微生物雜交育種

微生物雜交育種王陶2012年2月

（1）理解雜交育種的意義及其遺傳學原理；

（2）掌握親本選配、雜交技術方法、雜種后代的處理和早代測驗的基本理論和基本方法；

（3）掌握熟悉雜交育種的程序。教學的基本要求教學基本內(nèi)容雜交育種的概念、意義放線菌的雜交育種霉菌的雜交育種酵母菌的雜交育種教學重點及難點：真菌的雜交育種及方法發(fā)酵工業(yè)的優(yōu)良菌種的選育主要采用誘變育種方法。但是，一個菌種長期使用誘變劑處理之后，其生活能力一般要逐漸下降，例如生長周期延長，孢子量減少，代謝減慢，產(chǎn)量增加緩慢，誘變因素對產(chǎn)量基因影響的有效性降低等。因此，有必要利用雜交育種方法。

一、微生物雜交1、雜交育種的定義雜交育種是指將兩個基因型不同的菌株經(jīng)吻合（或接合）使遺傳物質(zhì)重新組合，從中分離和篩選具有新性狀的菌株。雜交育種（breedingbyhybridization)是國內(nèi)外廣泛應用并卓有成效的育種方法。目前在生產(chǎn)上大面積推廣種植的農(nóng)作物的品種絕大多數(shù)都是用雜交育種的方法育成的。定義的拓展雜交育種(Hybridizationbreeding)一般是指人為利用真核微生物的有性生殖或準性生殖，或原核微生物的接合、F因子轉(zhuǎn)導、轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)化等過程，促使兩個具不同遺傳性狀的菌株發(fā)生基因重組，以獲得性能優(yōu)良的生產(chǎn)菌株。這也是一類重要的微生物育種手段，比起誘變育種，它具有更強的方向性和目的性?；蛑亟M生長快，產(chǎn)量高甲生長快，產(chǎn)量低乙生長慢，產(chǎn)量高以雜交方法培育優(yōu)良品種或利用雜種優(yōu)勢稱為雜交育種。2、雜交育種的目的在于：1）通過雜交使不同菌株的遺傳物質(zhì)進行交換和重新組合，從而改變原有菌株的遺傳物質(zhì)基礎，獲得雜種菌株（重組體）；2）可以通過雜交把不同菌株的優(yōu)良生產(chǎn)性能集中于重組體中，克服長期用誘變劑處理造成的菌株生活力下降等缺陷；3）通過雜交，可以擴大變異范圍，改變產(chǎn)品的質(zhì)量和產(chǎn)量，甚至出現(xiàn)新的品種；4）分析雜交結(jié)果，可以總結(jié)遺傳物質(zhì)的轉(zhuǎn)移和傳遞規(guī)律，促進遺傳學理論的發(fā)展。3、微生物雜交育種基本程序選擇原始親本誘變篩選直接親本親和力鑒定雜交分離到基本培養(yǎng)基和選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)篩選重組體鑒定4、親本菌株的選擇原始親本是微生物雜交育種中具有不同遺傳背景的優(yōu)質(zhì)出發(fā)菌株,主要根據(jù)雜交的目的來選擇.從育種角度出發(fā).通常選擇具有優(yōu)良性狀如產(chǎn)量高,代謝快,產(chǎn)孢子能力強,無色素,泡沫少,粘性小等發(fā)酵性能好的菌株為原始親本.它們可以來自生產(chǎn)用菌或誘變過程中的某些符合要求的菌株,也可以是自然分離的野生型菌株.原始親本還應該具有野生型遺傳標記,如具有一定的孢子顏色,可溶性色素或抗性標記等明顯不同的性狀.

直接親本微生物雜交育種所使用的配對菌株稱為直接親本。特點：經(jīng)原始親本菌株誘變而來；具有營養(yǎng)缺陷型標記或其他標記研究表明：若要獲得高產(chǎn)的重組體，最好采用具有明顯遺傳性狀差異的近親菌株為直接親本5、培養(yǎng)基完全培養(yǎng)基（CM）：各種微生物菌株基本培養(yǎng)基（MM）：野生型，原養(yǎng)型有限培養(yǎng)基（LM）：異核體菌株補充培養(yǎng)基（SM）：鑒別，選擇發(fā)酵培養(yǎng)基6、標記親本菌株

由于雜交育種重組頻率極低為10-7左右.雜交后的混合體系中除了極少數(shù)重組體外.還存在大量的未雜交親本及無效雜交后代,增加重組體篩選難度.為了提高效率,加快重組體篩選和檢出,讓雜交親本帶上不同的遺傳標記是十分重要的.但實際工作中大多數(shù)親本無野生型遺傳標記,一般是由原始親本菌株經(jīng)誘變劑處理后選出的具遺傳標記,又通過親和力測定的直接用于雜交的菌株.一般雜交親本用營養(yǎng)缺陷型或抗藥性突變型等遺傳標記,作為選擇重組體的標準和依據(jù).

由于多數(shù)微生物尚未發(fā)現(xiàn)其有性世代，因此，直接親本菌株應帶有適當?shù)倪z傳標記。常用的遺傳標記有顏色、營養(yǎng)要求和抗藥性等。

營養(yǎng)標記菌株（即營養(yǎng)缺陷型菌株）是最常用的遺傳標記之一。所謂營養(yǎng)缺陷型菌株是微生物經(jīng)誘變劑處理后產(chǎn)生的一種生化突變體。由于基因突變，它失去了合成某種物質(zhì)（氨基酸、維生素或核苷酸堿基）的能力，在基本培養(yǎng)基上不能生長，大多數(shù)營養(yǎng)缺陷型菌株需要補加一定種類的有機物質(zhì)后才能生長。2．抗性標記(高溫、高鹽、高pH)3．溫度敏感性標記4．其他性狀標記如孢子顏色、菌落形態(tài)結(jié)構(gòu)、可溶性色素舍量、代謝產(chǎn)物產(chǎn)量高低和代謝返速度快慢等，以及利用的碳、氮原種類、殺傷力等其他性狀都可以作為重組體檢出的輔助性標記。7.雜交育種方法常規(guī)雜交育種

絲狀真核微生物通過接合、染色體交換，然后分離形成重組體。常規(guī)雜交主要包括接合、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導、溶原轉(zhuǎn)換和轉(zhuǎn)染等技術。原生質(zhì)體雜交育種二、放線菌的雜交育種放線菌雜交是在細菌雜交研究的基礎上發(fā)展起來的。放線菌和細菌一樣屬于原核生物，但它們卻像霉菌一樣以菌絲形態(tài)生長，而且形成分生孢子。所以就本質(zhì)來講，雖然放線菌的基因重組過程近似于細菌，但就育種方法來講它卻有許多與霉菌相似的方面。細菌的一個大類群，為革蘭氏陽性。多為腐生，少數(shù)為寄生。寄生型放線菌會引起放線菌病和諾卡氏病。能產(chǎn)生大量的、種類繁多的抗生素。世界上絕大多數(shù)的抗生素由放線菌產(chǎn)生。

放線菌菌體為單細胞，大多數(shù)由分枝發(fā)達的菌絲組成。根據(jù)放線菌菌絲的形態(tài)和功能分為營養(yǎng)菌絲、氣生菌絲和孢子絲三種.

形態(tài)結(jié)構(gòu)放線菌與人類生活及生產(chǎn)的關系又稱為初級菌絲體、一級菌絲體或基內(nèi)菌絲，匍匐生長于培養(yǎng)基內(nèi)，主要生理功能是吸收營養(yǎng)物。營養(yǎng)菌絲一般無隔膜；直徑0.2~0.8m；長度差別很大；短的小于100m，長的可達600m.有的產(chǎn)生色素：黃、橙、紅、紫、藍、綠、灰、褐、黑等，包括脂溶性和水溶性，脂溶性色素局限于菌絲，水溶性色素可在培養(yǎng)基中擴散。營養(yǎng)菌絲

又稱為二級菌絲體。營養(yǎng)菌絲體發(fā)育到一定時，長出培養(yǎng)基外并伸向空間的菌絲為氣生菌絲。氣生菌絲

孢子絲當氣生菌絲發(fā)育到一定程度，其上分化出可形成孢子的菌絲即為孢子絲，又名產(chǎn)孢絲或繁殖菌絲。

放線菌主要通過形成無性孢子的方式進行繁殖，也可利用菌絲片斷進行繁殖。放線菌生長到一定階段，一部分菌絲形成孢子絲，孢子絲成熟便分化形成許多孢子，稱為分生孢子。孢子呈白、黃、綠、淡紫、粉紅、藍、褐、灰等顏色。繁殖方式A放線菌雜交原理

放線菌屬于原核生物，只有一條環(huán)狀染色體。放線菌染色體結(jié)構(gòu)的特殊性決定其基因重組過程的特殊性。放線菌基因重組過程類似于大腸桿菌，大體上有以下四種遺傳體系：（1）異核現(xiàn)象

