實(shí)驗(yàn)二培養(yǎng)基的制備與高壓鍋的使用

實(shí)驗(yàn)二培養(yǎng)基的制備與高壓鍋的使用第1頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月一、目的與要求1、掌握一般培養(yǎng)基制備的原則和要求2、了解培養(yǎng)基的配制原理，掌握制備培養(yǎng)基的過程3、學(xué)習(xí)高壓蒸汽滅菌鍋操作技術(shù)第2頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月二、原理

不同的微生物生長(zhǎng)繁殖都需要提供一定的營(yíng)養(yǎng)條件，在實(shí)驗(yàn)室中，微生物的營(yíng)養(yǎng)由培養(yǎng)基來提供。

培養(yǎng)基：是按照微生物生長(zhǎng)繁殖所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，用人工方法配制而成的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。除營(yíng)養(yǎng)條件以外，微生物必須在最適酸堿度范圍內(nèi)才表現(xiàn)出最大生命力，因此，應(yīng)針對(duì)不同的微生物將培養(yǎng)基的pH值調(diào)節(jié)到適當(dāng)范圍。第3頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月培養(yǎng)基的分類（1）根據(jù)培養(yǎng)基原料來源不同：天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基（2）根據(jù)物理性狀分為：液體培養(yǎng)基、固體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基（3）根據(jù)培養(yǎng)目的不同：鑒別培養(yǎng)基、分離培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基第4頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月

三、操作步驟示意圖按培養(yǎng)基

配方稱量加水加

熱熔化調(diào)節(jié)

pH值分裝

包裝滅菌檢查滅菌

徹底與否第5頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月四、培養(yǎng)基的配制（1）稱量按培養(yǎng)基配方稱量。（2）溶化用燒杯先裝少許水,將培養(yǎng)基倒入燒杯中，加足水，然后在電爐上加熱溶化。（3）PH值用PH測(cè)量?jī)x測(cè)定，并用1%氧化鈉或5%鹽酸調(diào)節(jié)到所需的PH值。（4）分裝根據(jù)不同需要，立即趁熱裝入試管或培養(yǎng)皿中。第6頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月注意事項(xiàng)：（1）不要使培養(yǎng)基沾在管口，如沾上，需用干凈的紗布擦干凈。（2）液體培養(yǎng)基：分裝高度以試管的1/4左右為宜。

固體培養(yǎng)基：分裝試管，其裝量為管高的1/6~1/5滅菌后制成斜面。分裝培養(yǎng)皿，普通培養(yǎng)皿容量以15ml為宜。

半固體培養(yǎng)基：分裝試管一般以試管高度的1/3為宜，滅菌后，垂直待凝成半固體深層瓊脂。（3）裝好培養(yǎng)基的試管都要加上試管塞，這樣既可過濾空氣，避免雜菌侵入，又可減緩培養(yǎng)基水分的蒸發(fā)。（4）包裝：試管口部分，用報(bào)紙包扎。方式：第7頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月五、高壓蒸汽滅菌

高壓蒸汽滅菌鍋是一個(gè)耐高壓又密閉的金屬鍋。它是利用在密閉條件下產(chǎn)生高壓蒸汽來達(dá)到滅菌的效果。其溫度在121℃左右，有強(qiáng)大的殺菌能力。因此它是一種用途廣泛，效率高的滅菌工具。第8頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月具體操作步驟：（1）加入適量自來水于滅菌鍋中（至水位線）。（2）擺入上述包裝好的待滅菌的培養(yǎng)基（注意：不要擺得太擠，以免影響蒸汽流通和滅菌效果）。（3）加蓋旋緊螺旋，使蒸汽鍋密閉不漏氣（對(duì)角線均勻擰旋）。（4）打開放氣閥，打開電源，自開始產(chǎn)生蒸汽后10分鐘（此時(shí)蒸汽鍋內(nèi)的冷空氣由排氣閥排盡）關(guān)緊放氣閥，讓溫度隨蒸汽壓力上升而上升，當(dāng)達(dá)所需壓力時(shí)控制熱源維持所需時(shí)間（15～30分鐘）然后停止加熱，讓其自然冷卻。（5）待壓力降至0時(shí)，打開排氣閥，再打開鍋蓋，取出滅菌物。注意：壓力未降至0時(shí)，切勿打開鍋蓋，否則突然降壓，招致培養(yǎng)基沸騰，沾濕棉塞，甚至沖出管外。（6）自鍋中取出滅菌好的培養(yǎng)基，放置稍冷卻后擺成斜面，或倒入滅菌的培養(yǎng)皿（15ml左右）中冷卻后置入37℃恒溫箱培養(yǎng)24小時(shí)，無菌生長(zhǎng)，方可保存?zhèn)溆?。?頁，課件共10頁，創(chuàng)作于2023年2月思考作業(yè)題1、配制培養(yǎng)基應(yīng)注意哪些問題？2、高