A2組阿托品拮抗課件

目錄IntroductionMaterialsandmethodsResultsDiscussionIntroduction激動(dòng)藥(agonist)：與受體既有親和力又有內(nèi)在活性藥物完全激動(dòng)藥:

α=1部分激動(dòng)藥：

α<1Introduction拮抗藥(antagonist)：與受體有親和力，而無內(nèi)在活性的藥物（α=0）競爭性拮抗藥：

可逆性結(jié)合

量效反應(yīng)曲線：平行右移。仍可達(dá)到Emax非競爭性拮抗藥：不可逆性結(jié)合量效反應(yīng)曲線：水平壓低。不可達(dá)到EmaxpD2:親和力參數(shù)pD2=-logKD.

KD為引起最大效應(yīng)一半時(shí)（即50%受體被占領(lǐng)）所需的藥物劑量。pD2與D及R的親和力成正比。KD是解離常數(shù)，KD越小藥物與受體的親和力越大。IntroductionpA2:競爭性拮抗藥對相應(yīng)激動(dòng)劑的拮抗程度pA2＝－log[A2][A2]:半拮抗?jié)舛?。在拮抗藥的這一濃度下，可使激動(dòng)藥在2倍濃度時(shí)所產(chǎn)生的效應(yīng)恰好等于未加入拮抗藥時(shí)激動(dòng)藥引起的效應(yīng)。pA2值的大小反映競爭性拮抗藥與受體的親和力。pA2值越大，拮抗作用越強(qiáng)。pA2的意義:表示競爭性拮抗劑拮抗強(qiáng)度的參數(shù)；鑒定多種器官上與同種激動(dòng)劑反應(yīng)的受體是否為同一類型；鑒定多種激動(dòng)劑是否作用于同一受體。Introduction圖1.1競爭性拮抗藥對激動(dòng)藥量效曲線的影響阿托品（atropine）阿托品（atropine）的作用機(jī)制:為競爭性拮抗乙酰膽堿或膽堿受體激動(dòng)藥對M膽堿受體的激動(dòng)作用。阿托品與M膽堿受體結(jié)合，因內(nèi)在活性很小，一般不產(chǎn)生激動(dòng)作用，卻能阻斷乙酰膽堿或膽堿受體激動(dòng)藥與受體結(jié)合，結(jié)果拮抗了它們的作用。阿托品很大劑量或中毒劑量也有阻斷神經(jīng)節(jié)N1受體的作用。阿托品對各種M受體亞型的選擇性較低，對M1，M2，M3受體都有阻斷作用。乙酰膽堿（acetylcholine）乙酰膽堿對胃腸道的作用：乙酰膽堿（ACh）為膽堿能神經(jīng)遞質(zhì)，其性質(zhì)不穩(wěn)定，極易被體內(nèi)AChE水解，作用于回腸M3受體，使平滑肌鈣離子通道開放，鈣離子內(nèi)流增加，胞漿鈣離子增多，開放鈣信號(hào)通路，最終導(dǎo)致平滑肌收縮。Materials實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇：豚鼠回腸標(biāo)本制備：

取豚鼠回腸約2cm，對角結(jié)扎，一端固定在浴槽的通氣鉤上，另一端垂直連接于肌力換能器的感應(yīng)片上，調(diào)節(jié)基礎(chǔ)張力約為0.5g（記錄過程中張力持續(xù)變大并出現(xiàn)波動(dòng)）。腸管在槽內(nèi)穩(wěn)定十五分鐘后，記錄正常收縮活動(dòng)。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇：豚鼠回腸多種動(dòng)物的離體腸道可用來試驗(yàn)傳出神經(jīng)藥物，一般多用離體豚鼠及兔的腸道。豚鼠回腸的自發(fā)活動(dòng)較少，描記時(shí)有穩(wěn)定的基線，適合作藥物鑒定用。兔腸（尤其空腸）具有規(guī)則的擺動(dòng)運(yùn)動(dòng)，適用于觀察藥物對此動(dòng)物的影響。附：離體豚鼠回腸可用于觀察乙酰膽堿（Ach）和擬膽堿藥的劑量－反應(yīng)關(guān)系。離體兔空腸有節(jié)律性收縮活動(dòng)，可觀察腎上腺素、去毒豆堿等藥物對空腸擺動(dòng)運(yùn)動(dòng)的影響。大白鼠胃底條是檢定兒茶酚胺類藥物和5-羥色胺（5-HT）最敏感的標(biāo)本。雞食道由副交感神經(jīng)支配，因此離體雞食道標(biāo)本適合于試驗(yàn)擬副交感藥物。由于其作用

