藥物的鑒別試驗專題知識講座培訓(xùn)課件

復(fù)習(xí)回顧Basicregularityofdruginspection取樣外觀性狀鑒別檢查含量測定檢驗結(jié)果檢驗報告書7/26/20231藥物的鑒別試驗專題知識講座掌握鑒別試驗的目的、項目常用鑒別方法與選擇熟悉鑒別試驗的影響因素與注意事項了解鑒別試驗方法的驗證學(xué)習(xí)要求7/26/20232藥物的鑒別試驗專題知識講座鑒別試驗的定義鑒別試驗的項目鑒別試驗的方法鑒別試驗的條件主要內(nèi)容7/26/20233藥物的鑒別試驗專題知識講座一、鑒別試驗的定義

藥物鑒別試驗：根據(jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)，采用化學(xué)、物理化學(xué)或生物學(xué)、儀器分析等方法來判斷藥物的真?zhèn)?。僅用于證實儲藏有標(biāo)示的藥物鑒別，而不是對未知物進行定性分析。鑒別試驗方法應(yīng)專屬，每個品種一般2～3條。7/26/20234藥物的鑒別試驗專題知識講座

二、鑒別試驗的項目A性狀Ｂ

一般鑒別Ｃ

專屬鑒別外觀和物理常數(shù)確認(rèn)

鑒別項下規(guī)定的試驗

原料藥鑒別制劑鑒別7/26/20235藥物的鑒別試驗專題知識講座（一）性狀

（Description）1．外觀指藥物的聚集狀態(tài)、晶型、色澤及臭、味等性質(zhì)。2．溶解度是藥物的一種物理性質(zhì)，在一定程度上反映了藥品的純度。3．物理常數(shù)具有鑒別意義，也反映該藥品的純凈程度。比旋度、吸收系數(shù)、酸值、碘值、皂化值等

7/26/20236藥物的鑒別試驗專題知識講座（一）性狀－－

外觀、溶解度阿司匹林

【性狀】本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；無臭或微帶醋酸臭，味微酸；遇濕氣即緩緩水解。本品在乙醇中易溶，在三氯甲烷或乙醚中溶解，在水或無水乙醚中微溶；在氫氧化鈉溶液或碳酸鈉溶液中溶解，但同時分解。阿司匹林片【性狀】本品為白色片。阿司匹林腸溶片

【性狀】本品為腸溶包衣片，除去包衣后顯白色。7/26/20237藥物的鑒別試驗專題知識講座極易溶解：系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑不到1ml中溶解；易溶：系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑1～不到10ml中溶解；溶解：系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑10～不到30ml中溶解；略溶：系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑30～不到100ml中溶解；微溶：系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑100～不到1000ml中溶解;極微溶解：系指溶質(zhì)1g(ml)能在溶劑1000～不到10000ml中溶解；幾乎不溶或不溶系指溶質(zhì)1g(ml)在溶劑10000ml中不能完全溶解。（一）性狀－－外觀、溶解度7/26/20238藥物的鑒別試驗專題知識講座（一）性狀－－

物理常數(shù)布洛芬熔點：本品的熔點（附錄ⅥC）為74.5～77.5℃?？ò湍憠A熔點：本品的熔點（附錄ⅥC）為200～204℃，熔融時同時分解。熔點固體熔化成液體的溫度熔融同時分解的溫度自初熔至全熔的一段溫度7/26/20239藥物的鑒別試驗專題知識講座如：右旋糖酐20比旋度：取本品，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含10mg的溶液，在25℃時，依法測定(附錄ⅥＥ)，比旋度為+190°至200°

。（一）性狀－－物理常數(shù)藥品批發(fā)

比旋度

在一定波長與溫度下，偏振光透過1dm且每1ml中含旋光性物質(zhì)1g的溶液時測得的旋光度。7/26/202310藥物的鑒別試驗專題知識講座如：替硝唑

吸收系數(shù)

