生物利用度和生物等效性培訓(xùn)課件

生物利用度和生物等效性生物利用度生物利用度(bioavailability,BA)是指藥物吸收進(jìn)入大循環(huán)的速度與程度。生物利用度可分絕對(duì)生物利用度與相對(duì)生物利用度。絕對(duì)生物利用度是以靜脈注射制劑為參比標(biāo)準(zhǔn),通常用于原料藥及新劑型的研究相對(duì)生物利用度則是劑型之間或同種劑型不同制劑之間的比較研究,一般是以吸收最好的劑型或制劑為參比標(biāo)準(zhǔn)。2生物利用度和生物等效性意義它是藥物制劑質(zhì)量的重要指標(biāo),是新藥開發(fā)與研究的基本內(nèi)容藥典及部頒標(biāo)準(zhǔn)收載的藥物,改變劑型而不改變給藥途徑,測(cè)定生物利用度有更重要的意義,可以免作臨床驗(yàn)證。有些藥物臨床指標(biāo)不夠明確而生物利用度的測(cè)定更顯重要。3生物利用度和生物等效性AUCTmaxCmax藥物血藥濃度-時(shí)間曲線下的面積AUC與藥物吸收總量成正比,因此它代表藥物吸收的程度。達(dá)峰時(shí)Tmax表示吸收的速度。而峰濃度Cmax是與治療效果及毒性水平有關(guān)的參數(shù),也與藥物吸收數(shù)量有關(guān)。Cmax太大,超過最小毒性濃度,則能導(dǎo)致中毒。若Cmax達(dá)不到有效濃度,則無治療效果4生物利用度和生物等效性5生物利用度和生物等效性生物等效性.在相同實(shí)驗(yàn)條件下,給予相同劑量的藥劑等效制劑,它們吸收的速度與程度沒有明顯差別的產(chǎn)品叫生物等效產(chǎn)品。當(dāng)吸收速度的差別沒有臨床上的意義時(shí),某些藥物制劑其吸收程度相同而速度不同,也可認(rèn)為生物等效。6生物利用度和生物等效性藥劑等效性藥劑等效性是指同一藥物相同劑量制成同一劑型,但非活性成分不一定相同,在含量、純度、含量均勻度、崩解時(shí)間、溶出速率符合同一規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)的制劑。7生物利用度和生物等效性生物等效性與藥劑等效性不同二者的主要區(qū)別藥劑等效性沒有反映藥物制劑在體內(nèi)的情況生物利用度或生物等效性的研究,反映了藥物制劑的生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn),對(duì)臨床療效提供直接的證明8生物利用度和生物等效性目前實(shí)際要求進(jìn)行生物利用度的藥物主要有(1)新開發(fā)的藥物產(chǎn)品,特別是口服制劑。(2)改變劑型的產(chǎn)品(3)改變處方與工藝的產(chǎn)品(仿制產(chǎn)品)。9生物利用度和生物等效性以下幾類藥物,進(jìn)行生物利用度研究更有必要1.預(yù)防與治療嚴(yán)重疾病的藥物2.治療指數(shù)窄的藥物3.水溶性低的藥物4.溶解速度慢的藥物5.有胃腸道中生物轉(zhuǎn)化或在胃腸中不穩(wěn)定的藥物6.有特殊理化性質(zhì)的藥物7.賦形劑比例高的產(chǎn)品10生物利用度和生物等效性預(yù)防與治療嚴(yán)重疾病的藥物這類藥物的質(zhì)量對(duì)治療效果影響較大,生物利用度上的差別,有時(shí)會(huì)帶來嚴(yán)重的后果。11生物利用度和生物等效性治療指數(shù)窄的藥物治療指數(shù)是毒性濃度與有效濃度的比值治療指數(shù)窄的藥物制劑如苯妥英鈉，若生物利用度不一致,過高可能引起中毒,過低可能達(dá)不到治療濃度12生物利用度和生物等效性水溶性低的藥物例如水溶解度低于5mg/ml的,此類藥物溶解少,如果劑型設(shè)計(jì)不當(dāng)或制劑處方設(shè)計(jì)不好,均能影響生物利用度。13生物利用度和生物等效性溶解速度慢的藥物溶解速度慢的藥物,用法定方法在30min內(nèi)溶解少于50%的藥物。也就是在整個(gè)吸收過程中,溶解速度是限速步驟,藥物劑型因素對(duì)這類藥物制劑生物利用度有顯著的影響14生物利用度和生物等效性有胃腸道中生物轉(zhuǎn)化或在胃腸中不穩(wěn)定的藥物。此類制劑若設(shè)計(jì)不好，常造成生物利用度低通常需包衣或制成特殊劑型15生物利用度和生物等效性有特殊理化性質(zhì)的藥物如多晶型藥物,溶劑化物、粒度影響吸收的藥物16生物利用度和生物等效性賦形劑比例高的產(chǎn)品如賦形劑與活性成分之比為5:1的情況。因?yàn)橘x形劑多,有時(shí)對(duì)主藥會(huì)產(chǎn)生一定的影響17生物利用度和生物等效性免做生物等效性試驗(yàn)的藥物有些國(guó)家市售非處方藥物:其中包括維生素類的保健用品;經(jīng)有關(guān)主管部門批準(zhǔn)免作臨床試驗(yàn)的新的非處方復(fù)方制劑;長(zhǎng)期使用后安全系數(shù)大的處方藥物轉(zhuǎn)變?yōu)榉翘幏剿幬?8生物利用度和生物等效性評(píng)價(jià)(測(cè)定)生物利用度的方法.血藥濃度法尿藥濃度數(shù)據(jù)法19生物利用度和生物等效性絕對(duì)生物利用度20生物利用度和生物等效性相對(duì)生物利用度21生物利用度和生物等效性梯形法22生物利用度和生物等效性積分法23生物利用度和生物等效性尿藥濃度數(shù)據(jù)法（7個(gè)半衰期）24生物利用度和生物等效性生物利用度(生物等效性)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)研究對(duì)象試驗(yàn)制劑與標(biāo)準(zhǔn)參比制劑分析方法的指標(biāo)與要求單劑量給藥計(jì)劃單劑量試驗(yàn)結(jié)果處理生物利用度的計(jì)算多次給藥計(jì)劃結(jié)果處理結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析25生物利用度和生物等效性研究對(duì)象一般在人體內(nèi)進(jìn)行。應(yīng)選擇正常、健康的自愿受試者,受試者應(yīng)在各種條件一致的情況下進(jìn)行。(個(gè)別毒性大的藥物如抗癌藥,可以采用動(dòng)物)受試者選擇條件:年齡一般18~40歲,男性,體重為標(biāo)準(zhǔn)體重,受試者應(yīng)經(jīng)過肝、腎功能及心電圖等項(xiàng)檢查,試驗(yàn)前停用一切藥物,試驗(yàn)期間,禁忌煙酒。受試者人數(shù),可考慮12例。國(guó)外一般用24例。新藥研究到底選用多少例,應(yīng)根據(jù)衛(wèi)生行政部門頒布的指導(dǎo)原則的規(guī)定確定,不得隨意制訂。26生物利用度和生物等效性試驗(yàn)制劑與標(biāo)準(zhǔn)參比制劑試驗(yàn)制劑應(yīng)是中試以上規(guī)模生產(chǎn)出來的,國(guó)外規(guī)定為大生產(chǎn)批量的10%或10萬片以上的規(guī)模。絕對(duì)生物利用度研究,需選擇靜脈注射劑作為標(biāo)準(zhǔn)參比制劑。相對(duì)生物利用度或生物等效性的研究,可選用已批準(zhǔn)上市的、質(zhì)量?jī)?yōu)良的同類劑型或相關(guān)劑型產(chǎn)品為參比制劑。應(yīng)該說明,上述已批準(zhǔn)上市系指國(guó)內(nèi)經(jīng)批準(zhǔn)上市與國(guó)外產(chǎn)品經(jīng)我國(guó)衛(wèi)生部門批準(zhǔn)在我國(guó)上市的產(chǎn)品27生物利用度和生物等效性分析方法的指標(biāo)與要求

