人類疾病動(dòng)物模型-課件1

人類疾病動(dòng)物模型第一節(jié)人類疾病動(dòng)模型評(píng)估及分類第二節(jié)腫瘤疾病動(dòng)物模型第三節(jié)心血管疾病動(dòng)物模型第四節(jié)呼吸、消化疾病動(dòng)物模型第五節(jié)糖尿病動(dòng)物模型第六節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型第七節(jié)骨骼系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型1ppt課件第一節(jié)人類疾病動(dòng)模型評(píng)估及分類人類疾病動(dòng)物模型(Animalmodelsofhumandiseases)：

是指醫(yī)學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象和相關(guān)材料。

2ppt課件一、復(fù)制人類疾病動(dòng)物模型的評(píng)估

1．相似性

復(fù)制的動(dòng)物模型應(yīng)盡可能近似人類疾病，最好能找到與人類疾病相同的自發(fā)性疾病。2．重復(fù)性

理想的人類疾病動(dòng)物模型應(yīng)該是可重復(fù)的，應(yīng)是可標(biāo)準(zhǔn)化的，不能重復(fù)的動(dòng)物模型是無法進(jìn)行應(yīng)用研究的。

3ppt課件

3．可靠性

復(fù)制的動(dòng)物模型應(yīng)力求可靠地反映人類疾病，即可特異地反映該種疾病或某種機(jī)能、代謝、結(jié)構(gòu)變化，同時(shí)應(yīng)具備該種疾病的主要癥狀和體征，并經(jīng)受一系列檢測(cè)(如心電圖、臨床生理、生化指標(biāo)檢驗(yàn)、病理切片等)得以證實(shí)。

4ppt課件4．適用性和可控性

設(shè)計(jì)復(fù)制人類疾病動(dòng)物模型，應(yīng)盡量考慮在今后臨床能應(yīng)用和便于控制其疾病的發(fā)展，以便于開展研究工作。

5．易行性和經(jīng)濟(jì)性

復(fù)制動(dòng)物模型設(shè)計(jì)，應(yīng)盡量做到方法容易執(zhí)行和合乎經(jīng)濟(jì)原則。

5ppt課件二、動(dòng)物模型的分類

按產(chǎn)生原因分類1．誘發(fā)性動(dòng)物模型(experimentalanimalmodel)：

是指研究者通過使用物理的、化學(xué)的、生物的和復(fù)合的致病因素作用于動(dòng)物，造成動(dòng)物組織、器官或全身一定的損害，出現(xiàn)某些類似人類疾病時(shí)的功能、代謝或形態(tài)結(jié)構(gòu)方面的病變，即為人工誘發(fā)出特定的疾病動(dòng)物模型。6ppt課件物理因素：機(jī)械損傷、放射線損傷、氣壓、手術(shù)化學(xué)因素：化學(xué)藥致癌、化學(xué)毒物中毒、強(qiáng)酸強(qiáng)堿燒傷、某種有機(jī)成分的增加或減少導(dǎo)致營養(yǎng)性疾病等。生物因素：細(xì)菌、病毒、寄生蟲、生物毒素等。復(fù)合因素：復(fù)制時(shí)間長,方法繁瑣,但相似性高。7ppt課件2．自發(fā)性動(dòng)物模型

(spontaneousanimalmodel)：

指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物未經(jīng)任何人工處置，在自然條件下動(dòng)物自然發(fā)生、或由于基因突變的異常表現(xiàn)通過遺傳育種保留下來的動(dòng)物模型。

優(yōu)點(diǎn)：完全在自然條件下發(fā)生的疾病，排除了人為的因素，疾病的發(fā)生、發(fā)展與人類相應(yīng)的疾病很相似。缺點(diǎn)：來源比較困難，種類有限。

8ppt課件3．抗疾病型動(dòng)物模型(negativeanimalmodel)：

是指特定的疾病不會(huì)在某種動(dòng)物身上發(fā)生，從而可以用來探討為何這種動(dòng)物對(duì)該疾病有天然的抵抗力的動(dòng)物模型。4．生物醫(yī)學(xué)動(dòng)物模型(biomedicalanimalmodel)：

是指利用健康動(dòng)物生物學(xué)特征來提供人類疾病相似表現(xiàn)的疾病模型。9ppt課件第二節(jié)腫瘤疾病動(dòng)物模型腫瘤模型分類自發(fā)性腫瘤模型誘發(fā)性腫瘤模型移植性腫瘤模型10ppt課件一、腫瘤模型分類自發(fā)性腫瘤（spontaneoustumor）模型：指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物未經(jīng)任何有意識(shí)的人工處置，在自然情況下發(fā)生的腫瘤所形成的模型。誘發(fā)性腫瘤（inducedtumor）模型：是使用致癌因素在實(shí)驗(yàn)條件下誘發(fā)動(dòng)物發(fā)生腫瘤的動(dòng)物模型。移植性腫瘤（transplanttumor）模型：指將動(dòng)物移植同種或異種動(dòng)物連續(xù)傳代而培養(yǎng)出的模型。人體腫瘤移植性(transplantationhumantumor)模型：指將人體腫瘤移植動(dòng)物連續(xù)傳代而培養(yǎng)出的模型。11ppt課件二、自發(fā)性腫瘤模型(一)小鼠腫瘤：發(fā)生于近交系。不同品系，腫瘤發(fā)生類型和發(fā)病率不同。6-18月齡發(fā)生率最高。乳腺、肺、肝、造血組織是常發(fā)部位。癌比肉瘤常見。12ppt課件小鼠乳腺腫瘤腫瘤發(fā)生率：C3H：99％-100％；A系：60%-80%(但處女鼠僅約5％)；CBA/J：60%-65%；BALB/c、615更低；C57BL未見發(fā)生。13ppt課件腫瘤分類：A型為典型乳腺腺瘤。乳腺腺泡上皮細(xì)胞構(gòu)成腺泡結(jié)構(gòu)。B型包括乳頭狀囊腺癌、單純癌及導(dǎo)管內(nèi)癌等，為源于腺上皮的多種類型腫瘤。C型為纖維瘤和腺纖維瘤。有大量囊腔，囊腔內(nèi)襯以單層立方上皮。14ppt課件發(fā)病機(jī)制：乳腺腫瘤病毒—MMTV感染S變種為高度致癌，可母乳傳遞，作用于C3H、DBA、BALB/cfC3H。發(fā)病率>70%，潛伏期<1年。L變種由生殖細(xì)胞傳遞，作用于C3H，發(fā)生率<40％，潛伏期>1年。P變種由生殖細(xì)胞或母乳傳遞，作用于DD、DDD、R111。潛伏期<1年，發(fā)生率>70%；15ppt課件激素依賴對(duì)卵巢依賴腫瘤，具有雌激素和孕酮受體。對(duì)妊娠依賴腫瘤，具有催乳素受體。16ppt課件腫瘤發(fā)生率：8-9月齡AKR：80%-90%(♀>♂)；8-9月齡Afb：雌鼠90％，雄鼠65％。以淋巴細(xì)胞性白血病為主。小鼠白血病17ppt課件發(fā)病機(jī)制包括：病毒、化學(xué)和物理因素與淋巴生成組織和造血組織腫瘤有關(guān)的病毒為反轉(zhuǎn)錄病毒。也有一些重組病毒。淋巴細(xì)胞性白血病起源胸腺，大多數(shù)為T淋巴細(xì)胞。骨髓性白血病，其腫瘤細(xì)胞積聚于肝和循環(huán)系統(tǒng)。18ppt課件（二）大鼠腫瘤自發(fā)瘤較小鼠低。肉瘤多于癌。垂體瘤發(fā)生率較高。19ppt課件三、誘發(fā)性腫瘤模型方法：原位誘發(fā)：致癌物直接與動(dòng)物靶組織或器官接觸而誘發(fā)該組織或器官腫瘤，接觸方法有涂抹、灌注、喂養(yǎng)或埋置等。異位誘發(fā)：將與致癌物接觸后的動(dòng)物組織或器官埋置于該動(dòng)物或另一正常動(dòng)物皮下而產(chǎn)生的該組織或器官的腫瘤。異位誘發(fā)腫瘤具有易于觀察和取材的優(yōu)點(diǎn)。誘癌物：

