肝細(xì)胞性肝癌患者超聲檢測血流分級與血清hmgb1、sccag、p53蛋白表達(dá)的關(guān)系

肝細(xì)胞性肝癌患者超聲檢測血流分級與血清hmgb1、sccag、p53蛋白表達(dá)的關(guān)系

肝腫瘤（hc）是肝腫瘤的主要病理類型。hc具有易轉(zhuǎn)、發(fā)病率低、死亡率高的特點(diǎn)。根據(jù)流行病學(xué)研究，hc每年的發(fā)病率約為45%。1數(shù)據(jù)和方法1.1年齡及體質(zhì)量指數(shù)選擇2017年2月至2019年2月在綿陽市中心醫(yī)院住院的HCC患者120例，其中男性59例，女性61例；年齡42～65歲，平均年齡53.48歲（標(biāo)準(zhǔn)差12.59歲）；體質(zhì)量指數(shù)（bodymassindex,BMI)20.30～27.82kg/m納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合肝癌診斷標(biāo)準(zhǔn)排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)心、肝、腎功能嚴(yán)重不全者；(2)存在交流障礙的患者；(3)血常規(guī)異常患者；(4)不配合本次研究方案患者。1.2方法1.2.1病例檢查的內(nèi)容采用PHILIPHDI3000超聲儀。超聲探頭頻率為5～12MHz。囑患者取平臥位，按照由內(nèi)而外，自上而下的順序?qū)颊叩母闻K進(jìn)行掃描。分別對病灶部位的大小、邊界、鈣化和血流情況進(jìn)行分析。超聲檢測分別由2名高年資住院醫(yī)師共同檢測。依據(jù)Adler半定量方法進(jìn)行血流分級：病灶內(nèi)未發(fā)現(xiàn)血流信號則為0級；病灶部位有1～2處點(diǎn)狀出血點(diǎn)則為Ⅰ級；病灶部位發(fā)現(xiàn)1條主要血管，2～3條小血管，中量血流信號則為Ⅱ級1.2.2hgmb1、sccag水平測定患者空腹，抽取肘靜脈血液4mL；在3500r/min、4℃條件下離心15min，取上清液進(jìn)行下一步檢測。采用酶聯(lián)免疫吸附分析（enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA）進(jìn)行HMGB1、SCCAg水平測定。采用HMGB1ELISA試劑盒（ab18256。Abcam，英國）和SCCAgELISA試劑盒（YSRIBIO-050318。上海研生生化試劑公司，中國），操作流程嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。1.2.3免疫組織化學(xué)在超聲引導(dǎo)下對腫瘤病灶部位進(jìn)行穿刺活組織檢查。對病灶組織使用甲醛溶液進(jìn)行固定、常規(guī)脫水，石蠟進(jìn)行包埋，連續(xù)切片，切片厚度為4μm。采用免疫組織化學(xué)方法進(jìn)行P53蛋白水平檢測（其中鼠抗P53抗體購自邁新生物技術(shù)公司）。通過吉木薩（Giemsa）染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察。判斷標(biāo)準(zhǔn)：出現(xiàn)棕黃色顆粒則為陽性。1.2.4hgmb1、sccag、p33蛋白表達(dá)水平的比較分析病灶部位的大體類型和血流信號的分布情況。對小肝癌型、結(jié)節(jié)型和巨塊型腫瘤的HMGB1、SCCAg、P53蛋白表達(dá)水平進(jìn)行比較。對Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級血流信號的HMGB1、SCCAg、P53蛋白表達(dá)水平進(jìn)行比較。采用斯皮爾曼（Spearman）相關(guān)性分析，分析不同血流分級與HMGB1、SCCAg、P53蛋白表達(dá)水平的相關(guān)性。1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理所有數(shù)據(jù)均使用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS16.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布時(shí)，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以百分率（%）表示，采用Pearsonχ2結(jié)果2.1小鼠結(jié)節(jié)型、巨塊型，大小血流分級超聲診斷結(jié)果顯示，小肝癌型35例（Ⅰ級12例，Ⅱ級11例，Ⅲ級12例），小結(jié)節(jié)型39例（Ⅰ級10例，Ⅱ級14例，Ⅲ級15例），巨塊型46例（Ⅰ級20例，Ⅱ級12例，Ⅲ級14例）。血流分級Ⅰ級42例，Ⅱ級37例，Ⅲ級41例。不同級血流信號與病灶大體類型比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2.2sccag的表達(dá)與結(jié)節(jié)型不同大體類型血清HMGB1、SCCAg、P53蛋白表達(dá)水平比較，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。HMGB1在巨塊型病灶中表達(dá)水平為（102.23±5.12)ng/mL，在結(jié)節(jié)型為（76.76±4.14)ng/mL，在小肝癌型為（52.23±4.03)ng/mL;SCCAg在巨塊型病灶中表達(dá)水平為（1.99±0.25）μg/L，在結(jié)節(jié)型為（1.77±0.26）μg/L，在小肝癌型為（1.20±0.23）μg/L;P53蛋白在巨塊型病灶中表達(dá)水平為26%，在結(jié)節(jié)型為20%，在小肝癌型為10%。見表1。2.3sccag表達(dá)不同血流分級的血清HMGB1、SCCAg、P53蛋白表達(dá)水平比較，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。HMGB1在Ⅲ級中表達(dá)水平為（112.39±5.49)ng/mL，在Ⅱ級為（78.77±4.21)ng/mL，在Ⅰ級為（53.39±4.16)ng/mL;SCCAg在Ⅲ級中表達(dá)水平為（1.97±0.26）μg/L，在Ⅱ級為（1.69±0.34）μg/L，在Ⅰ級為（1.26±0.31）μg/L;P53蛋白在Ⅲ級中表達(dá)水平為29%，在Ⅱ級為22%，在Ⅰ級為12%。見表2。2.4相關(guān)分析病灶大體類型、血流分級與血清HMGB1、SCCAg、P53蛋白表達(dá)水平呈現(xiàn)正相關(guān)，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。見表3。2.5血清hgmb1、sccag、p33蛋白的聯(lián)合診斷效能通過對患者的受試者工作特性（receiveroperatingcharacteristic,ROC）曲線分析，血清HMGB1、SCCAg、P53蛋白的聯(lián)合診斷效能顯著高于單獨(dú)診斷。同時(shí)，Ⅰ級患者的血清HMGB1、SCCAg、P53蛋白的臨界值分別為53.41ng/mL、1.26μg/L、14%（圖1A）；Ⅱ級患者的血清HMGB1、SCCAg、P53蛋白的臨界值分別為78.11ng/mL、1.71μg/L、23%（圖1B）；Ⅲ級患者的血清HMGB1、SCCAg、P53蛋白的臨界值分別為113.09ng/mL、1.99μg/L、28%（圖1C）。3ag、p33蛋白表達(dá)與病理分型的關(guān)系中國是肝癌高發(fā)病率的國家之一，流行病學(xué)調(diào)查顯示筆者研究結(jié)果顯示，利用超聲技術(shù)檢測，病灶大體類型、血流分級均與患者的HMGB1、SCCAg、P53蛋白表達(dá)水平呈現(xiàn)顯著正相關(guān)。有研究報(bào)道，p53基因突變主要與腫瘤細(xì)胞的發(fā)生、發(fā)展和浸潤相關(guān)筆者研究還存在一定的局限性，未能對患者