取本品，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含12μg的溶液，照紫外-可見分光光度法(附錄ⅣA)，在317nm的波長處測定吸收度，吸收系數(shù)（E1%1cm）為352～378。（一）性狀－－物理常數(shù)A=ECL藥品批發(fā)

吸收系數(shù)

在給定的波長、溶劑和溫度等條件下，吸光物質(zhì)在單位濃度、單位液層厚度時的吸收度。7/26/202311藥物的鑒別試驗專題知識講座（二）一般鑒別試驗Generalidentificationtest2．有機氟化物1．丙二酰脲3．有機酸鹽4．芳香第一胺6.無機金屬鹽5．托烷生物堿類藥品依據(jù)：

某一類藥物組成中的陰離子和陽離子的特殊反應(yīng)或典型的有機官能團反應(yīng)。中國藥典附錄收載一般鑒別試驗：7/26/202312藥物的鑒別試驗專題知識講座例：有機酸－FeCl3反應(yīng)加稀HCl，沉淀分解，生成游離白色堿式苯甲酸鐵鹽（赭色沉淀）7/26/202313藥物的鑒別試驗專題知識講座例：有機氟化物反應(yīng)原理地塞米松磷酸鈉及其注射液，醋酸曲安奈德及其注射液、諾氟沙星、醋酸氟輕松、醋酸氟輕可的松等含氟藥物將有機氟轉(zhuǎn)化F-，用氧瓶燃燒法進行破壞，用水或堿性溶液吸收成F-，與茜素氟藍(lán)、硝酸亞鈰在Ph4.3溶液中形成藍(lán)紫色絡(luò)合物。7/26/202314藥物的鑒別試驗專題知識講座7/26/202315藥物的鑒別試驗專題知識講座例：托烷類生物堿類反應(yīng)原理氫溴酸山莨菪堿及其片劑、注射液，氫溴酸東莨菪堿及其片劑、注射液，丁溴酸東莨菪堿及其注射液、膠囊、硫酸阿托品及其片劑、注射液，鹽酸消旋山莨菪堿注射液等藥物的分子結(jié)構(gòu)，都是由莨菪烷衍生物（又稱托烷衍生物）與莨菪酸生成的酯，稱為托烷生物堿類。Vitali反應(yīng)7/26/202316藥物的鑒別試驗專題知識講座7/26/202317藥物的鑒別試驗專題知識講座（三）專屬性鑒別試驗Specificidentificationtest依據(jù)：藥物分子中的特殊基團或官能團特殊反應(yīng)或典型的有機官能團反應(yīng)。如：巴比妥類藥物依據(jù)C-5上取代基的官能團發(fā)生反應(yīng)鑒別7/26/202318藥物的鑒別試驗專題知識講座5,5-取代的巴比妥類藥物

5BarbitalPhenylbarbitalSecobarbital7/26/202319藥物的鑒別試驗專題知識講座三、鑒別方法化學(xué)鑒別法光譜鑒別法生物學(xué)法