放射線局部照射、化學(xué)致癌物（烷化劑、亞硝胺類、芳香胺類）、生物毒素（黃曲酶毒素）、細(xì)菌（幽門螺桿菌）、腫瘤病毒感染。

20ppt課件亞胺基偶氮甲苯(OAAT)誘發(fā)小鼠肝癌：用l％OAAT苯溶液涂于動(dòng)物兩肩胛間皮膚上，隔日1次，每次2-3滴、一般涂100次。7個(gè)月以上誘發(fā)肝腫瘤約55％。二乙基亞硝胺(DEN)誘發(fā)小鼠肺癌：采用小鼠皮下注射1％DEN水溶液，每周一次，(每次劑量為56mg/kg體重，總劑量為868mg)。觀察時(shí)間為100d左右。此模型誘發(fā)率約40%。若將DEN總劑量增到1176mg時(shí)，半年誘發(fā)率可達(dá)90％以上。黃曲霉素誘發(fā)大鼠肝癌：在大鼠飼料中加入黃曲霉素，含0.011-0.015ppm，喂養(yǎng)6個(gè)月，誘發(fā)率達(dá)80％。3.

舉例21ppt課件移植性腫瘤來源誘發(fā)性腫瘤：以小塊法移植誘發(fā)腫瘤于同系動(dòng)物或免疫缺陷動(dòng)物，進(jìn)行傳代。自發(fā)性腫瘤：將自發(fā)瘤移植同系、同種或異種動(dòng)物，經(jīng)傳代生長穩(wěn)定。需15-20代。腹水瘤：將移植性實(shí)體瘤注入同種動(dòng)物腹腔或腹壁，獲腹水傳代。四、移植性腫瘤模型：22ppt課件方法：實(shí)體瘤移植：

腫瘤細(xì)胞皮下接種——7-10d處死荷瘤動(dòng)物——選擇生長良好、無壞死液化的瘤組織——2-3mm3+生理鹽水或其它營養(yǎng)液——無菌套管針抽吸——接種同種受體動(dòng)物右前腋窩皮下。腹水瘤移植：

腫瘤細(xì)胞腹腔或腹壁內(nèi)接種——7-10d處死荷瘤動(dòng)物——取腹水——含葡萄糖平衡鹽水稀釋至適當(dāng)濃度——腹腔注射（腹水瘤）或皮下注射（實(shí)體瘤）。腹水瘤初建常呈血性，經(jīng)多次傳代后變?yōu)槿榘咨?，傳代穩(wěn)定后，即為移植性腹水瘤23ppt課件優(yōu)點(diǎn)：同時(shí)接種同樣量的瘤細(xì)胞，生長速度較一致，個(gè)體差異較小。接種成活率近100%。對(duì)宿主影響相類似。可連續(xù)傳代，試驗(yàn)周期短，條件易于控制。缺點(diǎn)：宿主對(duì)移植物產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)。腫瘤生長速度快，增殖比率高，體積倍增時(shí)間短，與人體腫瘤顯著不同，特別是與人體實(shí)體瘤。

移植性腫瘤的優(yōu)缺點(diǎn)24ppt課件第三節(jié)心血管疾病動(dòng)物模型一、誘發(fā)性動(dòng)物模型動(dòng)脈粥樣硬化癥模型高血壓模型心肌缺血模型心律失常模型

二、自發(fā)性動(dòng)物模型SHR大鼠腦卒中大鼠敘利亞地鼠25ppt課件一、動(dòng)脈粥樣硬化癥模型1、兔模型

方法1：選用2kg左右體重，每天膽固醇0.3g，4個(gè)月后形成主動(dòng)脈粥樣硬化斑塊；劑量增至0.5g，3個(gè)月出現(xiàn)斑塊；增至1.0g，可縮為2個(gè)月。在飼料中加入15％蛋黃粉、0.5％膽固醇和5%豬油，3周后，將膽固醇減去再喂3周，可使斑塊發(fā)生率達(dá)100％，血清膽固醇可升高至2000mg%。

評(píng)價(jià)：對(duì)喂飼膽固醇非常敏感，在短期內(nèi)便能出現(xiàn)明顯的病變。因?yàn)橥脤?duì)外源性膽固醇的吸收率可高達(dá)75％～90％，對(duì)高血脂的清除能力低(靜脈注射膽固醇后，高脂血癥可持續(xù)3～4天)。

但兔作模型不夠理想，主要表現(xiàn)為血源性泡沫細(xì)胞增多，且病變分布與人的病變也有差異。26ppt課件方法2：給兔皮下注射同型半胱氨酸硫代內(nèi)酯每天20～25mg/kg(以5％葡萄糖溶液配成1mg/ml的濃度)，連續(xù)20～25天。

評(píng)價(jià)：成年兔及幼兔均可出現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化的典型病變。冠狀動(dòng)脈管腔變窄、動(dòng)脈壁內(nèi)膜肌細(xì)胞增生、纖維狀異物質(zhì)。如同時(shí)在飲料中加入20％的膽固醇，則出現(xiàn)顯著的動(dòng)脈粥樣硬化病變。27ppt課件方法3：