有些放線菌的營養(yǎng)缺陷型在混合培養(yǎng)或雜交過程中，經(jīng)菌絲和菌絲間的接觸和融合而形成異核體。所謂異核體即同一條菌絲或細胞中含有不同基因型的細胞核。異核體所形成的菌落在表型上是原養(yǎng)型的，但其基因型分別與親本之一相同，而無重組體出現(xiàn)。由此證明，在這些放線菌的同一個細胞質(zhì)里，存在著兩種遺傳上不同的細胞核，它們在營養(yǎng)上起著互補作用。在繁殖過程中，它們沒有發(fā)生遺傳信息的交換。

有些鏈霉菌可以形成異核體，有些則不能。在不同菌株中形成異核體和發(fā)生基因重組缺乏明顯的相關性。但形成異核體和重組體除與菌株有關外，外界條件也起著一定作用。（2）接合現(xiàn)象

菌絲間接觸和融合后，相同細胞質(zhì)里不同基因型的細胞核在雙方增殖過程中，發(fā)生部分染色體的轉(zhuǎn)移或遺傳信息的交換。接合現(xiàn)象的結(jié)果導致部分合子的形成。

部分合子是由一個供體染色體片段與一個受體染色體的整體相結(jié)合而形成的，但亦可能兩個親本染色體都不完整。（3）異核系的形成

當部分合子形成后，接著就產(chǎn)生雜合的無性繁殖系（異核系）的細胞核，后者是經(jīng)過一次單交換而產(chǎn)生的異核系染色體組。它有一個二體區(qū)，即染色體的末端具有串聯(lián)的重復結(jié)構(gòu)。根據(jù)交換數(shù)目和染色體間的關系而產(chǎn)生單倍重組體或重組異核系。異核系的菌落形態(tài)很小，遺傳類型各不相同。能在基本培養(yǎng)基上或選擇性培養(yǎng)基上生長。但將異核系的分生孢子影印到同樣培養(yǎng)基上就不能生長。（4）重組體的形成

異核系不穩(wěn)定，在菌落生長過程中，染色體重疊兩節(jié)段（二體區(qū)）的不同位置上發(fā)生交換后，能產(chǎn)生重組體孢子。異核系所產(chǎn)生的孢子幾乎全部是單倍體，而成為一個單倍的無性繁殖系，能長出各種類型的分離子，但是，重組體也可由部分合子經(jīng)過雙交換而產(chǎn)生。

B放線菌的雜交技術現(xiàn)在常用的放線菌雜交方法主要有三種，即混合培養(yǎng)法、平板雜交法和玻璃紙轉(zhuǎn)移法。a混合培養(yǎng)法（1）選擇性平板法所使用的兩親株必須是互補的營養(yǎng)缺陷型。將用來進行重組的兩親株混合，接種到豐富的完全培養(yǎng)基斜面上，孢子形成后制成單孢子懸浮液，然后在選擇性培養(yǎng)基平板上進行分離，長出的菌落即為各種類型的重組體。（2）異核系分析法將混合培養(yǎng)后所制得的單孢子懸浮液，分離在基本培養(yǎng)基平板上，其中長成的小而豐富的菌落即為異核系。然后將異核系再分離在完全培養(yǎng)基上，長出的菌落即為分離子。b平板雜交法該方法是先將菌落培養(yǎng)在非選擇培養(yǎng)基上，當菌落形成孢子以后，用影印培養(yǎng)法將菌落印至已鋪有試驗菌孢子的完全培養(yǎng)基平板上，再培養(yǎng)至孢子形成。然后把這上面的孢子影印到一系列選擇性培養(yǎng)基上，以便于各種重組體子代的生長。c玻璃紙轉(zhuǎn)移法使用本法必須具備兩個條件：

第一，直接親本必須帶有兩個遺傳標記，即一個直接親本帶有一種營養(yǎng)要求和抗藥性（如抗鏈霉素）；而另一個直接親本則為對該藥物敏感（如對鏈霉素敏感）和帶有另一種營養(yǎng)缺陷型。

第二，選擇性培養(yǎng)基是帶有抗性藥物的補充培養(yǎng)基。

該方法是在選擇性培養(yǎng)基上挑選異核系菌落，其原理是：異核體帶有鏈霉素敏感的等位基因，在含有鏈霉素的選擇性培養(yǎng)基上不能生長。敏感性親本和抗藥性親本因為營養(yǎng)要求得不到滿足也不能在該選擇性培養(yǎng)基上生長。而不帶鏈霉素敏感等位基因的兩直接親本的局部結(jié)合子則能在該選擇性培養(yǎng)基上生長、繁殖成為異核系菌叢。放線菌的雜交育種

基因重組過程近似細菌，育種方法與霉菌相似．放線菌的遺傳體系和雜交原理：異核現(xiàn)象：同一細胞（菌絲）含不同基因型的核。無重組體出現(xiàn)。接合現(xiàn)象：發(fā)生部分染色體轉(zhuǎn)移（交換），形成部分合子。整+部分、部分+部分。異核系的形成：部分合子產(chǎn)生的無性繁殖系。能在基本或選擇培養(yǎng)基上生長。（單交換，二體區(qū)）重組體的形成：異核系不穩(wěn)定，可經(jīng)過雙交換形成重組子，產(chǎn)生重組子孢子。酵母菌yeast是一種單細胞真菌，可看作是真菌中的特殊形態(tài)。形態(tài)和結(jié)構(gòu)酵母菌是一種適應于在碳水化合物、高糖份偏酸性環(huán)境中生存的微生物。工業(yè)發(fā)酵就是用淀粉、蔬菜、糖作原料，在食品、化工、醫(yī)藥工業(yè)中得到廣泛應用。酵母菌又分發(fā)酵型和氧化型兩種。發(fā)酵型的多用于發(fā)酵工業(yè)。氧化型的用于石油加工工業(yè)，工藝過程中的脫蠟，降低石油凝固點，對石油煉制廢水的去油降酚起積極作用。⑴大多數(shù)以單細胞狀存在。在特殊條件下，生成的芽體互相連接形成樹枝狀，芽體延長像菌絲（假絲），細胞大多數(shù)是卵圓形，細胞核有明顯的核膜。⑵酵母菌的細胞結(jié)構(gòu)與細菌相似，但比細菌細胞大得多。一個橢圓形的酵母菌細胞長約7.2um，寬5.6nm(圓形直徑1—5um)⑶繁殖分為無性繁殖、有性繁殖。芽殖白芽母細胞的一端突起，進行分裂，芽長大，脫落。裂殖菌體直接進行分裂繁殖。有性繁殖先形成子囊孢子、生子囊孢子及其數(shù)目是鑒定酵母菌的依據(jù)之一。工業(yè)上可利用生子囊孢子進行雜交育種。⑷菌落特征表面濕潤、粘稠，大多數(shù)是乳白色，少數(shù)紅色（紅酵母），在固體培養(yǎng)基上生長時間長了，顏色變暗，呈縐縮狀。⑸酵母的生理特性──發(fā)酵工業(yè)發(fā)酵：食品、釀酒，面包、醋、醬、魚露等。醫(yī)藥：菌體蛋白、凝血質(zhì)、核糖核酸、酵母、細胞色素丙、輔酶甲、核苷酸、蛋白酶、維生素。化工：乙醇、甘油、甘露醇、有機酸、丙酮、乙醚、甲醛。環(huán)保：厭氧消化、垃圾無害化、堆肥技術。發(fā)酵過程主要是利用含糖、淀粉或碳水化合物作原料，不同種類的酵母菌對各種糖類的發(fā)酵能力不同，根據(jù)這一特性可以鑒別酵母中的不同種類。三、酵母菌的有性雜交育種（一）酵母菌的生活史（二）酵母菌有性雜交技術酵母菌有性雜交程序一般為：親本的單倍化↓有性雜交↓雜交后代的檢出↓篩選優(yōu)良性狀個體單倍化：將兩個不同性狀的親本菌株分別接種到含醋酸鈉等產(chǎn)孢子培養(yǎng)基斜面上，使其產(chǎn)生子囊，經(jīng)過減數(shù)分裂后，在每個子囊內(nèi)會形成4個子囊孢子（單倍體）。用蒸餾水洗下子囊，經(jīng)機械法（加硅藻土和石蠟油，在勻漿管中研磨）或酶法（用蝸牛酶等處理）破壞子囊，再經(jīng)離心，然后將獲得的子囊孢子涂布平板，就可以得到由單倍體細胞組成的菌落。有性雜交兩個遺傳型不同的生物體通過雜交產(chǎn)生雜種生物體的有性生殖過程。在真核微生物中，是指通過性細胞間或體細胞間的接合和隨之發(fā)生的減數(shù)分裂與遺傳重組，產(chǎn)生不同于親本遺傳型的子代的過程。凡能產(chǎn)生有性孢子的霉菌或酵母菌，一般都可用有性雜交的方法育種。1、親本的單倍化1）雜交親本單倍體細胞的分離（1）子囊孢子的形成形成子囊的條件一般方法（2）單倍體子囊孢子的分離顯微操作器分離單倍體子囊孢子法酶法機械研磨法（3）單倍體菌株的確定單倍體細胞與二倍體細胞在形態(tài)方面的區(qū)別生孢子能力的測定單倍體細胞結(jié)合型的確定2）雜交親本單倍體細胞遺傳標記的制作酵母菌有性雜交的方法：2、酵母菌有性雜交孢子雜交法群體交配法單倍體細胞雜交法3、雜交后代的檢出4、篩選優(yōu)良性狀個體S.Cerevisiae的雙倍體和單倍體細胞的比較項目 雙倍體 單倍體細胞 大，橢圓形 小，球形菌落 大，形態(tài)均一 小，形態(tài)變化較多液體培養(yǎng) 繁殖快，細胞較分散 繁殖較慢，細胞常聚集成團在產(chǎn)孢子培養(yǎng)基上 形成子囊及子囊孢子 不形成子囊自或 然人 破 工 壁破 壁減數(shù)分裂接合子囊孢子發(fā)芽霉菌是一種真菌能利用無機氮作氮源適于在酸性環(huán)境中繁殖的多細胞微生物。它在醫(yī)藥、化學、紡織、食品等工業(yè)中都得到廣泛應用。在發(fā)酵工業(yè)用霉菌生產(chǎn)酒精、有機酸（檸檬、葡萄糖酸）、抗生素、酶制劑（淀粉酶、蛋白酶、纖維酶）、維生素及甾體激素等；有些霉菌又是動植物的病源菌，在潮濕的環(huán)境中可使棉、毛、絲、麻、皮革、布匹幾乎所有的生活用品、工業(yè)品等多種物質(zhì)發(fā)霉、腐爛、變質(zhì)，禍害很大。霉菌能利用多種含N物質(zhì)如銨鹽、硝酸鹽、氨基酸、膠胨及蛋白質(zhì)作氮源；以淀粉、糖類、醇、脂肪、高級石臘等有機物作碳源。Fe、Zn、Cu、Mn、Mo促進霉生長也是必不可少的微量元素，是比較能耐酸、堿的微生物。形態(tài)絨毛狀或疏松的棉花狀，孢子具有各種不同顏色。個體形態(tài)霉菌是多細胞真菌的代表，菌體是由許多菌絲組成的菌絲體。其菌絲有兩部分：一部分伸入基質(zhì)內(nèi)部（即培養(yǎng)基內(nèi)部）或漫生于培養(yǎng)基表面吸取營養(yǎng)的營養(yǎng)菌絲；另一部分是伸于基質(zhì)上空稱為氣生菌絲，它可產(chǎn)生孢子，進行繁殖，包括無性繁殖和準性繁殖。無性繁殖──分裂出各種孢子：分生孢子、孢囊孢子、厚生孢子、節(jié)孢子準性繁殖──兩細胞質(zhì)融合生出各種孢子。菌落特征與放線菌相似，菌落由分枝狀菌絲組成。菌絲較長形成的菌落為絨毛狀。絮狀或蜘蛛網(wǎng)狀，一般比細菌菌落大幾倍到幾十倍。孢子可有不同形狀的構(gòu)造和顏色。工業(yè)上常用霉菌的形態(tài)及特點⑴曲霉Aspergillus種類很多。目前在發(fā)酵工業(yè)上應用的霉菌大都是曲霉。⑵根霉Rhizopus菌絲向四周蔓延，形成密密的棉絮狀的蔓絲而充滿著整個基礎表面，形成葡萄枝狀（孢子是梨形），與此派生出與根霉相似的梨頭霉用于甾體激素生產(chǎn)。⑶青霉、稻草霉、盤尼西林Pcnicillum青霉菌中的藍青霉和黃青霉素的重要菌種。孢子成掃帚狀，青霉十分接近曲霉，在自然界中土壤里廣泛存在。⑷毛霉Mucor形態(tài)與根霉相似，存在于腐敗植物、果實、面包等。⑸木霉Trichoderma分布很廣。在腐爛木材、植物殘體、種子、土壤、有機肥料均有存在。分解木質(zhì)素。用以木代糧菌種的培育與生產(chǎn)。四、霉菌的雜交育種不產(chǎn)生有性孢子的微生物除了主要進行無性繁殖外，還能進行準性生殖。準性生殖的發(fā)現(xiàn)，不僅促進了這類微生物遺傳的研究，而且亦為這類微生物的育種提供了一條新的途徑。

