激光共聚焦使用手冊(cè)講解課件

激光共聚焦顯微鏡FV1000-光譜掃描型-(倒置顯微鏡IX81)簡(jiǎn)易使用說明書激光共聚焦顯微鏡啟動(dòng)系統(tǒng) 3顯微鏡鏡下觀察

微分干涉差觀察 4

熒光觀察 5取圖的操作界面 6如何取圖 XY平面單標(biāo) 7 XY平面雙標(biāo)

同步掃描方式 10

序列掃描方式 13 XY平面

單標(biāo)+微分干涉差 16 XYZ掃描雙標(biāo) 19 XYL光譜掃描 212D操作界面 24圖像分析

打開文件 24 3D圖像的疊加 25

比例尺的使用 26 3D圖像的重建 27

3D圖像的旋轉(zhuǎn) 29 Unmixing 31

保存圖像 35保存到CD-R 36關(guān)閉系統(tǒng) 37附錄 38內(nèi)容啟動(dòng)系統(tǒng) 3內(nèi)容1. 打開計(jì)算機(jī).2.打開激光器.

(打開鑰匙開關(guān).)2-1. 多線氬離子(458nm,488nm,

514nm)ON(打開電源開關(guān)后,打開鑰匙開關(guān).)2-2. 氦氖綠(543nm)ON2-3. 氦氖紅(633nm)ON打開汞燈電源開關(guān).登陸WindowsXP系統(tǒng).雙擊快捷方式：

打開FV10-ASW應(yīng)用軟件.*系統(tǒng)軟件的啟動(dòng)需要等待一定時(shí)間.開啟系統(tǒng)5231UserID: Administrator

Password: fluoview

UserID: Administrator

Password: Administrator

1. 打開計(jì)算機(jī).開啟系統(tǒng)5231UserID: A

微分干涉差觀察

1. 使用手控面板選擇物鏡.(參照

Memo.)2. 插入起偏鏡.3. 插入微分干涉滑塊.4. 點(diǎn)擊FV10-ASW軟件中的圖標(biāo).5. 標(biāo)本聚焦.Memo按照7-1的操作轉(zhuǎn)換物鏡的倍率之后，對(duì)：●物鏡●各物鏡對(duì)應(yīng)的DIC元件*進(jìn)行操作.*DIC元件1234Note1. 使用TD滑塊控制鹵素?zé)舻墓鈴?qiáng).Note2. 檢查濾色片轉(zhuǎn)盤的位置是否為“6.DICT”.如果不是,用手柄按下DICT圖標(biāo).

Note1顯微鏡鏡下觀察手控面板用此旋鈕進(jìn)行微分干涉法對(duì)比度的調(diào)節(jié).微分干涉差觀察1. 使用手控面板選擇物鏡.

熒光觀察

123顯微鏡鏡下觀察Handswitch1. 使用手控面板選擇物鏡.2. 點(diǎn)擊FV10-ASW軟件中的圖標(biāo).3. 使用手控面板選擇熒光濾色片.

(參照

Memo.)4. 標(biāo)本聚焦.Note2Notes1&3Note1. 選擇第3步后,顯微鏡進(jìn)入熒光觀察狀態(tài).注意此時(shí)汞燈的機(jī)械快門要打開.(建議通常機(jī)械快門要放在關(guān)閉的位置().)Note2. 檢查DIC滑塊是否拉出.Memo

關(guān)于熒光濾色片NIBA：藍(lán)色激發(fā)/綠色熒光 （例：FITC、EGFP等）WIG：綠色激發(fā)/紅色熒光 （例：Rhodamine、DsRed等）Note3. 觀察之前，檢查汞燈的機(jī)械快門要放在開啟的位置().熒光觀察123顯微鏡鏡下觀察Handswitc圖像的拇指索引明場(chǎng)觀察

(顯微鏡鏡下觀察)熒光觀察

(顯微鏡鏡下觀察)染料選擇光路圖取圖條件的保存調(diào)出取圖條件TwinScanner

設(shè)定取圖的操作界面掃描的按鈕選擇XYZ,XYT或XYL每個(gè)通道的調(diào)節(jié)

