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文檔簡介

醫(yī)學檢驗專業(yè)職稱考試高頻考點匯總L止血帶結(jié)扎時間應小于1分鐘,如超過2分鐘,大靜脈血流受阻而使毛細血管內(nèi)壓增高,血管內(nèi)液與組織液交流,使分子質(zhì)量<5000的物質(zhì)逸入組織液,或缺氧引起血液成分的變化,使檢查結(jié)果增高或減低。.血液樣本采集后應立即送檢,并盡快進行檢查。血漿在4。C保存24小時后,某些凝血因子活性減少95%。低溫(4°C)保存血液可使血小板計數(shù)結(jié)果減低。.新載玻片常帶有游離堿質(zhì),必須以lmol/L的HCI清洗。載玻片應清潔、干燥、中性、無油膩。.染色過深、過淺與血涂片中細胞數(shù)量、血膜厚度、染色時間、染液濃度、pH密切相關(guān)。過深糾正方法是縮短染色時間、稀釋染液、調(diào)節(jié)pH;過淺糾正方法是延長染色時間、調(diào)節(jié)pH。.紅細胞計數(shù)參考值:成年男性(4?5參)X1012/L;成年女性(3.5?5.0)X1012/L;新生兒(6.0?7.0)*1012/L。.血紅蛋白參考值:成年:男性120?160g/L;女性:110?150g/L。新生兒:170?200g/L。7.紅細胞平均指數(shù)參考值:成人:MCV80"100fl;MCH26"34pg;MCHC320^360g/Lo.血沉管置血沉架上應完全直立,血沉管傾斜時,紅細胞沿管壁一側(cè)下沉,而血漿沿另一側(cè)下降,會加速紅細胞沉降,如血沉管傾斜3。,沉降率增加30%0于3ng/ml);紅細胞葉酸檢測(放免法)小于或等于227nmol/L(小于50?100ng/ml)o.再生障礙性貧血呈正細胞正色素性貧血,可有小細胞增多。網(wǎng)織紅細胞極低,血小板計數(shù)早期減少。骨髓各穿刺部位大多增生不良,但也有個別部位呈暫時增生,正常造血成分被脂肪組織取代。三個細胞系減少,白細胞常低于2X10兒,粒細胞顯著減少,多為淋巴細胞,骨髓巨核細胞減少,全片不見或僅有數(shù)個。.急性造血功能停滯(AAH)又稱急性再生障礙危象,即在原有慢性貧血病或其他疾病的基礎(chǔ)上,在某些誘因作用下,促使造血功能紊亂和代償失調(diào),血細胞暫時性減少或缺如,一旦誘因除去,危象隨之消失。.急性髓細胞白血病M0型細胞化學染色:POX及SB染色為陰性或陽性率小于3%。PAS及特異性酯酶染色呈陰性或弱陽性。.急性髓細胞白血病M2a型骨髓象:骨髓增生極度活躍或明顯活躍,骨髓中原始粒細胞占30%~89%(非紅系),早幼粒、中幼粒和成熟粒細胞大于10%,白血病細胞內(nèi)可見Auer小體,幼紅細胞及巨核細胞明顯減少。此型白血病細胞的特征是形態(tài)變異及核質(zhì)發(fā)育不平衡o.急性髓細胞白血病M7型骨髓象增生明顯活躍或增生活躍。粒系及紅系細胞增生均減低。巨核細胞系異常增生,全片巨核細胞可多達1000個以上,以原始及幼稚巨核細胞為主。其中原始巨核細胞大于30%,根據(jù)分化程度分兩種亞型:未成熟型:以原始巨核細胞增多為主;成熟型:原始巨核至成熟巨核細胞同時存在。.慢性粒細胞白血病細胞化學染色:NAP陽性率及積分明顯減低,甚至缺如。.惡性組織細胞按形態(tài)學特征,可歸納為下列五型:異常組織細胞、多核巨細胞、淋巴樣組織細胞、單核樣組織細胞、吞噬性組織細胞。73類白血病反應患者的骨髓象變化不大。除增生活躍及核左移外,常有毒性顆粒改變。少數(shù)病例原始和幼稚細胞增多,但無形態(tài)畸形。通常紅細胞系和巨核細胞系無明顯異常。.戈謝病細胞化學染色:戈謝細胞糖原、酸性磷酸酶及蘇丹黑B染色陽性或強陽性,過氧化物酶和堿性磷酸酶染色的生。.尼曼-匹克病骨髓象的特征是可見到尼曼-匹克細胞。.血管性血友病:由于患者vWF缺陷,使FVHI不穩(wěn)定,導致FVIH:C活性減低,故APTT延長。血友病A患者長期輸注FVHI,可產(chǎn)生FVIH抑制物,引起APTT延長。一些患者存在狼瘡抗凝物(LAC).使APTT延長。原發(fā)性和繼發(fā)性纖溶亢進(如DIC),產(chǎn)生大量的FDP,使APTT延長。.VWF增高:vWF是一種急性時相反應蛋白,很多情況下都增高,常見于血栓性疾?。ㄈ缧募」K赖龋⒛I小球疾病、DM、妊高征及大手術(shù)后。.PAlg增高:見于ITP,90%以上ITP患者的PAIgG增高,若同時測定PAlgM、PAlgA和PAC3,其靈敏度可高達100%。.PAgT減低:反映血小板聚集功能減低。見于獲得性血小板功能減低。還見于遺傳性血小板功能缺陷,不同的血小板功能缺陷病對各種誘導劑的反應不同。血小(Glanzmann?。篈DP、膠原和花生四烯酸誘導的血小板聚集減低和不聚集;巨大血小板綜合征:ADP、膠原和花生四烯酸誘導的血小板聚集正常,但瑞斯托霉素誘導的血小板不凝集;貯存池?。