立克次體病的血清學(xué)檢驗教學(xué)內(nèi)容

立克次體病的血清學(xué)檢驗精品資料立克次體病的血清學(xué)試驗參考范圍：補體結(jié)合試驗(CF)<1:40微量凝集試驗 <1:40間接血凝試驗(PHA) <1:100間接免疫熒光試驗(IFA) <1:16臨床評價：1．立克次體病是由節(jié)肢動物如蜱、虱、蚤、螨等媒介傳播的一類急性傳染病，病原微生物為立克次體科的立克次體屬、柯克體屬、羅卡利馬體屬等。立克次體屬可分為斑疹傷寒、斑點熱和恙蟲病三個群，所引起的疾病主要有流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、落磯山斑疹傷寒、蜱媒立克次體病、恙蟲病、立克次體病等。柯克體屬中的貝氏柯克體可引起 Q熱。羅卡利馬體屬是戰(zhàn)壕熱的病原體。立克次體屬的抗原分為兩種，一為可溶性抗原，與細胞壁表面的粘液有關(guān)，具有群特異性。另一種為顆粒性抗原，屬外膜抗原，具有種特異性?？驴梭w屬的病原體有兩種抗原相，第 1相含較多的內(nèi)毒素樣脂多糖和完整抗原組分，毒力較強。第Ⅱ相毒力弱，已失去 I相中的表面抗原。人體感染立克次體后，血清中可產(chǎn)生特異性抗體。利用各種血清學(xué)試驗方法檢測患者的血清抗體，對立克次體病具有診斷價值。2．檢測特異性抗體的血清學(xué)試驗，具有特異性高、敏感性強的優(yōu)點，可根據(jù)不同的立克次體病選用幾種試驗，對疾病作出診斷。僅供學(xué)習(xí)與交流，如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除 謝謝2精品資料(1)補體結(jié)合試驗是最常用的一種方法?？贵w效價 >1：40，且恢復(fù)期血清滴度高于急性期4倍以上有診斷價值。一般補體結(jié)合抗體在病程第 1周內(nèi)即可出現(xiàn)，以后抗體效價逐漸上升，至 2～3周達最高峰，其抗體主要為 IgM．然后逐漸下降至低滴度，此時主要是 IgG，低效價水平(1：l0～1：40)可維持數(shù)年甚至數(shù)十年不退。故可用于流行病學(xué)調(diào)查。 CF試驗所用抗原是具有種特異性的顆?？乖士捎靡詤^(qū)別流行性斑疹傷寒和地方性斑疹傷寒。復(fù)發(fā)型斑疹傷寒抗體出現(xiàn)早(發(fā)病第4天)，效價上升快，8～10天達高峰，其組成以 IgG為主。恙蟲病立克次體因各株間抗原性差別顯著。故宜采用多價抗原或當(dāng)?shù)卮碇昕乖?。Q熱患者血清中最早出現(xiàn)Ⅱ相抗體，發(fā)病數(shù)周后才出現(xiàn) I相抗體，而且Ⅱ相抗體水平大多始終高于 I相，Ⅱ相抗體逐漸上升，對 Q熱具有診斷價值。伴心內(nèi)膜炎時可出現(xiàn)較高效價的 I相和Ⅱ相補體結(jié)合抗體。慢性感染往往表現(xiàn)為持續(xù)較高水平的I相抗體。(2)微量凝集試驗所用抗原為可溶性抗原，具有群特異性， Q熱的診斷采用Ⅱ相抗原，可用于區(qū)別斑疹傷寒、恙蟲病、各種斑點熱、 Q熱等疾病。此試驗特異性高、操作簡便且節(jié)省抗原。其陽性出現(xiàn)常比 CF試驗早，流行性斑疹傷寒在病程第5日即可有80％以上病例呈陽性，2～3周時陽性率幾乎100％。Q熱第1周陽性率為50％，凝集效價于病程 1月左右達高峰，繼而迅速下降，于數(shù)月內(nèi)消失，維持時間不如 CF試驗長久，因而不適用于追溯性研究。地方性斑疹傷寒患者可出現(xiàn)效價較低的陽性反應(yīng)。(3)間接血凝試驗的一些特點與微量凝集試驗相同，也只具群特異性，不能作種的區(qū)別。主要用于斑疹傷寒群和蜱傳斑點熱群的血清學(xué)試驗．還可用于鑒別原發(fā)性和復(fù)發(fā)型斑疹傷寒，前者血清中主要是 IgM型抗體，后者主要為 IgG僅供學(xué)習(xí)與交流，如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除 謝謝3精品資料型抗體。斑疹傷寒患者的血凝抗體于病程第 5～7天出現(xiàn)，迅速上升，效價?？蛇_1：400～1：3200，比CF試驗高，高值維持2～10周，下降也較補體結(jié)合抗體快，血凝抗體只見于感染的活動期，病后3～6個月即消失。(4)間接免疫熒光試驗方法敏感，重復(fù)性好，又節(jié)省材料和時間，廣泛應(yīng)用于立克次體病的血清學(xué)診斷，特別是恙蟲病，為群特異性。在本試驗中，單份血清抗體滴度達≥1：128或恢復(fù)期比急性期血清抗體效價上升 4倍或以上者，有立克次體病診斷意義。恙蟲病患者血清熒光抗體多在 1周末出現(xiàn)，2周末有顯著升高，3～4周達高峰，6個月后仍保持一定水平，可持續(xù)數(shù)年至十年，而有利于流行病學(xué)調(diào)查。3．