準性生殖的定義和意義：類似于有性生殖但更原始的生殖方式，是通過同一物種兩個不同菌株的體細胞發(fā)生融合，不經(jīng)過減數(shù)分裂而導致低頻率基因重組并產(chǎn)生重組子。為半知菌育種提供了一個重要手段。存在范圍：常見于一些真菌尤其是半知菌中，是一群只有無性階段或有性階段未發(fā)現(xiàn)的真菌。它們當中大多屬于子囊菌，有些屬于擔子菌，只是由于未觀察到它們的有性階段，無法確定分類地位，因此歸于半知菌。A準性生殖的過程準性生殖的整個過程包括三個相互聯(lián)系的階段：異核體的形成；

二倍體的形成；

體細胞重組。1、異核體的形成

當具有不同性狀的兩個細胞或兩條菌絲相互聯(lián)結(jié)時，導致在一個細胞或一條菌絲中并存有兩種或兩種以上不同遺傳型的核。這樣的細胞或菌絲體叫做異核體，這種現(xiàn)象叫異核現(xiàn)象。異核體：同一菌絲有不同遺傳性狀的核在同一

細胞質(zhì)中生長。同核體：同一菌絲中只有一種核。異核體的特點：1）具有感受性的兩種菌絲間才可形成異核體；2）具有野生型性狀，可在基本培養(yǎng)基上生長；

（基因互補功能）3）大多數(shù)異核體的分生孢子不能在基本培養(yǎng)基

上生長；如能生長，則為異核體、或為雜合

二倍體（重組子）。2、雜合雙倍體的形成隨著異核體的形成，準性生殖便進入雜合雙倍體的形成階段，就是異核體菌絲在繁殖過程中，偶而發(fā)生兩種不同遺傳型核的融合，形成雜合細胞核。由于組成異核體的兩個親本細胞核各具有一個染色體組，所以雜合核是雙倍體。雜合雙倍體形成之后，隨異核體的繁殖而繁殖，這樣就在異核體菌落上形成雜合二倍體的斑點或扇面。將這些斑點或扇面的孢子挑出進行單孢子分離，即可得到雜合雙倍體菌株。體細胞重組

雜合雙倍體只具有相對的穩(wěn)定性，在其繁殖過程中可以發(fā)生染色體交換和染色體單倍化，從而形成各種分離子。染色體交換和染色體單倍化是兩個相互獨立的過程，有人把它們總稱為體細胞重組。這就是準性生殖的最后階段。染色體交換由準性生殖第二階段形成的雜合雙倍體并不進行減數(shù)分裂，卻會發(fā)生染色體交換。由于這種交換發(fā)生在體細胞的有絲分裂過程中，因此它們被稱為體細胞交換。雜合雙倍體發(fā)生了體細胞交換后所形成的兩個子細胞仍然是雙倍體細胞。染色體單倍化

雜合雙倍體除了發(fā)生染色體交換外，還能發(fā)生染色體單倍化。這過程不同于減數(shù)分裂。在減數(shù)分裂過程中，全部染色體同時有一對減為一個，所以通過一次減數(shù)分裂，由一個雙倍體細胞產(chǎn)生四個單倍體細胞。而染色體單倍化則不同，它是通過每一次細胞分裂后，往往只有一對染色體變?yōu)橐粋€，而其余染色體則仍然都是成雙的。這樣維過多次細胞分裂，才使一個雙倍體細胞轉(zhuǎn)變?yōu)閱伪扼w細胞。通過單倍化過程，形成了各種類型的分離子，它包括非整倍體、雙倍體和單倍體。體細胞交換和單倍體化

雜合體細胞中有極少數(shù)細胞核在進行有絲分裂的過程中，能發(fā)生體細胞染色體間的交換、分離（單倍體化）而產(chǎn)生具有新性狀的單倍體雜合子、雙倍體及非整倍體。ABA+B（同核體）（異核體）AABBABAABB（雜合二倍體）單倍體雜合子B霉菌的雜交技術（1）選擇直接親本用來進行雜交的兩個野生型菌株叫做原始親本。原始親本經(jīng)過誘變以后得到各種突變型菌株。假設這種菌株是用來作為形成異核體的親本，就叫直接親本。作為直接親本的遺傳標記有多種多樣。如營養(yǎng)突變型，抗藥性突變型，形態(tài)突變型等。（2）異核體的形成在基本培養(yǎng)基上，強迫兩株營養(yǎng)缺陷型互補營養(yǎng)，則這兩個菌株經(jīng)過菌絲細胞間的吻合形成異核體。由直接親本形成異核體的方法有：1）完全培養(yǎng)基液體混合培養(yǎng)法；2）完全培養(yǎng)基斜面混合培養(yǎng)法；3）液體有限培養(yǎng)基混合培養(yǎng)法；4）有限培養(yǎng)基平板異核叢形成法；5）基本培養(yǎng)基斜面銜接接種法6）基本培養(yǎng)基平板穿刺法等。（3）雙倍體的檢出檢出雙倍體的方法有三種：

l）用擴大鏡觀察異核體菌落的表面，如果發(fā)現(xiàn)有野生型顏色的斑點和扇面，即可用接種針將其孢子挑出，進行分離純化，即得雜合雙倍體。2）將異核體菌絲打碎，于基本培養(yǎng)基和完全培養(yǎng)基平板上進行分離，經(jīng)培養(yǎng)挑出異核菌落。在個別異核菌落上長出野生型原養(yǎng)性的斑點和扇面，將其挑出進行分離純化即可。上述兩種方法只能從每個異核體菌落（叢）上挑取一個斑點或扇面，以排除無性繁殖的干擾。