共聚焦的孔徑大小鹵素?zé)舻墓鈴?qiáng)調(diào)節(jié)

Kalman方式圖像顯示窗口內(nèi)存中所顯示的文件掃描模式掃描速度像素?cái)?shù)縮放和平移激光輸出的調(diào)節(jié)Lambda掃描的設(shè)定物鏡聚焦時(shí)間間隔和時(shí)間計(jì)數(shù)

(用于XYT或XT掃描)λ掃描帶寬選擇圖像的拇指索引明場(chǎng)觀察

(顯微鏡鏡下觀察)熒光觀察

(獲取單張圖像（XY平面）（熒光圖像）例：綠色熒光染色（FITC）點(diǎn)擊FV10-ASW軟件中的按鈕關(guān)閉汞燈快門.同時(shí),點(diǎn)擊按鈕關(guān)閉鹵素?zé)艨扉T.

點(diǎn)擊染料選擇按鈕.在染料列表中,雙擊用于觀察的熒光染料.

*取消當(dāng)前熒光染料，選擇另外熒光染料，要雙擊已指定的熒光染料，并重復(fù)步驟2.3. 點(diǎn)擊Apply按鈕. (關(guān)閉染料選擇面板可以用Close按鈕.)123染料選擇后的顯示界面如何取圖(XY平面-單標(biāo))獲取單張圖像（XY平面）（熒光圖像）點(diǎn)擊FV10-AMemo

掃描控制面板 : 連續(xù)掃描 : 停止掃描 : 快速掃描(隔行掃描)456[1] 探測(cè)器的靈敏度調(diào)節(jié)(HV)[2] 共聚焦的孔徑大小調(diào)節(jié)(C.A.)[3] 激光輸出的調(diào)節(jié)(Laser)

[1][2][3]調(diào)節(jié)方法

(例:HV調(diào)節(jié)):點(diǎn)擊滑塊,HV直接提高(或降低)到指定的位置.點(diǎn)擊此按鈕

或者使用鼠標(biāo)轉(zhuǎn)輪進(jìn)行微調(diào).圖像調(diào)節(jié)略述如何取圖(XY平面-單標(biāo))4. 點(diǎn)擊XYRepeat按鈕開始掃描.5. 調(diào)節(jié)綠色(FITC)圖像.

(圖像調(diào)節(jié)的略述如下.

更多的信息,參照附錄1.)6. 點(diǎn)擊Stop按鈕停止掃描.(參照

Memo.)Memo

掃描控制面板456[1] 探測(cè)器的靈敏度調(diào)節(jié)78910如何取圖(XY平面-單標(biāo))7. 選擇AutoHV,并選擇掃描速度. * 隨著掃描速度變慢,在保持同等亮度的前提下,背景噪音就會(huì)消除.

(也可以使用Kalmanaccumulation方式.

更多的信息，參照附錄2.)

8. 點(diǎn)擊XY按鈕取得一幅圖像.9. 點(diǎn)擊SeriesDone按鈕,“2DView-LiveImage(x)”2D界面就出現(xiàn).10. 保存該幅圖像:

右擊圖像管理器中顯示的圖像圖標(biāo)，選擇另存為保存該幅圖像.

(保存為“xml”類型是FV10-ASW軟件專用的圖像格式.)Memo

FV10-ASW專用的圖形格式OIF格式:

創(chuàng)建“一個(gè)含(16-bitTIFF)的圖像”和“一個(gè)附屬文件,”不能單獨(dú)分割.OIB格式:

創(chuàng)建單個(gè)的OIF格式的文件,方便進(jìn)行移動(dòng)和進(jìn)行其它的操作.

78910如何取圖(XY平面-單標(biāo))7. 選擇AutoH123獲取單張圖像（XY平面）（熒光圖像）

例：綠色熒光（Alexa488）＋紅色熒光（Alexa546）二重染色同步掃描如何取圖(XY平面-雙標(biāo))點(diǎn)擊FV10-ASW軟件中的按鈕關(guān)閉汞燈快門.同時(shí),點(diǎn)擊按鈕關(guān)閉鹵素?zé)艨扉T.

