產(chǎn)物在水溶液中為綠色，乙醚中為寶石紅色，而藥物沒有此性質(zhì)檢查時，規(guī)定乙醚層不得顯紅色，水層不得顯綠色，以此控制阿樸嗎啡限量；三、生物堿類藥物的特殊雜質(zhì)檢查第122頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月罌粟酸利用罌粟酸可與三氯化鐵在微酸性條件下生成紅色的罌粟酸鐵，嗎啡沒有此現(xiàn)象要求在加入2滴三氯化鐵試液后，溶液不得顯紅色。三、生物堿類藥物的特殊雜質(zhì)檢查第123頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）利用雜質(zhì)和藥物色譜學(xué)行為差異進行檢查1.薄層色譜法2.高效液相色譜法3.【實例分析】

三、生物堿類藥物的特殊雜質(zhì)檢查第124頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月1.薄層色譜法檢查“特殊雜質(zhì)”

中國藥典（2010年版）對藥物中“其他生物堿”的檢查①雜質(zhì)對照品法，如氫溴酸山莨菪堿中其它生物堿的檢查。②供試品溶液的自身稀釋對照法，如硫酸奎寧中其它金雞鈉堿的檢查。③雜質(zhì)對照品法與供試品溶液自身稀釋對照法并用，如鹽酸嗎啡中其它生物堿的檢查。三、生物堿類藥物的特殊雜質(zhì)檢查第125頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月高效液相色譜法具有分離效能高、專屬性強、檢測靈敏等特點，其在雜質(zhì)檢查上的應(yīng)用，在近版藥典中有逐漸增加的趨勢，如中國藥典（2010年版）對長春新堿中其他生物堿、磷酸川芎嗪中有關(guān)物質(zhì)的檢查。2.高效液相色譜法檢查特殊雜質(zhì)

三、生物堿類藥物的特殊雜質(zhì)檢查第126頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月3.【實例分析】生物堿中特殊雜質(zhì)色譜法檢查薄層色譜檢查

高效液相色譜法檢查

硫酸奎寧－其它金雞納堿

鹽酸嗎啡－其它生物堿

薄層色譜法討論硫酸長春新堿中有關(guān)物質(zhì)的檢查

磷酸川芎嗪中有關(guān)物質(zhì)檢查

三、生物堿類藥物的特殊雜質(zhì)檢查第127頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月附表-藥典中常見生物堿特殊雜質(zhì)及檢查方法硫酸阿托品氫溴酸東莨菪堿鹽酸偽麻黃堿硫酸奎寧硫酸奎尼丁表1表2表3鹽酸嗎啡硫酸嗎啡磷酸可待因鹽酸小檗堿硝酸士的寧利血平硫酸長春新堿硫酸長春堿咖啡因茶堿氨茶堿硝酸毛果蕓香堿磷酸川芎嗪三、生物堿類藥物的特殊雜質(zhì)檢查第128頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月藥典中常見生物堿特殊雜質(zhì)及檢查方法表1藥物特殊雜質(zhì)（檢查法）硫酸阿托品氫溴酸東莨菪堿鹽酸偽麻黃堿硫酸奎寧硫酸奎尼丁莨菪堿（旋光）、其它生物堿（氨試液的混濁）其他生物堿（氨試液的混濁）、易氧化物（KMnO4）有關(guān)物質(zhì)（HPLC）三氯甲烷-乙醇中不溶物、其它金雞鈉堿（TLC）三氯甲烷-乙醇中不溶物、有關(guān)物質(zhì)（TLC）三、生物堿類藥物的特殊雜質(zhì)檢查第129頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月藥物特殊雜質(zhì)（檢查法）鹽酸嗎啡硫酸嗎啡磷酸可待因鹽酸小檗堿硝酸士的寧利血平阿撲嗎啡、罌粟酸（顯色試驗）、其它生物堿（TLC）其他生物堿（殘渣重量法）嗎啡（比色法）其它生物堿（TLC）、氰化物、有機腈（TLC）馬錢子堿（顯色試驗）氧化產(chǎn)物（熒光）藥典中常見生物堿特殊雜質(zhì)及檢查方法表2三、生物堿類藥物的特殊雜質(zhì)檢查第130頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月藥物特殊雜質(zhì)（檢查法）硫酸長春新堿硫酸長春堿咖啡因茶堿氨茶堿硝酸毛果蕓香堿磷酸川芎嗪有關(guān)物質(zhì)（HPLC）其它生物堿（TLC）有關(guān)物質(zhì)（TLC）有關(guān)物質(zhì)（TLC）有關(guān)物質(zhì)（TLC）其它生物堿（氨試液的混濁）有關(guān)物質(zhì)（HPLC）藥典中常見生物堿特殊雜質(zhì)及檢查方法表3三、生物堿類藥物的特殊雜質(zhì)檢查第131頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月

