糖類藥物-課件

糖類藥物1、了解糖類藥物有哪些類別？2、掌握肝素和銀耳多糖的制備檢測原理和方法。概述糖類單糖低聚糖衍生物多糖單糖藥物葡萄糖（溶媒，利尿劑）果糖（降顱壓）氨基葡萄糖(適用于全身各個(gè)部位的骨關(guān)節(jié)炎)低聚糖藥物蔗糖麥芽糖乳糖衍生物6-磷酸葡萄糖1，6二磷酸果糖磷酸肌醇（抗癌衛(wèi)士）多糖糖類藥物研究的最多是多糖類藥物多糖鏈?zhǔn)巧茖W(xué)中除肽鏈、核苷酸鏈之外具有重大意義的第三鏈多糖類生理活性增強(qiáng)機(jī)體免疫能力激活巨噬細(xì)胞激活網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)激活補(bǔ)體人參多糖抗癌活性

多糖通過增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能、改變細(xì)胞膜生化活性、誘生腫瘤壞死因子、抗自由基作用而達(dá)到抗癌活性香菇多糖、云芝多糖、茯苓多糖、銀耳多糖降血糖活性

在粘性多糖中乙?；拇嬖谑墙笛腔钚缘闹匾种埔蜃涌狗派渚€作用通過強(qiáng)化造血系統(tǒng)和活化吞噬細(xì)胞等作用提高機(jī)體對(duì)輻射的耐受性茯苓多糖抗衰老作用抗凝血作用肝素抗血脂硫酸軟骨素多糖與相關(guān)藥物的研究分兩個(gè)方向作為信息分子進(jìn)入機(jī)體發(fā)揮補(bǔ)充調(diào)節(jié)或抑制的作用，這種特異性治療隨著糖功能基團(tuán)的發(fā)現(xiàn)將不斷涌現(xiàn)，目前報(bào)道較少。研究熱點(diǎn)以基質(zhì)成分作為非特異性治療調(diào)節(jié)各種生理功能，或糾正病理過程。國內(nèi)較為普遍粘多糖糖胺聚糖由細(xì)胞分泌的胞外生物高分子，是動(dòng)物體內(nèi)蛋白多糖分子中的糖鏈部分。具有多種藥理活性。包括抗凝血、降血脂、抗病毒、抗腫瘤及抗放射等。第一節(jié)糖類藥物制備的一般方法單糖及衍生物的制備直接提取法水50％乙醇82％乙醇活性炭脫色、濃縮、結(jié)晶多糖的提取脫脂：動(dòng)植物多糖及微生物細(xì)胞內(nèi)多糖的組織細(xì)胞多有脂質(zhì)包圍，甲醇、1：1的乙醇乙醚混合溶液、石油醚。脫色：含色素較高的根、莖、葉、果實(shí)類，需進(jìn)行處理。稀堿液提取法難溶于冷水、熱水，可溶于稀堿液（膠類）水提法易溶于溫水、難溶于冷水和乙醇粘多糖提取粘多糖與蛋白質(zhì)結(jié)合于細(xì)胞中，因此使糖-蛋白質(zhì)間的結(jié)合鍵斷裂，促使多糖釋放。方法有：堿解法

酶解法多糖與蛋白質(zhì)結(jié)合的糖肽鍵對(duì)堿不穩(wěn)定，故可用堿解法使糖與蛋白質(zhì)分開。理想的工具酶是專一性低的、具有廣泛水解作用的蛋白酶。鑒于蛋白酶不能斷裂糖肽鍵及其附近的肽鍵，為除去長肽段，?？膳c堿解法合用。胰蛋白酶、木瓜蛋白酶多糖分離純化乙醇沉淀法分級(jí)沉淀法

季胺鹽絡(luò)合法

用不同濃度的有機(jī)溶劑分級(jí)沉淀分子大小不同的粘多糖。與CTAB、CPC等能形成季胺鹽絡(luò)合物。在離子強(qiáng)度大時(shí)，這種絡(luò)合物可以解離，溶解，釋放。凝膠柱色譜法纖維素陰離子交換劑柱色譜法

電泳、超濾法、親和色譜、制備性高壓液相色譜、活性碳柱色譜Sepharose6B、DEAE—Toyopeurl650M及SephacrylS-200及SephedexG50柱色常見的交換劑為DEAE-纖維素多糖的含量測定與結(jié)構(gòu)分析顯色試劑一硫酸法

硫酸－蒽酮（620nm）苯酚－硫酸（490nm）兩種方法都是測總糖的，多糖被硫酸水解為單糖，然后單糖在硫酸作用下脫水生成糠醛。糠醛與蒽酮作用行測一種藍(lán)綠色的絡(luò)合物，在620nm處有最大吸收?？啡┡c苯酚作用形成橙黃色化合物，在490nm處有最大吸收。二者的顏色深淺與糖含量呈正相關(guān)。