點(diǎn)擊染料選擇按鈕.在染料列表中,雙擊用于觀察的熒光染料.

*取消當(dāng)前熒光染料，選擇另外熒光染料，要雙擊已指定的熒光染料，并重復(fù)步驟2.3. 點(diǎn)擊Apply按鈕. (關(guān)閉染料選擇面板可以用Close按鈕.)染料選擇后的顯示界面123獲取單張圖像（XY平面）（熒光圖像）如何取圖456如何取圖(XY平面-雙標(biāo))Memo

掃描控制面板 : 連續(xù)掃描 : 停止掃描 : 快速掃描(隔行掃描)[1] 探測(cè)器的靈敏度調(diào)節(jié)(HV)[2] 共聚焦的孔徑大小調(diào)節(jié)(C.A.)[3] 激光輸出的調(diào)節(jié)(Laser)[1][2][3]調(diào)節(jié)方法

(例:HV調(diào)節(jié)):點(diǎn)擊滑塊,HV直接提高(或降低)到指定的位置.點(diǎn)擊此按鈕

或者使用鼠標(biāo)轉(zhuǎn)輪進(jìn)行微調(diào).圖像調(diào)節(jié)略述4. 點(diǎn)擊XYRepeat按鈕開始掃描.5. 調(diào)節(jié)綠色(AlexaFluor488)圖像和紅色(AlexaFluor546)圖像.

(圖像調(diào)節(jié)的略述如下.

更多的信息,參照附錄1.)6. 點(diǎn)擊Stop按鈕停止掃描.(參照

Memo.)456如何取圖(XY平面-雙標(biāo))Memo

掃描控制面78910如何取圖(XY平面-雙標(biāo))7. 選擇AutoHV,并選擇掃描速度. * 隨著掃描速度變慢,在保持同等亮度的前提下,背景噪音就會(huì)消除.

(也可以使用Kalmanaccumulation方式.

更多的信息，參照附錄2.)

8. 點(diǎn)擊XY按鈕取得一幅圖像.9. 點(diǎn)擊SeriesDone按鈕,“2DView-LiveImage(x)”2D界面就出現(xiàn).10. 保存該幅圖像:

右擊圖像管理器中顯示的圖像圖標(biāo)，選擇另存為保存該幅圖像.

(保存為“xml”類型是FV10-ASW軟件專用的圖像格式.)Memo

FV10-ASW專用的圖形格式OIF格式:

創(chuàng)建“一個(gè)含(16-bitTIFF)的圖像”和“一個(gè)附屬文件,”不能單獨(dú)分割.OIB格式:

創(chuàng)建單個(gè)的OIF格式的文件,方便進(jìn)行移動(dòng)和進(jìn)行其它的操作.

78910如何取圖(XY平面-雙標(biāo))7. 選擇AutoH123獲取單張圖像（XY平面）（熒光圖像）

例：綠色熒光（Alexa488）＋紅色熒光（Alexa546）二重染色序列掃描(這里介紹線序列掃描.)如何取圖(XY平面-雙標(biāo))點(diǎn)擊FV10-ASW軟件中的按鈕關(guān)閉汞燈快門.同時(shí),點(diǎn)擊按鈕關(guān)閉鹵素?zé)艨扉T.

點(diǎn)擊染料選擇按鈕.在染料列表中,雙擊用于觀察的熒光染料.

*取消當(dāng)前熒光染料，選擇另外熒光染料，要雙擊已指定的熒光染料，并重復(fù)步驟2.3. 點(diǎn)擊Apply按鈕. (關(guān)閉染料選擇面板可以用Close按鈕.)染料選擇后的顯示界面123獲取單張圖像（XY平面）（熒光圖像）如何取圖4567如何取圖(XY平面-雙標(biāo))4. 點(diǎn)擊序列掃描,并選擇線序列方式.5. 點(diǎn)擊XYRepeat按鈕開始掃描.6. 調(diào)節(jié)綠色(AlexaFluor488)圖像和紅色(AlexaFluor546)圖像.

(圖像調(diào)節(jié)的略述如下.

