典型產(chǎn)品的分離純化工藝-青霉素的提取分離純化工藝（藥物分離純化課件）

藥物分離與純化技術(shù)課程典型產(chǎn)品的分離純化工藝--青霉素發(fā)酵的過程控制青霉素發(fā)酵的過程控制—典型產(chǎn)品的分離純化工藝大綱1.碳源控制2.pH控制3.溫度控制4.補(bǔ)料控制5.鐵離子的影響6.防止染菌7.空氣、蒸汽系統(tǒng)青霉素發(fā)酵的過程控制—典型產(chǎn)品的分離純化工藝青霉菌能利用多種碳源，如乳糖、蔗糖、葡萄糖、阿拉伯糖、甘露糖、淀粉和天然油脂等。乳糖是青霉素生物合成的最好碳源，葡萄糖也是比較好的碳源，但必須控制其加入的濃度，因?yàn)槠咸烟且妆痪w氧化/產(chǎn)生抑制抗生素合成酶形成/的物質(zhì)，從而影響青霉素的合成，所以可以采用連續(xù)添加葡萄糖的方法代替乳糖。（一）碳源控制青霉素發(fā)酵的過程控制—典型產(chǎn)品的分離純化工藝苯乙酸或其衍生物苯乙酰胺、苯乙胺、苯乙酰甘氨酸等均可作為青霉素G的側(cè)鏈前體。菌體對(duì)前體的利用有兩個(gè)途徑：直接結(jié)合到產(chǎn)物分子中或作為養(yǎng)料和能源利用，即氧化為二氧化碳和水。前體究竟通過哪個(gè)途徑被菌體利用，主要取決于培養(yǎng)條件以及/所用菌種的特性。通過比較苯乙酰胺、苯乙酸及苯氧基乙酸的毒性，除苯氧基乙酸外，苯乙酰胺和苯乙酸的毒性取決于培養(yǎng)基的pH和前體的濃度。

堿性時(shí)，苯乙酰胺有毒；酸性時(shí)，苯乙酸毒性較大；

中性時(shí)，苯乙酰胺的毒性大于苯乙酸。前體用量大于0.1%時(shí)，青霉素的生物合成均下降。

所以一般發(fā)酵液中前體濃度以維持在0.1%為宜。（一）碳源控制青霉素發(fā)酵的過程控制—典型產(chǎn)品的分離純化工藝在堿性條件下，苯乙酸被菌體氧化的速率隨培養(yǎng)基pH上升而增加。年幼的菌絲不氧化前體，而僅利用它來構(gòu)成青霉素分子。隨著菌齡的增大，氧化能力逐漸增加。培養(yǎng)基成分對(duì)前體的氧化程度有較大影響，合成培養(yǎng)基比復(fù)合培養(yǎng)基對(duì)前體的氧化量少。為了盡量減少苯乙酸的氧化，生產(chǎn)上多用間歇或連續(xù)添加低濃度苯乙酸的方法，以保持前體的供應(yīng)速率略大于生物合成的需要。（一）碳源控制青霉素發(fā)酵的過程控制—典型產(chǎn)品的分離純化工藝在青霉素發(fā)酵過程中，pH是通過下列手段控制的：（1)如pH過高，則添加糖、硫酸或無機(jī)氮源；(2)若pH過低，則加入碳酸鈣、氫氧化鈉、氨或尿素，也可提高通氣量。(3)另外，也可利用自動(dòng)加入酸或堿的方法，使發(fā)酵液pH維持在6.8～7.2，以提高青霉素產(chǎn)量。（二）pH控制青霉素發(fā)酵的過程控制—典型產(chǎn)品的分離純化工藝青霉菌生長(zhǎng)的適宜溫度為30℃，而分泌青霉素的適宜溫度是20℃左右，因此生產(chǎn)上采用變溫控制的方法，使之適合不同階段的需要。

(1)一級(jí)種子的培養(yǎng)溫度控制在27±1℃左右；(2)二級(jí)種子的培養(yǎng)溫度控制在25±1℃左右；(3)發(fā)酵前期和中期的溫度控制在26℃左右；(4)發(fā)酵后期的溫度控制在24℃左右。（三）溫度控制青霉素發(fā)酵的過程控制—典型產(chǎn)品的分離純化工藝

發(fā)酵過程中,除以中間補(bǔ)糖控制糖濃度及pH外，補(bǔ)加氮源也可提高發(fā)酵單位。經(jīng)為了延長(zhǎng)發(fā)酵周期，提高青霉素產(chǎn)量，發(fā)酵過程分次補(bǔ)加氮源也是有效的措施。如：分次補(bǔ)加硫酸銨。（五）鐵離子的影響

三價(jià)鐵離子對(duì)青霉素生物合成有顯著影響，一般若發(fā)酵液中鐵離子含量超過30～40μg/ml，則發(fā)酵單位增長(zhǎng)緩慢。因此鐵罐在使用前必須進(jìn)行處理，可在罐壁涂上環(huán)氧樹脂等保護(hù)層，使鐵離子含量控制在30μg/ml以下。（四）補(bǔ)料控制青霉素發(fā)酵的過程控制—典型產(chǎn)品的分離純化工藝