HPLC、GC鑒別法

薄層色譜鑒別法

紙色譜鑒別法

呈色反應(yīng)鑒別法

紫外光譜鑒別法

紅外光譜鑒別法

沉淀生成反應(yīng)鑒別法

色譜鑒別法

氣體生成反應(yīng)鑒別法

測定生成物的熔點熒光反應(yīng)鑒別法

7/26/202320藥物的鑒別試驗專題知識講座1.呈色反應(yīng)鑒別法指供試品溶液中加入適當(dāng)?shù)脑噭┤芤海谝欢l件下進行反應(yīng)，生成易于觀測的有色產(chǎn)物。（1）三氯化鐵呈色反應(yīng)：用于酚羥基或水解后產(chǎn)生酚羥基（2）異羥肟酸鐵反應(yīng)：多用于芳酸及其酯類、酰胺類（3）茚三酮呈色反應(yīng)：用于結(jié)構(gòu)中含有脂肪氨基藥物（4）重氮化-偶合顯色反應(yīng)：用于芳伯氨基或潛在芳伯氨基（5）氧化還原顯色反應(yīng)及其它顏色反應(yīng)7/26/202321藥物的鑒別試驗專題知識講座2.沉淀生成反應(yīng)鑒別法（1）與重金屬離子的沉淀反應(yīng)（2）與硫氰化鉻銨（雷氏鹽）的沉淀反應(yīng)（3）其它沉淀反應(yīng)。多用于生物堿及其鹽，具有芳香環(huán)的有機堿及其鹽。7/26/202322藥物的鑒別試驗專題知識講座

呋塞米

【鑒別】(1)取本品約25mg，加水5ml，滴加氫氧化鈉試液使恰溶解，加硫酸銅試液1～2滴，即生成綠色沉淀。(2)取本品25mg，置試管中，加乙醇2.5ml溶解后，沿管壁滴加對二甲氨基苯甲醛試液2ml，即顯綠色，漸變深紅色。

(3)取本品，加0.4％氫氧化鈉溶液制成每1ml中含5μg的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測定，在228nm與271nm的波長處有最大吸收。

例：呈色反應(yīng)與沉淀7/26/202323藥物的鑒別試驗專題知識講座常用的熒光發(fā)射形式：（1）藥物本身可在可見光下發(fā)射熒光；（2）藥物溶液加硫酸后，在可見光下發(fā)射熒光；（3）藥物和溴反應(yīng)后，于可見光下發(fā)射出熒光；3.熒光反應(yīng)鑒別法（4）藥物和間苯二酚反應(yīng)后，發(fā)射出熒光及藥物經(jīng)其它反應(yīng)后，發(fā)射熒光。7/26/202324藥物的鑒別試驗專題知識講座硫酸奎寧【鑒別】(1)取本品約20mg，加水20ml溶解后，分取溶液10ml，加稀硫酸使成酸性，即顯藍(lán)色熒光。(2)取鑒別(1)項剩余的溶液5ml，加溴試液3滴與氨試液1ml，即顯翠綠色。(3)取鑒別(1)項剩余的溶液5ml，加鹽酸使成酸性后，加氯化鋇試液1ml，即發(fā)生白色沉淀。例：熒光反應(yīng)7/26/202325藥物的鑒別試驗專題知識講座（1）大多數(shù)的胺（銨）類藥物、酰脲類藥物以及某些酰胺類藥物，可經(jīng)強堿處理后，加熱，產(chǎn)生氨（胺）氣。（2）化學(xué)結(jié)構(gòu)中含硫的藥物，可經(jīng)強酸處理后，加熱，發(fā)生硫化氫氣體。（3）含碘有機藥物，經(jīng)直火加熱，可生成紫色碘蒸氣；含醋酸酯和乙酰胺類藥物，經(jīng)硫酸水解后，加乙醇可產(chǎn)生醋酸乙酯的香味。4.氣體生成反應(yīng)鑒別法7/26/202326藥物的鑒別試驗專題知識講座

氯氮平

【鑒別】(1)取本品約100mg，加碳酸鈉等量攪拌均勻，置干燥試管中灼燒，管口覆以用1％1,2-萘醌-4-磺酸鈉溶液濕潤的試紙，試液顯紫藍(lán)色。

(2)本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（光譜集504圖）一致。

例：生成氣體反應(yīng)7/26/202327藥物的鑒別試驗專題知識講座（二）光譜鑒別法1.紫外－可見光譜鑒別法對比吸收曲線一致性對比最大吸收波長和同時測定最小吸收波長的一致性規(guī)定一定濃度的供試品在最大吸收波長處的吸收度規(guī)定吸收波長和吸收系數(shù)法規(guī)定吸收波長和吸收度比值法經(jīng)化學(xué)處理后，測定其反應(yīng)產(chǎn)物的吸收光譜特性7/26/202328藥物的鑒別試驗專題知識講座光譜鑒別法：紫外光譜

