動物細胞工程的主要技術(shù)

動物細胞工程的主要技術(shù)第1頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月動物細胞工程概念常用技術(shù)應(yīng)用細胞學(xué)的方法，按照人們的需要和預(yù)定的設(shè)計，有目的、有計劃地保存、改變動物細胞和創(chuàng)造新的動物細胞，進而培育成新的物種或者品種的一門科學(xué)技術(shù)。動物細胞培養(yǎng)（基礎(chǔ)）動物細胞融合單克隆抗體動物體細胞克隆技術(shù)第2頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月一動物細胞培養(yǎng)1.動物細胞培養(yǎng)條件（1）營養(yǎng)成分：培養(yǎng)液的主要成分有葡萄糖、氨基酸、無機鹽、維生素和動物血清等。（2）氣體環(huán)境O?：細胞呼吸消耗CO?:調(diào)節(jié)pH值（3）溫度和pH：哺乳動物細胞培養(yǎng)環(huán)境溫度控制在36.5℃～37.5℃，Ph7.2～7.4。

第3頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月動物細胞的培養(yǎng)過程

幼齡動物取動物器官和組織剪碎組織胰蛋白酶處理細胞培養(yǎng)單個細胞動物細胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)剪碎組織的目的？胰蛋白酶處理的目的？第4頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月動物胚胎或幼齡動物的組織、器官細胞懸浮液10代細胞50代細胞傳代培養(yǎng)無限傳代單個細胞加培養(yǎng)液原代培養(yǎng)胰蛋白酶剪碎細胞株細胞系遺傳物質(zhì)未改變遺傳物質(zhì)已改變2.動物細胞培養(yǎng)過程第5頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月有關(guān)概念原代培養(yǎng)：經(jīng)過濾、離心后將動物再接種到無菌的培養(yǎng)液中，在適宜的條件下進行靜止或慢速轉(zhuǎn)動培養(yǎng)，這個過程成為傳代培養(yǎng)。傳代培養(yǎng)：將原代細胞從培養(yǎng)瓶中取出，配制成細胞懸浮液，分裝到兩個或兩個以上的培養(yǎng)瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，稱為傳代培養(yǎng)。第6頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月有關(guān)概念

細胞株：傳代培養(yǎng)的細胞一般傳至10代左右細胞生長停滯，大部分細胞衰老死亡，少數(shù)細胞存活到40~50代，這種傳代細胞為細胞株。細胞系：細胞株傳代至50代后又出現(xiàn)細胞生長停滯狀態(tài)，只有部分細胞由于遺傳物質(zhì)的改變，使其在培養(yǎng)條件下可以無限制傳代，這種傳代細胞為細胞系。細胞株和細胞系的區(qū)別：細胞株傳代在40~50代內(nèi)，遺傳物質(zhì)沒有改變；細胞系無限傳代下去，遺傳物質(zhì)改變。第7頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月有關(guān)概念細胞貼壁：培養(yǎng)液中分散的動物細胞，置于適宜的條件下，能夠分裂，這些細胞貼附在培養(yǎng)瓶上，成為細胞貼壁生長。細胞的接觸抑制：當貼壁細胞分裂生長到表面相互接觸時，細胞就會停止分裂增殖的現(xiàn)象。第8頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月相關(guān)問題1.為什么選用動物胚胎或幼齡個體的器官和組織做動物細胞培養(yǎng)材料？胚胎組織或幼齡動物的組織或器官分裂、增殖旺盛2.為什么培養(yǎng)前要將組織細胞分散成單個細胞？分散成單個細胞便于物質(zhì)交換，使營養(yǎng)物質(zhì)吸收及代謝廢物排出更容易，利于細胞生長和繁殖3.為什么用胰蛋白酶處理？在動物組織間隙中含有一定量的彈性纖維等蛋白質(zhì)，它們將細胞網(wǎng)絡(luò)起來形成具有一定彈性和韌性的組織和器官，而彈性纖維易被胰蛋白酶催化分解，從而使細胞分離開。第9頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月相關(guān)問題4.培養(yǎng)的細胞為何貼壁生長？大多數(shù)組織細胞不適應(yīng)懸浮生長，它們必須在固定的表面生長和分裂5.動物細胞培養(yǎng)能否像植物組織培養(yǎng)那樣最終培養(yǎng)成生物個體？不能，動物細胞培養(yǎng)只能使細胞數(shù)目增多，不能發(fā)育成新的動物個體第10頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月二動物體細胞克隆技術(shù)1.概念：是將動物的一個細胞的細胞核移入一個已經(jīng)去掉細胞核的卵細胞中，使其重組并發(fā)育成為一個新的胚胎，這個新的胚胎始終發(fā)育為動物個體。第11頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月單克隆抗體制備流程

英國科學(xué)家米爾斯坦和德國科學(xué)家選用小鼠體內(nèi)的B淋巴細胞和一種營養(yǎng)缺陷型的骨髓瘤細胞作為實驗材料利用聚乙二醇為融合劑，使兩種細胞發(fā)生融合。然后利用只有雜交瘤細胞才能生長的選擇培養(yǎng)液來篩選處理過的細胞群體。骨髓瘤細胞在選擇培養(yǎng)液中停止生長，B淋巴細胞在體外培養(yǎng)也只能存活數(shù)天，因此只有雜交瘤細胞才可以大量生長、繁殖。利用這種方法培育得到的雜交瘤細胞不但可以像腫瘤細胞那樣無休止、快速地進行分裂增殖而且能像B淋巴細胞一樣分泌大量特異性抗體。通過雜交瘤細胞培養(yǎng)得到的這些特異性抗體就是所謂的單克隆抗體。第12頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月問題1為什么選用小鼠骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合？細胞的同源性越近，融合形成的雜種細胞越易成活問題2骨髓瘤細胞是癌細胞嗎？有無限增殖能力的細胞是腫瘤細胞，而且具有轉(zhuǎn)移能力的腫瘤細胞，稱為癌細胞，所以說瘤細胞不等于癌細胞。問題3整個制備