3）將大量異核體孢子分離于基本培養(yǎng)基平板上從中長出野生型原養(yǎng)性菌落，將其挑出分離純化，即得雜合雙倍體。（4）分離子的檢出1）將雜合雙倍體單孢子分離于完全培養(yǎng)基平板上，培養(yǎng)至菌落成熟，從每個菌落挑出一個斑點或扇面的孢子于完全培養(yǎng)基斜面上，培養(yǎng)后經(jīng)過純化和鑒別即得分離子。

2）用選擇性培養(yǎng)基篩選分離子我國進行了不少霉菌雜交育種方面的工作。60年代青霉素產(chǎn)生菌產(chǎn)黃準性生殖的過程：①菌絲聯(lián)結(jié)②異核體形成（質(zhì)配）③核配形成雜合二倍體④體細胞交換和單倍體化。準性生殖與有性生殖的比較

項目 準性生殖 有性生殖參與接合的親本細胞 形態(tài)相同的體細胞 形態(tài)或生理上有分化的性細胞獨立生活的異核體階段有 無接合后雙倍體細胞形態(tài)與單倍體基本相同 與單倍體明顯不同雙倍體變單倍體的途徑通過有絲分裂 通過減數(shù)分裂接合發(fā)生的幾率 偶然發(fā)現(xiàn)，幾率低 正常出現(xiàn)，幾率高安全閥基本知識如果壓力容器(設備/管線等)壓力超過設計壓力…1.盡可能避免超壓現(xiàn)象堵塞(BLOCKED)火災(FIRE)熱泄放(THERMALRELIEF)如何避免事故的發(fā)生?2.使用安全泄壓設施爆破片安全閥如何避免事故的發(fā)生?01安全閥的作用就是過壓保護!一切有過壓可能的設施都需要安全閥的保護!這里的壓力可以在200KG以上,也可以在1KG以下!設定壓力(setpressure)安全閥起跳壓力背壓(backpressure)安全閥出口壓力超壓(overpressure)表示安全閥開啟后至全開期間入口積聚的壓力.幾個壓力概念彈簧式先導式重力板式先導+重力板典型應用電站鍋爐典型應用長輸管線典型應用罐區(qū)安全閥的主要類型02不同類型安全閥的優(yōu)缺點結(jié)構(gòu)簡單,可靠性高適用范圍廣價格經(jīng)濟對介質(zhì)不過分挑剔彈簧式安全閥的優(yōu)點預漏--由于閥座密封力隨介質(zhì)壓力的升高而降低,所以會有預漏現(xiàn)象--在未達到安全閥設定點前,就有少量介質(zhì)泄出.100%SEATINGFORCE75502505075100%SETPRESSURE彈簧式安全閥的缺點過大的入口壓力降會造成閥門的頻跳,縮短閥門使用壽命.ChatterDiscGuideDiscHolderNozzle彈簧式安全閥的缺點彈簧式安全閥的缺點=10090807060500102030405010%OVERPRESSURE%BUILT-UPBACKPRESSURE%RATEDCAPACITY普通產(chǎn)品平衡背壓能力差.在普通產(chǎn)品基礎上加裝波紋管,使其平衡背壓的能力有所增強.能夠使閥芯內(nèi)件與高溫/腐蝕性介質(zhì)相隔離.平衡波紋管彈簧式安全閥的優(yōu)點優(yōu)異的閥座密封性能,閥座密封力隨介質(zhì)操作壓力的升高而升高,可使系統(tǒng)在較高運行壓力下高效能地工作.ResilientSeatP1P1P2先導式安全閥的優(yōu)點平衡背壓能力優(yōu)秀有突開型/調(diào)節(jié)型兩種動作特性可遠傳取壓先導式安全閥的優(yōu)點對介質(zhì)比較挑剃,不適用于較臟/較粘稠的介質(zhì),此類介質(zhì)會堵塞引壓管及導閥內(nèi)腔.成本較高.先導式安全閥的缺點重力板式產(chǎn)品的優(yōu)點目前低壓儲罐呼吸閥/緊急泄放閥的主力產(chǎn)品.結(jié)構(gòu)簡單.價格經(jīng)濟.重力板式產(chǎn)品的缺點不可現(xiàn)場調(diào)節(jié)設定值.閥座密封性差,并有較嚴重的預漏.受背壓影響大.需要很高的超壓以達到全開.不適用于深冷/粘稠工況.幾個常用規(guī)范ASMEsectionI-動力鍋爐(FiredVessel)ASMEsectionVIII-非受火容器(UnfiredVessel)API2000-低壓安全閥設計(LowpressurePRV)API520-火災工況計算與選型(FireSizing)API526-閥門尺寸(ValveDimension)API527-閥座密封(SeatTightness)介質(zhì)狀態(tài)(氣/液/氣液雙相).氣態(tài)介質(zhì)的分子量&Cp/Cv值.液態(tài)介質(zhì)的比重/黏度.安全閥泄放量要求.設定壓力.背壓.泄放溫度安全閥不以連接尺寸作為選型報價依據(jù)!如何提供高質(zhì)量的詢價?彈簧安全閥的結(jié)構(gòu)彈簧安全閥起跳曲線彈簧安全閥結(jié)構(gòu)彈簧安全閥結(jié)構(gòu)導壓管活塞密封活塞導向不平衡移動副(活塞)導管導閥彈性閥座P1P1P2先導式安全閥結(jié)構(gòu)先導式安全閥的工作原理頻跳安全閥的頻跳是一種閥門高頻反復開啟關閉的現(xiàn)象。安全閥頻跳時，一般來說密封面只打開其全啟高度的幾分只一或十幾分之一，然后迅速回座并再次起跳。頻跳時，閥瓣和噴嘴的密封面不斷高頻撞擊會造成密封面的嚴重損傷。如果頻跳現(xiàn)象進一步加劇還有可能造成閥體內(nèi)部其他部分甚至系統(tǒng)的損傷。安全閥工作不正常的因素頻跳后果1、導向平面由于反復高頻磨擦造成表面劃傷或局部材料疲勞實效。2、密封面由于高頻碰撞造成損傷。3、由于高頻振顫造成彈簧實效。4、由頻跳所帶來的閥門及管道振顫可能會破壞焊接材料和系統(tǒng)上其他設備。5、由于安全閥在頻跳時無法達到需要的排放量，系統(tǒng)壓力有可能繼續(xù)升壓并超過最大允許工作壓力。安全閥工作不正常的因素A、系統(tǒng)壓力在通過閥門與系統(tǒng)之間的連接管時壓力下降超過3%。當閥門處于關閉狀態(tài)時，閥門入口處的壓力是相對穩(wěn)定的。閥門入口壓力與系統(tǒng)壓力相同。當系統(tǒng)壓力達到安全閥的起跳壓力時，閥門迅速打開并開始泄壓。但是由于閥門與系統(tǒng)之間的連接管設計不當，造成連接管內(nèi)局部壓力下降過快超過3%，是閥門入口處壓力迅速下降到回座壓力而導致閥門關閉。因此安全閥開啟后沒有達到完全排放，系統(tǒng)壓力仍然很高，所以閥門會再次起跳并重復上述過程，既發(fā)生頻跳。導致頻跳的原因?qū)е陆庸軌航蹈哂?%的原因1、閥門與系統(tǒng)間的連接管內(nèi)徑小于閥門入口管內(nèi)徑。2、存在嚴重的渦流現(xiàn)象。3、連接管過長而且沒有作相應的補償（使用內(nèi)徑較大的管道）。4、連接管過于復雜（拐彎過多甚至在該管上開口用作它途。在一般情況下安全閥入口處不允許安裝其他閥門。）導致頻跳的原因B、閥門的調(diào)節(jié)環(huán)位置設置不當。安全閥擁有噴嘴環(huán)和導向環(huán)。這兩個環(huán)的位置直接影響安全閥的起跳和回座過程。如果噴嘴環(huán)的位置過低或?qū)颦h(huán)的位置過高，則閥門起跳后介質(zhì)的作用力無法在閥瓣座和調(diào)節(jié)環(huán)所構(gòu)成的空間內(nèi)產(chǎn)生足夠的托舉力使閥門保持排放狀態(tài)，從而導致閥門迅速回座。但是系統(tǒng)壓力仍然保持較高水平，因此回座后閥門會很快再次起跳。導致頻跳的原因C、安全閥的額定排量遠遠大于所需排量。