DNS法

其利用S，5一二硝基水楊酸與多糖水解產(chǎn)物還原糖共熱后還原成棕紅色氨基化合物，在540nm處有特征吸收。高壓電泳、紙色譜、薄層色譜、高效液相色譜、旋光測定、凝膠色譜、高效凝膠滲透色譜（HPGPC）等。HPGPC測定多糖的純度和分子量具有快速、高分辨率和重現(xiàn)性好的優(yōu)點(diǎn)，在國內(nèi)外已得到廣泛應(yīng)用。第二節(jié)重要糖類藥物生產(chǎn)工藝D-甘露醇（D-Mannitol）在體內(nèi)不被代謝，經(jīng)腎小球?yàn)V過后在腎小管內(nèi)甚少被重吸收，可吸收水進(jìn)入血液中，起到滲透利尿作用。適應(yīng)癥組織脫水藥降低眼內(nèi)壓滲透性利尿藥作為輔助性利尿措施治療腎病綜合征、肝硬化腹水作為沖洗劑，應(yīng)用于經(jīng)尿道內(nèi)作前列腺切除結(jié)構(gòu)與性質(zhì)甘露醇為白色針狀結(jié)晶，無臭，略有甜味，不潮解。易溶于水，溶于熱乙醇，微溶于低級(jí)醇類、低級(jí)胺類、吡啶不溶于有機(jī)溶劑。生產(chǎn)工藝從海藻、海帶提取。葡萄糖為原料，經(jīng)電解、脫鹽，精制。發(fā)酵法。發(fā)酵法提取法去粘多糖檢測方法1、旋光法硼砂作為增旋劑，測旋光度，詳見《英國藥典》2、碘量法(藥典法）過碘酸鉀氧化碘量法，詳見《中國藥典》（第二部）肝素肝素是最有效的抗凝劑。阻止血小板聚集和破壞，抑制凝血酶的形成及活性，并能促使纖維蛋白溶解。臨床運(yùn)用于外科預(yù)防血栓形成以及妊娠者的抗凝治療在心臟、手術(shù)和腎臟透析時(shí)維持血液體外循環(huán)暢通用于治療各種原因引起的彌散性血管內(nèi)凝血結(jié)構(gòu)與性質(zhì)肝素是天然抗凝劑，是一種含有硫酸基的酸性粘多糖。肝素分子量不均一，由低、中、高三類不同分子量組成，分子量從3000到37500。肝素為白色或灰白色粉末，無臭無味，有吸濕性，易溶于水，不溶于乙醇、丙酮、二氧六環(huán)等有機(jī)溶劑，其游離酸在乙醚中有一定溶解性。肝素分子中含有硫酸基與羧基，呈強(qiáng)酸性，為聚陰離子，能與陽離子反應(yīng)成鹽。生產(chǎn)工藝在動(dòng)物體內(nèi)，肝素與蛋白質(zhì)共價(jià)結(jié)合形成肝素－蛋白復(fù)合物。這種復(fù)合物無抗凝活性，隨著蛋白質(zhì)的去除，其活性方能顯示出來。典型的粘多糖提取步驟

肝素鈉的提取分離兩大生產(chǎn)工藝堿性熱水或沸水來提取肝素－蛋白復(fù)合物。

使用堿性無機(jī)鹽溶液使其斷鍵解離

鹽解法使用蛋白水解酶使其斷鍵解離

酶解法鹽解-離子交換生產(chǎn)工藝酶解-離子交換生產(chǎn)工藝質(zhì)量檢測天青A法：堿性染料天青A的正電荷與肝素磺酸基、羧基負(fù)電荷結(jié)合，生成肝素－天青復(fù)合物，其顏色不同于原來的顏色，在pH8.6條件下，于505nm

處可進(jìn)行比色測定。生物檢定法：兔全血法人參多糖

(GPS)為人參的主要成分之一，近年研究表明，GPS可明顯增強(qiáng)免疫系統(tǒng)的功能并有免疫抗腫瘤和輔助抗腫瘤活性。粉碎脫脂超聲提取85％乙醇溶液沉淀去蛋白，去核酸總多糖檢測方法硫酸－苯酚法見參考文獻(xiàn)銀耳多糖

本品系擔(dān)子菌多糖類免疫增強(qiáng)劑，有改善機(jī)體免疫功能及升高白細(xì)胞的作用。臨床用于腫瘤化療或放療以及其它原因所致的白細(xì)胞減少癥，有顯著效果。此外尚可用于治療慢性支氣管炎。制備方法1.去銀耳子實(shí)體10g加水300ml，直火提取1h，提取過程中不斷用玻棒攪拌。雙層紗布過濾，提取液濃縮至100ml左右2.濃縮液加入等體積Sevag試劑去蛋白，3000rpm離心10min。3.上清液加入95％乙醇調(diào)整含醇量至80％，靜置0.5h，4.3000rpm離心10min，沉淀用無水乙醇，乙醚，丙酮洗滌1次，真空干燥，得銀耳粗多糖。

銀耳多糖鑒定：（1）Molish反應(yīng)：多糖在濃硫酸或濃鹽酸的作用下脫水形成糠醛及其衍生物，其與α-萘酚反應(yīng)作用生成紫色的化合物，原理是羰基于酚類進(jìn)行了縮合，這樣，將糖與濃酸作用后再與α-萘酚反應(yīng)作用就能生成紫色的化合物，因此，陰性反應(yīng)證明沒有糖類物質(zhì)的存在；而陽性反應(yīng)，則說明有糖存在的可能性，需要進(jìn)一步通過其他糖的定性試驗(yàn)才能確定有糖的存在。（2）斐林試劑：質(zhì)量濃度為0.1g／mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)