不能完全被神經(jīng)節(jié)阻斷藥所阻滯，故不宜用于試驗(yàn)作用于神經(jīng)節(jié)的藥物。GB/T7714吳祥林.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇[J].微生物學(xué)免疫學(xué)進(jìn)展,1982,(1).GB/T7714李俐.小白鼠離體回腸收縮抑制實(shí)驗(yàn)[J].中國燒傷創(chuàng)瘍雜志,1990,(1).Methods儀器安裝調(diào)試標(biāo)本準(zhǔn)備給藥方案數(shù)據(jù)處理儀器安裝調(diào)試標(biāo)本準(zhǔn)備取豚鼠回腸約2cm，對角結(jié)扎，一端固定在浴槽的通氣鉤上，另一端垂直連接于肌力換能器的感應(yīng)片上，調(diào)節(jié)基礎(chǔ)張力約為0.5g（記錄過程中張力持續(xù)變大并出現(xiàn)波動(dòng)）。腸管在槽內(nèi)穩(wěn)定十五分鐘后，記錄正常收縮活動(dòng)。給藥方案（1）用微量注射器向麥?zhǔn)显〔蹆?nèi)從低到高加入Ach溶液，當(dāng)每個(gè)濃度引起的腸管收縮反應(yīng)達(dá)到最大時(shí)，立即累加另一個(gè)濃度，直到收縮反應(yīng)不再增加。（2）用臺(tái)氏液沖洗標(biāo)本3～5次，回腸恢復(fù)正常后，加入5×10-5mol/L阿托品20ul后，重復(fù)步驟（1）。（3）用臺(tái)氏液沖洗標(biāo)本3～5次，回腸恢復(fù)正常后，加入5×10-4mol/L阿托品20ul后，重復(fù)步驟（1）。（4）用臺(tái)氏液沖洗標(biāo)本3～5次，回腸恢復(fù)正常后，加入5×10-3mol/L阿托品20ul后，重復(fù)步驟（1）。1.量效曲線圖

