培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化課件

培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化1ppt課件培養(yǎng)液中酵母菌1ppt課件探究：培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化目的要求1、學(xué)習(xí)利用血球計(jì)數(shù)板進(jìn)行微生物計(jì)數(shù)的方法2、實(shí)驗(yàn)探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化3、注意樣方法的應(yīng)用4、體會(huì)影響種群數(shù)量變化的因素2ppt課件探究：培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化目的要求2ppt課件1、酵母菌的繁殖方式主要是:2、酵母菌的呼吸方式是:兼性厭氧(可進(jìn)行有氧呼吸和無(wú)氧呼吸)回顧思考:出芽生殖3、酵母菌的培養(yǎng)條件要注意那些問(wèn)題?比如要用適宜的溫度培養(yǎng),調(diào)節(jié)好PH值,溶氧量的控制等。3ppt課件1、酵母菌的繁殖方式主要是:2、酵母菌的呼吸方式是:兼性厭氧一、血球計(jì)數(shù)板4ppt課件一、血球計(jì)數(shù)板4ppt課件1、血球計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)

血球計(jì)數(shù)板是一種專(zhuān)門(mén)用于計(jì)算較大單細(xì)胞微生物數(shù)量的儀器，由一塊比普通載玻片厚的特制玻片制成的玻片中有四條下凹的槽，構(gòu)成三個(gè)平臺(tái)。中間的平臺(tái)較寬，其中間又被一短橫槽隔為兩半，每半邊上面刻有一個(gè)方格網(wǎng)。5ppt課件1、血球計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)血球計(jì)數(shù)板是一種專(zhuān)門(mén)用于計(jì)算較大大方格中方格小方格6ppt課件大方格中方格小方格6ppt課件

方格網(wǎng)上刻有9個(gè)大方格，其中只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室，供微生物計(jì)數(shù)用。

大方格的長(zhǎng)和寬各為1mm，深度為0.1mm，即1mm×1mm×0.1mm，其容積為0.1mm3；大方格的長(zhǎng)和寬各為2mm，深度為0.1mm，即2mm×2mm×0.1mm，其容積為0.4mm37ppt課件方格網(wǎng)上刻有9個(gè)大方格，其中只有中間的一個(gè)大方格為計(jì)數(shù)室，計(jì)數(shù)室通常也有兩種規(guī)格16×25型：即大方格內(nèi)分為16中格，每一中格又分為25小格25×16型：即大方格內(nèi)分為25中格，每一中格又分為16小格。

不管計(jì)數(shù)室是哪一種構(gòu)造，其每一大方格都是由16×25=25×16=400個(gè)小方格組成。

8ppt課件計(jì)數(shù)室通常也有兩種規(guī)格16×25型：25×16型：2、計(jì)數(shù)16×25型：

一般取四角的四個(gè)中方格（100個(gè)小方格）計(jì)數(shù)25×16型：一般計(jì)數(shù)四個(gè)角和中央的五個(gè)中方格（80個(gè)小方格）的細(xì)胞數(shù)。

9ppt課件2、計(jì)數(shù)16×25型：25×16型：9ppt課件3、計(jì)算

以1mm×1mm×0.1mm型為例

計(jì)數(shù)室容積為0.1mm3，則每個(gè)小方格的容積為1/4000mm3

。100個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)/100×400×10000×稀釋倍數(shù)

酵母細(xì)胞個(gè)數(shù)／1mL=80個(gè)小方格細(xì)胞總數(shù)/80×400×10000×稀釋倍數(shù)

10ppt課件3、計(jì)算以1mm×1mm×0.1mm型為例例1通常用血球計(jì)數(shù)板對(duì)培養(yǎng)液中酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，若計(jì)數(shù)室為1mm×1mm×0.1mm方格，由400個(gè)小方格組成。若多次重復(fù)計(jì)數(shù)后，算得每個(gè)小方格中平均有5個(gè)酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數(shù)有

個(gè)。2×10811ppt課件例1通常用血球計(jì)數(shù)板對(duì)培養(yǎng)液中酵母菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，若計(jì)數(shù)室例2檢測(cè)員將1mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測(cè)的方法檢測(cè)每毫升藍(lán)藻的數(shù)量；將蓋玻片放在計(jì)數(shù)室上，用吸管吸取少許培養(yǎng)液使其自行滲入計(jì)數(shù)室，并用濾紙吸去多余液體。已知每個(gè)計(jì)數(shù)室由25×16＝400個(gè)小格組成，容納液體的總體積為0．1mm3。