測(cè)定方法要求專屬性強(qiáng)、準(zhǔn)確性高、精密、靈敏的分析方法。要求絕對(duì)回收率不低于70%,日內(nèi)、日間相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD%)小于10%,濃度很低(如ng水平),也可小于15%或20%并提供分析方法的最低檢測(cè)濃度。28生物利用度和生物等效性單劑量給藥計(jì)劃

如試驗(yàn)制劑與參比制劑兩種進(jìn)行比較則采用雙處理、兩周期隨機(jī)交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì)兩周期間稱洗凈期,一般相當(dāng)藥物10個(gè)半衰期,通常一周

給藥劑量一般應(yīng)與該制劑臨床治療劑量一致,且被試驗(yàn)制劑與標(biāo)準(zhǔn)制劑總劑量應(yīng)相等。如非臨床治療劑量,應(yīng)提供劑量設(shè)置的足夠依據(jù)。若劑量不等應(yīng)說明原因?qū)Ψ蔷€性動(dòng)力學(xué)的藥物要用兩個(gè)不同劑量進(jìn)行試驗(yàn)29生物利用度和生物等效性具體方案受試者禁食10h后,早晨空腹時(shí)以200ml水將藥吞服,服藥后4h時(shí)統(tǒng)一食譜的標(biāo)準(zhǔn)餐。整個(gè)采樣時(shí)間至少3~5個(gè)半衰期。如果藥物半衰期未知,采樣需持續(xù)到血藥濃度為峰濃度的1/10~1/20。30生物利用度和生物等效性采樣安排:根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行,一個(gè)完整的口服血藥濃度一時(shí)間曲線,應(yīng)包括吸收相、平衡相與消除相。服藥前采樣一次,吸收相與平衡相各采樣3次,消除相采樣4~8次,總數(shù)11~15次。對(duì)個(gè)別藥物,若采樣次數(shù)較少,應(yīng)說明理由31生物利用度和生物等效性單劑量試驗(yàn)結(jié)果處理列出試驗(yàn)制劑與標(biāo)準(zhǔn)參比制劑每一個(gè)受試的血藥濃度與時(shí)間的原始數(shù)據(jù),同時(shí)計(jì)算平均值與標(biāo)準(zhǔn)差,列表并作圖計(jì)算每受試者生物利用度或生物等效性有關(guān)參數(shù),并求出平均值與標(biāo)準(zhǔn)差,列表32生物利用度和生物等效性AUCo-t用梯形法計(jì)算。T1/2=0.693/K。Cmax、Tmax通過實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)直接求出,或用拋物線法求得。33生物利用度和生物等效性生物利用度的計(jì)算絕對(duì)生物利用度與相對(duì)生物利用度：用藥時(shí)曲線下面積的數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算。34生物利用度和生物等效性多次給藥計(jì)劃(多劑量給藥計(jì)劃緩釋、控釋制劑除進(jìn)行單劑量試驗(yàn)外,還要求進(jìn)行多次給藥試驗(yàn)多次給藥同樣采用交叉試驗(yàn)設(shè)計(jì),洗凈期一周,受試者選擇、人數(shù)、制劑、分析方法等研究條件與單劑量法相同,緩釋、控釋制劑按設(shè)計(jì)要求給藥(如每天一次或二次),若參比制劑為普通速釋制劑,則按臨床常規(guī)方法給藥(如每天二次或三次)；35生物利用度和生物等效性具體方案連服一定時(shí)間，不少于待測(cè)藥物7個(gè)半衰期后,開始測(cè)定谷濃度,至少測(cè)三次,以確證達(dá)到穩(wěn)態(tài)。達(dá)穩(wěn)態(tài)后至少要測(cè)定一個(gè)劑量間隔的血藥濃度-時(shí)間曲線,特別要注意測(cè)定給藥前(0時(shí)間)與劑量間隔末(τ時(shí)間)的血藥濃度,其他采樣時(shí)間可參考單劑量實(shí)驗(yàn)安排,以便求得生物利用度

最好能測(cè)定達(dá)穩(wěn)態(tài)后全天服藥的血藥濃度-時(shí)間曲線,特別對(duì)那些在一天內(nèi)吸收與處置容易發(fā)生節(jié)律變化的藥物。36生物利用度和生物等效性多劑量試驗(yàn)的結(jié)果處理實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)整理與單劑量試驗(yàn)相同。然后計(jì)算每一個(gè)受試者生物利用度或生物等效性有關(guān)參數(shù),并求出平均值與標(biāo)準(zhǔn)差,列表。37生物利用度和生物等效性平均穩(wěn)態(tài)血藥濃度38生物利用度和生物等效性結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析試驗(yàn)結(jié)果應(yīng)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,并作出判斷。相對(duì)生物利用度值差異在土20％時(shí),一般認(rèn)為可以被接受。生物等效性標(biāo)準(zhǔn)是試驗(yàn)制劑生物利用度的參數(shù)AUC平均值的90%可信限,應(yīng)落在標(biāo)準(zhǔn)參比制劑的80％-125%置信區(qū)間之間。Cmax則在70%-145％之間。39生物利用度和生物等效性生物等效性統(tǒng)計(jì)分析統(tǒng)計(jì)分析宜采用方差分析、雙單側(cè)檢驗(yàn)、置信區(qū)間、內(nèi)葉斯分析等由于AUC,因不呈正態(tài)分布,應(yīng)先將其進(jìn)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換,才可進(jìn)行方差分析。40生物利用度和生物等效性方差分析方差分析方差分析是檢驗(yàn)差異的傳統(tǒng)方法,且為其它方法的基礎(chǔ)。方差分析的統(tǒng)計(jì)假設(shè)是:①樣品的隨機(jī)化;②方差齊性;③統(tǒng)計(jì)模型的可加性;④殘差的獨(dú)立性和正態(tài)性。

41生物利用度和生物等效性在生物等效性評(píng)價(jià)中方差分析的基礎(chǔ)是①受試者的選擇與分配應(yīng)是隨機(jī)的。②試驗(yàn)組與參比組的誤差來源和影響因素應(yīng)當(dāng)相等或至少相當(dāng)。③誤差的作用具有可加性,如受試者、周期間、藥物間的作用應(yīng)該具可加性,且上述作用之間無交互影響。④實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)應(yīng)是正態(tài)分布。42生物利用度和生物等效性若滿足不了上述條件需采用其它措施如數(shù)據(jù)的對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換以符合上述條件。許多生物學(xué)資料是非正態(tài)分布,接近于對(duì)數(shù)正態(tài)分布。由血藥濃度數(shù)據(jù)計(jì)算出的AUC和Cmax趨于偏態(tài)分布,它們的變異隨平均值增大而增大,對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后可改善這種情況,使其變異與平均值無關(guān)

43生物利用度和生物等效性方差分析用來檢驗(yàn)試驗(yàn)組與參比組組內(nèi)與組間差異,評(píng)價(jià)受試者、試驗(yàn)周期、制劑間的變異和其它試驗(yàn)設(shè)計(jì)的變異。一般差異的顯著性水平定為0.05。方差分析是顯著性檢驗(yàn),不是等效性檢驗(yàn)。44生物利用度和生物等效性雙單側(cè)檢驗(yàn)(twoone-sidedtest)雙單側(cè)檢驗(yàn)用于可信限檢驗(yàn),確定試驗(yàn)制劑與參比制劑生物利用度參數(shù)平均值的差異是否在允許范圍內(nèi)。45生物利用度和生物等效性雙單側(cè)檢驗(yàn)的假設(shè)為

