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文檔簡介
一、各類微生物比較分類地位:高→低真菌→放線菌→螺旋體→細菌→支原體→立克次氏體→衣原體→病毒類別細胞類型形態(tài)DNA/RNA真菌真核、多(主)或單絨毛狀+放線菌原核、
單分枝狀+細菌原核、
單球、桿、螺形+螺旋體原核、
單螺旋狀+支原體原核、
單不定形+衣原體原核、
單橢圓形+立克次氏體原核、
單短桿、球狀+病毒非細胞球、桿為主僅一種類別無生命培養(yǎng)基生長情況繁殖方式核糖體真菌+孢子、菌絲、裂殖+放線菌+孢子、菌絲+細菌+二分裂+螺旋體+二分裂+支原體+二分裂+衣原體-二分裂+立克次氏體-二分裂+病毒-復(fù)制-類別常見抗生素敏感性干擾素敏感性其它真菌--孢子和菌絲組成、無性和有性放線菌+-孢子和菌絲組成、產(chǎn)抗生素最多細菌+-典型原核微生物螺旋體+-無鞭毛,能運動,不同于螺形菌支原體+-無胞壁,最小獨立生存細胞衣原體++獨特周期(原、始),專性活寄生立克次氏體+-專性活細胞寄生病毒
-+專性活細胞寄生
細菌放線菌真菌霉菌酵母形態(tài)
桿、球、螺
分枝狀分枝狀橢圓細胞壁肽聚糖肽聚糖幾丁質(zhì)酵母多糖生長溫度
37℃28-32℃
22-28℃酸堿度
6.8-7.47.2-7.64-6常用培養(yǎng)基營養(yǎng)肉湯高氏一號沙保培養(yǎng)基
查氏培養(yǎng)基代表二、微生物的培養(yǎng)(一)培養(yǎng)條件:細菌、放線菌和真菌(二)培養(yǎng)基1、概念、種類及用途(固、液、半固、鑒別)2、必備條件:四個3、配制過程:固體?(三)培養(yǎng)現(xiàn)象1、固體:2、液體:3、半固體:菌落(純、多、可見)和菌苔沉淀、均勻渾濁、菌膜檢查細菌動力(鞭毛)(四)細菌鑒別1、形態(tài)結(jié)構(gòu):2、染色性革蘭染色:原理、步驟、試劑與結(jié)果3、培養(yǎng)現(xiàn)象:菌落特征、液體生長現(xiàn)象4、生化反應(yīng)球、桿、螺形細胞壁組成和結(jié)構(gòu)差異涂片→干燥→固定→初染→媒染→脫色→復(fù)染初染(草酸銨結(jié)晶紫)→媒染(盧卡氏典液)→脫色:關(guān)鍵(95%乙醇)→復(fù)染(復(fù)紅或沙黃)→結(jié)果:紫為G+;紅為G-吲哚試驗(I)硫化氫試驗枸櫞酸鹽利用試驗(C)尿素酶試驗常用的生化反應(yīng)甲基紅試驗(M)單糖發(fā)酵試驗VP試驗(Vi)糖發(fā)酵蛋白質(zhì)分解其它IMViC試驗三、消毒滅菌1、概念:消毒、滅菌、防腐、無菌操作殺死病原微生物殺死所有微生物抑制,生長繁殖2、消毒滅菌方法:物理、化學(xué)、生物及其適用范圍空氣:濾過、紫外、化學(xué)(甲醛、過氧乙酸、環(huán)氧乙烷、臭氧等)車間地面、墻壁:紫外、化學(xué)(甲醛、過氧乙酸、環(huán)氧乙烷、新潔爾滅、煤酚皂、臭氧等)制劑設(shè)備:蒸汽、化學(xué)(甲醛、過氧乙酸、環(huán)氧乙烷、新潔爾滅、煤酚皂、臭氧、乙醇等)操作人員:乙醇原輔料:干熱、濕熱、輻射、過濾制劑:濾過、干熱、濕熱、輻射、防腐劑圍繞藥物生產(chǎn)儀器:接種環(huán)、培養(yǎng)皿、吸量管、三角瓶、試管培養(yǎng)基:高壓蒸汽滅菌法壓力、溫度、時間圍繞藥物檢驗四、微生物與藥物檢查(一)藥物的體外抑菌試驗:稀釋法、紙片法、挖溝法、聯(lián)合抑菌試驗(二)藥物的衛(wèi)生學(xué)檢查陰性:加稀釋液→無菌生長陽性:加供試液+菌液→有菌生長供試品:加供試液→無菌生長,判合格