維生素Ｂ2

【鑒別】(1)取本品約1mg，加水100ml溶解后，溶液在透射光下顯淡黃綠色并有強烈的黃綠色熒光；分成二份，一份中加無機酸或堿溶液，熒光即消失；另一份中加連二亞硫酸鈉結(jié)晶少許，搖勻后，黃色即消褪，熒光亦消失。

(2)取含量測定項下的溶液，照分光光度法（附錄ⅣA）測定，在267nm、375nm、與444nm的波長處有最大吸收。375nm波長處的吸收度與267nm波長處的吸收度的比值應(yīng)為0.31～0.33；444nm波長處的吸收度與267nm波長處的吸收度的比值應(yīng)為0.36～0.39。

7/26/202329藥物的鑒別試驗專題知識講座2、丹參藥材中丹參總酚酸的測定－－標(biāo)準(zhǔn)曲線法對照品溶液的配制：取原兒茶醛對照品適量，精密稱定，加水稀釋配制成對照品溶液。樣品的配制：分別稱取1g丹參藥材粉末至100ml錐形瓶中，精密加入75%甲醇溶液，超聲1小時，濾過，經(jīng)顯色，紫外掃描。顯色方法：取樣品0.2ml于10ml量瓶中，加入0.5ml5%NaNO2后，搖勻后再加入0.5ml10%Al(NO3)3，搖勻后再加入4ml4%NaOH溶液，用水補足至刻度，即進行紫外掃描。7/26/202330藥物的鑒別試驗專題知識講座原兒茶醛對照品紫外掃描圖丹參藥材樣品紫外掃描圖不同濃度對照品紫外掃描圖7/26/202331藥物的鑒別試驗專題知識講座2）光譜鑒別法：紅外光譜對比供試品紅外吸收光譜與藥品標(biāo)準(zhǔn)紅外光譜的一致性，尤其是指紋一致性。主要用于組分單一、結(jié)構(gòu)明確的原料藥。

阿莫西林【鑒別】（1）在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時間與對照品溶液主峰的保留時間一致。（2）本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的光譜（光譜集441）一致。7/26/202332藥物的鑒別試驗專題知識講座7/26/202333藥物的鑒別試驗專題知識講座（三）色譜法1、薄層色譜法

2、高效液相色譜法3、質(zhì)譜法7/26/202334藥物的鑒別試驗專題知識講座1、薄層色譜法

薄層層析流動相的移動是依靠毛細(xì)作用。將試樣點在色譜濾紙或?qū)游霭宓囊欢?，并將該端浸在作為流動相的溶劑（常稱之為展開劑）中，隨著溶劑向上的移動，經(jīng)過試樣點時，帶動試樣向上運動。7/26/202335藥物的鑒別試驗專題知識講座

硫酸阿米卡星

【鑒別】(1)取本品與阿米卡星標(biāo)準(zhǔn)品適量，分別加水制成每1ml中含10mg的溶液，照薄層色譜法（附錄ⅤB）試驗，吸取上述兩種溶液各10μl，分別點于同一硅膠Ｈ薄層板上，以氯仿－甲醇－濃氨溶液－水(1:4:2:1)為展開劑，展開后，晾干，噴以0.2％茚三酮的水飽和正丁醇溶液，在100℃加熱10分鐘，供試品溶液與標(biāo)準(zhǔn)品溶液所顯主斑點的顏色與位置應(yīng)相同。7/26/202336藥物的鑒別試驗專題知識講座2、高效液相色譜法7/26/202337藥物的鑒別試驗專題知識講座（一）溶液的濃度（二）溶液的溫度（三）溶液的酸堿度（四）試驗時間（五）干擾成分的存在四、鑒別試驗條件7/26/202338藥物的鑒別試驗