分別為試驗(yàn)制劑與參比制劑AUC或Cmax的對(duì)數(shù)均值:r1為生物等效的低側(cè)界限,r2為高側(cè)界限;如檢驗(yàn)參數(shù)為AUC,則r1=0.8,r2=1.25。46生物利用度和生物等效性檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)量式中S為樣本誤差均方的平方根,由方差分析結(jié)果得到,n為樣本人數(shù),t1和t2均服從自由度υ的t分布(υ均誤差均方自由度),臨界值為t1-a它可以查t單側(cè)分位數(shù)表得到。當(dāng)t1>t1-a,t2>t1-a同時(shí)成立,則拒絕Ho,接受Hl,即認(rèn)為兩制劑生物等效。47生物利用度和生物等效性置信區(qū)間置信區(qū)間分析生物等效性分析中常用90%的置信區(qū)間分析即為試驗(yàn)制劑的生物利用度有90％的可能性在此范圍之間。48生物利用度和生物等效性公式49生物利用度和生物等效性體內(nèi)外相關(guān)性研究一旦這種關(guān)系建立后,就可能用體外試驗(yàn)代替體內(nèi)試驗(yàn),即用體外溶出或釋放試驗(yàn)結(jié)果作為制劑產(chǎn)品體內(nèi)生物利用度特性的指示。同時(shí),也可用于篩選處方,保證制劑產(chǎn)品體內(nèi)外性能的一致性

50生物利用度和生物等效性體內(nèi)外相關(guān)性有三種情況整個(gè)體外溶出、釋放時(shí)間過程和整個(gè)體內(nèi)時(shí)間過程之間存在相關(guān)關(guān)系體外溶出時(shí)間過程和體內(nèi)時(shí)間過程的參數(shù)之間存在相關(guān)關(guān)系。單點(diǎn)相關(guān)

51生物利用度和生物等效性整個(gè)體外溶出、釋放時(shí)間過程和整個(gè)體內(nèi)時(shí)間過程之間存在相關(guān)關(guān)系

具有這種相關(guān)關(guān)系·其體外溶出曲線，和體內(nèi)整個(gè)吸收曲線存在相關(guān)關(guān)系,這是最高水平的相關(guān)系。體內(nèi)吸收曲線可通過Wagner-Nelson法或Loo-Reegelman法求得。52生物利用度和生物等效性53生物利用度和生物等效性體外溶出時(shí)間過程和體內(nèi)時(shí)間過程的參數(shù)之間存在相關(guān)關(guān)系。這一相關(guān)的方法主要是利用統(tǒng)計(jì)矩分析原理,可以將體外平均溶出時(shí)間和體內(nèi)平均滯留時(shí)間或體內(nèi)平均溶出時(shí)間進(jìn)行比較。如:a：體外平均溶出時(shí)間對(duì)體內(nèi)平均溶出時(shí)間B：體外平均溶出時(shí)間對(duì)體內(nèi)平均滯留時(shí)間C：體外溶出速度常數(shù)對(duì)體內(nèi)吸收速度常數(shù)54生物利用度和生物等效性為單點(diǎn)相關(guān)關(guān)系某一溶出時(shí)間點(diǎn),如T50%、T90%,和某一藥動(dòng)學(xué)參數(shù)如AUC、Cmax或tmax存在相關(guān)關(guān)系。可有以下三種情況（1）某一特定時(shí)間點(diǎn)體外溶出量和體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)之間相關(guān)性。(2)體外溶出某一百分?jǐn)?shù)所需時(shí)間與體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)之間有相關(guān)性。(3〉體外溶出參數(shù)與體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)之間有相關(guān)性55生物利用度和生物等效性某一特定時(shí)間點(diǎn)體外溶出量和體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)之間相關(guān)性如a:時(shí)間t時(shí)的溶出量對(duì)AUCB:時(shí)間t時(shí)的溶出量對(duì)CmaxC:時(shí)間t時(shí)的溶出量對(duì)平均滯留時(shí)間MRT56生物利用度和生物等效性體外溶出某一百分?jǐn)?shù)所需時(shí)間與體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)之間有相關(guān)性。a:Tx%對(duì)AUCb:Tx%又才Cmaxc:Tx%對(duì)MRT57生物利用度和生物等效性體外溶出參數(shù)與體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)之間有相關(guān)性