更多的信息,參照附錄1.)7. 點(diǎn)擊Stop按鈕停止掃描.(參照

Memo.)[1] 探測(cè)器的靈敏度調(diào)節(jié)(HV)[2] 共聚焦的孔徑大小調(diào)節(jié)(C.A.)[3] 激光輸出的調(diào)節(jié)(Laser)[1][2][3]調(diào)節(jié)方法

(例:HV調(diào)節(jié)):點(diǎn)擊滑塊,HV直接提高(或降低)到指定的位置.點(diǎn)擊此按鈕

或者使用鼠標(biāo)轉(zhuǎn)輪進(jìn)行微調(diào).圖像調(diào)節(jié)略述4567如何取圖(XY平面-雙標(biāo))4. 點(diǎn)擊序列掃描,并891011如何取圖(XY平面-雙標(biāo))8. 選擇AutoHV,并選擇掃描速度. * 隨著掃描速度變慢,在保持同等亮度的前提下,背景噪音就會(huì)消除.

(也可以使用Kalmanaccumulation方式.

更多的信息，參照附錄2.)

9. 點(diǎn)擊XY按鈕取得一幅圖像.10. 點(diǎn)擊SeriesDone按鈕,“2DView-LiveImage(x)”2D界面就出現(xiàn).11. 保存該幅圖像:

右擊圖像管理器中顯示的圖像圖標(biāo)，選擇另存為保存該幅圖像.

(保存為“xml”類型是FV10-ASW軟件專用的圖像格式.)Memo

FV10-ASW專用的圖形格式OIF格式:

創(chuàng)建“一個(gè)含(16-bitTIFF)的圖像”和“一個(gè)附屬文件,”不能單獨(dú)分割.OIB格式:

創(chuàng)建單個(gè)的OIF格式的文件,方便進(jìn)行移動(dòng)和進(jìn)行其它的操作.

891011如何取圖(XY平面-雙標(biāo))8. 選擇Auto1234獲取單張圖像（XY平面）

（熒光圖像＋微分干涉）例：綠色熒光（FITC）+DIC圖像如何取圖(XY平面-單標(biāo)+微分干涉差)

1. 點(diǎn)擊FV10-ASW軟件中的按鈕關(guān)閉汞燈快門.同時(shí),點(diǎn)擊按鈕關(guān)閉鹵素?zé)艨扉T.

點(diǎn)擊染料選擇按鈕.在染料列表中,雙擊用于觀察的熒光染料.

*取消當(dāng)前熒光染料，選擇另外熒光染料，要雙擊已指定的熒光染料，并重復(fù)步驟2.3. 點(diǎn)擊Apply按鈕.(關(guān)閉染料選擇面板可以用Close按鈕.)4. 選擇TD1.染料選擇后的顯示界面1234獲取單張圖像（XY平面）如何取圖(XY平面-567如何取圖(XY平面-單標(biāo)+微分干涉差)Memo

掃描控制面板 : 連續(xù)掃描 : 停止掃描 : 快速掃描(隔行掃描)[1] 探測(cè)器的靈敏度調(diào)節(jié)(HV)[2] 共聚焦的孔徑大小調(diào)節(jié)(C.A.)[3] 激光輸出的調(diào)節(jié)(Laser)[1][2][3]調(diào)節(jié)方法

(例:HV調(diào)節(jié)):點(diǎn)擊滑塊,HV直接提高(或降低)到指定的位置.點(diǎn)擊此按鈕

或者使用鼠標(biāo)轉(zhuǎn)輪進(jìn)行微調(diào).圖像調(diào)節(jié)略述5. 點(diǎn)擊XYRepeat按鈕開始掃描.

6. 調(diào)節(jié)綠色(FITC)圖像和微分干涉差的圖像.

(圖像調(diào)節(jié)的略述如下.

更多的信息,參照附錄1.)7. 點(diǎn)擊Stop按鈕停止掃描.(參照

Memo.)567如何取圖(XY平面-單標(biāo)+微分干涉差)Memo891011如何取圖(XY平面-單標(biāo)+微分干涉差)8.選擇AutoHV,并選擇掃描速度. * 隨著掃描速度變慢,在保持同等亮度的前提下,背景噪音就會(huì)消除.