褐旅茴w粒缺陷時,ADP誘導的聚集常減低,無二相聚集;a顆粒缺陷時,血小板凝集和聚集均正常;血小板花生四烯酸代謝缺陷:ADP誘導的聚集常減低,無二相聚集,膠原和花生四烯酸誘導的血小板聚集均低下。.FIB降低見于先天性低或無FIB血癥、遺傳性FIB異常、DIC、原發(fā)性纖溶癥、重癥肝炎和肝硬化等。.血漿魚精蛋白副凝固(3P)試驗陽性見于DIC的早、中期,但在惡性腫瘤、上消化道出血、外科大手術(shù)后、敗血癥、腎小球疾病、人工流產(chǎn)、分娩等也可出現(xiàn)假陽性。陰性見于正常人、晚期DIC和原發(fā)性纖溶癥。.血清FDP增高見于原發(fā)性纖溶癥、DIC、惡性腫瘤、急性早幼粒細胞白血病、肺栓塞、深靜脈血栓形成、腎臟疾病、肝臟疾病、器官移植的排斥反應、溶栓治療。.血漿D-二聚體在DIC時,為陽性或增高,是診斷DIC的重要依據(jù)。高凝狀態(tài)和血栓性疾病時,血漿D-二聚體含量也增高。D-二聚體繼發(fā)性纖溶癥為陽性或增高,而原發(fā)性纖溶癥為陰性或不升高,此是兩者鑒別的重要指標。.發(fā)色底物法:該法主要是利用測定產(chǎn)色物質(zhì)的吸光度變化來推算所測定物質(zhì)的含量。.病理性高血糖:①各型糖尿病及甲狀腺功能亢進、Cushing病、肢端肥大癥、嗜銘細胞瘤等內(nèi)分泌疾病;②顱外傷顱內(nèi)出血、腦膜炎等引起顱內(nèi)壓升高刺激血糖中樞以及在疾病應激狀態(tài)時;③脫水,血漿呈高滲狀態(tài),見于高熱、嘔吐、腹瀉等。86.0GTT的主要適應證:①無糖尿病癥狀,隨機或空腹血糖異常者;②無糖尿病癥狀,有一過性或持續(xù)性糖尿;③無糖尿病癥狀,但有明顯糖尿病家族史;④有糖尿病癥狀,但隨機或空腹血糖不夠診斷標準;⑤娃娠期、甲狀腺功能亢進、肝病、感染,出現(xiàn)糖尿者;⑥分娩巨大胎兒的婦女或有巨大胎兒史的個體;⑦不明原因的腎病或視網(wǎng)膜病。.對于空腹或餐前尿糖陰性的輕型糖尿病患者可通過測定餐巨也尿糖輔助診斷。也可在胰島素治療中用于指導調(diào)整藥量,24小時尿糖定量對判斷糖尿病的程度和指導用藥較尿糖定性更為準確。.成人紅細胞中的血紅蛋白有HbA(占95獷97%)、HbA2(占2.5%),HbF(占0.5%)。.GHb的測定可以反映測定前6?8周患者的平均血糖水平。.糖化血清蛋白測定反映2?3周前的血糖控制水平,作為糖尿病近期內(nèi)控制的一個靈敏指標.能在短期內(nèi)得到治療效果的回饋,特別適用于住院調(diào)整用藥的患者。.載脂蛋白A有Al、All、AlVoAI和AH主要分布在HDL中,是HDL的主要載脂蛋白。.al-酸性糖蛋白(AAG)的測定目前主要作為急性時相反應的指標,在風濕病、惡性腫瘤及心肌梗死患者亦常增高,在營養(yǎng)不良、嚴重肝損害等情況下降低。93.銅藍蛋白(CER)最特殊的作用在于協(xié)助診斷肝豆狀核變性(Wilson病)。Wilson病患者血清銅藍蛋白含量降低(10ml/dl以下),而伴有血漿可透析的銅含量增加。.血漿C-反應蛋白濃度在急性心肌梗死、創(chuàng)傷、感染、炎癥、外科手術(shù)、腫瘤浸潤時迅速地升高,可達正常水平的數(shù)千倍。.配制的底物濃度應準確且足夠大,底物液中應加入不抑制該酶活力的防腐劑并保存于冰箱中,以防止底物被分解。.CK是由兩種不同的亞基M和B組成的二聚體,正常人體中有三種同工酶,即CK-BB(CKl)、CK-MB(CK2)和CK-MM(CK3)。.血清LD活性增高主要見于心肌梗死、肝病、肺梗死、惡性腫瘤、白血病、惡性淋巴瘤等的輔助診斷。同時,某些腫瘤轉(zhuǎn)移后所致的胸、腹水中LD活性往往也升高。.測定ALT常作為判斷肝細胞損傷的靈敏指標。肝硬化、肝癌時,ALT有輕度或中度增高,提示可能并發(fā)肝細胞壞死,預后嚴重。.人體各器官中GGT含量以腎臟最高,其次是前列腺、胰、肝、盲腸和腦。在腎臟、胰腺和肝臟中,此酶含量之比約為100:8:4。但腎臟疾病時,血液中該酶活性增高卻不明顯。測定尿中該酶活性有助于診斷腎小管疾患。.正常人動脈血的pH的參考值范圍是7.35?7.45,平均7.4°pH<7.35為酸血癥,>7.45為堿血癥。.呼吸性堿中毒血液生化指標為血漿pH>7.45,PC02明顯降低,TCQ2減少,C1-增高,K+輕度降低,AG輕度增高。.惡性腫瘤骨轉(zhuǎn)移是引起血鈣升高最常見的原因。多發(fā)性骨髓瘤、乳腺癌、肺癌等伴有骨轉(zhuǎn)移時有大量骨質(zhì)破壞,而腎和腸又不能及時清除過多的鈣,遂引起高血鈣。.腎小管病變?nèi)鏔anconi綜合征,腎小管重吸收功能障礙,尿磷排泄量增加,血磷下降。.Wilson病時血清銅明顯降低。.碘是構(gòu)成甲狀腺素的必需成分。缺碘可發(fā)生地方性甲狀腺腫及呆小癥。.治療藥物濃度監(jiān)測,標本可以是血漿、血清、全血、唾液、尿、腦脊液等體液。免疫抑制劑環(huán)抱素A和FK506測定采用的標本為全血,取樣的多少和時間應根據(jù)監(jiān)測的要求、目的及具體藥物而定。取樣時,必須表明患者的用藥情況。