a:溶出速度常數(shù)kd或K。對(duì)Cmax或AUCB:MDT體外對(duì)Cmax或AUC58生物利用度和生物等效性影響生物利用度的因素劑型的影響藥物在胃腸道內(nèi)的代謝分解肝臟首過作用受試者本身變易的影響59生物利用度和生物等效性劑型的影響同種藥物不同劑型,生物利用度往往不同。同種劑型,由于處工藝不同,有時(shí)生物利用度也不同產(chǎn)生這種現(xiàn)象的原因,主要?jiǎng)┬偷男再|(zhì)與處方組成影響藥物的吸收。這個(gè)問題是當(dāng)前某些產(chǎn)品質(zhì)量存在的主要問題,應(yīng)通過改進(jìn)劑型設(shè)計(jì)和制劑處方加以解決。60生物利用度和生物等效性藥物在胃腸道內(nèi)的代謝分解某些藥物在胃腸道內(nèi)停留時(shí)間較長(zhǎng),易受胃腸內(nèi)微生物或酶的作用而發(fā)生代謝分解,使生物利用度降低。61生物利用度和生物等效性肝臟首過作用心得安、利多卡因等藥物均有一定程度的肝臟首過作用首過作用的程度,可以用藥物口服或靜注后得到的曲線下的面積來預(yù)測(cè)。62生物利用度和生物等效性受試者本身變易的影響測(cè)求生物利用度,應(yīng)進(jìn)行交叉試驗(yàn),以消除受試者之間藥物清除率(KV)的變異。但是有時(shí)這些研究仍受到受試者本身變異的影響,也就是同一受試者對(duì)同次數(shù)所給藥物消除作用不完全相同,藥物消除變異越大,F或Fr估算的標(biāo)準(zhǔn)差也越大。為了減少個(gè)體自身差異性的影響,一般假設(shè)分布容積不變,而校正消除速度常數(shù)或半期的差別。這就是半衰期校正法,

63生物利用度和生物等效性研究目的及內(nèi)容臨床前進(jìn)行藥物動(dòng)力學(xué)研究,目的在于了解新藥在動(dòng)物體內(nèi)動(dòng)態(tài)變化的規(guī)律及特點(diǎn),給臨床合理用藥提供參考;其內(nèi)容包括藥物的吸收、分布、排泄、蛋白結(jié)合等。根據(jù)數(shù)學(xué)模型,求算重要的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)64生物利用度和生物等效性藥物在生物樣品中的分離與測(cè)定建立一個(gè)專屬性強(qiáng)、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好、靈敏的測(cè)定方法(一)專屬性(二)重現(xiàn)性.(三)靈敏度.(四)標(biāo)準(zhǔn)曲線及回收率(五)分離及測(cè)定65生物利用度和生物等效性專屬性

必須證明所測(cè)藥物為原形藥或其代謝產(chǎn)物。66生物利用度和生物等效性重現(xiàn)性用RSD%表示藥物加入生物樣品中反復(fù)測(cè)定的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差,在實(shí)際所用標(biāo)準(zhǔn)曲線(至少四個(gè)濃度)范圍內(nèi),日內(nèi)變異系數(shù)爭(zhēng)取達(dá)到5%以內(nèi),但不能越過10%或20%(ng水平)。.67生物利用度和生物等效性靈敏度一般以ng(或ug/ml)生物樣品表示。要求能測(cè)出3~5個(gè)半衰期后的血藥濃度或者能檢測(cè)出Cmax的1/10濃度。68生物利用度和生物等效性標(biāo)準(zhǔn)曲線及回收率1.要指明藥物的化學(xué)純度。2.要制備藥物在血、尿、糞、膽汁及組織勻漿等中的標(biāo)準(zhǔn)曲線,每條標(biāo)準(zhǔn)曲線在應(yīng)用濃度范圍內(nèi),最少包含四個(gè)藥物濃度;并指出其相關(guān)系數(shù)。3、要注意不同組織的空白干擾及回收率可能不同，絕對(duì)回收率低于70％。69生物利用度和生物等效性分離及測(cè)定1.根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件,首選先進(jìn)的HPLC、GC等分離方法,以及紫外、熒光等測(cè)定方法2.