（一）非水滴定法

（二）提取酸堿滴定法中國藥典(2010年版)常用生物堿藥物含量測定方法一覽表（三）酸性染料比色法（四）紫外分光光度法（五）高效液相色譜法四、生物堿類藥物的含量測定第132頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（一）非水滴定法1.高氯酸法基本原理2.一般方法3.滴定注意事項

【實例分析】

【相關(guān)鏈接】四、生物堿類藥物的含量測定第133頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月1.高氯酸滴定法基本原理高氯酸置換出與生物堿結(jié)合的較弱的酸的反應(yīng)。BH+·A-：表示生物堿鹽類；

HA：表示被置換出的弱酸；四、生物堿類藥物的含量測定第134頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月不同HA在醋酸中的酸性情況如示：

HClO4

＞HBr＞H2SO4

＞HCl＞HSO4－＞HNO3

＞H3PO4及其它弱酸四、生物堿類藥物的含量測定第135頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月2.一般方法除另有規(guī)定外，精密稱取供試品適量[消耗高氯酸滴定液（0.1mol/L）約8ml]，加冰醋酸10～30ml使溶解，加各品種項下規(guī)定的指示液1～2滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定。終點顏色應(yīng)以電位滴定時的突躍點為準，并將滴定結(jié)果用空白試驗校正。四、生物堿類藥物的含量測定第136頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月3.滴定注意事項（1）方法的適用對象（2）不同酸根的影響③硝酸鹽①磷酸鹽及有機酸鹽②氫鹵酸鹽④硫酸鹽（3）滴定終點的指示方法（4）滴定劑的注意事項四、生物堿類藥物的含量測定第137頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（1）方法的適用對象適于Kb<10-8的有機堿、有機酸的堿金屬鹽的含量測定。Kb為10-8～10-10，宜選冰醋酸作溶劑；Kb為10-10～10-12時，選用冰醋酸與醋酐的混合溶劑；Kb<10-12，選擇醋酐作溶劑。如咖啡因（Kb＝10-14.15）的含量測定選擇醋酸和醋酐的混合溶劑。四、生物堿類藥物的含量測定第138頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）不同酸根的影響①磷酸鹽及有機酸鹽在冰醋酸中酸性極弱，不干擾高氯酸滴定，故可直接滴定

四、生物堿類藥物的含量測定第139頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）不同酸根的影響②氫鹵酸鹽在醋酸中酸性較強，反應(yīng)不能完全藥典規(guī)定生物堿的氫鹵酸鹽不可直接滴定需加入5％醋酸汞冰醋酸試液3～5ml后，使其生成在醋酸溶劑中難解離的鹵化汞，再進行滴定，此時可反應(yīng)完全Hg(Ac)2

＋2BH+·X-→HgX2+2B·HX

四、生物堿類藥物的含量測定第140頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）不同酸根的影響③硝酸鹽可直接滴定硝酸有較強的氧化性，可氧化指示劑結(jié)晶紫硝酸鹽不宜用結(jié)晶紫作指示劑，改用電位法指示終點。電位滴定時用玻璃電極作為指示電極，飽和甘汞電極（玻璃套管內(nèi)裝氯化鉀的飽和無水甲醇溶液）為參比電極四、生物堿類藥物的含量測定第141頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）不同酸根的影響④硫酸鹽