一般懷疑中毒情況時,要在用藥后,峰值時取樣;懷疑藥物劑量不足時,要在下一次用藥前取樣。.LD在組織中的分布特點是心、腎以LD1為主,LD2次之;肺以LD3、LD4為主;骨骼肌以LD5為主;肝以LD5為主,LD4次之。血清中LD含量的順序是LD2>LDl>LD3>LD4>LD5o.腎小球的濾過功能主要取決于腎血流量及腎小球有效濾過壓。.尿鈉濃度可作為估計腎小管壞死程度的指標。尿鈉排泄量多少取決于胞外液量及腎小管重吸收的變化,在鑒別急性腎衰竭和腎前性氮質(zhì)血癥時有意義。.血清淀粉酶升高最多見于急性胰腺炎,是急性胰腺炎的重要診斷指標之一,在發(fā)病后2?12小時活性開始升高,12?72小時達峰值,3?4天后恢復正常。.血清TT3與TT4濃度增高主要見于甲狀腺功能亢進時,和FT3、FT4一起可用在甲亢(甲狀腺功能亢進癥)及甲減(甲狀腺功能減低癥)的診斷、病情評估、療效監(jiān)測上。TT3是早期Graves病療效觀察及停藥后復發(fā)的敏感指標。.原發(fā)性甲狀腺性功能減退的最早表現(xiàn)是TSH升高,如TSH升高而T3、T4正??赡転閬喤R床型甲減,采臍血、新生兒血或妊娠第22周羊水測TSH(uTSH)有助于胎兒或新生兒甲減的診斷。.VMA測定可用于觀察腎上腺髓質(zhì)交感神經(jīng)的功能。在定量意義上VMA是兒茶酚胺代謝產(chǎn)物中最重要的化合物,可用來估計內(nèi)源形成的兒茶酚胺,其升高見于嗜倍細胞瘤及腎上腺髓質(zhì)增生。.間接凝集反應是將可溶性抗原(或抗體)先吸附于適當大小的顆粒性載體表面,然后與相應抗體(或抗原)作用,在適宜電解質(zhì)存在的條件下,出現(xiàn)特異性凝集現(xiàn)象。.間接凝集反應適用于各種抗體和可溶性抗原的檢測。以載體來分,常用的為紅細胞、膠乳顆粒及明膠顆粒等。.正向間接凝集反應:可溶性抗原致敏載體,用以檢測標本中待測抗體的凝集反應,稱為」E向間接凝集反應。反向間接凝集反應:特異性抗體致敏載體,用以檢測標本中待測抗原的凝集反應,稱為反向間接凝集反應。117、間接血凝試驗,紅細胞是大小均一的載體顆粒,最常用的為綿羊、家兔、雞的紅細胞及0型人紅細胞。.抗原抗體溶液在電解質(zhì)的存在下結(jié)合,形成絮狀沉淀物,這種絮狀沉淀受抗原和抗體比例的直接影響,因此常用來作為測定抗原抗體反應最適比例的方法,常見類型有:抗原稀釋法;抗體稀釋法;方陣滴定法,即棋盤滴定法。.某些非離子型親水劑對促進IC的形成有顯著的增強作用,如聚乙二醇(PEG)、吐溫-20,其作用是消除蛋白質(zhì)(抗原或抗體)分子周圍的電子云和水化層,促進抗原、抗體分子靠近,結(jié)合形成大分子復合物。120.抗原抗體的比例是濁度形成的關(guān)鍵因素。當抗原過量時,形成的IC分子小,而且會發(fā)生再解離,使?jié)岫确炊陆担馍⑸湟鄿p少,這就是高劑量鉤狀效應。當反應液中抗體過量時,IC的形成隨著抗原遞增而增加,至抗原、抗體最適比例處達最高峰,這就是經(jīng)典的海德堡曲線理論。.單向擴散試驗檢測時的注意點:①抗血清必須特異性強、效價高、親和力強,在良好條件下保存;②每次測定都必須作標準曲線;③每次測定時必須用質(zhì)控血清作質(zhì)控,④注意雙環(huán)現(xiàn)象(出現(xiàn)了兩種抗原性相同成分)。.雙向擴散試驗,抗原性質(zhì)的分析:兩條沉淀線互相吻合相連,表明抗體與兩個抗原中的相同表位結(jié)合而沉淀,兩個抗原相同;沉淀線呈部分相切,說明兩個抗原之間有部分相同;兩條沉淀線交叉而過,說明兩個抗原完全不同。.免疫電泳為定性試驗,目前主要應用于純化抗原和抗體成分的分析及正常和異常免疫球蛋白的識別與鑒定方面,例如多發(fā)性骨髓瘤患者血清在免疫電泳后,可觀察到異常的M蛋白沉淀弧。.免疫固定電泳可用于鑒定遷移率近似的蛋白和M蛋白,免疫球蛋白輕鏈,尿液、腦脊液等微量蛋白,游離輕鏈,補體裂解產(chǎn)物等。免疫固定電泳最大的優(yōu)勢是分辨率強,敏感度高,操作周期短,僅需數(shù)小時,結(jié)果易于分析,目前已作為常規(guī)檢測。.RIA為競爭抑制性結(jié)合,反應參數(shù)與待檢抗原量成反比,IRMA為非競爭性結(jié)合,反應參數(shù)與待檢抗原濃度呈正相關(guān)。.熒光顯微技術(shù)主要靠觀察標本片上熒光抗體的染色結(jié)果作為抗原的鑒定和定位。因此標本制作的好壞直接影響到檢測的結(jié)果。在制作標本過程中應力求保持抗原的完整性。.間接法可用于檢測抗原和抗體。本法有兩種抗體相繼作用,第一抗體為針對抗原的特異抗體,第二抗體(熒光抗體)為針對第一抗體的抗抗體。本法靈敏度高,而且在不同抗原的檢測中只需應用一種熒光抗體。缺點是容易產(chǎn)生非特異熒光。.均相酶免疫測定主要用于小分子激素和半抗原(如藥物)的測定,均相法的優(yōu)點是適合于自動化測定,但反應中被抑制的酶活力較小,需用靈敏的光度計測定,反應的溫度也需嚴格控制,其應用相對要局限得多。.液相酶免疫測定:此類測定方法主要用于檢測樣品中極微量的短肽激素和某些藥物等小分子半抗原,近年來的發(fā)展使其靈敏度可達ng至pg水平,與放射免疫測定相近。