(也可以使用Kalmanaccumulation方式.

更多的信息，參照附錄2.)

9. 點(diǎn)擊XY按鈕取得一幅圖像.10. 點(diǎn)擊SeriesDone按鈕,“2DView-LiveImage(x)”2D界面就出現(xiàn).11. 保存該幅圖像:

右擊圖像管理器中顯示的圖像圖標(biāo)，選擇另存為保存該幅圖像.

(保存為“xml”類型是FV10-ASW軟件專用的圖像格式.)Memo

FV10-ASW專用的圖形格式OIF格式:

創(chuàng)建“一個(gè)含(16-bitTIFF)的圖像”和“一個(gè)附屬文件,”不能單獨(dú)分割.OIB格式:

創(chuàng)建單個(gè)的OIF格式的文件,方便進(jìn)行移動(dòng)和進(jìn)行其它的操作.

891011如何取圖(XY平面-單標(biāo)+微分干涉差)8.1458Memo

和

按鈕 :點(diǎn)擊移動(dòng)1.0m. :點(diǎn)擊移動(dòng)0.1m.267

獲取3D圖像(XYZ)

(熒光圖像)

例:綠色熒光(FITC)和紅色熒光(Rhodamine)雙標(biāo)這里介紹線序列掃描取圖的過程.如何取圖(XYZ掃描-雙標(biāo))

1. 采用13和14頁步驟1到7.2. 輸入StepSize大小(點(diǎn)擊OP按鈕可以使用推薦的值),并選擇.3. 點(diǎn)擊XYRepeat按鈕開始掃描.4. 點(diǎn)擊

和按鈕上移焦點(diǎn)位置.

(參照Memo.)5. 當(dāng)圖像顯示到達(dá)上限時(shí),點(diǎn)擊Set按鈕確定.6. 點(diǎn)擊

和按鈕下移焦點(diǎn)位置.

(參照Memo.)7. 當(dāng)圖像顯示到達(dá)下限時(shí),點(diǎn)擊Set按鈕確定.8. 點(diǎn)擊Stop按鈕停止掃描.確定Z軸的上限和下限如下.1458Memo267獲取3D圖像(XYZ)

(910111312如何取圖(XYZ掃描-雙標(biāo))9. 選擇AutoHV,并選擇掃描速度. * 隨著掃描速度變慢,在保持同等亮度的前提下,背景噪音就會(huì)消除.

(也可以使用Kalmanaccumulation方式.

更多的信息，參照附錄2.)

10. 選擇Depth按鈕.11. 點(diǎn)擊XYZ按鈕取得圖像.12. 點(diǎn)擊SeriesDone按鈕,“2DView-LiveImage(x)”2D界面就出現(xiàn).13. 保存該幅圖像:

右擊圖像管理器中顯示的圖像圖標(biāo)，選擇另存為保存該幅圖像.

(保存為“xml”類型是FV10-ASW軟件專用的圖像格式.)Memo

FV10-ASW專用的圖形格式OIF格式:

創(chuàng)建“一個(gè)含(16-bitTIFF)的圖像”和“一個(gè)附屬文件,”不能單獨(dú)分割.OIB格式:

創(chuàng)建單個(gè)的OIF格式的文件,方便進(jìn)行移動(dòng)和進(jìn)行其它的操作.

910111312如何取圖(XYZ掃描-雙標(biāo))9. 選擇123*可以通過調(diào)用掃描狀態(tài)來實(shí)現(xiàn)該設(shè)置.更多的信息,參照附錄5.

獲取光譜圖像(XYL)

例:綠色熒光(AlexaFluor488)和綠色熒光(YOYO-1)雙標(biāo)如何取圖(XYL光譜掃描)

1. 點(diǎn)擊FV10-ASW軟件中的按鈕關(guān)閉汞燈快門.同時(shí),點(diǎn)擊按鈕關(guān)閉鹵素?zé)艨扉T.