現(xiàn)觀察到圖中該計(jì)數(shù)室所示a、b、c、d、e5個(gè)中格80個(gè)小格內(nèi)共有藍(lán)藻n個(gè)，則上述水樣中約有藍(lán)藻

個(gè)／mL。5n×10512ppt課件例2檢測(cè)員將1mL水樣稀釋10倍后，用抽樣檢測(cè)的方法4、血球計(jì)數(shù)板的使用方法步驟③計(jì)數(shù)：稍待片刻（約5min），待酵母菌細(xì)胞全部沉降到計(jì)數(shù)室底部后，將計(jì)數(shù)板放在載物臺(tái)的中央，先在低倍鏡下找到計(jì)數(shù)室所在位置后，再轉(zhuǎn)換高倍鏡觀察、計(jì)數(shù)并記錄。①鏡檢計(jì)數(shù)室：在加樣前，先對(duì)計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室進(jìn)行鏡檢。若有污物，則需清洗，吹干后才能進(jìn)行計(jì)數(shù)。②加樣品：將清潔干燥的血球計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)室上加蓋專(zhuān)用的蓋玻片，用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入，一次性充滿計(jì)數(shù)室，防止產(chǎn)生氣泡，充入細(xì)胞懸液的量以不超過(guò)計(jì)數(shù)室臺(tái)面與蓋玻片之間的矩形邊緣為宜。多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去。13ppt課件4、血球計(jì)數(shù)板的使用方法步驟③計(jì)數(shù)：①鏡檢計(jì)數(shù)室：②5、血球計(jì)數(shù)板的使用注意事項(xiàng)①?gòu)脑嚬苤形雠囵B(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之前，要將試管輕輕震蕩幾下，這樣使酵母菌分布均勻，防止酵母凝聚沉淀，提高計(jì)數(shù)的代表性和準(zhǔn)確性，求得的培養(yǎng)液中的酵母菌數(shù)量誤差小。②如果一個(gè)小方格內(nèi)酵母菌過(guò)多，難以數(shù)清，應(yīng)當(dāng)對(duì)培養(yǎng)液進(jìn)行稀釋以便于酵母菌的計(jì)數(shù)。具體方法是：搖勻試管，取1mL酵母菌培養(yǎng)液，加入成倍的無(wú)菌水稀釋?zhuān)♂宯倍后，再用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，所得數(shù)值乘以稀釋倍數(shù)。以每小方格內(nèi)含有4～5個(gè)酵母細(xì)胞為宜。特別是在培養(yǎng)后期的樣液需要稀釋后計(jì)數(shù)。14ppt課件5、血球計(jì)數(shù)板的使用注意事項(xiàng)①?gòu)脑嚬苤形雠囵B(yǎng)液進(jìn)行計(jì)數(shù)之③對(duì)于壓在方格界線上的酵母菌應(yīng)當(dāng)計(jì)數(shù)同側(cè)相鄰兩邊上的菌體數(shù)，一般可采取“數(shù)上線不數(shù)下線，數(shù)左線不數(shù)右線”的原則處理，另兩邊不計(jì)數(shù)。④對(duì)每個(gè)樣品可計(jì)數(shù)三次，再取其平均值。⑤計(jì)數(shù)時(shí)應(yīng)不時(shí)調(diào)節(jié)焦距，才能觀察到不同深度的菌體。

⑥血球計(jì)數(shù)板使用后，用自來(lái)水沖洗，切勿用硬物洗刷，以免損壞網(wǎng)格。

15ppt課件③對(duì)于壓在方格界線上的酵母菌應(yīng)當(dāng)計(jì)數(shù)同側(cè)相鄰兩邊上的菌體數(shù)1、研究過(guò)程測(cè)定定期取樣測(cè)細(xì)胞數(shù)目2、測(cè)定方法測(cè)重量濕重干重（一）研究方法二、微生物的種群數(shù)量變化在恒定容積液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)16ppt課件1、研究過(guò)程測(cè)定定期取樣測(cè)細(xì)胞數(shù)目2、測(cè)定方法測(cè)重量濕重干重細(xì)菌數(shù)目的對(duì)數(shù)時(shí)間01234細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線（二）種群數(shù)量變化規(guī)律1：調(diào)整期2：對(duì)數(shù)期3：穩(wěn)定期4：衰亡期17ppt課件細(xì)菌數(shù)目的對(duì)數(shù)時(shí)間01234細(xì)菌的生長(zhǎng)曲線（二）種群數(shù)量變化細(xì)菌數(shù)目的對(duì)數(shù)時(shí)間01234細(xì)菌的生長(zhǎng)速率時(shí)間01234細(xì)菌生長(zhǎng)曲線細(xì)菌生長(zhǎng)速率曲線該怎樣畫(huà)呢？18ppt課件細(xì)菌數(shù)目的對(duì)數(shù)時(shí)間01234細(xì)菌的生長(zhǎng)速率時(shí)間01234細(xì)菌