給兔靜脈滴注去甲腎上腺素lmg/24h，時(shí)間為30min。一種方法是先滴15min，休息5min后再滴15min。另一種方法是每次點(diǎn)滴5min和休息5min，反復(fù)6次。

評(píng)價(jià):

持續(xù)兩周，均可引起主動(dòng)脈病變，呈現(xiàn)血管壁中層弱性纖維拉長、劈裂或斷裂，病變中出現(xiàn)壞死及鈣化。28ppt課件2、大鼠模型

方法1：配方一飼料(1％-4％膽固醇、10％豬油，0.2%甲基硫氧嘧啶、89％-86％基礎(chǔ)飼料)，喂服7～10天?？尚纬筛吣懝檀佳Y。配方二飼料(10％蛋黃粉、5％豬油、0.5％膽鹽、85％基礎(chǔ)飼料)，喂服7天可形成高膽固醇血癥。

評(píng)價(jià)：飼養(yǎng)方便、抵抗力強(qiáng)、食性與人相近。所形成的病理改變與人早期者相似，不易形成似人體的后期病變，較易形成血栓。29ppt課件

方法2：給大鼠腹腔注射表面活化劑——TrotonWRl339，300mg/kg體重。

評(píng)價(jià):

給藥9h后可使血清膽固醇升高3～4倍；20h后雄性大鼠血清膽固醇仍為正常的3-4倍，而雌性大鼠卻為6倍左右。用藥后24h左右升脂作用達(dá)最高點(diǎn)，48h左右恢復(fù)正常。其中以甘油三酯升高最強(qiáng)，其次是磷脂、游離膽固醇，對(duì)膽固醇酯沒有影響。30ppt課件3、小鼠模型

方法：雄性小鼠飼以1％膽固醇及10％豬油的高脂飼料，7天后血清膽固醇即升為343±15mg％；若在飼料中再加入0.3％的膽酸，連飼7天，血清膽固醇可高達(dá)530±36mg％

評(píng)價(jià)：容易飼養(yǎng)和節(jié)省藥品等優(yōu)點(diǎn)，但是取血不便，難做動(dòng)態(tài)觀察，所以較少采用。31ppt課件4、雞模型

方法：4～8周的萊克亨雞，在飼料中加入1％-2％膽固醇或15％蛋黃粉，再加5％～10％豬油，經(jīng)過6～10周，血膽固醇即升至1000mg％～4000mg％，胸主動(dòng)脈斑塊發(fā)生率達(dá)100％。

評(píng)價(jià)：雞為雜食動(dòng)物，僅在普通飼料中加入膽固醇，就可形成動(dòng)脈粥樣硬化斑塊。病變發(fā)生較快，在斑塊中有時(shí)伴有鈣化和形成潰瘍。雞和鴿能自發(fā)主動(dòng)脈粥樣硬化，研究病變與早期代謝變化具有重要價(jià)值。32ppt課件動(dòng)物選擇：常用動(dòng)物是犬和大鼠。犬與人高血壓的相似之處。血壓早期血壓波動(dòng)大，逐漸升高，并維持在高水平；環(huán)境和緊張刺激引起血壓明顯升高；高血壓發(fā)展過程，出現(xiàn)高級(jí)神經(jīng)活動(dòng)障礙；部分動(dòng)物血中兒茶酚胺含量增加。大鼠高鹽飲食后可形成高血壓；如果僅攝入過量鈉鹽而無過量鹽皮質(zhì)激素分泌，只能誘發(fā)某些動(dòng)物的高血壓。則該鹽性高血壓具有遺傳易感性。二、高血壓模型33ppt課件腎性高血壓模型

手術(shù)狹窄一側(cè)腎動(dòng)脈(一腎模型)、雙側(cè)腎動(dòng)脈(二腎模型)、腎門結(jié)扎均可產(chǎn)生持續(xù)性高血壓。一腎型和二腎型高血壓機(jī)制的差別：一腎型，鈉潴留或腎素血管緊張素被激活均可使血壓升高；二腎型，只有腎素-血管緊張素被激活才能使血壓升高；一腎型，必須激活交感神經(jīng)系統(tǒng)；二腎型，不必。一腎型，單腎低壓灌注下水鈉滯留，導(dǎo)致外周阻力增高；

二腎型，動(dòng)物種類及狹窄處口徑影響高血壓，由多種機(jī)理聯(lián)合引起。34ppt課件內(nèi)分泌性高血壓模型方法：電刺激大鼠及猴的中樞神經(jīng)系統(tǒng)；或狗的喉上神經(jīng)或迷走神經(jīng)中樞端，造成反射性高血壓。對(duì)大鼠、貓、狗注射兒茶酚胺或血管緊張素，引起急性血壓升高，用于降壓藥物作用機(jī)制研究。機(jī)制：摘除動(dòng)物兩側(cè)腎臟，可提高動(dòng)物對(duì)加壓藥物的敏感性。在攝入外源性DOCA的同時(shí)，切除一側(cè)腎臟和術(shù)后飲用鹽水，可形成DOCA-鹽性高血壓。鈉耗竭或破壞中樞腎上腺素能結(jié)構(gòu)，可預(yù)防或大大削弱DOCA引起的血管高反應(yīng)性高血壓的發(fā)展。

35ppt課件三、心肌缺血?jiǎng)游锬Ｐ蛣?dòng)物選擇：犬心臟解剖與人類近似，心臟比例大，冠狀血管易操作，抗心紊亂能力強(qiáng)。但冠狀動(dòng)脈變異較大，結(jié)扎主干，動(dòng)物容易死亡，側(cè)枝需多處結(jié)扎。豬心臟的側(cè)枝循環(huán)和傳導(dǎo)系統(tǒng)血液供應(yīng)與人類似，易于形成心肌梗塞，室顫發(fā)生率高。大鼠用于心肌耐缺氧實(shí)驗(yàn)，但心肌梗塞后存活率較低。如結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈，死亡率為42％

36ppt課件方法：一般采用造成冠狀動(dòng)脈狹窄或堵塞，或輔以增加心臟負(fù)荷。電刺激：電刺激右側(cè)下丘腦背內(nèi)側(cè)核。藥物法：垂體后葉素靜脈推注或滴注家兔；異丙基腎上腺素皮下注射大鼠、豚鼠、兔、狗

。冠脈阻塞法：心肌梗死的范圍取決于阻塞動(dòng)脈的大小和側(cè)支循環(huán)的狀況。

37ppt課件四、心律失常動(dòng)物模型動(dòng)物選擇大鼠、豚鼠、兔、貓心臟較小，心室纖顫可能自發(fā)恢復(fù)。大鼠對(duì)強(qiáng)心甙不敏感。豚鼠心電圖及對(duì)心血管藥物的感受性與人類相似。兔宜在不麻醉?xiàng)l件下實(shí)驗(yàn)，對(duì)用于心臟的藥物感受性較好。