用放射性核素標(biāo)記藥物,在用前要進(jìn)行純度檢查,放化純度要〉95%。定位標(biāo)記要指明標(biāo)記位置。盡量不用以曝射制備的非定位3H標(biāo)記物。3.放射免疫法和酶標(biāo)免疫法具有一定特異性,靈敏度高,但原藥與其代謝產(chǎn)物或內(nèi)源性物質(zhì)常有交叉反應(yīng),需提供證據(jù),說明其特異性。4.生物檢定法常能反映藥效學(xué)本質(zhì),一般特異性較差,最好用特異性高的方法予以對(duì)比、證明,否則要加以說明。70生物利用度和生物等效性動(dòng)物選擇與注意事項(xiàng)必須采用成年、健康動(dòng)物。常用動(dòng)物為大鼠、小鼠、兔、豚鼠,狗等。首選動(dòng)物與性別盡量與藥效學(xué)或毒理學(xué)研究所用動(dòng)物一致。盡量在清醒狀態(tài)下進(jìn)行。動(dòng)物進(jìn)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)飼養(yǎng)3~5d再開始實(shí)驗(yàn)。給藥途徑要選擇擬在臨床上用的途徑(如有特殊情況,要加以說明71生物利用度和生物等效性藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)測(cè)定血藥濃度-時(shí)間曲線(藥-時(shí)曲線)藥-時(shí)曲線與數(shù)據(jù)處理實(shí)驗(yàn)報(bào)告材料72生物利用度和生物等效性血藥濃度-時(shí)間曲線1.給藥后取血時(shí)間應(yīng)注意到下列三個(gè)相的時(shí)間點(diǎn)分布,先做預(yù)試,摸索各自范圍,靜脈注射:分布相、平衡相和消除相。血管外給藥,吸收相、平衡相和消除相。實(shí)驗(yàn)觀察期不小于3個(gè)半衰期2.口服給藥,一般在給藥前禁食12h。研究口服給藥,不宜選用兔和反芻動(dòng)物如羊等。3.最好從同一動(dòng)物多次采樣,盡量避免用多只動(dòng)物合并樣品。4、劑量的選擇：在有效安全范圍內(nèi)，要選擇三種劑量73生物利用度和生物等效性藥時(shí)曲線及數(shù)據(jù)處理1.要提出描述血-藥時(shí)程的數(shù)學(xué)表達(dá)式,并確定其參數(shù),對(duì)線性房室模型,一般要提供:靜脈注射:T1/2(α)、T1/2(B)、k12、k21、K10、V、Cl、AUC...血管外給藥:Ka、Tl/2、Cl、AUC、V、Cmax、Tmax…非線性過程:常以Michaelis-Menten式表達(dá),要提供Vm及km值。2.在做了靜脈及口服給藥后,可計(jì)算原料藥的絕對(duì)生物利用度。3.如用電子計(jì)算機(jī)處理數(shù)據(jù),應(yīng)指出所用程序名稱。74生物利用度和生物等效性實(shí)驗(yàn)報(bào)告材料1.每只動(dòng)物、每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的原始數(shù)據(jù)、均數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)誤或標(biāo)準(zhǔn)差。2.比較曲線擬合計(jì)算值與觀測(cè)值的符合程度。75生物利用度和生物等效性藥物的分布選用大鼠或小鼠做分布試驗(yàn)較為方便。選擇一個(gè)劑量(一般以治療劑量為宜)后,、至少測(cè)定藥物在心、肝、脾、肺、腎、胃腸道、生殖腺、腦、體脂、骨髓肌等組織的分布。特別注意藥物在靶器官(包括藥效學(xué)與毒理學(xué))的分布。以藥-時(shí)曲線作參考,選2-3個(gè)時(shí)間點(diǎn)分別代表分布相(或吸收相)、平衡相和消除相的藥物分布消除相的組織分布必須包括在內(nèi))。每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的組織,必須有至少5只動(dòng)物的數(shù)據(jù)。76生物利用度和生物等效性藥物的排泄1.尿和糞的藥物排泄試驗(yàn)