目的：使微生物的生長(zhǎng)較長(zhǎng)時(shí)間的維持在穩(wěn)定期。

優(yōu)點(diǎn)：縮短了培養(yǎng)周期,提高設(shè)備利用率,便于自動(dòng)化管理。連續(xù)培養(yǎng)19ppt課件目的：使微生物的生長(zhǎng)較長(zhǎng)時(shí)間的維持在穩(wěn)定期。例2（08江蘇卷）為研究酵母菌種群密度的動(dòng)態(tài)變化，某同學(xué)按下表所列條件進(jìn)行了A、B、C和D共4組實(shí)驗(yàn)，用1000mL錐形瓶作為培養(yǎng)器皿，棉塞封口，在25℃下靜置培養(yǎng)，其他實(shí)驗(yàn)條件均相同，定時(shí)用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果繪出的酵母菌種群密度變化曲線圖如下，請(qǐng)分析回答以下問(wèn)題。1）圖中曲線①、②和③分別是_____組、______組和______組的結(jié)果。D

BA2）B組和A組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同的原因是B組____________。培養(yǎng)液較多，與空氣接觸面積較小，故供氧較少

3）D組和B組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同的原因是D組____________。葡萄糖濃度較低，故營(yíng)養(yǎng)物供應(yīng)較少

4）在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，直接從靜置的培養(yǎng)瓶中取培養(yǎng)原液計(jì)數(shù)的做法是錯(cuò)誤的，正確的方法是

和

。搖勻培養(yǎng)液后再取樣培養(yǎng)后期的樣液稀釋后再計(jì)數(shù)5）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用試管刷蘸洗滌劑擦洗血球計(jì)數(shù)板的做法是錯(cuò)誤的，正確的方法是

浸泡和沖洗

20ppt課件例2（08江蘇卷）為研究酵母菌種群密度的動(dòng)態(tài)變化，某同學(xué)按細(xì)菌細(xì)胞數(shù)目的測(cè)定待測(cè)樣品等量的已知含量的紅細(xì)胞混勻涂抹紅細(xì)胞細(xì)菌測(cè)定：紅細(xì)胞數(shù)目細(xì)菌數(shù)目計(jì)算單位體積內(nèi)的細(xì)菌數(shù)目21ppt課件細(xì)菌細(xì)胞數(shù)目的測(cè)定待測(cè)樣品等量的已知含量的紅細(xì)胞混勻涂抹紅細(xì)菌重量的測(cè)定取樣：取一定體積的培養(yǎng)液離心分離、反復(fù)洗滌稱(chēng)濕重烘干稱(chēng)干重22ppt課件細(xì)菌重量的測(cè)定取樣：取一定體積的培養(yǎng)液離心分離、反復(fù)洗滌稱(chēng)濕

1、調(diào)整期采用對(duì)數(shù)期的菌體作為菌種、增加接種量、代謝活躍；體積增大；分裂遲緩。適應(yīng)新環(huán)境1）主要特征：2）原因：3）人工控制（縮短調(diào)整期）：23ppt課件1、調(diào)整期采用對(duì)數(shù)期的菌體作為菌種、代謝活躍；體積增大；分個(gè)體：代謝旺盛；分裂最快；個(gè)體形態(tài)和生理特征穩(wěn)定。群體：繁殖＞死亡1）主要特征：2）應(yīng)用：作生產(chǎn)菌種，科研材料。2、對(duì)數(shù)期24ppt課件個(gè)體：代謝旺盛；分裂最快；個(gè)體形態(tài)和1）主要特征：2）應(yīng)用：3、穩(wěn)定期個(gè)體：積累有害代謝產(chǎn)物；有些出現(xiàn)芽孢。群體：活菌數(shù)量最多；繁殖＝死亡1）主要特征：2）原因：生存條件相對(duì)惡化：營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗；有害代謝產(chǎn)物積累；PH改變種內(nèi)斗爭(zhēng)最激烈。25ppt課件3、穩(wěn)定期個(gè)體：積累有害代謝產(chǎn)物；有些出現(xiàn)芽孢。1）主要特征個(gè)體：細(xì)胞形態(tài)多樣群體：活菌數(shù)急劇下降；繁殖＜死亡1）主要特征：2）原因：生存環(huán)境極度惡化（營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消耗、有害代謝產(chǎn)物積累、PH