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文檔簡介
免疫學實驗膠體金免疫層析技術課件第1頁,課件共19頁,創(chuàng)作于2023年2月膠體金免疫層析技術(colloidalgoldimmunochromatographyassay,GICA)
第2頁,課件共19頁,創(chuàng)作于2023年2月20世紀80-90年代在酶聯(lián)免疫吸附試驗、乳膠凝集試驗、單克隆抗體技術、膠體金免疫技術和新材料技術基礎上發(fā)展了新型體外診斷技術——膠體金免疫層析技術(colloidalgoldimmunochromatographyassay,GICA)。
膠體金免疫層析技術第3頁,課件共19頁,創(chuàng)作于2023年2月
GICA是一種新型檢測方法,具有簡單快速、結果清晰,可通過肉眼判定結果、無需復雜操作技巧和特殊設備、靈敏度高、無污染、攜帶方便等優(yōu)點。己成為臨床快速診斷領域發(fā)展的一個新方向,在發(fā)達國家己得到廣泛應用。疾病的快速診斷及藥物殘留分析第4頁,課件共19頁,創(chuàng)作于2023年2月類別應用領域檢測的物質人類醫(yī)學各級醫(yī)院,血站,CDC,防疫站,診斷中心;家庭自檢;商檢系統(tǒng);邊檢口岸;公安系統(tǒng).傳染病(乙肝五項,HIV,SARS等)標志物(AFP、肌鈣蛋白、糞便血紅蛋白等)女性妊娠hCG(早孕)毒品(嗎啡,K粉,搖頭丸,冰毒)農(nóng)牧業(yè)畜牧獸醫(yī)站,商檢系統(tǒng),邊檢口岸,農(nóng)牧類院系和研究所傳染?。ㄇ萘鞲?鏈球菌等)病毒(煙草花葉病毒、犬細小病毒等)環(huán)境環(huán)保監(jiān)測部門,研究機構有害物質超標食品安全食品安全檢測中心,各監(jiān)管部門農(nóng)獸藥殘留(磺胺類、瘦肉精等),大腸桿菌,黃曲霉素第5頁,課件共19頁,創(chuàng)作于2023年2月
膠體金(colloidalgold)也稱金溶膠(goldsol),是金鹽被還原成原子金后形成的金顆粒懸液。膠體金第6頁,課件共19頁,創(chuàng)作于2023年2月zeta電位可以使膠體金顆粒之間相互排斥,以維持膠體金的穩(wěn)定狀態(tài)。
基礎金核雙離子內(nèi)層負離子(AuC12-)zeta電位外層離子層H+分散在膠體間的溶液中第7頁,課件共19頁,創(chuàng)作于2023年2月
膠體金顆粒對蛋白質有很強的吸附功能,而不被壞其生物活性,可以與蛋白質等(葡萄球菌A蛋白、免疫球蛋白)等非共價結合,形成膠體金標記物。第8頁,課件共19頁,創(chuàng)作于2023年2月襯板樣品墊金標墊吸收墊膜膠體金免疫層析試紙條的構成第9頁,課件共19頁,創(chuàng)作于2023年2月膠體金免疫層析試紙條類型:第10頁,課件共19頁,創(chuàng)作于2023年2月第11頁,課件共19頁,創(chuàng)作于2023年2月夾心法反應原理C陰性B陽性GICA有三種反應模式:夾心法,間接法,競爭抑制法。第12頁,課件共19頁,創(chuàng)作于2023年2月間接法反應原理C陰性B陽性第13頁,課件共19頁,創(chuàng)作于2023年2月陰性弱陽性陽性競爭抑制法反應原理檢測線顏色強度與SD濃度負相關第14頁,課件共19頁,創(chuàng)作于2023年2月目的:掌握間接試紙卡的檢測原理,操作方法及結果判定方法第15頁,課件共19頁,創(chuàng)作于2023年2月1、禽流感H9亞型抗原檢測試紙卡2、禽流感抗體檢測試紙卡3、磺胺嘧啶殘留檢測試紙卡4、禽流感H9亞型病毒陽性對照5、禽流感H9亞型病毒陰性對照6、禽流感抗體陽性對照7、磺胺嘧啶殘留陽性對照8、磺胺嘧啶殘留陰性對照實驗材料:第16頁,課件共19頁,創(chuàng)作于2023年2月1、加被檢樣品:100ul/孔,陽性、陰性對照。2、5min后觀察結果。實驗步驟:第17頁,課件共19頁,創(chuàng)作于2023年2月結果判定:1、禽流感H9亞型抗原檢測試紙卡:兩條紅線,陽性;一條紅線,陰性;無紅線,試紙失效。2、禽流感抗體檢測試紙卡:兩條紅線,陽性;一條紅線,陰性;無紅線,試紙失效。3、
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