2.膽汁排泄:

77生物利用度和生物等效性1、尿和糞的藥物排泄試驗(yàn)要將動(dòng)物放入代謝籠內(nèi),給藥后不同時(shí)間間隔收集尿或糞全部樣品。記錄尿體積,混勻,取一部分樣品,測(cè)定藥物濃度。尿、糞應(yīng)每隔一定時(shí)間收集1次,以測(cè)定藥物經(jīng)此途徑排泄的速度78生物利用度和生物等效性

2、膽汁排泄一般用大鼠在麻醉下作膽管插管引流;待動(dòng)物清醒后,以各種途徑給藥,并以合適的時(shí)間間隔分段收集膽汁,進(jìn)行藥物測(cè)定。79生物利用度和生物等效性藥物與血漿蛋白的結(jié)合研究藥物與血漿蛋白結(jié)合的方法很多,如平衡透析法、超過濾法、分配平衡法、凝膠過濾法、光譜法等其中以平衡透析法最簡(jiǎn)單、經(jīng)濟(jì),但較費(fèi)時(shí),一般約需24h方達(dá)平衡,最好置冷室進(jìn)行,以免藥物或蛋白質(zhì)破壞。其它方法各有優(yōu)缺點(diǎn),根據(jù)所研究藥物的理化性質(zhì)及實(shí)驗(yàn)室條件,均可供選擇使用。80生物利用度和生物等效性血漿蛋白結(jié)合的百分?jǐn)?shù)計(jì)算。如按各種透析法進(jìn)行實(shí)驗(yàn),應(yīng)按下式計(jì)算藥物與血漿蛋白結(jié)合的百分?jǐn)?shù)。結(jié)合百分?jǐn)?shù)={1-（濾出液(自由形)濃度/總濃度）}×100％81生物利用度和生物等效性注意事項(xiàng):(1)藥物與血漿蛋白結(jié)合程度受很多因素影響,如血漿pH、血漿濃度、藥物濃度等。血漿pH應(yīng)固定為7.4,至少選擇三個(gè)血藥濃度(包括有效濃度在內(nèi))進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。(2)必須證明藥物與半透膜本身有無結(jié)合,應(yīng)做對(duì)照予以校正。(3)可被血漿轉(zhuǎn)化的藥物,要加少量酶抑制劑,以終止其轉(zhuǎn)化。82生物利用度和生物等效性總結(jié)通過全面實(shí)驗(yàn)觀察,要對(duì)該藥在動(dòng)物體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)做綜合性論述。包括吸收、分布、消除的特點(diǎn),自尿、糞、膽汁的排泄情況,有無蛋白結(jié)合,結(jié)合百分?jǐn)?shù),有無積蓄,在什么器官或組織積蓄,積蓄程度等。如首次發(fā)現(xiàn)的新藥,應(yīng)對(duì)藥物的主要去向做探討,以免積蓄中毒。83生物利用度和生物等效性治療藥物監(jiān)測(cè)在藥物動(dòng)力學(xué)中的應(yīng)用治療藥物監(jiān)測(cè)（IDM)是近年來臨床藥學(xué)發(fā)展較快的一個(gè)新領(lǐng)域也是藥物動(dòng)力學(xué)應(yīng)用的一個(gè)方面。它是以藥物動(dòng)力學(xué)與藥效學(xué)基礎(chǔ)理論為指導(dǎo),借助先進(jìn)分析技術(shù)與電子計(jì)算機(jī)手段檢測(cè)血藥濃度,探討藥物在體內(nèi)的過程,使給藥方案?jìng)€(gè)體化,84生物利用度和生物等效性主要工作協(xié)助醫(yī)師選擇藥物設(shè)計(jì)給藥方案評(píng)價(jià)患者對(duì)藥物治療的反應(yīng)確定是否需要進(jìn)行血藥濃度測(cè)定測(cè)定血液或其它體液中的藥物濃度對(duì)血藥濃度數(shù)據(jù)進(jìn)行藥物動(dòng)力學(xué)評(píng)價(jià)必要時(shí)重新調(diào)整給藥方案繼續(xù)血藥濃度監(jiān)測(cè)當(dāng)患者由于其它因素導(dǎo)致治療效果較差時(shí)，能夠推薦特殊處理方法85生物利用度和生物等效性下列情況需進(jìn)行治療藥物監(jiān)測(cè)1、給予同一劑量后個(gè)體差異大的藥物2、具非線性動(dòng)力學(xué)特征的藥物