固相酶免疫測定:如常用的酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)o.ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。本法有三個必要的試劑:①固相的抗原或抗體;②酶標記的抗原或抗體;③酶反應的底物。131.化學發(fā)光免疫測定技術(shù)無放射性污染,同時能達到放射免疫測定的靈敏度,而且還具有快速、準確、特異、可自動化等特點,因此已廣泛應用于各種激素、腫瘤標志物、藥物濃度及其他微量生物活性物質(zhì)的測定。.金免疫層析試驗(GICA)多用于檢測抗原,但亦可用于檢測抗體。常見方法類型有:①雙抗體夾心法測抗原;②競爭法測小分子抗原;③間接法測抗體。.不同的膠體金水溶膠因粒子大小不同,顏色亦不同。顆粒在5~20nm之間,吸收波長為520nm時,呈葡萄酒紅色;顆粒在20?40nm之間,吸收波長為530nni時,呈深紅色;顆粒為60nm,吸收波長為600nm時,呈藍紫色;若離心去掉較大的金顆粒后,溶膠呈紅色。.根據(jù)T細胞的免疫效應功能和表面CD分子表達至少可以將T細胞分為:CD3+CD4+CD8-輔助性T細胞(Th)、CD3+CD4-CD8+細胞毒性T細胞(Tc或CTL)和CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞(Tr或Treg)等。.B細胞的表面標志:膜免疫球蛋白(mlg)又稱為BCR,表達于所有成熟的B細胞和大多數(shù)B細胞瘤的細胞表面,屬于免疫球蛋白超家族原型,是B細胞最具特性的表面標志。又稱抗原受體。成熟B細胞的mlg主要為mlgM和mlgDo9.外周血中桿狀核粒細胞增多和/或出現(xiàn)晚幼粒、中幼粒、早幼粒等細胞時(>5%)稱為核左移。中性粒細胞核分葉5葉以上者超過3%則稱為核右移,常伴白細胞總數(shù)減低。1O火焰狀漿細胞:漿細胞體積大,胞質(zhì)紅染,邊緣呈火焰狀。見于IgA型骨髓瘤。.正常紅細胞直方圖,在36?360門范圍內(nèi)分布兩個細胞群體,從50~125fl區(qū)域有一個兩側(cè)對稱、較狹窄的曲線,為正常大小的紅細胞,從125?200fl區(qū)域有另一個低而寬的曲線,為大紅細胞、網(wǎng)織紅細胞。當紅細胞體積大小發(fā)生變化時,峰左移或右移,或出現(xiàn)雙峰。.我國標準抗A和抗B血清效價均在1:128以上。.抗球蛋白法配血法:又稱Coombs試驗。是最可靠的確定不完全抗體的方法,但操作繁瑣??骨虻鞍追ㄅ溲ㄊ亲钤缬糜跈z查不完全抗體的方法。直接抗球蛋白法可檢查受檢者紅細胞是否已被不完全抗體致敏;間接抗球蛋白法可用于鑒定Rh血型及血清中是否存在不完全抗體。.聚凝胺法配血法可以檢出IgM與IgG兩種性質(zhì)的抗體,能發(fā)現(xiàn)可引起溶血性輸血反應的幾乎所有規(guī)則與不規(guī)則抗體。.卡式配血/血型鑒定檢測法國或為國際安全輸血檢查的推差方迭。.Rh血型系統(tǒng)的抗體多由獲得性免疫產(chǎn)生,血清中很少有天然抗體,故不需要做反定型。17.血液制品貯存溫度和時間血液制品貯存溫度時間全血和紅細胞制劑2飛℃2~6。C21天(ACD)35天(CDPA-1)洗滌紅細胞2?6c24天濃縮血小板20?24℃7天.人類NK細胞表面標志主要以CD16、CD56來認定。目前多以CD3-、CD16+、CD56+作為NK細胞典型標志。.體外刺激T細胞增殖反應的刺激物包括植物血凝素(PHA)、刀豆素A(ConA)和美洲商陸(PWM)、白喉類毒素、破傷風類毒素、純化蛋白衍生物(PPD)和白色念珠菌等。.B細胞增殖試驗原理與T細胞增殖試驗相同,但刺激物不同,小鼠B細胞可用細菌脂多糖(LPS)作為刺激物,人則用含SPA的金黃色葡萄球菌菌體及抗IgM抗體等刺激。.測定人NK細胞活性的靶細胞多用K562細胞株,而測定小鼠NK細胞活性則常采用YAC-1細胞株。.流式細胞術(shù)用于AIDS病免疫功能的檢測,是其最重要的檢測手段,通過動態(tài)監(jiān)測T細胞亞群可對HIV感染者或AIDS發(fā)病者進行鑒別。僅為HIV攜帶者,病毒未復制時,其Th細胞下降不明顯;當發(fā)展為AIDS時,Th細胞水平明顯下降,如Thl細胞<Th2細胞時,HIV在細胞間的傳播和感染更敏感,更易發(fā)生AIDS。.免疫比濁法測定1g,該法具有檢測范圍寬、測定結(jié)果準確、精密度高,檢測時間短(一般在幾分鐘內(nèi)即可完成測試)、敏感度高、穩(wěn)定性好等優(yōu)點。.免疫球蛋白降低:有先天性和獲得性兩類。先天性低1g血癥,主要見于體液免疫缺陷病和聯(lián)合免疫缺陷病。1g全缺,如Bruton型無Ig血癥,血中IgG常小于lg/L,lgA與IgM含量也明顯減低為正常人的.SPI^0.1表明腎臟有高度選擇性地排泌分子量較小的蛋白質(zhì);SPI>0.2表明腎臟是非選擇性地排泌分子量較大的蛋白質(zhì)。.