硫酸在醋酸中酸性較弱，是一元酸只能被置換為HSO4－，僅滴定至硫酸氫鹽為止。當生物堿的硫酸鹽分子中具有不同堿性的氮原子時，反應(yīng)的定量關(guān)系需格外注意四、生物堿類藥物的含量測定第142頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（3）滴定終點的指示方法終點判定有電位法和指示劑法二種。硝酸鹽類采用電位法其余生物堿、有機堿性藥物的終點判定多使用指示劑法。常用指示劑為結(jié)晶紫四、生物堿類藥物的含量測定第143頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月結(jié)晶紫終點指示不同的堿及鹽，終點顏色有較大差異。終點顏色呈現(xiàn)的變化為紫、藍、藍綠、綠、黃。一般堿性較強的藥物，終點為藍色，如硫酸阿托品；堿性中等的藥物，為藍綠色或綠色，如硫酸奎寧；堿性較弱的則以黃綠或黃色為終點顏色，如咖啡因四、生物堿類藥物的含量測定第144頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月常見生物堿非水滴定法終點判定藥物終點指示方法終點顏色鹽酸麻黃堿硫酸阿托品氫溴酸東莨菪堿硫酸奎寧硫酸奎尼丁鹽酸嗎啡硫酸嗎啡磷酸可待因咖啡因結(jié)晶紫結(jié)晶紫結(jié)晶紫結(jié)晶紫結(jié)晶紫結(jié)晶紫結(jié)晶紫結(jié)晶紫結(jié)晶紫翠綠色純藍純藍藍綠色綠色綠色綠色綠色黃四、生物堿類藥物的含量測定第145頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（4）滴定劑的注意事項①冰醋酸具有揮發(fā)性，且體積膨脹系數(shù)較大，長期貯存或溫度變化均影響濃度，故高氯酸的醋酸滴定液需根據(jù)溫度變化校正，使用時與標定時的溫度差超過10℃則需重新標定；②冰醋酸和高氯酸中含有微量水分，可干擾突躍，配制高氯酸滴定液時需加入計算量的醋酐；③濃高氯酸與醋酐混合會引起爆炸，配制時應(yīng)將高氯酸用冰醋酸稀釋后，再加醋酐四、生物堿類藥物的含量測定第146頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（一）非水酸堿滴定法

【實例分析】中國藥典（2010）鹽酸麻黃堿原料的含量測定

中國藥典（2010）常見生物堿硫酸鹽的含量測定硫酸阿托品原料的含量測定

硫酸奎寧的含量測定

硫酸奎寧片的含量測定

硫酸奎寧含量測定小結(jié)

四、生物堿類藥物的含量測定第147頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月方法：取本品約0.15g，精密稱定，加冰醋酸10ml，加熱溶解后，加醋酸汞試液4ml與結(jié)晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液顯翠綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正1mol的鹽酸麻黃堿與1mol的高氯酸反應(yīng)，每1ml高氯酸滴定液（0.1mol/L）相當于20.17mg的C10H15NO·HCl。中國藥典鹽酸麻黃堿原料的含量測定四、生物堿類藥物的含量測定第148頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月四、生物堿類藥物的含量測定反應(yīng)式第149頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月含量計算含量（％）＝

四、生物堿類藥物的含量測定V：供試液消耗高氯酸的體積；V0:空白試驗驗消耗的高氯酸的體積；F:高氯酸（0.1mol/L）濃度校正系數(shù)；W：供試品取量。第150頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月硫酸阿托品原料的含量測定方法：取本品約0.5g，精密稱定，加冰醋酸與醋酐各10ml溶解后，加結(jié)晶紫指示液1～2滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液顯純藍色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。硫酸鹽在醋酸中僅滴定至硫酸氫鹽，1mol的硫酸阿托品可與1mol的高氯酸反應(yīng)，每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于67.68mg的(C17H23NO3)2·H2SO4。(C17H23NO3)2·H2SO4

＋HClO4→C17H23NO3H+·ClO4－＋C17H23NO3H+·HSO4－四、生物堿類藥物的含量測定第151頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月硫酸奎寧的含量測定藥典方法方程式分析四、生物堿類藥物的含量測定第152頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月藥典方法取本品約0.2g，精密稱定，加冰醋酸10ml溶解后，加醋酐5ml與結(jié)晶紫指示液l～2滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定至溶液顯藍綠色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正。四、生物堿類藥物的含量測定第153頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月分析硫酸奎寧為2分子喹核堿與1分子硫酸的鹽，高氯酸只能與其中1個喹核氮發(fā)生反應(yīng)，置換出硫酸氫根；奎寧具有的喹啉氮，在醋酸溶劑下，可為高氯酸滴定四、生物堿類藥物的含量測定第154頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月方程式(C20H24N2O2)2·H2SO4