犬、猴、豬心臟較大。心室顫難自然恢復(fù)。犬對(duì)引起心律失常的刺激敏感。豬的冠狀動(dòng)脈與人相似，可以結(jié)扎冠狀動(dòng)脈形成心律失常。

38ppt課件方法：藥物誘發(fā)：氯仿—小鼠室顫、氯仿+乙酰膽堿—小鼠房顫、氯仿+腎上腺素—兔室顫、腎上腺素---豚鼠和狗；強(qiáng)心甙—豚鼠、狗；烏頭堿—大鼠、兔和狗；電刺激引起的心律失常：電刺激家兔丘腦；局部刺激家兔心臟。冠狀動(dòng)脈結(jié)扎引起心梗后心律失常模型—大鼠、小型豬。39ppt課件遺傳背景從Wistar中獲得的血壓持續(xù)升高的近交系。WKY大鼠也是從Wistar中獲得的近交系，為SHR的正常血壓對(duì)照組動(dòng)物。SHR大鼠血壓變化受遺傳因素影響，高血壓特征為多基因方式遺傳。

三、自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)40ppt課件特征體重：SHR大鼠體重增長率較WKY差；

壽命：♂430d，♀550d；血壓：SHR在2月齡前血壓值在20kPa以上。4-5月齡達(dá)24-28kPa；WKY大鼠的血壓♂18kPa，♀16.4kPa。A亞系30.7kPa；B亞系24.6-29.3kPa；C亞系23.3-28kPa。雄性比雌性提前1個(gè)月達(dá)到峰值。病變：1.5-2個(gè)月齡時(shí)，末梢動(dòng)脈變狹窄、彎曲，心臟漸漸肥大。6個(gè)月發(fā)生腦卒中病變(出血或梗死)、心肌梗死和纖維化、腎硬化癥、細(xì)小動(dòng)脈肥厚或壞死；中樞到末梢的自主神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)生異常變化41ppt課件SHR與人的相似之處①遺傳因素占主要地位。②在高血壓早期無明顯器質(zhì)性改變。③血壓升高隨年齡增加而加劇，6個(gè)月后，上升到最高水平。④緊張刺激和大量食鹽等環(huán)境因素加重高血壓的發(fā)展。⑤血壓上升早期或高血壓前期有高血流動(dòng)力特征。⑥發(fā)生繼發(fā)性心血管損害，出現(xiàn)心腦腎合并癥。42ppt課件43ppt課件四、腦卒中易發(fā)癥大鼠（SHRSP）遺傳背景

從SHR大鼠的A系選擇3組雌雄鼠開始交配，對(duì)數(shù)千對(duì)交配的大鼠所生產(chǎn)的數(shù)萬只仔鼠進(jìn)行長期觀察，進(jìn)行腦卒中大鼠繼代兄妹交配。這種大鼠繁殖至F6以后，其自然發(fā)生腦卒中的患病率達(dá)80％左右，F(xiàn)10以后約為90％，隨著繁殖代數(shù)的增高，患病率還會(huì)持續(xù)性地升高。44ppt課件特征體重：SHRSP大鼠體重增長率比其母體大鼠SHR稍差壽命：比SHR大鼠短，雄性平均為230d，雌性平均為346d。血壓：在年輕時(shí)就發(fā)生高血壓病。血壓急劇上升達(dá)到異常高度是發(fā)生腦卒中的主要原因。病變：行為產(chǎn)生改變。出生80d前后即可發(fā)生腦卒中。除腦外，腎、睪丸及其他臟器中的血管也發(fā)生壞死性病變，及由此引起的實(shí)質(zhì)性退行性病變。

腦病變部位結(jié)構(gòu)特點(diǎn)與人的腦卒中相似。從年輕時(shí)起進(jìn)行食鹽負(fù)荷試驗(yàn)(以1％的食鹽水為日常飲用水或用含10％食鹽的飼料飼喂動(dòng)物)會(huì)促進(jìn)血壓升高的速度，是發(fā)生腦卒中和由此繼發(fā)其他病變的提前。45ppt課件五、敘利亞地鼠

遺傳背景

敘利亞地鼠心肌病，屬常染色體隱性基因遺傳。BIO14.6是保存最久的心肌病地鼠品系。

BIO40.54和82.86兩個(gè)品系來源于BIO14.6的近交。品系間的差別：病變程度和病情發(fā)展速度。存活時(shí)間：BIO14.6——1年

BIO40.54——3個(gè)月

BIO82.86——介于兩者之間

46ppt課件特征相似性：近似于人類擴(kuò)張型和肥厚型的心肌病。發(fā)病時(shí)間：♀25-30日齡，♂1月齡發(fā)病。發(fā)病率：雌雄相同。多數(shù)無癥狀，死后剖檢發(fā)現(xiàn)有心肌病或在飼養(yǎng)中猝死。病理改變：病變?yōu)榧毙约∪芎蛪乃馈Ｔ缙跓o明顯病變；晚期以心室擴(kuò)張為主。B1014．6為心臟肥厚；B1040．54為不均等心室間隔肥厚，或心肌均勻肥厚和心尖部肥厚。47ppt課件第四節(jié)呼吸、消化疾病動(dòng)物模型一、肝纖維化動(dòng)物模型二、支氣管哮喘動(dòng)物模型48ppt課件

已有化學(xué)性損傷、免疫性、生物學(xué)、酒精性和營養(yǎng)性肝纖維化模型。每種方法因致病因素不同，給藥途徑不同，產(chǎn)生肝硬化的機(jī)理、纖維化出現(xiàn)早晚、穩(wěn)定性、出現(xiàn)率、重復(fù)性及機(jī)體自然患病過程相似程度等都不盡相同。一、肝纖維化動(dòng)物模型49ppt課件1.免疫法：

機(jī)制：免疫性肝纖維化產(chǎn)生的機(jī)理是Ⅲ型變態(tài)反應(yīng)引起，白蛋白和血清的大分子物質(zhì)，作為異種抗原進(jìn)入大鼠體內(nèi)后，刺激其產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，當(dāng)抗原再次進(jìn)人機(jī)體后抗原抗體結(jié)合，形成抗原—抗體免疫復(fù)合物(IC)，抗原的反復(fù)、長期刺激，過量的免疫復(fù)合物來不及被清除，沉積于肝臟的血管壁內(nèi)外，引起血管炎，造成肝損傷。反復(fù)導(dǎo)致肝細(xì)胞變性、壞死，再生，纖維增生等變化，最后發(fā)展為肝纖維化、肝硬化。