免疫固定電泳(IFE)技術(shù)是區(qū)帶電泳技術(shù)與特異性抗血清的兔疫沉淀反應相結(jié)合的一種免疫學分析方法,是臨床鑒定M蛋白最常用的方法。145.皮試試驗由于影響因素多。假陽性的常見原因:①變應原稀釋液偏酸或偏堿;②患者有皮膚劃痕癥;③抗原不純或被污染;④抗原量注射過多。假陰性的常見原因:①變應原抗原性喪失或濃度過低;②患者皮膚反應較低;③受試者正使用抗組胺類藥或激素類藥;④注射部位過深或注射量太少。.結(jié)核菌素皮試目的:①了解機體是否對結(jié)核分枝桿菌有免疫力及接種卡介苗后的免疫效果觀察。人群中大約96%的人均感染過結(jié)核分枝桿菌,細胞免疫正常者,皮試結(jié)果應為陽性。②排除結(jié)核分枝桿菌感染。如細胞免疫正常,皮試結(jié)果陰性,可排除結(jié)核分枝桿菌感染。但值得注意的是,在患者極度衰竭時,即使感染了結(jié)核分枝桿菌,仍可為陰性。③了解機體細胞免疫功能狀況。.ANA在未治療的SLE患者中的效價較高,在大多數(shù)自身免疫性疾病中均可呈陽性,如SLERA、混合性結(jié)締組織病(MCTD)、干燥綜合征(SS)、硬皮病、慢性活動性肝炎,正常老年人也可有低效價的ANAoANA陽性并不一定患有自身免疫性疾病。.抗dsDNA抗體是SLE患者的特征性標志抗體,該抗體陽性為SLE的重要診斷標準之一。.抗Sm抗體僅發(fā)現(xiàn)于SLE患者中,是SLE的血清標志抗體,已列入SLE的診斷標準。.抗核RNP抗體是診斷MCTD的重要血清學依據(jù),列入MCTD的診斷標準。.抗SSA/Ro抗體和抗SSB/La抗體是SS患者最常見的自身抗體。.抗Jo-1抗體最常見于多發(fā)性肌炎(PM)。.抗Scl-70抗體幾乎僅在進行性系統(tǒng)性硬皮?。≒SS)患者中檢出。.常見的RF有IgM型、IgG型、IgA型和IgE型,IgM型RF被認為是RF的主要類型,也是臨床免疫檢驗中常規(guī)方法所測定的類型。.抗CCP抗體主要為IgG類抗體,對RA的特異性為96%,在疾病的早期階段就可以出現(xiàn)陽性,具有很高的陽性預測值。.原發(fā)性膽汁性肝硬化患者幾乎都有AMA,AMA抗原組中M2型對診斷原發(fā)性膽汁性肝硬化最具有診斷意義。.B細胞表面存在著CD10、CD19、CD20、CD22等抗原。CD10只出現(xiàn)在前B細胞,CD19、CD20從原始至成熟的B細胞都存在,而CD22只在成熟B細胞表達。故檢測這些B細胞標志可了解B細胞數(shù)量、亞型和分化情況。.T細胞功能體外試驗:通常用PHA刺激淋巴細胞的增殖、轉(zhuǎn)化試驗來判斷T細胞的功能。.HIV抗體檢測:初篩試驗常用ELISA法、膠乳凝集法和免疫金層析法。確認試驗主要用免疫印跡法,判斷標準為:①HIV抗體陽性:至少有兩條膜帶(gp41/gpl20/gpl60)或至少一條膜帶與p24帶同時出現(xiàn);②HIV抗體陰性:無HIV抗體特異性條帶出現(xiàn);③HIV抗體可疑:出現(xiàn)HIV特異性條帶,但帶型不足以確認陽性者。.大多數(shù)細菌合適的pH為7.2~7.6。少數(shù)細菌對pH的需要明顯不同,如霍亂弧菌pH8.4?9.2,結(jié)核分枝桿菌pH6.5?6.8,乳酸桿菌pH5.5。.需氧菌必須在有氧(空氣)的情況下才能生長,微需氧菌在5%?6%的低氧環(huán)境中才能生長。.細菌染色的基本程序:涂片(干燥)一固定一染色(媒染)一(脫色)f(復染)。.金黃色葡萄球菌:觸酶試驗陽性、血漿凝固酶試驗陽性、甘露醇發(fā)酵試驗陽性、對新生霉素敏感;表皮葡萄球菌:觸酶試驗陽性、血漿凝固酶試驗陰性、對新生霉素敏感;腐生葡萄球菌:觸酶試驗陽性、血漿凝固酶試驗陰性、對新生霉素耐藥。.鏈球菌屬鑒定:①膽汁七葉首試驗:因D群鏈球菌能在40%膽汁培養(yǎng)基中生長,并可分解七葉甘,使培養(yǎng)基變黑;②Optochin敏感性試驗:幾乎所有的肺炎鏈球菌菌株都對Optochin敏感,而其他鏈球菌通常不被其所抑制;③馬尿酸鹽水解試驗:B群鏈球菌具有馬尿酸氧化酶,使馬尿酸水解;④cAMP試驗:羊血平板上B群鏈球菌與金葡菌協(xié)同形成箭頭狀溶血;⑤桿菌肽敏感試驗:化膿型鏈球菌為陽性;⑥血清分群分型;⑦豬鏈球菌檢測。.肺炎鏈球菌鑒定:①膽汁溶解試驗:陽性;②)菊糖發(fā)酵試驗:陽性;③動物試驗:小白鼠對肺炎鏈球菌極為敏感;④莢膜腫脹試驗:陽性;⑤Optochin敏感試驗:陽性;⑥快速乳膠凝集試驗:陽性。.腦膜炎奈瑟菌的鑒定主要通過氧化酶、糖類發(fā)酵和血清學等試驗。①細菌染色形態(tài);②氧化酶試驗陽性;③觸酶試驗陽性;④分解葡萄糖、麥芽糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣;⑤莢膜多糖抗原直接凝集試驗。.埃希菌屬初步鑒定:根據(jù)菌落特征,涂片染色的菌形及染色反應,取純培養(yǎng)物作生化反應。