＋3HClO4→(C20H24N2O2·2H+)·2ClO4－＋(C20H24N2O2·2H+)·HSO4－·ClO4－喹啉氮被高氯酸滴定喹核堿硫酸鹽被高氯酸滴定滴定時，1mol的硫酸奎寧可與3mol的高氯酸反應(yīng)。每1ml的高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于24.90mg的C20H24N2O2)2·H2SO4。四、生物堿類藥物的含量測定第155頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月硫酸奎寧片的含量測定藥典方法方程式分析四、生物堿類藥物的含量測定第156頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月藥典方法取本品10片，除去包衣后，精密稱定，研細，精密稱取適量(約相當于硫酸奎寧0.3g)，置分液漏斗中，加氯化鈉0.5g與0.1mol/L氫氧化鈉溶液10ml，混勻，精密加三氯甲烷50ml，振搖10分鐘，靜置，分取三氯甲烷液，用干燥濾紙濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，加醋酐5m1與二甲基黃指示液2滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液顯玫瑰紅色，并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正四、生物堿類藥物的含量測定第157頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月分析硫酸奎寧片需采用堿化及三氯甲烷提取以與賦型劑等干擾成分分離。強堿溶液使其堿化為奎寧游離堿，1分子硫酸奎寧生成2分子奎寧游離堿，喹啉氮和喹核氮此時均可與高氯酸反應(yīng)，1mol的硫酸奎寧可消耗4mol的高氯酸四、生物堿類藥物的含量測定第158頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月方程式(C20H24N2O2)2·H2SO4

＋2NaOH→2C20H24N2O2

＋

Na2SO4＋2H2O2C20H24N2O2

＋4HClO4→2(C20H24N2O2·2H+)·2ClO4－

硫酸奎寧片劑分析的滴定度不同于原料藥，每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相當于19.57mg的(C20H24N2O2)2·H2SO4·2H2O四、生物堿類藥物的含量測定第159頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月硫酸奎寧含量測定小結(jié)硫酸奎寧原料1mol的硫酸奎寧可與3mol的高氯酸反應(yīng)硫酸奎寧片1mol的硫酸奎寧片可與4mol的高氯酸反應(yīng)四、生物堿類藥物的含量測定第160頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月1.非水溶劑的種類（1）酸性溶劑?？娠@著地增強有機弱堿的堿度，最常用的酸性溶劑為冰醋酸。（2）堿性溶劑可顯著地增強有機弱酸相對酸度，最常用的堿性溶劑為二甲基甲酰胺。（3）兩性溶劑兼有酸、堿兩種性能，最常用的溶劑為甲醇。（4）惰性溶劑這一類溶劑沒有酸、堿性，如苯、三氯甲烷四、生物堿類藥物的含量測定返回第161頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）提取酸堿滴定法1.基本原理2.測定方法及討論簡述四、生物堿類藥物的含量測定第162頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月簡述堿性較強的生物堿（pKb6～9）的鹽類，水相即可達到明顯的滴定突躍。經(jīng)堿性試劑堿化、有機溶劑提取后，可采用直接酸堿滴定法測定含量，本方法尤其適于此類藥物制劑的含量測定四、生物堿類藥物的含量測定第163頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）提取酸堿滴定法1.基本原理供試品溶于水或稀酸堿性試劑有機溶劑有機相生物堿游離水洗混存的堿性試劑和水溶性雜質(zhì)游離生物堿有機相無水硫酸鈉和西黃蓍膠脫水濾過游離生物堿有機相酸堿滴定法測定四、生物堿類藥物的含量測定第164頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月可采用的酸堿滴定法形式有機溶劑蒸干后，殘渣用中性乙醇溶解，酸滴定液直接滴定；用過量的酸滴定液溶解，用堿滴定液回滴剩余的酸；不蒸干有機溶劑，加入定量過量的酸滴定液使游離生物堿重新成鹽溶于水相，再用堿滴定液回滴水相四、生物堿類藥物的含量測定第165頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）提取酸堿滴定法2.測定方法及討論【實例分析】磷酸可待因片的含量測定