方法：動(dòng)物選用雄性Wistar大鼠，體重130g左右。取豬血清0.5ml，腹腔內(nèi)注射，每周2次，共8次(豬血清的制備：取新鮮豬血，離心制血清，濾過除菌，分裝放低溫冰箱備用)。

50ppt課件

評(píng)價(jià):

大鼠第3周出現(xiàn)肝細(xì)胞變性、壞死，第4周增生的膠原纖維形成纖維束，從中央靜脈到門管區(qū)之間相互伸延，發(fā)生纖維化。模型特點(diǎn)：

①肝纖維化出現(xiàn)早，出現(xiàn)率高；

②動(dòng)物整體損傷輕微，毛發(fā)、生長情況正常；③纖維化組織中大量膠原增生，Ⅲ、Ⅳ型前膠原mRNA增多。慢性活動(dòng)性肝炎患者循環(huán)免疫復(fù)合物多為陽性，豬血清模型可用慢性肝炎所致肝纖維化的研究，對(duì)于研究免疫復(fù)合物的形成，沉積和清除及對(duì)于防治免疫損傷性肝纖維化有效藥物的篩選，具有意義。51ppt課件指標(biāo)豬血清模型白蛋白模型方法簡單復(fù)雜價(jià)格經(jīng)濟(jì)較貴出現(xiàn)率86.7%77.7%死亡率040%/31.6%周期28d95d豬血清模型與白蛋白模型相比52ppt課件2.化學(xué)性損傷法：

雄性Wistar大鼠，體重130g左右，用硫代乙酰胺腹腔內(nèi)注射，第1次20mg/100g體重，從第二次起12mg/100g體重，每周注射2次，共8周。

評(píng)價(jià):

第3周，在肝小葉間中間帶出現(xiàn)大片的肝細(xì)胞變性壞死和炎細(xì)胞浸潤，炎細(xì)胞浸潤、壞死細(xì)胞數(shù)和程度超過豬血清模型。6周后出現(xiàn)增生纖維束，纖維增生晚于和少于豬血清模型。大鼠肝纖維組織中有I型膠原的mRNA增多。53ppt課件3.四氯化碳法：

180～200gWistar或SD大鼠，皮下注射40%-50%CCl4，油溶液(0.3ml/100g)，每周2次，第2周始，隔日以20％-30％酒精lml灌胃(或作為唯一飲料)，飼以單純玉米面(混以0.5％膽固醇)，共10周。

評(píng)價(jià)：第2周出現(xiàn)小葉中心小片狀肝細(xì)胞變性壞死，第4周開始有較薄的纖維間隔形成，第6周肝臟間隔進(jìn)一步增厚，有假小葉形成：第8周形成厚的纖維間隔，分割形成假小葉。大鼠成活率60%-80%。

該模型是目前國內(nèi)外常采用的動(dòng)物模型，可靠且復(fù)制時(shí)間短，肝纖維化進(jìn)展穩(wěn)定，適合于肝硬化過程的動(dòng)態(tài)研究。54ppt課件

大鼠、豚鼠和狗最常用。根據(jù)制模方式可分為：主動(dòng)免疫致敏動(dòng)物模型：

利用哺乳類大動(dòng)物(如狗、羊和猴)在自然狀態(tài)下感染線圓蟲類寄生蟲(主要是蛔蟲)，血清中長期存在高滴度的抗某一寄生蟲抗原的特應(yīng)性抗體(IgE)，再次受到這一寄生蟲抗原的攻擊，即迅速地產(chǎn)生抗原抗體反應(yīng)，并使呼吸道產(chǎn)生支氣管嗜喘反應(yīng)；被動(dòng)免疫致敏動(dòng)物模型：

在實(shí)驗(yàn)前，用特殊的抗原及免疫輔佐劑注入動(dòng)物體內(nèi)，使動(dòng)物致敏后，制備抗血清輸入動(dòng)物使其被動(dòng)致敏，再用同一抗原進(jìn)行攻擊建立哮喘模型。

二、支氣管哮喘動(dòng)物模型55ppt課件卵白蛋白激發(fā)哮喘模型造模機(jī)制：

過敏原卵白蛋白注入豚鼠體內(nèi)，其可溶性抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生IgE抗體，使機(jī)體處于致敏狀態(tài)。當(dāng)豚鼠再次接觸此抗原時(shí)，IgE介導(dǎo)發(fā)生抗原抗體反應(yīng)，使細(xì)胞脫顆粒，釋放出活性化學(xué)物質(zhì)如組胺、嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子等，作用于支氣管引起氣道高反應(yīng)致哮喘。

56ppt課件豚鼠：

200～300g豚鼠，第1天和8天，0.5％卵白蛋白溶于生理鹽水10ml加至超聲霧化吸入器，用簡易面罩霧化吸入10min，第16—20天將致敏動(dòng)物置于密閉的容器內(nèi)，用1％卵白蛋白氣霧激發(fā)，使動(dòng)物暴露在卵白蛋白氣霧中10～30min，至出現(xiàn)哮喘樣發(fā)作。評(píng)價(jià)：

出現(xiàn)咳嗽、煩躁、口唇和四肢紫紺，呼吸費(fèi)力。生理記錄儀描記呼吸曲線，出現(xiàn)呼吸頻率加快和呼吸加深。病理檢查發(fā)現(xiàn)毛細(xì)血管擴(kuò)張，嗜酸性粒細(xì)胞浸潤，腺體分泌活動(dòng)亢進(jìn)。該模型是國內(nèi)外常用的方法，方法簡單，復(fù)制性強(qiáng)，且豚鼠是最好的顯示氣道高反應(yīng)型的特征動(dòng)物，其哮喘發(fā)作與人表現(xiàn)相似。主要用于哮喘發(fā)病機(jī)制的研究和治療觀察。57ppt課件大鼠：

4～6周齡120～180g雄性SD大鼠，，腹腔注射卵白蛋白100mg抗原液1ml，滅活百日咳桿菌疫苗5×109個(gè)和氫氧化鋁干粉100mg致敏。2周后用超聲霧化器向箱內(nèi)噴霧1％卵白蛋白，吸入20min激發(fā)。評(píng)價(jià)：

表現(xiàn)呼吸氣促，嚴(yán)重者呼吸減慢或節(jié)律不齊、輕度紫紺、四肢癱軟、行動(dòng)遲滯或俯伏不動(dòng)、反應(yīng)遲鈍，連續(xù)激發(fā)后大鼠體重減輕、毛色失去光澤、反應(yīng)遲鈍。本模型適用于特異性抗原抗體反應(yīng)的研究，有速發(fā)和遲發(fā)雙相反應(yīng)。58ppt課件鄰苯二甲酸酐(PA)致變應(yīng)性哮喘模型機(jī)制：