凡符合KIA:A/A或K/A、產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣、H2s-、MIU:動力+或-、吧噪+、胭酶-,甲基紅+,硝酸鹽還原+,VP-,氧化酶-,枸檬酸鹽-,可鑒定為大腸埃希菌。.志賀菌屬與大腸埃希菌的鑒別:①無動力,不發(fā)酵乳糖,靛基質(zhì)陰性,賴氨酸陰性;②發(fā)酵糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣(福氏志賀菌6型、鮑氏志賀菌13和14型、痢疾志賀菌3型除外);③分解黏液酸,在醋酸鹽和枸椽酸鹽瓊脂上產(chǎn)堿。.沙門菌屬血清學診斷:肥達試驗:用已知的傷寒沙門菌0、H抗原,副傷寒甲、乙H抗原稀釋后與被檢血清作定量凝集試驗,以檢測患者血清中抗體的含量,來判斷機體是否受沙門菌感染而導致腸熱癥并判別沙門菌的種類。.克雷伯菌屬標本的采集:腸炎患者采集糞便,敗血癥者采集血液,其他根據(jù)病癥分別采集尿液、膿汁、痰、腦脊液、胸水及腹水等。.克雷伯菌屬鑒定:①初步鑒定:根據(jù)KIA、MIU,結(jié)合甲基紅試驗、V-P試驗、枸檬酸鹽利用及氧化酶結(jié)果進行初步鑒定;②屬的鑒定:關(guān)鍵是克雷伯菌屬動力和鳥氨酸脫竣酶均為陰性反應;③種的鑒定:肺炎克雷伯菌口引噪陰性和不能在10°C生長,而催娩克雷伯菌口引味陽性,能在10°C生長,不能在25°C生長。.霍亂弧菌標本采集以糞便為主,盡可能在患者用藥之前采取??捎脽o菌棉拭子采取自然排出的新鮮糞便,亦可用直腸拭子由肛門插入直腸3?5cm處采集。一般米泊水樣便采取1?3ml,成形便采取蠶豆大小。.氣單胞菌屬分離培養(yǎng):血液標本經(jīng)肉浸液或胰化酪蛋白大豆肉湯內(nèi)增菌后轉(zhuǎn)種血瓊脂平板或含氨苦西林血平板,膿汁、分泌物等直接接種血瓊脂平板;糞便標本接種腸道選擇培養(yǎng)基。另一部分標本可接種于PBS,置4°C冷增菌后,于1、3、5、7、17天移種分離平板上。標本接種后,經(jīng)35。C培養(yǎng)24~48小時,觀察菌落。.彎曲菌屬懸滴標本檢查:取新鮮糞便置于載玻片上,加生理鹽水少許混合后,上覆蓋玻片置顯微鏡下觀察有無投鏢式或螺旋狀運動的細菌。腦脊液經(jīng)3000r/min離心沉淀15分鐘后,制成涂片作懸滴檢查。.幽門螺桿菌快速診斷:有直接染色鏡檢,快速胭酶分解試驗、碳標記(13C或14c標記尿素)呼氣試驗(如果CO,超標,提示HP存在)、有商品試劑盒檢測糞便HP抗原、血清學檢測抗HP菌體抗體或胭酶抗體、基因芯片法檢測胭酶、細胞毒素和空泡毒素抗體。分子生物學技術(shù)檢測毒素基因。.由于艱難梭菌的分離培養(yǎng)困難,所以在臨床上一般不采用分離培養(yǎng)病原菌的方法,可通過臨床表現(xiàn)及細胞毒素試驗陽性檢測來進行診斷。在CCFA平板上的菌落,黃色,粗糙型,脂酶,卵磷脂酶陰性。在紫外線照射下呈黃綠色熒光。.產(chǎn)單核李斯特菌可根據(jù)下列特點加以確定:在血瓊脂上有狹窄的B溶血環(huán),25°C動力最強,在半固體培養(yǎng)基上呈傘狀生長,可在4°C冷增菌生長,木糖、甘露醇和H,S陰性。cAMP(與金黃色葡萄球菌協(xié)同溶血)陽性。觸酶試驗陽性。.固體培養(yǎng)法:結(jié)核分枝桿菌的分離培養(yǎng)對于結(jié)核病的診斷、療效觀察及抗結(jié)核藥物的研究均具有重要意義。培養(yǎng)前針對標本應做適當?shù)那疤幚恚缣悼勺?%H2s04或4%NaOH處理20~30分鐘,除去雜菌再接種于羅氏培養(yǎng)基,37°C5%~10%C02培養(yǎng),定時觀察,至4~8周。此方法可準確診斷結(jié)核桿菌。.麻風分枝桿菌是麻風的病原菌,麻風是一種慢性傳染病,也是一種人畜共患病。早期主要損害皮膚、黏膜和神經(jīng)末梢,晚期可侵犯深部組織和器官,此菌尚未人工培養(yǎng)成功,已用凱徐建立了良好的動物模型。180.銅綠假單胞菌初步鑒定可依據(jù)菌落特征、色素(約10%菌株不產(chǎn)生色素)、氣味等以及涂片染色結(jié)果,氧化酶試驗。.提高流感嗜血桿菌的陽性率:①初次培養(yǎng)應在5%?10%C02環(huán)境;②生長需要X、V因子,故在培養(yǎng)基中應添加此因子;③應用選擇性培養(yǎng)基,如巧克力瓊脂中加一定量抗生素,1ml培養(yǎng)基中含萬古霉素50ug,桿菌肽300ug,克林可霉素lug,嗜血桿菌分離率可達96.7M.立克次體培養(yǎng)法;①立克次體分離:斑疹傷寒、斑點熱、恙蟲病和Q熱病原體分離多用動物接種。常用動物有豚鼠、金黃地鼠、小白鼠、大白鼠及家兔等。漢賽巴通體用人工培養(yǎng)基,埃立克體用細胞培養(yǎng);②分離株的大量繁殖及保存用雞胚卵黃囊培養(yǎng)或細胞培養(yǎng)。.諾卡菌屬標本采集:可采集痰液、支氣管沖洗液、組織滲出液、膿液和腦脊液標本。標本采集后,應仔細查找有無黃、紅或黑色顆粒,其直徑一般小于1mm。本菌在腦脊液、胸腔穿刺液及痰液中多不形成顆粒。.