2. 點(diǎn)擊按鈕

檢查光路.3. 做如下設(shè)置.選擇BS20/80或DM405/488.選擇488nm作為激發(fā)光源.選擇Mirror.只選擇CHS1.123*可以通過調(diào)用掃描狀態(tài)來實(shí)現(xiàn)該設(shè)置.更多的信息,參45679如何取圖(XYL光譜掃描)

4. 點(diǎn)擊按鈕,出現(xiàn)光譜設(shè)置窗口.5. 設(shè)置CHS1光譜帶寬為10nm,以此為例.

(參照附錄4關(guān)于改變光譜帶寬的方法.)

6. 點(diǎn)擊XYRepeat按鈕開始掃描.7. 在觀察圖像的同時(shí),移動(dòng)光譜帶到圖像最亮的位置狀態(tài).

(參照附錄4關(guān)于改變光譜帶寬的方法.)

注: 移動(dòng)光譜帶位置要保持光譜帶寬為10nm不變.8. 調(diào)節(jié)圖像.

(參照附錄1.)

9. 點(diǎn)擊Stop按鈕停止掃描.45679如何取圖(XYL光譜掃描)4. 點(diǎn)擊按鈕101112131514如何取圖(XYL光譜掃描)

10. 選擇AutoHV,并選擇掃描速度. * 隨著掃描速度變慢,在保持同等亮度的前提下,背景噪音就會(huì)消除.

(也可以使用Kalmanaccumulation方式.

更多的信息，參照附錄2.)

11. 設(shè)定要掃描的波長(zhǎng)范圍,光譜帶寬和步距.

Start=開始波長(zhǎng)

End=結(jié)束波長(zhǎng)

Resolution=光譜帶寬

StepSize=步距12. 選擇Lambda按鈕.13. 點(diǎn)擊XYL按鈕取得圖像.14. 點(diǎn)擊SeriesDone按鈕,“2DView-LiveImage(x)”2D界面就出現(xiàn).15. 保存該幅圖像:

右擊圖像管理器中顯示的圖像圖標(biāo)，選擇另存為保存該幅圖像..

(保存為“oib”和"oif"類型是FV10-ASW軟件專用的圖像格式.)101112131514如何取圖(XYL光譜掃描)10.1. 雙擊資源管理器中要選擇打開的文件.

1圖像分析(打開文件)2D的操作界面顯示狀態(tài)的切換1:1顯示幀的播放選擇結(jié)束幀投影的切換3D重建放大調(diào)整窗口的大小動(dòng)畫播放速度選擇開始幀文本不同形狀的ROI區(qū)域網(wǎng)格箭頭比例尺點(diǎn)顏色條Ch1display

Ch2display點(diǎn)擊按鈕

轉(zhuǎn)換顯示模式1. 雙擊資源管理器中要選擇打開的文件.1圖像分析(打開文12圖像分析(3D圖像的疊加)

1. 點(diǎn)擊按鈕

并選擇.2. 要保存此圖像,右擊此圖像,選擇SaveDisplay并命名.12圖像分析(3D圖像的疊加)1. 點(diǎn)擊按鈕12345圖像分析(比例尺的使用)1. 點(diǎn)擊按鈕.2. 點(diǎn)擊圖像的同時(shí),拖放此比例尺到一個(gè)特定的位置.3. 點(diǎn)擊手柄的左端或右端,移動(dòng)鼠標(biāo).4. 選擇比例尺并右擊選擇屬性的設(shè)置.5. 設(shè)置具體的比例尺屬性.改變比例尺的大小改變文本,顏色,字體等.12345圖像分析(比例尺的使用)1. 點(diǎn)擊按鈕以一定的角度觀察3D圖像觀察3D圖像的某個(gè)橫截面1345圖像分析(3D圖像的重建)

1. 點(diǎn)擊按鈕.2. 創(chuàng)建3D圖像.3. 拖動(dòng)鼠標(biāo)以一定的角度觀察圖像.

要保存此圖像,進(jìn)行下一頁第6步的操作.4. 點(diǎn)擊按鈕

并選定.5. 拖動(dòng)鼠標(biāo)觀察某個(gè)垂直橫斷面.