有菌生長,判不合格
無菌檢查微生物限度檢查1、無菌檢查:無菌制劑(如注射劑、植入劑)方法:直接接種法和薄膜過濾法(優(yōu)先)2、微生物限度檢查:非規(guī)定滅菌制劑
(如口服液、外用制劑)控制菌檢查細菌總數(shù)檢查非全檢真菌總數(shù)檢查活螨檢查大腸埃希菌大腸菌群銅綠假單胞菌沙門菌金黃色葡萄球菌梭菌限制數(shù)量限制種類不超標,判合格超標,判不合格未檢出,判合格檢出,判不合格
方法:常規(guī)平板法和薄膜過濾法細菌、真菌總數(shù)檢查陰性:加稀釋液→無菌生長供試品:加供試液→不超標,判合格
超標,判不合格
數(shù)據(jù)處理
混合平板的制備細菌、真菌的培養(yǎng)結(jié)果觀察與計數(shù)供試液的制備書寫檢驗記錄單常規(guī)平板法基本過程:配制培養(yǎng)基控制菌檢查方法:常規(guī)方法法和薄膜過濾法陰性:加稀釋液→無菌生長陽性:加供試液+菌液→檢出控制菌供試品:加供試液→未檢出,判合格
檢出,判不合格
供試液制備增菌培養(yǎng)鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)挑取疑似菌落染色、鏡檢
生化試驗書寫檢驗報告單供試品控制菌檢查的基本程序:五、微生物的致病性與免疫(一)細菌的致病性1、影響因素毒力侵入數(shù)量侵入途徑機體免疫力侵襲力毒素:內(nèi)、外毒素比較2、感染類型:隱性、顯性、帶菌狀態(tài)菌血癥:菌入血,不繁殖毒血癥:菌不入血,毒素入血敗雪癥:菌入血且繁殖,毒素入血(二)免疫基礎(chǔ)1、免疫功能免疫防御免疫自穩(wěn)免疫監(jiān)視2、免疫系統(tǒng)免疫器官免疫細胞免疫分子中樞:骨髓、胸腺外周:淋巴結(jié)、脾臟等補體:概念干擾素:作用、產(chǎn)生3、抗原特性:免疫原性和免疫反應(yīng)性構(gòu)成條件:異物性、復(fù)雜大分子、特異性主要醫(yī)學(xué)抗原:哪些4、抗體概念產(chǎn)生規(guī)律:初次反應(yīng)、再次反應(yīng)作用:哪些以一抗原進入機體后所發(fā)生的免疫過程說明非特異性免疫和特異性免疫5、免疫防御機能非特異性特異性特點、組成6、超敏反應(yīng):類型及其常見疾病7、特異性免疫獲得:類型及其示例1、微生物遺傳物質(zhì):
真菌:DNA
原核:DNA:核質(zhì)(必需)與質(zhì)粒(非必需)
病毒:DNA或RNA六、微生物的遺傳與變易2、微生物遺傳變異現(xiàn)象形態(tài)結(jié)構(gòu)菌落形態(tài)毒力酶活性R質(zhì)粒:組成、耐藥機制3、原核微生物基因轉(zhuǎn)移方式轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)導(dǎo)接合噬菌體轉(zhuǎn)變4、菌種保藏方式斜面低溫保藏法液狀石蠟封存法砂土管保藏法冷凍干燥保藏法超低溫保藏法七、實訓(xùn)操作(一)顯微鏡使用技術(shù)1、放大倍數(shù)=
目鏡倍數(shù)×物鏡倍數(shù)2、使用原則:由低到高;先粗后微;宜慢忌快低:4×;10×高:40×油鏡:100×(加香柏油)放大倍數(shù)越大,視野越窄,越暗3、使用后
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