由于所選的安全閥的喉徑面積遠遠大于所需，安全閥排放時過大的排量導致壓力容器內(nèi)局部壓力下降過快，而系統(tǒng)本身的超壓狀態(tài)沒有得到緩解，使安全閥不得不再次起跳頻跳的原因閥門拒跳：當系統(tǒng)壓力達到安全閥的起跳壓力時，閥門不起跳的現(xiàn)象。安全閥工作不正常的因素1、閥門整定壓力過高。2、閥門內(nèi)落入大量雜質(zhì)從而使閥辦座和導套間卡死或摩擦力過大。3、彈簧之間夾入雜物使彈簧無法被正常壓縮。4、閥門安裝不當，使閥門垂直度超過極限范圍（正負兩度）從而使閥桿組件在起跳過程中受阻。5、排氣管道沒有被可靠支撐或由于管道受熱膨脹移位從而對閥體產(chǎn)生扭轉(zhuǎn)力，導致閥體內(nèi)機構(gòu)發(fā)生偏心而卡死。安全閥拒跳的原因閥門不回座或回座比過大：安全閥正常起跳后長時間無法回座，閥門保持排放狀態(tài)的現(xiàn)象。安全閥工作不正常的因素1、閥門上下調(diào)整環(huán)的位置設置不當。2、排氣管道設計不當造成排氣不暢，由于排氣管道過小、拐彎過多或被堵塞，使排放的蒸汽無法迅速排出而在排氣管和閥體內(nèi)積累，這時背壓會作用在閥門內(nèi)部機構(gòu)上并產(chǎn)生抑制閥門關閉的趨勢。3、閥門內(nèi)落入大量雜質(zhì)從而使閥瓣座和導套之間卡死后摩擦力過大。安全閥不回座或回座比過大的因素：4、彈簧之間夾入雜物從而使彈簧被正常壓縮后無法恢復。5、由于對閥門排放時的排放反力計算不足，從而在排放時閥體受力扭曲損壞內(nèi)部零件導致卡死。6、閥桿螺母（位于閥桿頂端）的定位銷脫落。在閥門排放時由于振動使該螺母下滑使閥桿組件回落受阻。安全閥不回座或回座比過大的因素：7、由于彈簧壓緊螺栓的鎖緊螺母松脫，在閥門排放時由于振動時彈簧壓緊螺栓松動上滑導致閥門的設定起跳值不斷減小。

8、閥門安裝不當，使閥門垂直度超過極限范圍（正負兩度）從而使閥桿組件在回落過程中受阻。

9、閥門的密封面中有雜質(zhì)，造成閥門無法正常關閉。

10、鎖緊螺母沒有鎖緊，由于管道震動下環(huán)向上運動，上平面高于密封面，閥門回座時無法密封安全閥不回座或回座比過大的因素：謝謝觀看癌基因與抑癌基因oncogene&tumorsuppressorgene24135基因突變概述.癌基因和抗癌基因的概念.癌基因的分類.癌基因產(chǎn)物的作用.癌基因激活的機理主要內(nèi)容疾?。?/p>

——是人體某一層面或各層面形態(tài)和功能（包括其物質(zhì)基礎——代謝）的異常，歸根結(jié)底是某些特定蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)或功能的變異，而這些蛋白質(zhì)又是細胞核中相應基因借助細胞受體和細胞中信號轉(zhuǎn)導分子接收信號后作出應答（表達）的產(chǎn)物。TranscriptionTranslationReplicationDNARNAProtein中心法規(guī)Whatisgene?基因：

—是遺傳信息的載體

—是一段特定的DNA序列（片段）

—是編碼RNA或蛋白質(zhì)的一段DNA片段

—是由編碼序列和調(diào)控序列組成的一段DNA片段基因主宰生物體的命運：微效基因的變異——生物體對生存環(huán)境的敏感度變化關鍵關鍵基因的變異——生物體疾病——死亡所以才有：“人類所有疾病均可視為基因病”之說注：如果外傷如燒傷、骨折等也算疾病的話，外傷應該無法歸入基因病的行列。Genopathy問：兩個不相干的人，如果他們患得同一疾病，致病基因是否相同？再問：同卵雙生的孿生兄弟，他們患病的機會是否一樣，命運是否相同？┯┯┯┯

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┷┷┷┷增添缺失替換DNA分子(復制)中發(fā)生堿基對的______、______

和

，而引起的

的改變。替換增添缺失基因結(jié)構(gòu)基因變異的概念：英語句子中的一個字母的改變，可能導致句子的意思發(fā)生怎樣的變化？可能導致句子的意思不變、變化不大或完全改變THECATSATONTHEMATTHECATSITONTHEMATTHEHATSATONTHEMATTHECATONTHEMAT同理：替換、增添、缺失堿基對，可能會使性狀不變、變化不大或完全改變。基因的結(jié)構(gòu)改變,一定會引起性狀的改變??原句：1.基因多態(tài)性與致病突變基因變異與疾病的關系2.單基因病、多基因病3.疾病易感基因

基因多態(tài)性polymorphism是指DNA序列在群體中的變異性（差異性）在人群中的發(fā)生概率>1%（SNP&CNP)<1%的變異概率叫做突變基因多態(tài)性特定的基因多態(tài)性與疾病相關時，可用致病突變加以描述SNP:散在單個堿基的不同，單個堿基的缺失、插入和置換。

CNP:DNA片段拷貝數(shù)變異，包括缺失、插入和重復等。同義突變、錯義突變、無義突變、移碼突變

致病突變生殖細胞基因突變將突變的遺傳信息傳給下一代(代代相傳),即遺傳性疾病。體細胞基因突變局部形成突變細胞群（腫瘤）。受精卵分裂基因突變的原因物理因素化學因素生物因素基因突變的原因（誘發(fā)因素）紫外線、輻射等堿基類似物5BU/疊氮胸苷等病毒和某些細菌等自發(fā)突變DNA復制過程中堿基配對出現(xiàn)誤差。UV使相鄰的胸腺嘧啶產(chǎn)生胸腺嘧啶二聚體,DNA復制時二聚體對應鏈空缺，堿基隨機添補發(fā)生突變。胸腺嘧啶二聚體胸腺嘧啶胸腺嘧啶紫外線誘變物理誘變(physicalinduction)

5溴尿嘧啶(5BU)與T類似，多為酮式構(gòu)型。間期細胞用酮式5BU處理，5BU能插入DNA取代T與A配對；插入DNA后異構(gòu)成烯醇式5BU與G配對。兩次DNA復制后,使A/T轉(zhuǎn)換成G/C，發(fā)生堿基轉(zhuǎn)換,產(chǎn)生基因突變?；瘜W誘變(chemicalinduction)堿基類似物(baseanalogues)誘變AT5-BUA5-BUAAT5-BU5-BU(烯醇式)

(酮式)GGC1.生物變異的根本來源，為生物進化提供了最初的原始材料,能使生物的性狀出現(xiàn)差別，以適應不同的外界環(huán)境，是生物進化的重要因素之一。2.致病突變是導致人類遺傳病的病變基礎?；蛲蛔兊囊饬x概述：腫瘤細胞惡性增殖特性（一）腫瘤細胞失去了生長調(diào)節(jié)的反饋抑制正常細胞受損,一旦恢復原狀，細胞就會停止增殖，但是腫瘤細胞不受這一反饋機制抑制。（二）腫瘤細胞失去了細胞分裂的接觸抑制。正常細胞體外培養(yǎng)，相鄰細胞相接觸，長在一起，細胞就會停止增殖，而腫瘤細胞生長滿培養(yǎng)皿后，細胞可以重疊起生長。（三）腫瘤細胞表現(xiàn)出比正常細胞更低的營養(yǎng)要求。（四）腫瘤細胞生長有一種自分泌作用，自己分泌生長需要的生長因子和調(diào)控信號,促進自身的惡性增殖。Whatisoncogene?癌基因——是基因組內(nèi)正常存在的基因，其編碼產(chǎn)物通常作為正調(diào)控信號，促進細胞的增殖和生長。癌基因的突變或表達異常是細胞惡性轉(zhuǎn)化（癌變）的重要原因?！彩悄芫幋a生長因子、生長因子受體、細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導分子以及與生長有關的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子等的基因。如何發(fā)現(xiàn)癌基因的呢?11910年，洛克菲勒研究院一個年輕的研究員Rous發(fā)現(xiàn)，雞肉瘤細胞裂解物在通過除菌濾器以后，注射到正常雞體內(nèi)，可以引起肉瘤，首次提出雞肉瘤可能是由病毒引起的。0.2m孔徑細菌過不去但病毒可以通過從病毒癌基因到細胞原癌基因的研究歷程：Roussarcomavirus,RSVthefirstcancer-causingretrovirus1958年，Stewart和Eddy分離出一種病毒，注射到小鼠體內(nèi)可以引起肝臟、腎臟、乳腺、胸腺、腎上腺等多種組織器官的腫瘤，因而把這種病毒稱為多瘤病毒。50年代末、60年代初，癌病毒研究成了一個極具想像力的研究領域，主流科學家開始進入癌病毒研究領域polyomavirus這期間，Temin發(fā)現(xiàn)RSV有不同亞型，且引起細胞惡變程度不同，推測RNA病毒將其遺傳信息傳遞給了正常細胞的DNA。這與Crick提出的中心法則是相違背的讓事實屈從于理論還是堅持基于實驗的結(jié)果？VSTemin發(fā)現(xiàn)逆轉(zhuǎn)錄酶，1975年獲諾貝爾獎TeminCrickTemin的實驗設計：實驗設計簡單而巧妙：將合成DNA所需的“原料”，即A、T、C、G四種脫氧核苷酸，與破壞了外殼的RSV一起在體外40℃的條件下溫育一段時間結(jié)果在試管里獲得了一種新合成的大分子，它不能被RNA酶破壞，但卻可以被DNA酶所分解，證明這種新合成的大分子是DNA用RNA酶預先破壞RSV的RNA，再重復上述的試驗，則不能獲得這種大分子，說明這個DNA大分子是以RSV的RNA為模板合成的1969年，一個日本學者里子水谷來到Temin的實驗室，這是一個非常擅長實驗的年輕科學家。按Temin的設想，他們開始尋找RSV中存在“逆轉(zhuǎn)錄酶”的證據(jù)DNA