要保存此圖像,進(jìn)行下一頁第6步的操作.以一定的角度觀察3D圖像觀察3D圖像的某個(gè)橫截面1345圖像保存上一頁中第3、5選項(xiàng)的圖像68圖像分析(3D圖像的重建)6. 點(diǎn)擊按鈕.7. 會(huì)創(chuàng)建一個(gè)2D圖像(帶文件名).8. 保存該幅圖像:

右擊圖像管理器中顯示的圖像圖標(biāo)，選擇另存為保存該幅圖像.

(保存為“xml”類型是FV10-ASW軟件專用的圖像格式.)Memo

FV10-ASW專用的圖形格式OIF格式:

創(chuàng)建“一個(gè)含(16-bitTIFF)的圖像”和“一個(gè)附屬文件,”不能單獨(dú)分割.OIB格式:

創(chuàng)建單個(gè)的OIF格式的文件,方便進(jìn)行移動(dòng)和進(jìn)行其它的操作.

保存上一頁中第3、5選項(xiàng)的圖像68圖像分析(3D圖像的重建13動(dòng)畫的播放4圖像分析(3D圖像的旋轉(zhuǎn))1. 點(diǎn)擊按鈕.2. 創(chuàng)建3D圖像.3. 拖動(dòng)鼠標(biāo)以一定的角度觀察圖像.4. 點(diǎn)擊并控制按鈕

實(shí)現(xiàn)圖像圍繞著X-軸旋轉(zhuǎn).

再次點(diǎn)擊停止旋轉(zhuǎn).

點(diǎn)擊并控制按鈕

實(shí)現(xiàn)圖像圍繞著Y-軸旋轉(zhuǎn).

再次點(diǎn)擊停止旋轉(zhuǎn).

點(diǎn)擊并控制按鈕

實(shí)現(xiàn)圖像圍繞著Z-軸旋轉(zhuǎn).

再次點(diǎn)擊停止旋轉(zhuǎn).13動(dòng)畫的播放4圖像分析(3D圖像的旋轉(zhuǎn))1. 點(diǎn)擊按鈕要保存動(dòng)態(tài)旋轉(zhuǎn)的圖像,請(qǐng)參照如下的方法創(chuàng)建3D圖像.例,試圖旋轉(zhuǎn)圖像180度.

5710689圖像分析(3D圖像的旋轉(zhuǎn))5. 點(diǎn)擊按鈕.6. 點(diǎn)擊Anglerotation菜單.7. 選擇旋轉(zhuǎn)軸.8. 輸入旋轉(zhuǎn)的角度.9. 選擇AVI類型并點(diǎn)擊Create按鈕.10. 輸入一個(gè)文件名并點(diǎn)擊Save按鈕.Start= 開始角度End= 結(jié)束角度Frame/s= 旋轉(zhuǎn)速度Interval= 單次旋轉(zhuǎn)的角度要保存動(dòng)態(tài)旋轉(zhuǎn)的圖像,請(qǐng)參照如下的方法創(chuàng)建3D圖234圖像分析

(Unmixing)I.每種熒光染料的定位都很明顯的情形基于XYL圖像中類似熒光光譜相連的原則,通過已知的每種熒光染料的定位分解光譜并得到圖像.例:綠色熒光(AlexaFluor488)和綠色熒光(YOYO-1)雙標(biāo)56Unmixedimage此處顯示分解光譜的通道分配1. 打開一幅AlexaFluor488和YOYO1雙標(biāo)的XYL圖像.2. 分別為AlexaFluor488和YOYO1選定一個(gè)封閉的區(qū)域.3. 從Processing下拉菜單中選擇SpectralDeconvolution圖標(biāo).4. 雙擊ROI1和ROI2區(qū)域.5. 檢查處理類型設(shè)置為“Normal”并且點(diǎn)擊Execute按鈕.6. 獲得圖像.234圖像分析(Unmixing)基于XYL圖像中類似熒光23456記載的熒光光譜在此顯示.圖像分析