3、治療指數(shù)小、毒性反應(yīng)強(qiáng)的藥物4、毒性反應(yīng)不易識(shí)別，用量不當(dāng)或用量不足的臨床反應(yīng)難以識(shí)別的藥物5、患者胃腸道、肝、腎疾病，影響藥物吸收、代謝、排泄86生物利用度和生物等效性6、常規(guī)劑量下沒有看到療效，測(cè)血藥濃度有助于分析原因7、常規(guī)劑量下出現(xiàn)毒性反應(yīng)8、懷疑由于合并用藥而出現(xiàn)的異常反應(yīng)9、診斷和外理藥物過量或中毒10、為確定新藥的群體給藥方案，進(jìn)行臨床藥動(dòng)學(xué)研究87生物利用度和生物等效性建立靈敏的血藥濃度或其他體液濃度的測(cè)定方法這是治療藥物監(jiān)測(cè)的前提,若方法不準(zhǔn),則可導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果,常用的方法有高效液相.色譜法,熒光偏振免疫法、酶免疫法等,其中以高效液相色譜法與熒光偏振免疫法為常用。在測(cè)定一個(gè)藥物的血藥濃度時(shí),首先對(duì)方法進(jìn)行確證,測(cè)定三個(gè)濃度的回收率及相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD%,同時(shí)要求出方法的靈敏度即最低檢測(cè)濃度與檢測(cè)限。88生物利用度和生物等效性TDM與臨床診斷在治療過程中,有時(shí)病人癥狀增多,是病情加重還是藥物中毒需診斷清楚,否則帶來嚴(yán)重的效果。某癲癇病人,連續(xù)服用苯妥英鈉,發(fā)作仍不能控制,經(jīng)采血分析監(jiān)測(cè),患者苯妥英鈉血藥濃度40mg/L,正常治療范圍應(yīng)為10-2Omg/mL,故患者確系苯妥英鈉中毒,于是停服苯妥英鈉,后癥狀緩解89生物利用度和生物等效性TDM與給藥方案IDM的核心是個(gè)體化給藥,藥物的療效不是完全由劑量決定,而是由血藥濃度決定的,由劑量到血藥濃度受到許多因素的影響,尤其是病人的生理、病理因素的影響,因此要根據(jù)病人情況用藥即個(gè)體化給藥。而個(gè)體化給藥關(guān)鍵是獲得個(gè)體參數(shù),多次采血可以求出病人藥動(dòng)力學(xué)參數(shù),但臨床不易接受,近年來關(guān)于群體藥動(dòng)學(xué)的發(fā)展,為這問題的解決提出辦法在臨床取1-2個(gè)點(diǎn),然后將此數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)上得到的該藥物的群體參數(shù)混合運(yùn)算,即可得到個(gè)體的藥動(dòng)學(xué)參數(shù),可依此計(jì)算給藥劑量、間隔時(shí)間、制訂個(gè)體給藥方案。90生物利用度和生物等效性TDM與有效安全用藥合理用藥要保證安全有效,治療藥物監(jiān)測(cè)是保證某些藥物安全有效的重要手段,患者慶大霉素血藥濃度監(jiān)測(cè)結(jié)果,慶大霉素有效血藥濃度為11~8mg/L,血藥濃度過高將會(huì)帶來嚴(yán)重毒副反應(yīng),兩次給藥間隔時(shí)間太短,會(huì)使血藥濃度升高，故應(yīng)進(jìn)行調(diào)整,避免了嚴(yán)重不良后果91生物利用度和生物等效性TDM與中毒急救TDM能及時(shí)準(zhǔn)確對(duì)中毒物進(jìn)行定性與定量監(jiān)測(cè),有針對(duì)性地采取救治措施,提高救治的成功率。某醫(yī)院有一患者吞服大量安眠藥,但具體藥名不詳,采血用多種安眠藥為外標(biāo)進(jìn)行定量分析,速可眠呈陽性反應(yīng),血藥濃度高達(dá)34mg/l,進(jìn)行血透析,再次采取血進(jìn)行.監(jiān)測(cè),速可眠血濃下降至11.5mg/L,患者自主呼吸恢復(fù),次日神志恢復(fù)。92生物利用度和生物等效性給藥方案設(shè)計(jì)給藥方案就是為治療提供藥物劑量和給藥間隔的一種計(jì)劃表,以達(dá)到合理用藥的目的