鉤端螺旋體屬抗體檢測可采用間接免疫熒光法、ELISA等技術(shù)。一般在病初和發(fā)病的3?4周采取雙份血清,監(jiān)測抗體滴度的動態(tài)變化。有腦膜刺激征的可抽取腦脊液檢測抗體。.梅毒螺旋體直接鏡檢:一期梅毒取硬下疳滲出液,二期梅毒取梅毒疹滲出液,制成涂片用暗視野顯微鏡直接鏡檢,如見有運動活潑的密螺旋體有助于診斷。也可經(jīng)鍍銀染色、Giemsa染色后光學顯微鏡檢查。也可用直接熒光染色檢查標本中的螺旋體。.流行性感冒病毒血清學診斷:需同時檢測急性期(5天以內(nèi))和恢復期(2~4周)血清,在相同條件下進行血凝抑制試驗,如恢復期抗體效價比急性期高4倍或4倍以上即有診斷意義。.甲型肝炎患者病期不長,預后良好,一般不需要進行病原學檢查。感染早期一般可用RIA或ELISA檢測患者血清中抗-HAVIgM。它出現(xiàn)早,消失快,是HAV新近感染的重要指標。.臨床實驗室目前主要靠RIA和ELISA等血清學方法檢測HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBc、抗-HBe。其中HBsAg的檢測最為重要,可發(fā)現(xiàn)無癥狀攜帶者,是獻血者篩選的必檢指標。.HCV感染的一個主要特點就是慢性化的概率很高,感染過程很長,存在不同程度的肝組織病變,并呈慢性進行性。可發(fā)展為肝硬化,與原發(fā)性肝癌關(guān)系十分密切。.血培養(yǎng):一般在患者發(fā)熱初期或高峰期采集,或根據(jù)不同的發(fā)熱情況在未用抗生素前采集。但懷疑細菌性心內(nèi)膜炎時,血培養(yǎng)不少于3次。一般為靜脈采血,成人采血量10?20ml,兒童3?5ml,嬰兒『2ml。床邊直接注入血液培養(yǎng)基,否則用SPS抗凝劑送檢,不得用EDTA,枸檬酸鈉抗凝。.性傳播疾病:一般用拭子取尿道膿性分泌物(男性)或?qū)m頸分泌物(女性),供培養(yǎng)及鏡檢;梅毒患者取皮膚滲出液和淋巴穿刺液涂片;皰疹抽取皰內(nèi)液體,或刺破小瘡后,用無菌拭子采樣。192,墨汁負染色適用于隱球菌的檢查,可見新型隱球菌具有寬厚莢膜。.乳酸酚棉蘭染色適用于各種真菌的檢查,酵母型細胞,菌絲和抱子被染為藍色。.玉米粉聚山梨酯-80瓊脂用于培養(yǎng)白假絲酵母菌,以觀察其形成的厚膜袍子和假菌絲。.芽管形成試驗:將假絲酵母菌接種于0.2~0.5ml人或動物血清中,37°C孵育3小時(一般不超過4小時),取一接種環(huán)血清在顯微鏡下觀察酵母細胞是否形成了芽管。.超廣譜B-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)常見于肺炎克雷伯菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、大腸埃希菌和奇異變形桿菌,大多由TEMK2,SHV-1型突變而成。其他的基因型的類別還有CTX-M、T0H0等。ESBLs可以水解青霉素,一、二、三代頭抱菌素和氨曲南,但頭霉菌素和碳青酶烯類不受影響。.非封閉離心杯內(nèi)離心管破裂時,關(guān)閉電源,待氣溶膠沉降約30分鐘后開蓋,若離心機停止時發(fā)現(xiàn)離心管破裂,立即蓋上離心機,密閉約30分鐘。戴結(jié)實的手套清理消毒。其他未破損的帶蓋離心管應消毒。封閉離心杯內(nèi)離心管破裂時,在生物安全柜內(nèi)打開、處理。.感染性物質(zhì)運輸通常需要三層包裝,裝載標本的內(nèi)層容器應密閉、防水、防滲漏,貼標示內(nèi)容物的標簽;第二層包裝為吸水性材料,當內(nèi)層容器泄漏時,吸收澄出的液體;第三層包裝保護第二層包裝免受物理性損壞。濃縮粒細胞20~24。C24小時新鮮冰凍血漿、冰凍血漿、冷沉淀物<-30°C1年低溫冰凍紅細胞<-65℃10年.尿標本采集容器應符合以下條件:材料由不與尿成分發(fā)生反應的惰性一次性環(huán)保型材料制成;一般應能容納性ml以上尿的容積;必須干燥、清潔,無污染物、無滲漏、無化學物質(zhì)。.餐后尿:通常收集午餐后至下午2時的尿。這種尿標本,有利于檢出病理性糖尿、蛋白尿或尿膽原。有助于肝膽疾病、腎臟疾病、糖尿病、溶血性疾病等的臨床診斷。.冰乙酸用于檢測尿5-羥色胺、醛固酮等的尿防腐。.無尿指尿量<100ml/24h,或12小時無尿液產(chǎn)生。腎受汞等毒性物質(zhì)損害,??梢鸺毙阅I小管壞死,而突然引起少尿及尿閉。.膽紅素尿外觀呈深黃色,振蕩后產(chǎn)生的泡沫亦呈黃色。.膿尿、菌尿均見于腎盂腎炎、膀胱炎、前列腺炎、精囊炎、尿道炎等。.相差顯微鏡法:是以光的衍射和干涉現(xiàn)象照射標本,產(chǎn)生明暗不同的反差進行識別,有助于辨別透明管型、不典型紅細胞、新鮮尿中血小場。.偏振光顯微鏡法:利用光的偏振特性對具有雙折射性的物體進行鑒別,如可顯示鹽類結(jié)晶的精細結(jié)構(gòu)。.正常尿中無白細胞管型。出現(xiàn)白細胞管型,提示腎實質(zhì)有細菌感染性病變,見于急性腎盂腎炎、腎膿腫、間質(zhì)性腎炎、急性腎小球腎炎;非感染性炎癥的腎病綜合征、紅斑狼瘡腎炎;腎移植排斥反應(可見淋巴細胞管型)。.