苯酐是小分子化合物，屬半抗原。由于半抗原不能刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，故需與蛋白結(jié)合成全抗原，形成新的抗原決定簇而發(fā)揮致敏作用。據(jù)此實(shí)驗(yàn)制備了兩種不同載體的苯酐全抗原即PA-HSA和PA-BSA。用致敏的抗血清給正常動(dòng)物注射使其致敏，并在相應(yīng)抗原吸入攻擊下同樣可誘發(fā)出哮喘。59ppt課件方法：

2-3月齡250—300g豚鼠。用30mg苯酐以lml丙酮溶解后，加入4℃2％HSA9%碳酸氫鈉溶液中，并攪拌1h形成PA—HSA。同法制備PA—BSA。將制備的抗原與弗氏完全佐劑等量研磨，使之成油包水狀。腹腔或后腿肌肉注射0.2～0.3ml/只(含蛋白4-6mg)。注射3～8周后抗原吸入激發(fā)。動(dòng)物俯臥固定，激發(fā)前描記正常的呼吸曲線。用1:1000HSA鹽水溶液霧化后吸入1～3min，觀察記錄0.5h。60ppt課件模型評(píng)價(jià)：

豚鼠吸入抗原后1-10min內(nèi)，表現(xiàn)為呼吸頻率加快，由100—120次/min增加到140～160次/min；呼吸幅度增大，同時(shí)伴有咳嗽、噴啑，重者呼吸極度費(fèi)力、掙扎，有短暫窒息甚至死亡。發(fā)作一般持續(xù)30～50min。

PA是確切的職業(yè)性致喘物質(zhì)。苯酐哮喘屬變應(yīng)性哮喘，患者體內(nèi)可測(cè)出特異性抗體，苯酐抗原吸入激發(fā)試驗(yàn)常呈現(xiàn)陽性。本模型的建立，為進(jìn)一步研究該哮喘的病理變化提供了條件。61ppt課件血小板活性因子(PAF)誘發(fā)哮喘模型造模機(jī)制

PAF是目前已知的唯一能引起氣道高反應(yīng)性炎癥介質(zhì)。PAF引發(fā)哮喘發(fā)作的原因可能是PAF通過嗜酸性粒細(xì)胞的活化趨向、脫顆粒、釋放嗜酸性細(xì)胞蛋白X(Epx)、嗜酸性細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)和堿性蛋白等細(xì)胞毒性物質(zhì)引起氣道上皮細(xì)胞損傷和脫落。另外，激活的嗜酸性細(xì)胞本身又合成和釋放PAF，使這一過程加劇，最終引起氣道高反應(yīng)性。

62ppt課件方法:

300—500g雄性豚鼠，激發(fā)實(shí)驗(yàn)當(dāng)天，采用含0.25%BSA生理鹽水，將PAF稀釋成500ug/ml，按1500ug/kg的劑量霧化吸入，即引起豚鼠哮喘發(fā)作。評(píng)價(jià):

PAF激發(fā)豚鼠哮喘發(fā)作不需致敏過程，直接利用其特性而引發(fā)氣道的高反應(yīng)性，本模型主要用于研究哮喘病因?qū)W和發(fā)病機(jī)制的研究。63ppt課件第五節(jié)糖尿病動(dòng)物模型一、模型概述二、誘發(fā)性動(dòng)物模型三、遺傳性肥胖癥小鼠四、遺傳性糖尿病小鼠五、原發(fā)性糖尿病大鼠六、非胰島素依賴性糖尿病大鼠64ppt課件

糖尿病是一種體內(nèi)胰島素相對(duì)或絕對(duì)不足或靶細(xì)胞對(duì)胰島素敏感性降低，或胰島素存在結(jié)構(gòu)上缺陷而引起的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)代謝紊亂的一種慢性疾病。

糖尿病動(dòng)物模型復(fù)制方法主要包括5種：注射致高血糖因子，如生長激素、胰高糖素、糖皮質(zhì)激素以及兒茶酚胺類激素等，復(fù)制出某些繼發(fā)性糖尿病模型。注射化學(xué)物質(zhì)引起胰島β細(xì)胞的損傷，如鏈脲佐菌素(STZ)、四氧嘧啶、二苯硫代卡肥腙可造成胰島β細(xì)胞不可逆損傷；環(huán)丙庚哌、天門冬素酶、6—氨基尼克酰胺、2—脫氧葡萄糖、甘露庚酮糖可引起β細(xì)胞可逆性損傷。一、模型概述65ppt課件注射生物及生物制品引起β細(xì)胞破壞，如鼠腦炎、心肌炎病毒M型變異可誘發(fā)若干品系的成年小鼠糖尿病，IL—1在一定劑量和范圍內(nèi)對(duì)β細(xì)胞有選擇性細(xì)胞毒作用，導(dǎo)致IDDM。手術(shù)切除胰腺的大部分或全部，并給予高糖飲食刺激，引起繼發(fā)性永久性糖尿病。篩選、引種、繁殖遺傳性及自發(fā)性糖尿病，這類動(dòng)物模型更接近人類糖尿病的自然起病及發(fā)展，尤其適于研究糖尿病的病因?qū)W。66ppt課件四氧嘧啶法

SD大鼠200g左右，40mg/kg四氧嘧啶靜脈注射1次，觀察血糖>300mg/l，持續(xù)2周可以認(rèn)為造模成功。鏈脲佐菌致糖尿病Wistar大鼠

鏈脲佐菌素可造成動(dòng)物胰島β細(xì)胞大量壞死，通過不同給藥方法，可復(fù)制出速發(fā)型類似NIDDM和遲發(fā)型類似IDDM的動(dòng)物模型。二、誘發(fā)性動(dòng)物模型67ppt課件速發(fā)型：

STZ用0.1mmol/L無菌枸櫞酸—枸櫞酸鈉緩沖液新鮮配制成2％溶液，調(diào)節(jié)pH至4.5，濾菌器過濾除菌。大鼠禁食10h，按50～65mg/kg腹腔內(nèi)或尾靜脈一次性注射，24h內(nèi)隨機(jī)血糖≥16.7mmol/L，穩(wěn)定5d即可作為成功模型。

評(píng)價(jià)：一次足量給予鏈脲佐菌素，造成β細(xì)胞大量損傷，胰島素合成和分泌減少，引起糖代謝紊亂，導(dǎo)致糖尿病。速發(fā)型模型較適于NIDDM的相關(guān)研究。通常單劑量達(dá)50mg/kg體重不出現(xiàn)自然緩解現(xiàn)象。6～27天后，胰島有一定程度再生，功能部分恢復(fù)，但仍處于高血糖狀態(tài)。68ppt課件遲發(fā)型：鏈脲佐菌配制同前，福氏佐劑(CFA)按4:1稱取液體石蠟和羊毛脂，研碎混勻，經(jīng)高壓消毒后低溫保存，使用前按1.5mg/0.5ml加入無菌滅活卡介苗。第1天腹腔注射0.5mlCFA，次日按25mg/kg腹腔內(nèi)注射STZ溶液。每周1次，連續(xù)3周，第2周部分大鼠就可成模型，第3周成模率87.5％。