RNA

ProteinTranscriptionTranslationReplicationReplicationRe-Transcription修正中心法規(guī)據(jù)說，1975年Temin因發(fā)現(xiàn)逆轉(zhuǎn)錄酶而獲諾貝爾獎時，Bishop懊惱不已，因為早在1969年他就認為Temin的RNADNA的“前病毒理論”有可能是正確的，并且也進行了一些實驗，但不久由于資深同事的規(guī)勸而放棄了這方面的努力。但Bishop馬上意識到：逆轉(zhuǎn)錄酶的發(fā)現(xiàn)為逆轉(zhuǎn)錄病毒致癌的研究提供了一條新途徑。一個RSV，三個諾貝爾獎?。。?989年，UCSF的Bishop和Varmus根據(jù)逆轉(zhuǎn)錄病毒的復制機制發(fā)現(xiàn)了細胞癌基因，并獲諾貝爾獎。Cellularoncogene啟示：Perutz說:“科學創(chuàng)造如同藝術創(chuàng)造一樣，都不可能通過精心組織而產(chǎn)生”Bishop說:“許多人引以為豪的是一天工作16小時，工作安排要以分秒計……可是工作狂是思考的大敵，而思考則是科學發(fā)現(xiàn)的關鍵”Perutzsharedthe1962NobelPrizeforChemistrywithJohnKendrew,fortheirstudiesofthestructuresofhemoglobinandglobularproteins科學的本質(zhì)和藝術一樣，都需要直覺和想像力請給自己一些思考的時間吧！癌基因的分類目前對癌基因尚無統(tǒng)一分類的方法，一般有下面3種分類方法：一、按結(jié)構(gòu)特點分（6）類（一）src癌基因家族（二）ras癌基因家族（三）sis癌基因家族（四）myc癌基因家族（五）myb癌基因家族（六）其它：如fos，erb－A等。三、按細胞增殖調(diào)控蛋白特性分成（4）類（一）生長因子（二）受體類（三）細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)換器（四）細胞核因子二、按產(chǎn)物功能分（8）類（一）生長因子類（二）酪氨酸蛋白激酶（三）膜相關G蛋白（四）受體，無蛋白激酶活性（五）胞質(zhì)絲氨酸-蘇氨酸蛋白激酶（六）胞質(zhì)調(diào)控因子（七）核反式調(diào)控因子（八）其它:db1、bcl－2癌基因產(chǎn)物參與信號轉(zhuǎn)導

胞外信號作用于膜表面受體→胞內(nèi)信使物質(zhì)的生成便意味著胞外信號跨膜傳遞的完成。胞內(nèi)信使至少有：cAMP（環(huán)磷酸腺苷）IP3（三磷酸肌醇）PG（前列腺素）cGMP（環(huán)磷酸鳥苷）DG（二?；视停〤a2＋（鈣離子）CAM（鈣調(diào)素）主要機制是通過蛋白激酶活化引起底物蛋白一連串磷酸化的生物信號反應過程,跨膜機制涉及到：（一）質(zhì)膜上cAMP信使系統(tǒng)（二）質(zhì)膜上肌醇脂質(zhì)系統(tǒng)這兩個系統(tǒng)都是由受體鳥苷酸調(diào)節(jié)蛋白（GTP-regulatoryprotein，G蛋白）和效應酶（腺苷酸環(huán)化酶磷脂酶等）組成，有相似的信號轉(zhuǎn)導過程：即受體活化后引起GTP與不同G蛋白結(jié)合活化和抑制效應酶從而影響胞內(nèi)信使產(chǎn)生而發(fā)生不同的調(diào)控效應。（三）受體操縱的離子通道系統(tǒng)（四）受體酪氨酸蛋白激酶的轉(zhuǎn)導

（一）獲得性基因病

(acquiredgeneticdisease)例如：病毒感染激活原癌基因癌基因活化的機制

（二）染色體易位和重排使無活性的原癌基因轉(zhuǎn)位至強啟動子或增強子附近而被活化。與基因脆性位點相關。（三）基因擴增（四）點突變?nèi)?、癌基因的產(chǎn)物與功能（一）癌基因產(chǎn)物作用的一般特點1.目前發(fā)現(xiàn)c-onc均為結(jié)構(gòu)基因.2.癌基因產(chǎn)物可分布在膜質(zhì)核也可分泌至胞外.（二）癌基因產(chǎn)物分類1.細胞外生長因子：TGF-b2.跨膜生長因子受體:MAPK3.細胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導分子:Gprotein/Ras4.核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子

（三）癌基因產(chǎn)物的協(xié)同作用實驗證明，用ras或myc分別轉(zhuǎn)染細胞，可使細胞長期增殖，但不能轉(zhuǎn)化成癌細胞，在裸鼠體內(nèi)也不能形成腫瘤。但用ras+myc同時轉(zhuǎn)染細胞，則使細胞轉(zhuǎn)化成癌細胞。說明：致癌至少需要2種或以上的onc協(xié)同作用，2種onc在2條通路上發(fā)揮作用，由于細胞增殖調(diào)控是多因子，多階段影響的結(jié)果。而影響增殖分化的onc達幾十種之多，所以大多數(shù)人認為：癌發(fā)生是多階段多步驟的。Whatistumorsuppressorgene?腫瘤抑制基因（抗癌基因、抑癌基因）——是調(diào)節(jié)細胞正常生長和增殖的基因。當這些基因不能表達，或其產(chǎn)物失去活性時，細胞就會異常生長和增殖，最終導致細胞癌變。反之，若導入或激活它則可抑制細胞的惡性表型。——癌基因與抑癌基因相互制約，維持細胞增殖正負調(diào)節(jié)信號的相對穩(wěn)定。影響1歲的兒童“二次打擊”學說兩個等位基因同時突變視網(wǎng)膜母細胞瘤（Retinoblastoma）RB基因變異(13號染色體)

(1)脫磷酸化Rb蛋白（活性）與轉(zhuǎn)錄因子E2F結(jié)合，抑制基因的轉(zhuǎn)錄活性(2)磷酸化Rb蛋白（失活）與E2F解離，釋放E2F(3)E2F啟動基因轉(zhuǎn)錄(4)細胞進入增生階段(G1S)因此，Rb蛋白在控制細胞生長方面發(fā)揮重要作用一旦Rb基因突變可使細胞進入過度增生狀態(tài)RB基因的功能等位基因(allele)例如：花顏色基因位于一對同源染色體的同一位置上、控制相對性狀的兩個的基因叫等位基因(allele)一對相同的等位基因稱純合等位基因

一對不同的等位基因稱雜合等位基因

顯性基因隱性基因完全顯性不完全顯性共顯性問：女性的兩條X染色體基因應如何表達？拓展知識：X染色體基因中，有65%完全處于“休眠”狀態(tài)，20%僅在部分女性身上“休眠”，15%則完全逃離“休眠”狀態(tài)一旦其中一條X染色體被損壞，還可以由另一條X染色體來糾正男性卻只有一條X染色體，一旦它遭到破壞，男性就會患上血友病、色盲以及肌肉萎縮癥等各種遺傳病以前人們一直認為，在女性的兩條X染色體中，有一條染色體是完全不起作用或是處于“休眠”狀態(tài)的在Y染色體中，目前仍在“工作”的基因只剩下不到100個X染色體中“工作”的基因>1000個有一個這樣的故事：20年前一次意外事故，三個工人遭受鈷60（Co60)放射性核素的照射結(jié)果：一名工人不久死亡一名工人幾年后死于白血病最后一名工人20年后患糖尿病就診你知道醫(yī)生在為病人檢查時發(fā)現(xiàn)了什么嗎？鎖骨骨折肋骨串珠樣X光片發(fā)現(xiàn)廣泛性骨質(zhì)缺損骨髓檢查——漿細胞比例為30%左右（正常為0.6-1.3%）(多發(fā)性骨髓瘤）因此，多基因病涉及遺傳因素和環(huán)境因素物理因素化學因素生物因素自發(fā)因素2.多基因病(polygenicdisease)：性狀或疾病的遺傳方式取決于兩個以上微效基因的累加作用，同時還受環(huán)境因素的影響，因此這類性狀也稱為復雜性狀或復雜疾病（complexdisease）也叫：“復雜性狀疾病”近視(myopia)高血壓(hypertension)糖尿病(diabetes)精神分裂癥(schizophrenia)哮喘(asthma)腫瘤或癌

(tumororcancer)多基因病的遺傳要點數(shù)量性狀的遺傳基礎是兩對以上基因。這些基因之間沒有顯,隱性的區(qū)別,而是共顯性。每個基因?qū)Ρ硇偷挠绊懞苄?稱為微效基因。微效基因具有累加效應,即一個基因?qū)Ρ硇妥饔煤苄?但若干個基因共同作用,可對表型產(chǎn)生明顯影響。不僅遺傳因素起作用,環(huán)境因素具有明顯作用。例如：結(jié)腸癌（Coloncancer)相關基因：NGX6，SOX7，ITGB1，HSPA9B，MAPK8，PAG，