用于立克次體病的診斷方法雖有多種，但國內(nèi)實驗室最常用者仍為外一斐試驗，此為非特異性凝集反應(yīng)，取雙份或三份血清標(biāo)本，抗體效價有 4倍以上增長者具有診斷意義。直接檢查法可作為立克次體病的預(yù)測和篩選，此方法是取組織活檢標(biāo)本，直接用免疫熒光或免疫酶染色檢查立克次體，具有特異性。從血液或其他臨床材料中分離病原體是可靠的診斷依據(jù)，但這一方法既昂貴又費時，且易致實驗室傳播，故不適宜在一般實驗室推廣。4．影響本試驗結(jié)果的因素(1)疾病早期有效的抗生素治療可頓挫疾病，抗體的產(chǎn)生會延遲 1周左右，其最高效價也可能降低。若發(fā)病數(shù)天后進行抗生素治療，對抗體產(chǎn)生的時間或其最終效價影響極小。(2)引起Q熱的I相脂多糖抗原與光滑型革蘭陰性桿菌有交叉反應(yīng)。(3)類風(fēng)濕因子陽性的血清在間接免疫熒光試驗中，可出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。僅供學(xué)習(xí)與交流，如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除 謝謝4精品資料外-斐試驗參考范圍：外-斐試驗<l：160臨床評價：1．外-斐試驗是臨床上診斷立克次體病常用的血清學(xué)試驗，為非特異性凝集反應(yīng)。立克次體屬中的普氏立克次體、莫氏立克次體、斑點熱立克次體和恙蟲病立克次體具有耐熱、耐稀堿的多糖抗原，而變形桿菌某些特殊菌株如 X19、X2和XK的菌體與其有共同抗原成分，能發(fā)生交叉反應(yīng)。外一斐試驗系利用這三型變形桿菌的菌體抗原代替立克次體抗原進行凝集試驗，測定患者血清中的立克次體抗體。2．外-斐凝集素可早在發(fā)病 4～6天出現(xiàn)，多于 2～3周退熱前后達最高滴度，然后很快下降，維持數(shù)月， 5個月后基本消失。外-斐試驗宜取雙份或三份血清標(biāo)本(初人院、病程第 2周和恢復(fù)期)，滴定效價達 1：160即為陽性，效價有4倍以上增長者具有診斷意義。盡管外-斐試驗有不能分型及特異性較差等缺點，但由于抗原易于獲得和保存，操作簡便，故仍被廣泛應(yīng)用。由立克次體引起的疾病主要有流行性斑疹傷寒、地方性斑疹傷寒、落磯山斑點熱、蜱媒立克次體病、恙蟲病、Q熱、立克次體痘和戰(zhàn)壕熱等，這些疾病在外-斐試驗中的特點如下：(1)斑疹傷寒病人能產(chǎn)生高滴度的 OX19凝集素及低滴度的 OX2凝集素，陽性率高達83.5％～93.4％，但不與OXK發(fā)生凝集。流行性斑疹傷寒在起病第5～6天時，病人血清即可與 OX19發(fā)生陽性凝集反應(yīng)，其凝集效價于第 3周達到高峰，一般超過1：320，有時可達1：2560，陽性率以第4周最高，繼而效價迅僅供學(xué)習(xí)與交流，如有侵權(quán)請聯(lián)系網(wǎng)站刪除 謝謝5精品資料速下降，于3～6個月內(nèi)轉(zhuǎn)為陰性。地方性斑疹傷寒患者的血清與變形桿菌OX19發(fā)生的凝集反應(yīng)，凝集效價一般較流行性斑疹傷寒為低，大多在 1：160～1：640，陽性反應(yīng)出現(xiàn)于發(fā)病的第 5～17天，平均為第11～15天。(2)恙蟲病患者血清可與變形桿菌 OXK株發(fā)生凝集反應(yīng)，陽性反應(yīng)最早在起病第4天即出現(xiàn)，第1周陽性率不高，僅為 30％左右，第2周末為60％，第3～4周80%～90%的患者可呈陽性。凝集效價 1：80～1：1280以上不等．多數(shù)在1：80～1：640之間，第1周開始上升，隨病程而逐漸增高，第 3～4周凝集效價達高峰，第5周開始下降，至第 8～9周多數(shù)為陰性。(3)落磯山斑點熱或蜱傳斑點熱患者的血清能產(chǎn)生 OX19與OX2凝集素，通常為OX19高于OX2，但也有OX2較高者。若僅出現(xiàn)OX2高滴度陽性，則對斑點熱有特殊意義。(4)立克次體痘、Q熱及戰(zhàn)壕熱患者血清中的特異性抗體不能與變形桿菌抗原發(fā)生凝集反應(yīng)，故外-斐試驗呈陰性結(jié)果。3．取組織活檢標(biāo)本，用免疫熒光及免疫酶染色法直接檢查立克次體，具有特異性，可作為標(biāo)本的預(yù)測和篩選。病原體的培養(yǎng)和鑒定是確診立克次體感染的可靠方法，但不適用于一般實驗室。應(yīng)用血清學(xué)試驗檢測患者血清中特異性抗原，對立克次體感染的診斷具有重要價值，常用的方法有補體結(jié)合試驗、微量凝集試驗、間接免疫熒光試驗及間接血凝試驗等。4．影響本試驗結(jié)果的因素(1)某些非立克次體病，外-斐試驗也可出現(xiàn)陽性反應(yīng)．如變形桿菌尿路感染、鉤端螺旋體病、回歸熱、瘧疾、傷