評(píng)價(jià)：福氏完全佐劑可激發(fā)機(jī)體免疫功能，將小劑量STZ和CFA聯(lián)合使用，可激活大鼠體內(nèi)淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)胰島β細(xì)胞發(fā)生輕度改變，被激活的HLC可將輕度變性的細(xì)胞作靶細(xì)胞攻擊，導(dǎo)致自身免疫，胰島β細(xì)胞損害加重，引起糖尿病。遲發(fā)型模型有免疫學(xué)的改變，更接近人類IDDM的發(fā)生發(fā)展變化，有報(bào)道可測(cè)得大鼠體內(nèi)抗胰島細(xì)胞抗體。69ppt課件3）四氧嘧啶與鏈脲菌素的特點(diǎn)比較STZ造模穩(wěn)定，快速，無自然緩解，種屬選擇性不強(qiáng)(豚鼠只能用鏈脲菌素造模)，復(fù)制前不需禁食。糖尿病形成后無需特意安排動(dòng)物飼養(yǎng)條件。STZ優(yōu)于四氧嘧啶，但價(jià)格較四氧嘧啶貴。四氧嘧啶和鏈脲菌素均為一種選擇性作用于胰島β細(xì)胞的化學(xué)物質(zhì)，其作用機(jī)制目前有不同認(rèn)識(shí)，有人認(rèn)為是破壞了細(xì)胞本身，有人則認(rèn)為僅是細(xì)胞脫顆粒或是胞膜上葡萄糖受體的變化。70ppt課件三、遺傳性肥胖癥小鼠db/db肥胖型糖尿病小鼠(diabeticmice)

糖尿病基因(db)于1966年JAX發(fā)現(xiàn)于C57BL/Ks小鼠第4染色體隱性基因突變。體重：純合子過度肥胖，3至8周齡時(shí)，體重加速增重達(dá)45g（正常約12-20g）。然后體重開始減輕至發(fā)病致死。

血糖濃度：

4周齡為3mg/ml，12周齡至5mg/ml。血糖超過2.5mg/ml(正常約1.4-1.8mg/ml)，表現(xiàn)為糖尿、多尿和劇渴。胰島素含量：先升至8周齡左右，再漸漸下降到正常含量。12周齡后，含量只正常量25%，直到發(fā)病致死。壽命：

4至6個(gè)月。只胰臟內(nèi)?細(xì)胞呈現(xiàn)退化及顆粒遞減的現(xiàn)象。71ppt課件72ppt課件肥胖小鼠(obesemice)

肥胖基因（ob）為隱性基因，位于第10染色體體重：

4周齡增重加速，是正常鼠3倍,達(dá)60g，表現(xiàn)為單純肥胖。是脂肪細(xì)胞數(shù)目和體積增加的結(jié)果，其肥胖癥與人類的肥胖癥相似。胰島素變化：幼年時(shí)血糖和胰島素?zé)o明顯增加，5～6月齡后，肥胖趨向穩(wěn)定，胰島素和葡萄糖水平上升。不受外來胰島素的影響，但節(jié)制食物可增加對(duì)胰島素的敏感性及延長其壽命。Langerhans島的增生與胰島素分泌增加有關(guān)。繁殖力：所有的雌鼠無生殖力，必須用雜合子交配保持基因。雌鼠卵巢和子宮萎縮，若節(jié)制飲食，雄鼠偶爾能繁殖。73ppt課件四、遺傳性糖尿病小鼠KK小鼠為近交系，糖尿病受多基因控制。區(qū)分使用可獲得不同程度的糖尿病模型，與人糖尿病的多樣性相對(duì)應(yīng)。病理特征：飼喂高能量飼料，或給予金硫葡萄糖，可使動(dòng)物出現(xiàn)伴有高胰島素血癥的高血糖癥(肥胖KK小鼠)。肥胖KK小鼠糖尿病性變化與成人糖尿病相似，即:血中胰島素和血糖升高，胰β細(xì)胞脫顆粒，腎小球系膜細(xì)胞增生、基底膜肥厚。非肥胖KK小鼠只在耐糖試驗(yàn)表現(xiàn)糖尿.代謝：肝臟和脂肪組織的脂肪合成亢進(jìn)；脂肪組織和肌肉組織中參與糖代謝的胰島素感受性降低。脂肪合成亢進(jìn)會(huì)導(dǎo)致肥胖，末梢組織胰島素感受性降低則導(dǎo)致了高血糖的出現(xiàn)。74ppt課件五、原發(fā)性糖尿病大鼠遺傳背景：

BBWistar大鼠為封閉群，可作為青少年時(shí)期發(fā)作的胰島素依賴性糖尿病(IDDM)的動(dòng)物模型。特征：不出現(xiàn)肥胖。起病突然，發(fā)病率90%，發(fā)病年齡為58-123日齡。特征為體重減輕、高血糖、糖尿、多糖和胰島素缺乏。急性發(fā)病的尸檢常可發(fā)現(xiàn)某些胰島區(qū)有淋巴細(xì)胞浸潤的胰島炎、β-細(xì)胞顆粒喪失與壞死；GTT血糖曲線顯示完全是糖尿病型曲線，胰島素分泌處于最低值，并出現(xiàn)延遲現(xiàn)象，。發(fā)病機(jī)制可能為細(xì)胞介導(dǎo)的自身免疫。75ppt課件六、胰島素非依賴性大鼠

自發(fā)性高血壓肥胖（SHR/N-cp）大鼠是非胰島素依賴性糖尿病的一種模型動(dòng)物，不論正常血壓和高血壓的胖鼠（cp/cp）或瘦鼠（+/+）都表現(xiàn)NIDDM征象。1.遺傳背景：肥胖特征為常染色體單基因隱性遺傳2.特征：胖鼠的高血糖與胰島素抗性增高及肥胖有關(guān)。在胰島素抗性的遺傳學(xué)基礎(chǔ)上，肥胖和給與蔗糖可形成葡萄糖耐量異常。9.5月齡均出現(xiàn)NIDDM的特征性改變。雖存在高胰島素血癥，但胰島素分泌能力的缺陷日漸加重，胰島素的效能也日逐降低。肥胖和食物中糖分的增高會(huì)使這些現(xiàn)象加重。

76ppt課件第六節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型一、記憶動(dòng)物模型二、老年性癡呆動(dòng)物模型三、疼痛動(dòng)物模型77ppt課件