RANGAP1，SRC和CDC2等。相關信號通路：ras/MEK/ERK，JNK，Rb/E2F，PI3K/AKT及受體相互作用相關通路，免疫反應相關通路以及細胞黏附相關通路等。①早期原發(fā)癌生長②腫瘤血管形成③腫瘤細胞脫落并侵入基質(zhì)④進入脈管系統(tǒng)⑤癌栓形成⑥繼發(fā)組織器官定位生長⑦轉(zhuǎn)移癌繼續(xù)擴散例如：糖尿病(diabetes)依賴胰島素型糖尿病在位于第6號染色體上可能包含至少一個對I型糖尿病敏感的基因在人類基因組中，大約10個位點現(xiàn)在被發(fā)現(xiàn)似乎對I型糖尿病敏感其中：1)11號染色體位點IDDM2上的基因

2)葡萄糖激酶基因高血壓(hypertension)目前最受關注的是ATP2B1基因編碼一種膜蛋白，具有鈣泵特性能將高濃度細胞內(nèi)鈣泵出細胞外。精神神經(jīng)性疾病精神分裂癥基因表達改變/誘導增強家族史家暴基因本質(zhì)：基因組變異驚嚇—？—基因突變——精神病多基因病的遺傳：易患性(liability)易感性(susceptibility)發(fā)病閾值(threshold)易患性(liability)——在多基因病發(fā)生中，遺傳因素和環(huán)境因素共同作用決定一個個體患某種遺傳病的可能性。possibility遺傳因素(hereditaryfactors)環(huán)境因素(environmentalfactor)易感性(susceptibility)——特指由遺傳因素決定的患病風險，僅代表個體所含有的遺傳因素，易感性完全由基因決定?！谝欢ǖ沫h(huán)境條件下，易感性高低可代表易患性高低。riskwithdisease發(fā)病閾值(threshold)——當一個個體易患性高到一定限度就可能發(fā)病——這種由易患性所導致的多基因病發(fā)病最低限度稱為發(fā)病閾值minimum例如：三核苷酸拷貝數(shù)變異CGG(精氨酸)重復：——重復5-54次，正?！貜?-230次，攜帶者（敏感體質(zhì)）——重復230-4000次，發(fā)病

如：脆性X染色體綜合征智力低下患者細胞在缺乏胸腺嘧啶或葉酸的環(huán)境中培養(yǎng)時往往出現(xiàn)X-染色體發(fā)生斷裂男性發(fā)病1/1200-2500，女性發(fā)病1/1650-5000FragileXsyndrome閾值效應舉例：長臉，耳外凸智力低下語言障礙對外界反應遲鈍Copynumbervariation問：為什么是三核苷酸重復而不是4、5個？提示：三核苷酸處于閱讀框架內(nèi)，不容易破壞原有基因的開放閱讀框架(ORF)4、5個核苷酸不在ORF內(nèi)，變化容易對原有基因造成很大的影響，一般不容易積累保留癌蛋白抗原癌基因抑癌基因P53蛋白積聚，細胞周期變化P53等位基因丟失、點突變腫瘤形成腫瘤促進因子細胞表型變化相關基因作用P53基因阻滯細胞周期：G1和G2/M期

促進細胞調(diào)亡：bax/bcl2

維持基因組穩(wěn)定：核酸內(nèi)切酶活性

抑制腫瘤血管生成：Smad4P53基因可否用于治療癌癥？P53基因功能基因治療：是指以改變?nèi)祟愡z傳物質(zhì)為基礎的生物醫(yī)學治療。通過將人的正?；蚧蛴兄委熥饔玫腄NA導入人體靶細胞，去糾正基因的缺陷或者發(fā)揮治療作用。抑癌基因P53載體P53基因治療第三節(jié)分析文體特征和表現(xiàn)手法2大考點書法大家啟功自傳賞析中學生，副教授。博不精，專不透。名雖揚，實不夠。高不成，低不就。癱偏‘左’，派曾‘右’。面微圓，皮欠厚。妻已亡，并無后。喪猶新，病照舊。六十六，非不壽。八寶山，漸相湊。計平生，謚曰陋。身與名，一起臭?！举p析】寓幽默于“三字經(jīng)”，名利淡薄，人生灑脫，真乃大師心態(tài)。1.實用類文本都有其鮮明的文體特征，傳記的文體特征體現(xiàn)為作品的真實性和生動性。傳記的表現(xiàn)手法主要有以下幾個方面：人物表現(xiàn)的手法、結(jié)構(gòu)技巧、語言藝術和修辭手法。2.在實際考查中，對傳記中段落作用、細節(jié)描寫、人物陪襯以及環(huán)境描寫設題較多，對于材料的選擇與組織也常有涉及。3.考生復習時要善于借鑒小說和散文的知識和經(jīng)驗，同時抓住傳記的主旨、構(gòu)思以及語言特征來解答問題。傳記的文體特點是真實性和文學性。其中，真實性是傳記的第一特征，寫作時不允許任意虛構(gòu)。但傳記不同于一般的枯燥的歷史記錄，它具有文學性，它通過作者的選擇、剪輯、組接，傾注了愛憎的情感；它需要用藝術的手法加以表現(xiàn)，以達到傳神的目的?？键c一分析文體特征從哪些方面分析傳記的文體特征？一、選材方面1.人物的時代性和代表性。傳記里的人物都是某時代某領域較

