抗原抗體反應(yīng)（免疫學(xué)檢驗課件）

第十二章抗原-抗體反應(yīng)本章要點抗原抗體反應(yīng)特點。1影響抗原抗體反應(yīng)因素。2抗原抗體反應(yīng)原理。3CONTENTS目錄01020304抗原抗體反應(yīng)原理抗原抗體反應(yīng)特點抗原抗體反應(yīng)的影響因素抗原抗體反應(yīng)類型前言抗原抗體在體內(nèi)體外能發(fā)生特異性結(jié)合。由于抗原理化性狀和抗體類型不同，抗原抗體結(jié)合后表現(xiàn)出不同的反應(yīng)類型，可用于疾病的診斷、病原鑒定、藥物分析等檢測。如何利用抗原抗體反應(yīng)的特點準確的進行免疫學(xué)檢測是一個重要內(nèi)容?？乖贵w反應(yīng)原理01基本概念抗原抗體反應(yīng)抗原與抗體在體內(nèi)或體外發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)?；靖拍羁乖贵w反應(yīng)的原理和物質(zhì)基礎(chǔ):抗原表位與抗體高變區(qū)間的互補結(jié)合在極短距離內(nèi)才能發(fā)生抗原抗體反應(yīng)原理一、抗原抗體結(jié)合力一、抗原抗體結(jié)合力靜電引力：又稱庫倫引力指帶電離子基團（如：—NH3+和COO-）之間的引力，距離越近引力越大。一、抗原抗體結(jié)合力范德華引力：原子與原子、分子與分子相互接近時分子極化作用發(fā)生的一種吸引力，其決定分子空間構(gòu)型。能量小于靜電引力。一、抗原抗體結(jié)合力氫鍵：由分子中H原子與電負性大的O和N原子等相互作用形成的引力，結(jié)合力較范德華力強，因為需要受氫體和供氫體之間的互補形成氫鍵，因此更具有特異性。一、抗原抗體結(jié)合力疏水作用：疏水集團相互排斥水分子而趨于聚集的力。作用力最強，占總結(jié)合力的50%?？乖贵w反應(yīng)原理二、抗原抗體親和性和親和力二、抗原抗體親和性和親和力親和性(affinity)抗體分子上一個抗原結(jié)合點與對應(yīng)的抗原決定簇之間的結(jié)合強度，用平衡常數(shù)K值表示，K值越高抗原抗體結(jié)合越牢固二、抗原抗體親和性和親和力親合力(avidity)一個完整的抗體結(jié)合部位與若干個抗原表位之間結(jié)合的強度。抗原抗體反應(yīng)原理三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體三、親水膠體轉(zhuǎn)化為疏水膠體形成可見抗原抗體反應(yīng)抗原/抗體結(jié)合水化層變薄，失去親水性電解質(zhì)中和膠體粒子表面電荷，使各疏水膠體進一步靠攏疏水膠體抗原抗體反應(yīng)的特點02抗原抗體反應(yīng)的特點一、特異性抗原抗體反應(yīng)的特點特異性：抗原與抗體結(jié)合反應(yīng)的專一性。抗原抗體反應(yīng)的特點特異性：分子基礎(chǔ):抗原表位與抗體分子高變區(qū)之間空間構(gòu)型的互補性。抗原抗體反應(yīng)的特點特異性：交叉反應(yīng)：兩種不同的抗原分子具有部分相同或類似結(jié)構(gòu)的抗原表位，可與彼此相應(yīng)的抗血清發(fā)生反應(yīng)。缺點：影響檢測的準確性優(yōu)點：協(xié)助檢測抗原抗體反應(yīng)的特點二、可逆性抗原抗體反應(yīng)的特點二、可逆性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合成復(fù)合物后，在一定條件下又可解離為游離抗原與抗體的特性（非共價鍵結(jié)合）抗原抗體反應(yīng)的特點二、可逆性影響因素：抗體對相應(yīng)抗原的親合力：親合力越高，結(jié)合越牢固，越不易解離。環(huán)境因素對復(fù)合物的影響：pH（破壞離子間的靜電引力）、離子強度（破壞離子間的靜電引力）抗原抗體反應(yīng)的特點三、比例性抗原抗體反應(yīng)的特點三、比例性前帶(prezone)：抗體過量后帶(postzone)：抗原過量等價帶(equivalencezone)：抗原抗體比例合適

免疫學(xué)檢測時，由于帶現(xiàn)象的干擾，導(dǎo)致假陰性結(jié)果?？乖贵w反應(yīng)的特點四、階段性抗原抗體反應(yīng)的特點四、階段性第一階段：特異性結(jié)合階段，反應(yīng)快，不可見（數(shù)秒或數(shù)分鐘內(nèi)完成）。第二階段：反應(yīng)可見階段，反應(yīng)慢（數(shù)分鐘或數(shù)小時或數(shù)日）），出現(xiàn)凝集、沉淀和細胞溶解等現(xiàn)象。受電解質(zhì)、溫度和酸堿度影響?？乖贵w反應(yīng)的影響因素03抗原抗體反應(yīng)的影響因素一、自身因素抗原抗體反應(yīng)的影響因素一、自身因素抗原：可溶性抗原＋相應(yīng)抗體→沉淀顆粒性抗原＋相應(yīng)抗體→凝集單價抗原－－不凝集或沉淀抗原抗體反應(yīng)的影響因素一、自身因素抗體來源：驢和馬免疫血清：等價帶較窄（H型抗體）兔：等價帶較寬（R型抗體）濃度：比例合適出現(xiàn)可見反應(yīng)親合力抗原抗體反應(yīng)的影響因素二、環(huán)境因素抗原抗體反應(yīng)的影響因素二、環(huán)境因素電解質(zhì)：中和膠體粒子上的電荷，使膠體粒子的電勢下降，促使抗原抗體復(fù)合物從溶液中析出，形成可見的沉淀物或凝集物?？乖贵w反應(yīng)的影響因素二、環(huán)境因素酸堿度：蛋白質(zhì)具兩性電離特性，有其故有的PI，pH達到或接近顆粒性抗原的PI時，引起的抗原非特異性自身凝集現(xiàn)象?？乖贵w反應(yīng)的影響因素二、環(huán)境因素溫度：溫度升高可加速分子運動，使反應(yīng)加速。但若溫度高于56℃時，可導(dǎo)致已結(jié)合的抗原抗體再解離，甚至變性或破壞。抗原抗體反應(yīng)類型04抗原抗體反應(yīng)類型抗原-抗體反應(yīng)的類型抗原抗體反應(yīng)類型抗原-抗體反應(yīng)的類型反應(yīng)類型實驗技術(shù)結(jié)果判斷中和反應(yīng)病毒中和試驗檢測病毒感染性毒素中和試驗檢測外毒素毒性標記免疫反應(yīng)熒光免疫技術(shù)檢測熒光現(xiàn)象放射免疫技術(shù)檢測放射性強度酶免疫技術(shù)檢測酶底物顯色發(fā)光免疫技術(shù)檢測發(fā)光強度金免疫技術(shù)檢測金顆粒沉淀小結(jié)