藥典方法分析（1）常用堿化試劑（2）適宜提取溶劑及用量（3）滴定指示劑四、生物堿類藥物的含量測定第166頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月取本品15片（30mg規(guī)格）或25片（15mg規(guī)格），精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于磷酸可待因15g），置100ml量瓶中，加水適量使成混懸液，加0.25mol/L硫酸溶液20ml，時時振搖約30min，使磷酸可待因溶解，加水稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液50ml，置分液漏斗中，加氨試液使成堿性，用三氯甲烷振搖提取至少4次，第一次25ml，以后每次各15ml，至可待因提盡為止，每次得到的三氯甲烷液均用同一份水10ml洗滌，洗液用三氯甲烷5ml振搖提取，合并三氯甲烷液，置水浴上蒸干，精密加硫酸滴定液（0.01mol/L）25ml，加熱使溶解，放冷，加甲基紅指示液2滴，用氫氧化鈉滴定液（0.02mol/L）滴定，每1ml硫酸滴定液（0.01mol/L）相當于8.488mg的磷酸可待因。磷酸可待因片的含量測定四、生物堿類藥物的含量測定第167頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月提取酸堿滴定法分析氨水是常用的使生物堿鹽堿化為游離生物堿的試劑強度適中，pKb為4.76，不會造成生物堿分解或乳化現(xiàn)象，易于揮發(fā)除去，對酸滴定液的滴定不產(chǎn)生干擾（1）常用堿化試劑四、生物堿類藥物的含量測定第168頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月提取酸堿滴定法分析藥典常用的游離生物堿提取溶劑為三氯甲烷，優(yōu)點：溶解度大，共存物質(zhì)不溶，不與水混溶，易于揮發(fā)缺點：加熱可分解為鹽酸，不宜完全蒸干，不適于強堿性生物堿的提取和鹽酸小檗堿等可與三氯甲烷發(fā)生化學(xué)反應(yīng)的藥物。分4次，體積一般為生物堿溶液體積的一半（首次）或1/4。（2）適宜提取溶劑及用量四、生物堿類藥物的含量測定第169頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月提取酸堿滴定法分析甲基紅、溴酚藍、溴甲酚紫等在酸性區(qū)變色的指示劑（3）滴定指示劑四、生物堿類藥物的含量測定第170頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）酸性染料比色法1.基本原理

2.測定影響因素

反應(yīng)過程流程圖

含量測定方法四、生物堿類藥物的含量測定第171頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月酸性染料是指一些具有酸性基團的酸堿指示劑，如溴百里酚藍、溴甲酚紫、溴酚藍、溴甲酚綠等，可在適宜條件下解離為陰離子（In－）。生物堿類及堿性藥物可在適宜介質(zhì)中與H＋結(jié)合，生成陽離子（BH＋）。兩種離子可定量結(jié)合，生成易溶于有機溶劑，難溶于水的，有顏色的離子對（BH＋·In－）。用有機溶劑定量提取該有色離子對，測定該有色溶液的吸光度，計算藥物的含量（三）酸性染料比色法1.基本原理

四、生物堿類藥物的含量測定第172頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月反應(yīng)過程四、生物堿類藥物的含量測定第173頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月含量測定方法使用有機溶劑定量提取該有色離子對，并在一定波長處測定該有色溶液的吸光度，計算藥物的含量。分離出有機提取相，用堿化試劑堿化有機相，將離子對中的酸性染料釋放出來，用水提取In－，測定水中染料的吸光度，間接計算出堿性藥物的含量。硫酸阿托品、氫溴酸東莨菪堿的片劑和注射劑的含量測定均采用此法。四、生物堿類藥物的含量測定第174頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）酸性染料比色法2.影響因素

（1）試驗最佳pH值選擇

（2）適宜的酸性染料及濃度的選擇

（3）提取溶劑的選擇

（4）水分的干擾及排除【實例分析】硫酸阿托品注射劑的含量測定四、生物堿類藥物的含量測定第175頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）酸性染料比色法（1）試驗最佳pH值選擇最佳pH值應(yīng)當能夠使有機堿性藥物全部以BH＋存在，而溶液中產(chǎn)生的In－足夠與其定量結(jié)合。此值可通過藥物和染料的pK值及二者在有機相及水相的分配系數(shù)制定。中國藥典多采用鄰苯二甲酸氫鉀緩沖液四、生物堿類藥物的含量測定第176頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）酸性染料比色法

（2）適宜的酸性染料及濃度的選擇生成的離子對在有機相中的溶解度足夠大，有色染料本身在有機相中的溶解度足夠小，離子對在所測定波長處有較大的吸收系數(shù)。常用的酸性染料有溴麝香草酚藍（BTB）、溴酚藍（BPB）、溴甲酚紫（BCP）、溴甲酚綠（BCG）和甲基橙。其濃度應(yīng)保證足夠量，適當增加濃度，可提高測定的靈敏度。四、生物堿類藥物的含量測定第177頁，課件共194頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）酸性染料比色法（3）提取溶劑的選擇常用的溶劑有三氯甲烷、二氯甲烷、苯、甲苯、四氯化碳等。三氯甲烷因提取效率高、選擇性好，水中溶解度小，可形成氫鍵，最為常用

四、生物堿類藥物的含量測定第178頁，課件共194頁，創(chuàng)作于202