突出的人物。2.選材的真實性和典型性。傳記的材料比較翔實，作者從傳主

的繁雜經(jīng)歷中選取典型的事例，來表現(xiàn)傳主的人格特點，有

較強的說服力。3.傳記的材料可以是重大事件，也可以是日常生活小事。[知能構(gòu)建]二、組材方面1.從時序角度思考。通過抓時間詞語，可以迅速理清文章脈絡，

把握人物的生活經(jīng)歷及思想演變過程。2.從詳略方面思考。組材是與主題密切相關的。對中心有用的，

與主題特別密切的材料，是主要內(nèi)容，則需濃墨重彩地渲染，

要詳細寫；與主題關系不很密切的材料，是次要內(nèi)容，則輕

描淡寫，甚至一筆帶過。三、句段作用和標題效果類別作用或效果開頭段內(nèi)容：開篇點題，渲染氣氛，奠定基調(diào)，表明情感。結(jié)構(gòu)：總領下文，統(tǒng)攝全篇；與下文某處文字呼應，為下文做鋪墊或埋下伏筆；與結(jié)尾呼應。中間段內(nèi)容：如果比較短，它的作用一般是總結(jié)上文，照應下文；如果比較長，它的作用一般是擴展思路，豐富內(nèi)涵，具體展示，深化主題。結(jié)構(gòu)：過渡，承上啟下，為下文埋下伏筆、鋪墊蓄勢。結(jié)尾段內(nèi)容：點明中心，深化主題，畫龍點睛，升華感情、卒章顯志，啟發(fā)思考。結(jié)構(gòu)：照應開頭；呼應前文；使結(jié)構(gòu)首尾圓合。標題①突出了敘述評議的對象。②設置懸念，激發(fā)讀者的閱讀興趣。③表現(xiàn)了傳主的精神或品質(zhì)。④點明了主旨，表達了作者的情感。⑤運用修辭，使文章內(nèi)涵豐富，意蘊深刻，增加了文章的厚度與深度。四、語言特色角度分析鑒賞傳記的類別自傳采用第一人稱，語言或幽默調(diào)侃或自然親切；他傳采用第三人稱，語言或樸實自然或文采斐然。語意和句式句子中的關鍵詞所包含的情感、態(tài)度等，整句與散句、推測與肯定、議論與抒情、祈使與反問等特殊句式，往往有著不同一般的表現(xiàn)力。這些都是分析語言的切入點。修辭的角度修辭一般是用來加強語言的表現(xiàn)力的。抓住修辭特點，就能從語言的表達效果上加以體味。語言風格含蓄與明快、文雅與通俗、生動與樸實、富麗與素淡、簡潔與繁復等。1.(2015·新課標全國卷Ⅰ)閱讀下面的文字，完成后面的題目。[即學即練]朱東潤自傳1896年我出生在江蘇泰興一個失業(yè)店員的家庭，早年生活艱苦，所受的教育也存在著一定的波折。21歲我到梧州擔任廣西第二中學的外語教師，23歲調(diào)任南通師范學校教師。1929年4月間，我到武漢大學擔任外語講師，從此我就成為大學教師。那時武漢大學的文學院長是聞一多教授，他看到中文系的教師實在太復雜，總想來一些變動。用近年的說法，這叫作摻沙子。我的命運是作為沙子而到中文系開課的。大約是1939年吧，一所內(nèi)遷的大學的中文系在學年開始，出現(xiàn)了傳記研究這一個課，其下注明本年開韓柳文。傳記文學也好，韓柳文學也不妨，但是怎么會在傳記研究這個總題下面開韓柳文呢？在當時的大學里，出現(xiàn)的怪事不少，可是這一項多少和我的興趣有關，這就決定了我對于傳記文學獻身的意圖。《四庫全書總目》有傳記類，指出《晏子春秋》為傳之祖，《孔子三朝記》為記之祖，這是三百年前的看法，現(xiàn)在用不上了。有人說《史記》《漢書》為傳記之祖，這個也用不上?！妒贰贰稘h》有互見法，對于一個人的評價，常常需要通讀全書多卷，才能得其大略?？墒窃趥饔浳膶W里，一個傳主只有一本書，必須在這本書里把對他的評價全部交代。是不是古人所作的傳、行狀、神道碑這一類的作品對于近代傳記文學的寫作有什么幫助呢？也不盡然。古代文人的這類作品，主要是對于死者的歌頌，對于近代傳記文學是沒有什么用處的。這些作品，畢竟不是傳記文學。除了史家和文人的作品以外，是不是還有值得提出的呢？有的，這便是所謂別傳。別傳的名稱，可能不是作者的自稱而是后人認為有別于正史，因此稱為“別傳”。有些簡單一些，也可稱為傳敘。這類作品寫得都很生動，沒有那些阿諛奉承之辭，而且是信筆直書，對于傳主的錯誤和缺陷，都是全部奉陳。是不是可以從國外吸收傳記文學的寫作方法呢？當然可以，而且有此必要。但是不能沒有一個抉擇。羅馬時代的勃路塔克是最好的了，但是他的時代和我們相去太遠，而且他的那部大作，所著重的是相互比較而很少對于傳主的刻畫，因此我們只能看到一個大略而看不到入情入理的細致的分析。英國的《約翰遜博士傳》是傳記文學中的不朽名作，英國人把它推重到極高的地位。這部書的細致是到了一個登峰造極的地位，但是的確也難免有些瑣碎。而且由于約翰遜并不處于當時的政治中心，其人也并不能代表英國的一般人物，所以這部作品不是我們必須模仿的范本。是不是我國已經(jīng)翻譯過來的《維多利亞女王傳》可以作為范本呢？應當說是可以，由于作者著墨無多，處處顯得“頰上三毫”的風神?？墒侵袊娜讼鄠鞯淖龇?，正是走的一樣的道路，所以無論近代人怎么推崇這部作品，總還不免令人有“穿新鞋走老路”的戒心。國內(nèi)外的作品讀過一些，也讀過法國評論家莫洛亞的傳記文學理論，是不是對于傳記文學就算有些認識呢？不算，在自己沒有動手創(chuàng)作之前，就不能算是認識。這時是1940年左右，中國正在艱苦抗戰(zhàn)，我只身獨處，住在四川樂山的郊區(qū)，每周得進城到學校上課，生活也很艱苦。家鄉(xiāng)已經(jīng)陷落了，妻室兒女，一家八口，正在死亡線上掙扎。我決心把研讀的各種傳記作為范本，自己也寫出一本來。我寫誰呢？我考慮了好久，最后決定寫明代的張居正。第一，因為他能把一個充滿內(nèi)憂外患的國家拯救出來，為垂亡的明王朝延長了七十年的壽命。第二，因為他不顧個人的安危和世人的唾罵，終于完成歷史賦予他的使命。他不是沒有缺點的，但是無論他有多大的缺點，他是唯一能夠拯救那個時代的人物。(有刪改)【相關鏈接】①自傳和傳人，本是性質(zhì)類似的著述，除了因為作者立場的不同，因而有必要的區(qū)別以外，原來沒有很大的差異。但是在西洋文學里，常會發(fā)生分類的麻煩。我們則傳敘二字連用指明同類的文學。同時因為古代的用法，傳人曰傳，自敘曰敘，這種分別的觀念，是一種原有的觀念，所以傳敘文學，包括敘、傳在內(nèi)，絲毫不感覺牽強。(朱東潤《關于傳敘文學的幾個名詞》)②朱先生確是有儒家風度的學者，一身正氣，因此他所選擇的傳主對象，差不多都是關心國計民生的有為之士。他強調(diào)關切現(xiàn)實，拯救危亡，尊崇氣節(jié)與品格。這都是可以理解的。(傅璇琮《理性的思索和情感的傾注——讀朱東潤先生史傳文學隨想》)★作為帶有學術性質(zhì)的自傳，本文有什么特點？請簡要回答。答：________________________________________________解析本題考查分析文本的文體基本特征和語言特色。解答時，要在閱讀的基礎上，了解文章的文體特征、內(nèi)容的側(cè)重點、內(nèi)容表達的特征。本文作為一篇帶有學術性質(zhì)的自傳，突出特點之一就是偏重學術經(jīng)歷，介紹了自己的傳記文學觀及其形成過程。文章的開頭與結(jié)尾，將自己的生平與學術結(jié)合起來，尤其是為張居正寫傳原因的解說，結(jié)合當時的社會背景和自己家庭的情況，更是呈現(xiàn)出學術背后的家國情懷。在行文方面，語言平易自然，穿插“怎么會在傳記研究這個總題下面開韓柳文呢？”“我寫誰呢？”等口語，語言平白如話，就像面對面閑談一樣。答案①偏重學術經(jīng)歷，主要寫自己的傳記文學觀及其形成過程；②寫生平與寫學術二者交融，呈現(xiàn)學術背后的家國情懷；③行文平易自然，穿插使用口語，就像和老朋友閑談一樣。1.一般和具體結(jié)合我們在對文本的一般性特征進行分析的同時，也應該注意到富有個性的“具體”的特征。[思維建模]分析文體特征2要領2.注意效果解讀

分析文體特征時，不能僅僅停留在辨別認知的層面上，而必須懂得去對它們做“效果”分析。對“效果”的分析不外乎從這樣的兩個方面去考慮：一是從表達者的表達這個方面去考慮，看他采用這樣的方式會給他的表達帶來怎樣的好處；二是從閱讀者這個方面考慮，看他這樣做可以對讀者的閱讀產(chǎn)生什么樣的積極的效果。分析傳記的文體特征?咀嚼經(jīng)典高考題目提升審題答題技能高考曾經(jīng)這樣考品答案，悟技巧，不丟分1.(2014·遼寧卷)本文第一自然段有何作用？請簡要分析。(6分)(《侯仁之：城市的知音》)①交代侯仁之選擇歷史專業(yè)的原因；②寫出了侯仁之對國家民族命運的關注，使傳主形象更加豐滿；③體現(xiàn)了傳記的真實性；④為下文介紹侯仁之的學術研究及成就做鋪墊。(答出1點給1分，2點給3分，3點給5分，4點給6分)2.(2013·福建卷)文章已有“《夢里京華》”一例，為何還要例舉“委曲求全”？請簡要分析。(4分)(《那一種遙遠的幽默》)①增強說服力，進一步突出王文顯劇作別有一番幽默，肯定他喜劇創(chuàng)作的能力和影響。②引出下文對王文顯任代理校長時行事風格的敘寫，形成對比，以突出王文顯治校的持重務實，一絲不茍。(每點2分，意思對即可。)3.(2012·新課標全國卷)12(1)選項E：本文擷取謝希德人生的若干片斷，描寫她熱愛祖國、獻身科學、關愛親人的事跡，表現(xiàn)了一位杰出女性的偉大人格。(√)(《謝希德的誠與真》)本選項考查對文體特征的理解，涉及文章的選材、文本的主要內(nèi)容與主題等內(nèi)容。(正確選項，3分)因傳記是記載人物生平或事跡的一類記敘文體，它的表達技巧比較接近于小說和散文，可以說文學類文本的表現(xiàn)手法都與傳記相通。由于傳記的文體特征，需要格外注意其他人物對傳主的映襯、細節(jié)描寫、引用和議論等方面?？键c二分析表現(xiàn)手法3題型(一)敘述1.順敘的作用(效果)：思路清晰，結(jié)構(gòu)條理。2.倒敘的作用(效果)[知能構(gòu)建](1)能增強文章的生動性，使文章產(chǎn)生懸念，更能引人入勝。(2)強調(diào)作用，這一段主要寫了……放到開頭強調(diào)了傳主的……(與傳主精神、品質(zhì)等的關系)。(3)表達了作者對傳主怎樣的情感(與作者情感的關系)。(4)深化了主旨(與主旨的關系)。(5)使文章結(jié)構(gòu)富于變化，避免了敘述的平淡和結(jié)構(gòu)的單調(diào)。3.插敘的作用(效果)(1)內(nèi)容上：①(如果是引述他人的話，或是傳主自己的話、書信等)突出了傳記的真實性，使文章內(nèi)容更充實。②深化了文章主題。③使人物形象更加鮮明。④(如果是引述他人的話等就屬于側(cè)面描寫)側(cè)面烘托了傳主的……⑤(如果插敘的語段拿傳主和其他人對比)通過對比，襯托出了傳主的……(2)結(jié)構(gòu)上：①避免了結(jié)構(gòu)的平鋪直敘，使行文起伏多變，使結(jié)構(gòu)更加緊湊集中。②對……做了必要的鋪墊照應，補充說明。(二)描寫(主要是細節(jié)描寫)1.描寫的三種作用(1)讓傳主形象更全面完整，更立體化。傳主形象是由多個側(cè)面組成的，只表現(xiàn)其偉大的一面