動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前應(yīng)通過跳臺(tái)試驗(yàn)(stepdowntest)、避暗試驗(yàn)(stepthroughtest)、迷津(maze，包括Y型迷宮、水迷宮等)進(jìn)行訓(xùn)練，使動(dòng)物建立一定的條件反射，學(xué)習(xí)和記憶逃避電擊或?qū)ひ捠澄锏哪芰Γ缓蠼o予損害中樞神經(jīng)系統(tǒng)因素后，觀察動(dòng)物記憶的保留情況。一、記憶動(dòng)物模型78ppt課件跳臺(tái)試驗(yàn)雄性KM小鼠，體重25-28g。跳臺(tái)試驗(yàn)裝置：跳臺(tái)為13cm×l3cm×l7cm的被動(dòng)回避反應(yīng)箱，底板設(shè)有銅柵，可通交流電；電壓為30V。銅柵的一角放置一直徑為4cm、高4.5cm的橡皮圓臺(tái)為安全區(qū)。動(dòng)物可停留在圓臺(tái)上回避電擊。79ppt課件先將小鼠放入回避反應(yīng)箱內(nèi)自由活動(dòng)2min熟悉環(huán)境，然后接通銅柵電源，動(dòng)物即跳到橡皮圓臺(tái)上回避電擊。訓(xùn)練小鼠使之在圓臺(tái)上能持續(xù)停留5min的目標(biāo)，記錄在達(dá)此目標(biāo)前動(dòng)物跳下臺(tái)的次數(shù)(錯(cuò)誤次數(shù))和每次受到電擊的時(shí)間總和，并以此作為學(xué)習(xí)訓(xùn)練的成績。學(xué)習(xí)訓(xùn)練完成后15min重新將小鼠放到圓臺(tái)上，記錄5min內(nèi)小鼠跳下臺(tái)的次數(shù)(錯(cuò)誤次數(shù))及在臺(tái)下受電擊的時(shí)間總和，以此成績作為第一次記憶試驗(yàn)成績。24h后重復(fù)上述試驗(yàn)為第二次記憶試驗(yàn)成績。80ppt課件水迷宮體重250-3009雄性大鼠。跳臺(tái)反應(yīng)箱與回避反應(yīng)箱結(jié)構(gòu)類似而體積較大，為90cm×l8cm×60cm有機(jī)玻璃箱，用不透明板分隔為5間。箱底為銅柵，通電壓為36V的交流電，每間內(nèi)置一高4.5cm、直徑6.5cm的橡皮墊，作為大鼠回避電擊的安全區(qū)。整個(gè)迷路設(shè)置四個(gè)盲端，終點(diǎn)有一高出水平面的安全臺(tái)。水深20cm，水溫25℃±2℃。81ppt課件學(xué)習(xí)獲得期：正式訓(xùn)練前將大鼠放在安全臺(tái)附近，讓其自行游上終點(diǎn)安全臺(tái)二次。然后分別從中部和起點(diǎn)讓其自行游上終點(diǎn)安全臺(tái)一次，進(jìn)行預(yù)訓(xùn)練。預(yù)訓(xùn)練后選取體重和靈活性等較一致者，每天一次逐只依次游迷宮。以大鼠自迷宮起點(diǎn)游至終點(diǎn)安全臺(tái)所需要的時(shí)間和途中進(jìn)入盲端的錯(cuò)誤次數(shù)，作為衡量大鼠學(xué)習(xí)獲得能力的指標(biāo)。

82ppt課件記憶鞏固期：大鼠預(yù)訓(xùn)練后，選取體重和靈活性一致者，進(jìn)行水迷宮學(xué)習(xí)訓(xùn)練。每天每只大鼠10次測(cè)試，連續(xù)訓(xùn)練5d，以連續(xù)4次在10s內(nèi)，進(jìn)入盲端次數(shù)不超過一次，到達(dá)終點(diǎn)作為學(xué)會(huì)游迷宮的標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)處理后，通過大鼠對(duì)已掌握的游迷宮正確途徑在7d內(nèi)鞏固的程度，衡量其記憶鞏固的能力。以大鼠自迷宮起點(diǎn)游至終點(diǎn)安全臺(tái)所需要的時(shí)間和進(jìn)入盲端的錯(cuò)誤次數(shù)作為衡量記憶鞏固的指標(biāo)。83ppt課件二、疼痛動(dòng)物模型

疼痛作為主觀的感受和體驗(yàn)，是一種復(fù)雜的生理心理反應(yīng)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)只能間接借助由于傷害性刺激引起的“痛”反應(yīng)作為測(cè)量指標(biāo)。按刺激性質(zhì)可分為四大類，即熱刺激法、電刺激法、機(jī)械刺激法和化學(xué)刺激法。84ppt課件大鼠光熱法

造模機(jī)制：用小型聚光燈產(chǎn)生一定強(qiáng)度的光束，經(jīng)凸透鏡聚焦照射大鼠的尾巴或家兔鼻部以致痛，大鼠以甩尾為痛反應(yīng)指標(biāo)，家兔以甩頭為痛反應(yīng)指標(biāo)。85ppt課件方法：

200g雄性大鼠，裝入固定筒內(nèi)，尾巴外露，先用75％乙醇擦凈尾部，用墨汁在尾部下1/3處標(biāo)出光刺激點(diǎn)的位置(墨汁能易于吸熱)。調(diào)節(jié)輻射熱測(cè)痛儀的焦距，在聚焦的鼠臺(tái)檔板作標(biāo)記，使鼠尾光刺激點(diǎn)位置與檔板上標(biāo)記重合。每次實(shí)驗(yàn)于每日同一時(shí)間進(jìn)行。照射開始到甩尾反應(yīng)的潛伏期為痛閾。負(fù)載電壓20V，選用潛伏期在5s以內(nèi)的動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)開始時(shí)先測(cè)3次，每次間隔5min，計(jì)算其平均值為基礎(chǔ)痛閾。為防止皮膚灼傷，光照截止時(shí)間10s或以潛伏期升高150％為限。86ppt課件

模型評(píng)價(jià):

大鼠甩尾法操作方便，反應(yīng)恒定，重復(fù)性好，對(duì)于篩選麻醉性鎮(zhèn)痛藥及非麻醉性鎮(zhèn)痛藥均適用，故使用最多。但甩尾反應(yīng)是一種脊髓反應(yīng)，骨骼肌松弛藥也可出現(xiàn)陽性結(jié)果。87ppt課件小鼠熱板法造模機(jī)制

把小鼠放在事先加熱到55℃的金屬板上，以舔后足或跳躍作為疼痛反應(yīng)指標(biāo)。方法：

20g雌性小鼠。恒溫水浴至55