93生物利用度和生物等效性根據(jù)半衰期確定給藥方案1.確定給藥間隔時(shí)間:2.負(fù)荷劑量加倍94生物利用度和生物等效性確定給藥間隔時(shí)間一般選用τ=T1/2,這種辦法對(duì)多數(shù)藥物是適用的,此方案不會(huì)在體內(nèi)造成積累,故用藥較安全但一些殺菌性抗菌藥如利福平、青霉素等,因抗菌效力及其后續(xù)殺菌作用與藥物血漿峰濃度有關(guān),故可將每次用量加大而給藥次數(shù)減少,一些半衰期較短的藥物,一般應(yīng)參照半衰期長(zhǎng)短在一天內(nèi)多次給藥,不能簡(jiǎn)化為一次給藥,否則劑量將大大增加,而使毒性增加。有些半衰期特別長(zhǎng)的藥物按半衰期給藥,血藥濃度波動(dòng)太大,所以,將總劑量分次服用,比較安全。95生物利用度和生物等效性負(fù)荷劑量加倍關(guān)于負(fù)荷劑量為維持量的2倍,其原理已討論過。當(dāng)采用T=T1/2給藥,用首次劑量加倍法可收到迅速控制病情之效,如抗菌藥(磺胺、土霉素）用于控制感染,苯妥英鈉用于控制心律失常等,都可用首次劑量加倍法。96生物利用度和生物等效性根據(jù)平均穩(wěn)態(tài)血藥濃度制訂給藥方案對(duì)某一藥物制劑,其k、V或cl、F基本上恒定,只能通過調(diào)節(jié)Xo或τ,以達(dá)到治療所需平均穩(wěn)態(tài)血藥濃度的目的。如果藥物治療血藥濃度范圍很窄,且半衰期很短,為了不使血藥濃度波動(dòng)太大,給藥次數(shù)可頻繁一些,可超過每天4次,但這類藥物最好采用緩釋劑型。97生物利用度和生物等效性使穩(wěn)態(tài)血藥濃度控制在一定濃度范圍內(nèi)的給藥方案98生物利用度和生物等效性根據(jù)最低穩(wěn)態(tài)血藥濃度制定給藥方案100生物利用度和生物等效性例101生物利用度和生物等效性與腎衰病人的劑量調(diào)整腎是機(jī)體調(diào)整體液和電解質(zhì)平衡，排除代謝廢物和藥物的重要器官腎功能減退不僅影響體內(nèi)體液和電解質(zhì)平衡，而且會(huì)引起機(jī)體生理和代謝功能的變化，改變藥物的分布和蛋白結(jié)合以及藥物消除，進(jìn)而改變藥物動(dòng)力學(xué)性質(zhì)和藥效學(xué)對(duì)于治療指數(shù)較小的藥物，如不進(jìn)行劑量調(diào)整，有可能發(fā)生藥物中毒等不良反應(yīng)。102生物利用度和生物等效性方法1、根據(jù)患者的藥物清除率和消除速度常數(shù)調(diào)整劑量2、Wagner法3、Ritschel一點(diǎn)法4、重復(fù)一點(diǎn)法103生物利用度和生物等效性緩釋、控釋制劑的定義《中國(guó)藥典》對(duì)緩釋、控釋制劑的定義已有明確規(guī)定:緩釋制劑指口服藥物在規(guī)定溶劑中,按要求緩慢地非恒速釋放,且每日用藥次數(shù)與相應(yīng)普通制劑比較至少減少1次或用藥間隔時(shí)間有所延長(zhǎng)的制劑?？蒯屩苿┲缚诜幬镌谝?guī)定溶劑中,按要求緩慢地恒速或接近恒速釋放,且每日用藥次數(shù)與相應(yīng)普通制劑比較至少減少一次或用藥間隔時(shí)間有所延長(zhǎng)的制劑。104生物利用度和生物等效性105生物利用度和生物等效性緩釋、控釋制劑的特點(diǎn)1、對(duì)半衰期短的或需要頻繁給藥的藥物.可以減少服藥次數(shù),如普通制劑每天3次,制成緩釋或控釋制劑改為每天1次。這樣可以大大提高病