(Unmixing)II.基于使用單標(biāo)樣品作參照的情形從單標(biāo)記的XYL圖像中取出單個(gè)熒光光譜作為參照,進(jìn)行光譜的分解并得到圖像.例:綠色熒光(AlexaFluor488)和綠色熒光(YOYO-1)雙標(biāo)1. 打開一幅AlexaFluor488單標(biāo)取樣的XYL圖像.2. 為AlexaFluor488選定一個(gè)封閉的區(qū)域.3. 從Processing下拉菜單中選擇SpectralDeconvolution圖標(biāo).4. 雙擊ROI1區(qū)域.5. 點(diǎn)擊SaveProfile圖標(biāo).6. 輸入保存的名字并且點(diǎn)擊OK按鈕將AlexaFluor488的光譜記載到數(shù)據(jù)庫中.7. 對(duì)于YOYO1單標(biāo),重復(fù)1-6步.23456記載的熒光光譜在此顯示.圖像分析(UnmixinUnmixedimage91011128圖像分析

(Unmixing)II.基于使用單標(biāo)樣品作參照的情形此處顯示分解光譜的通道分配8. 打開一幅AlexaFluor488和YOYO1雙標(biāo)的XYL圖像.9. 從Processing下拉菜單中選擇SpectralDeconvolution圖標(biāo).10. 雙擊數(shù)據(jù)庫中記載的AlexaFluor488和YOYO1圖標(biāo).11. 檢查處理類型設(shè)置為“Normal”并且點(diǎn)擊Execute按鈕.12. 獲得圖像.Unmixedimage91011128圖像分析(Unm2345圖像分析

(Unmixing)III. 基于只知道一定數(shù)量標(biāo)記的熒光染料的情形

(BlindUnmixing)基于XYL圖像中類似熒光光譜相連的原則,通過已知的一定數(shù)量的熒光標(biāo)記分解光譜并得到圖像.例:兩種類型熒光標(biāo)記的樣品Unmixedimage此處顯示分解光譜的通道分配1. 打開一幅具有兩種類型熒光標(biāo)記的XYL圖像.2. 從Processing下拉菜單中選擇SpectralDeconvolution圖標(biāo).3. 選中兩個(gè)檢查框用于計(jì)算.

(具有三種類型熒光標(biāo)記時(shí)要選中三個(gè)檢查框.)4. 檢查處理類型設(shè)置為“Blind”并且點(diǎn)擊Execute按鈕.5. 獲得圖像.2345圖像分析(Unmixing)基于XYL圖像中類似熒XY或者XYZ圖像的每個(gè)通道存為TIFF格式的文件1. 右擊圖像管理器中顯示的圖像圖標(biāo),選擇另存為保存該幅圖像..2. 設(shè)置Saveas類型為TIFF并保存.*存為BMP和JPEG格式也可以.12312圖像分析(保存圖像)

**********************************************************************************XY或者XYZ通道合并的圖像存為TIFF格式的文件帶有比例尺的圖像存為BMP格式的文件1. 右擊圖像管理器中顯示的圖像圖標(biāo),選擇另存為保存該幅圖像..2. 設(shè)置Saveas類型為TIFF并保存.3. 檢查要合并的通道并保存.*存為BMP和JPEG格式也可以.1. 右擊該幅圖像.2. 選擇SaveDisplay并以新的文件名保存該幅圖像.動(dòng)態(tài)圖像存為AVI格式的文件1. 右擊該圖像.2. 選擇SaveasAVI并以新的文件名保存該圖像.XY或者XYZ圖像的每個(gè)通道存為TIFF格式的文件1. 右保存到CD-R2345761. 插入一張CD-R光盤.2. 點(diǎn)擊OK.3. 選擇文件并拖放到CD-R的窗口.4. 點(diǎn)擊"WritethesefilestoCD."5. 點(diǎn)擊Next.6. 開始刻錄.7. 點(diǎn)擊Finish按鈕結(jié)束.保存到CD-R2345761. 插入一張CD-R光盤.134關(guān)閉系統(tǒng)21. 選擇File/Exit,退出FV10-ASW軟件.2. 退出WindowsXP.(1) 選擇Start/ShutDown.(2) 在ShutDown窗口中,

選擇ShutDown并點(diǎn)擊OK