正常尿中無蠟樣管型。出現(xiàn)蠟樣管型提示腎小管有嚴重病變,預后差??梢娪诼阅I小球腎炎晚期、長期無尿和少尿、尿毒癥、腎病綜合征、腎功能不全、腎淀粉樣變性;亦可見于腎小管炎癥和變性、腎移植慢性排異反應、重癥肝病等。.草酸鈣結(jié)晶屬正常代謝成分,但在新鮮尿中大量出現(xiàn)此結(jié)晶伴隨紅細胞,而又有腎或膀胱的刺激癥狀,多為腎或膀胱結(jié)石的征兆,尿路結(jié)石約90%為草酸鈣結(jié)晶。.磺基水楊酸法:又稱磺柳酸法。被NCCLS作為干化學法檢查尿蛋白的參考方法,并推薦為檢查尿蛋白的確證試驗。.肝細胞性黃疸見于各種使肝細胞廣泛損害的疾病,如急性黃疸性肝炎、病毒性肝炎、肝硬化、中毒性肝炎、敗血癥等。.梗阻性黃疸因無膽紅素排入腸腔,糞便呈白陶土色,尿膽原陰性,尿膽素亦陰性。.尿微量清蛋白檢測主要用于早期腎損害的診斷,尤其當尿清蛋白排泄率持續(xù)超過20ug/min尿,常作為糖尿病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)等全身性疾病早期腎損害的敏感指標。33.尿液標本必須新鮮,不能含有強酸、強堿等物質(zhì)。使用干化學尿比密測定時,變化范圍為pH6.2~7.0,當尿液pH/7.0時,造成結(jié)果偏低,應在干化學測定結(jié)果的基礎(chǔ)上增加0.005,作為由于堿性尿損失的補償。.尿亞硝酸鹽試驗是細菌感染的指標。陽性結(jié)果的產(chǎn)生取決于3個條件:①尿液中的致病菌須含有硝酸鹽還原酶。②體內(nèi)有適量硝酸鹽的存在。③尿液在膀胱內(nèi)有足夠的停留時間(>4小時)且排除藥物等干擾因素。檢測結(jié)果陰性并不能排除菌尿的可能。尿液中尿膽原、維生素C、尿pH大于6,尿量過多,都有可能造成亞硝酸鹽假陰性結(jié)果。.尿液中維生素C含量的高低對血紅蛋白、膽紅素、葡萄糖及亞硝酸鹽可產(chǎn)生嚴重的負干擾,干擾的程度隨維生素C濃度的增加而增加。.尿有形成分分析儀的定量參數(shù)主要包括:紅細胞(RBC/分)、白細胞(WBC/ul)、上皮細胞(EC/ul)、管型(CAST/ul)、細菌(BACT/ul)。.糞便檢驗,檢查蟒蟲時需要用透明薄膜拭子或棉拭子于清晨排便前拭取肛門四周,并立即鏡檢。.消化道潰瘍經(jīng)治療后糞便顏色已趨正常,但隱血試驗陽性仍可持續(xù)5?7天,隱血試驗轉(zhuǎn)為陰性可作為判斷出血完全停止的可靠指標。.隱血試驗免疫學法主要用于下消化道出血檢驗,而40%~50%上消化道出血不能檢出;大量出血時,血紅蛋白(抗原)濃度過高造成的與單克隆抗體不匹配(即后帶現(xiàn)象),亦可出現(xiàn)假陰性。.糞便生理鹽水涂片檢驗。滴加1~2滴生理鹽水在載玻片上,以竹簽挑取含有黏液或血液等可疑部分的少量糞便,若外觀無異常則需糞便內(nèi)外多點取材,混懸于生理鹽水中制成涂片,厚度以通過懸液能看清紙上的字跡為宜。進行顯微鏡檢驗時,原則上要觀察10個以上的高倍視野。.蛋白商反映了腦脊液球蛋白與清蛋白的比例變化。①蛋白商增高:提示腦脊液球蛋白含量增高,見于多發(fā)性硬化癥、神經(jīng)梅毒、腦脊髓膜炎、亞急性硬化性全腦炎等;②蛋白商減低:提示腦脊液清蛋白含量增高,見于化膿性腦膜炎急性期、腦腫瘤、脊髓壓迫癥等。.目前,將漿膜腔積液的檢驗分為三級:一級檢驗:一般檢驗項目,包括比密、總蛋白、Rivalta試驗、細胞計數(shù)、細胞分類計數(shù)及細菌學檢驗;二級檢驗:主要為化學檢驗、包括CRP、LD、ADA、LzM、AMY、葡萄糖等;三級檢驗:主要為免疫學檢驗,包括CEA、AFP、腫瘤特異抗原、鐵蛋白等。.室溫下正常精液常在排出后30分鐘內(nèi)自行液化。若超過60分鐘仍未液化,則稱為精液遲緩液化癥。.先天性精囊腺缺如,果糖為陰性。精囊腺炎時,果糖含量減低。在無精癥和射精量少于1ml者,若精漿中無果糖為精囊阻塞;有果糖,則為射精管阻塞。.卵磷脂小體為圓形或卵圓形,大小不等,多大于血小板,小于紅細胞,折光性強。正常前列腺液涂片中數(shù)量較多,分布均勻。前列腺炎時數(shù)量常減少或消失,分布不均,有成簇分布現(xiàn)象。.細菌性陰道炎的臨床診斷依據(jù)為:①線索細胞:為陰道鱗狀上皮細胞黏附大量加德納菌及其他短小桿菌后形成;②PH:>4.5;③胺試驗:陽性;4.陰道分泌物稀薄均勻。凡有線索細胞,再加上述任意其他2條,診斷即成立。.胃液檢查對胃泌素瘤、胃癌和十二指腸潰瘍的診斷與鑒別診斷有重要意義。如果空腹胃液量大于100ml,BAO大于15nlmol/h,MAO大于30mmo1/h,且BAO/MAO大于0.6,即可考慮胃泌素瘤。臨床上通過胃液檢查和血清胃泌素的測定,95%的胃泌素瘤可確診。.高分化鱗癌:癌細胞分化程度較高,以表層細胞為主。癌細胞的多形性和

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