臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件

臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講解學(xué)習(xí)臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講解學(xué)習(xí)1臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集、處理、保存及核酸提取方法江西省腫瘤醫(yī)院陳文學(xué)臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集、處2檢驗(yàn)誤差的發(fā)生率1997年,一位意大利著名檢驗(yàn)專(zhuān)家對(duì)急診檢驗(yàn)誤差發(fā)生的種類(lèi)和發(fā)生率進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)。結(jié)果顯示,約有68.2%的檢驗(yàn)誤差發(fā)生在檢驗(yàn)前期,而來(lái)自檢驗(yàn)中期和檢驗(yàn)后期的誤差率分別為133%和18.5%。2007年,這位專(zhuān)家又進(jìn)行了類(lèi)似的統(tǒng)計(jì),結(jié)果顯示,檢驗(yàn)前期的誤差發(fā)生率仍高達(dá)61.9%檢驗(yàn)誤差的發(fā)生率3正確采集、運(yùn)送、保存臨床標(biāo)本的重要性質(zhì)量保證關(guān)鍵性環(huán)節(jié)■解決涉及實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)的醫(yī)患糾紛的方法之正確采集、運(yùn)送、保存臨床標(biāo)本4核酸提取的重要性核酸提取是臨床PCR檢驗(yàn)最為關(guān)鍵的部分■核酸提取的成敗關(guān)系到臨床PCR檢驗(yàn)的正確與否臨床PQR檢驗(yàn)操作中最易出問(wèn)題的環(huán)節(jié)核酸提取的重要性5標(biāo)本采集標(biāo)本采集時(shí)間對(duì)擴(kuò)增檢測(cè)結(jié)果的影響《過(guò)早或過(guò)晚都可能會(huì)出現(xiàn)假陰性結(jié)果)標(biāo)本采集部位的準(zhǔn)備適度消毒)■標(biāo)本的類(lèi)型和采集量(衣原體上皮細(xì)胞)采樣質(zhì)量的評(píng)價(jià)(評(píng)價(jià)方法:內(nèi)眼觀(guān)察、顯微鏡下觀(guān)察和化學(xué)分析)采樣及運(yùn)輸容器(一次性無(wú)菌器材,防腐劑,抗凝劑)■標(biāo)本采集中的防污染(一次性無(wú)菌容器,防止混入操作者頭發(fā),表皮等,如玻璃容器要高壓滅菌)標(biāo)本采集6標(biāo)本運(yùn)送■樣本一經(jīng)采集,則應(yīng)盡可能快的送至檢測(cè)驗(yàn)室■樣本中如加入了適當(dāng)?shù)姆€(wěn)定劑,如用于RNA測(cè)定加入GITC的血清(漿樣本和用于DNA測(cè)定的EDTA抗凝血等則可在室溫下運(yùn)送或郵寄■實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)待測(cè)靶核酸的特性,對(duì)各種臨床樣本的運(yùn)送條件作出相應(yīng)的規(guī)定。標(biāo)本運(yùn)送7臨床標(biāo)本的處理和保存血清(漿)全血外周血單個(gè)核細(xì)胞痰棉拭子膿液體液乳汁組織臨床標(biāo)本的處理和保存8血清(漿)DNA測(cè)定,可按照一般的血清標(biāo)本處理程序,對(duì)測(cè)定影響不大?！鯮NA測(cè)定,標(biāo)本的獲取和保存方式對(duì)測(cè)定結(jié)果,可能有決定性影響。最好是使用EDTA抗凝嚴(yán)禁使用肝素,因其對(duì)PCR擴(kuò)增有抑制,且很難在核酸提取過(guò)程中完全去除全血標(biāo)本,抗凝后6小時(shí)內(nèi)分離血漿,如使用血清標(biāo)本需盡快(2小時(shí)內(nèi))分離血清,標(biāo)本的短期1~2周)保存可在-20℃下,較長(zhǎng)期保存應(yīng)在70℃下血清(漿)9全血■以全血作為待測(cè)標(biāo)本時(shí)必須注意抗凝劑的選擇,一般使用EDA-Na或枸椽酸鈉,不可使用肝素。全血樣本如用于DNA提取檢測(cè)可4℃下短期保存如用于RNA檢測(cè),則應(yīng)在取血后,盡快提取RNA。全血10外周血單個(gè)核細(xì)胞外周血單個(gè)核細(xì)胞可從抗凝全血制備,主要有兩條途徑,一是使用淋巴細(xì)胞分離液分離制備;二是使用紅細(xì)胞裂解液,裂解全血中的紅細(xì)胞,經(jīng)生理鹽水?dāng)?shù)次洗滌,即可得到單個(gè)核細(xì)胞。■外周血單個(gè)核細(xì)胞如暫不提取核酸可保存于-70℃C下外周血單個(gè)核細(xì)胞11臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件12臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件13臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件14臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件15臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件16臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件17臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件18臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件19臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件20臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件21臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件22臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件23臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件24臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件25臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件26臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件27臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件28臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件29臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件30臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件31臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件32臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件33臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件34臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件35臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件36臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件37臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件38臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件39臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件40臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件41臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件42臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件43臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件44臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件45臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件46臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件47臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件48臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件49臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件50臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件51臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件52臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件53臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件54臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件55臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件56臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件57臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件58臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件59臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件60臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件61臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件62臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件63臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件64臨床PCR檢驗(yàn)標(biāo)本的采集處理保存及核酸提取方法講課件65END16、業(yè)余生活要有意義，不要越軌。——華盛頓

17、一個(gè)人即使已登上頂峰，也仍要自強(qiáng)不