2.肌張力圖

3.PD2的計(jì)算

4.PA2的計(jì)算

5.EC50計(jì)算結(jié)果

Results1.量效曲線圖2.1乙酰膽堿累積量效關(guān)系曲線①有效濃度（閾濃度）②半數(shù)有效量（EC50

）③最大效應(yīng)（Emax）④效價(jià)強(qiáng)度圖2.2不加乙酰膽堿的肌張力圖2.肌張力圖圖2.3第一次加阿托品的肌張力圖圖2.4第二次加阿托品的肌張力圖圖2.5第三次加阿托品的肌張力圖現(xiàn)象與分析：1.乙酰膽堿為腸道M膽堿受體的激動(dòng)劑，回腸產(chǎn)生的張力幅度在一定范圍內(nèi)隨乙酰膽堿濃度的升高而升高2.由于存在回腸神經(jīng)系統(tǒng)中的乙酰膽堿酯酶不斷分解乙酰膽堿，造成乙酰膽堿濃度低于閾濃度時(shí)回腸張力曲線會(huì)下降，因此只有維持一定的乙酰膽堿閾濃度，回腸才能持續(xù)收縮，回腸張力曲線才會(huì)持續(xù)上升。3.加入阿托品后，前幾次加入乙酰膽堿回腸均不產(chǎn)生張力變化：在加乙酰膽堿前加入阿托品，阿托品阻斷M膽堿受體，隨著乙酰膽堿濃度的升高，乙酰膽堿不斷與阿托品競爭M膽堿受體，當(dāng)乙酰膽堿達(dá)到一定濃度時(shí)，回腸才產(chǎn)生張力變化。4.在第二次和第三次加入阿托品后，回腸的基礎(chǔ)張力下降，以第三次加入阿托品時(shí)基礎(chǔ)張力下降最為顯著：阿托品與內(nèi)源性乙酰膽堿競爭M膽堿受體，拮抗內(nèi)源性乙酰膽堿的作用，導(dǎo)致加入阿托品時(shí)會(huì)場基礎(chǔ)張力下降。3.pD2的計(jì)算1、阿托品=0mol/L時(shí)pD2計(jì)算結(jié)果y—張力百分率(％)；x—乙酰膽堿濃度濃度(－㏒mol/L)回歸曲線方程：y＝143.73－17.82xpD2:當(dāng)y＝50時(shí),對應(yīng)的x值。pD2＝5.26(－㏒mol/L)圖2.6未加阿托品時(shí)Ach和張力百分率回歸曲線2、阿托品=5*10^-8mol/L時(shí)pD2計(jì)算結(jié)果y—張力百分率(％)；x—乙酰膽堿濃度濃度(－㏒mol/L)回歸曲線方程：y＝105.53－14.90xpD2*:當(dāng)y＝50時(shí),對應(yīng)的x值。pD2*＝3.73(－㏒mol/L)圖2.7第一次加阿托品時(shí)Ach和張力百分率回歸曲線3、阿托品=5*10^-7mol/L時(shí)pD2計(jì)算結(jié)果y—張力百分率(％)x—乙酰膽堿濃度濃度(－㏒mol/L)回歸曲線方程：y＝87.93－12.79xpD2*:當(dāng)y＝50時(shí),對應(yīng)的x值。pD2*＝2.96(－㏒mol/L)圖2.8第二次加阿托品時(shí)Ach和張力百分率回歸曲線4、阿托品=5*10^-6mol/L時(shí)pD2計(jì)算結(jié)果y—張力百分率(％)x—乙酰膽堿濃度(－㏒mol/L)回歸曲線方程：y＝35.70－5.39xpD2*:當(dāng)y＝50時(shí),對應(yīng)的x值。pD2*＝-2.65(－㏒mol/L)圖2.9第三次加阿托品時(shí)Ach和張力百分率回歸曲線pD2的計(jì)算PD2值(－㏒mol/L)不加阿托品時(shí)5.26阿托品=5*10^-8mol/L時(shí)3.73阿托品=5*10^-7mol/L時(shí)2.96阿托品=5*10^-6mol/L時(shí)-2.65pD2分析：pD2隨著阿托品濃度的升高而變?。簆D2反映乙酰膽堿與回腸M膽堿受體的親和力，即50%受體被乙酰膽堿占領(lǐng)的濃度負(fù)對數(shù)，由于阿托品濃度的升高，需要的乙酰膽堿濃度就升高，pD2就變小。4.pA2的計(jì)算pA2結(jié)果A1＝㏒^-1(pD2):表示未加入阿托品前乙酰膽堿產(chǎn)生50％最大效應(yīng)所需的克分子濃度。A2＝㏒^-1(pD2*):表示拮抗劑阿托品存在時(shí)乙酰膽堿產(chǎn)生相同效應(yīng)所需的克分子濃度。(A2－A1)／A1:表示達(dá)到原有效應(yīng)所需增加激動(dòng)藥乙酰膽堿額濃度占原用激動(dòng)藥濃度的百分比。y——㏒(A2／A1－1);x——阿托品濃度(－㏒mol/L)回歸曲線方程：y＝y(tǒng)＝24.06－3.20xpA2:當(dāng)A2＝2*A1時(shí);即y＝0時(shí),對應(yīng)的x值。pA2＝7.52(－㏒mol/L)5.EC50計(jì)算結(jié)果EC50計(jì)算結(jié)果線性方程EC50值不加阿托品時(shí)y=0.1303x+2E-06R2=0.99841.53E-05阿托品=5*10^-8mol/L時(shí)y=0.1442x+9E-06R2=0.9896.24E-05阿托品=5*10^-7mol/L時(shí)y=0.1458x+2E-05R2=0.9645

1.37E-04阿托品=5*10^-6mol/L時(shí)y=0.2652x+0.0001R2=0.60323.77E-04EC50分析：EC50隨著阿托品濃度的升高而升高：EC50即半數(shù)有效量，50%受體被乙酰膽堿占領(lǐng)時(shí)的藥物濃度，由于阿托品濃度的升高，需要用來占領(lǐng)受體的乙酰膽堿濃度就升高，

EC50就變大。Discussion-最大效應(yīng)（Emax）

理論：阿托品為乙酰膽堿的競爭性拮抗劑，量效曲線應(yīng)平行右移，Emax不變現(xiàn)象：圖1.1中四條量效曲線均未達(dá)到Emax猜測：加入阿托品后乙酰膽堿量效曲線的Emax可能超過未加阿托品的乙酰膽堿量效曲線探索：增加乙酰膽堿的濃度2/1.5/1/0.5繼續(xù)實(shí)驗(yàn)Discussion-最大效應(yīng)（Emax）

猜測的依據(jù)Ⅰ型增強(qiáng)：拮抗劑濃度較低時(shí)，表現(xiàn)為累積量效曲線左移Ⅱ型增強(qiáng)：拮抗劑濃度較高時(shí)，表現(xiàn)為