染菌是抗生素發(fā)酵的大敵。影響染菌的因素很多，而且?guī)щS機(jī)性質(zhì)，但只要認(rèn)真對(duì)待，過細(xì)地工作，染菌是可以防止的。請(qǐng)到左邊的導(dǎo)航欄里選擇查看防止染菌的要點(diǎn)的內(nèi)容。（七）空氣、蒸汽系統(tǒng)的要求1.空氣系統(tǒng)的要求防止空氣帶菌主要是提高空壓機(jī)進(jìn)口空氣的潔凈度，防止空氣夾帶油和水及空氣過濾器失效。（六）防止染菌青霉素發(fā)酵的過程控制—典型產(chǎn)品的分離純化工藝

重視飽和蒸汽的質(zhì)量，要嚴(yán)防蒸汽中夾帶大量冷凝水，防止蒸汽壓力大幅度波動(dòng)，保證生產(chǎn)時(shí)所用的蒸汽壓力在30～35千帕以上。(1)連續(xù)滅菌設(shè)備：連消塔結(jié)構(gòu)要求簡(jiǎn)單，易于拆裝和清理，操作時(shí)蒸汽能與物料混合均勻，并易于控制溫度。(2)發(fā)酵罐：發(fā)酵罐及其附屬設(shè)備應(yīng)注意嚴(yán)密和防止泄漏，避免形成“死角”。凡與物料、空氣、下水道連接的閥門都必須保證嚴(yán)密度。(3)無菌室：用超凈工作臺(tái)及凈化室代替無菌室，以提高無菌程度。2.蒸汽系統(tǒng)的要求藥物分離與純化技術(shù)課程典型產(chǎn)品的分離純化工藝--青霉素發(fā)酵工藝流程青霉素發(fā)酵工藝流程—典型產(chǎn)品的分離純化工藝大綱1.菌種2.菌種的保藏3.孢子的制備4.種子的制備5.發(fā)酵培養(yǎng)基6.滅菌7.發(fā)酵青霉素發(fā)酵工藝流程—典型產(chǎn)品的分離純化工藝青霉是產(chǎn)生青霉素的重要菌種。廣泛分布于空氣、土壤和各種物上，常生長(zhǎng)在腐爛的柑桔皮上呈青綠色。目前已發(fā)現(xiàn)幾百種，其中產(chǎn)黃青霉(Penicillumchrysogenum)、點(diǎn)青霉(Penicillumnototum)等都能大量產(chǎn)生青霉素。

青霉素的發(fā)現(xiàn)和大規(guī)模地生產(chǎn)、應(yīng)用，不僅對(duì)抗生素工業(yè)的發(fā)展起了巨大的推動(dòng)作用，而且加上其他抗生素的廣泛使用，比如像磺胺藥物，使人類的平均壽命，再次延長(zhǎng)了四歲。

此外，有的青霉菌還用于生產(chǎn)灰黃霉素及磷酸二酯酶、纖維素酶等酶制劑和有機(jī)酸。（一）菌種青霉素發(fā)酵工藝流程—典型產(chǎn)品的分離純化工藝菌種的保藏方法：（1）斜面菌種低溫保藏法利用低溫對(duì)微生物生命活動(dòng)有抑制作用的原理進(jìn)行保藏。把斜面菌種、固體穿刺培養(yǎng)物或菌懸液等，直接放入4～5℃冰箱中。保藏時(shí)間一般不超過3個(gè)月，到時(shí)必須進(jìn)行移接傳代，再放回冰箱。（2）砂土管保藏法將干燥砂粒與細(xì)土混合后滅菌制成砂土管，然后接種保藏。若把砂土管放在低溫或抽氣后密封，效果更佳。此法適用于產(chǎn)孢子及芽孢菌種的保藏。保藏期1～10年。（3）甘油封藏法向培養(yǎng)好的菌種斜面上，加入滅菌甘油，高出斜面1cm，然后蠟封管口，放入冰箱。該法既可防止培養(yǎng)基水分蒸發(fā)，又能使菌種與空氣隔絕。保藏期1～2年。（二）菌種的保藏青霉素發(fā)酵工藝流程—典型產(chǎn)品的分離純化工藝菌種的保藏方法：（4）真空冷凍干燥法

是目前比較理想的一種方法。在低于-15℃下，快速將細(xì)胞凍結(jié)，并保持細(xì)胞完整，然后在真空中使水分升華致干。

在此環(huán)境中，微生物的生長(zhǎng)和代謝都暫時(shí)停止，不易發(fā)生變異，故可長(zhǎng)時(shí)間保存，一般為5～10年，最多可達(dá)15年之久。

此法兼?zhèn)淞说蜏?、干燥及缺氧幾方面條件，使微生物可以保存較長(zhǎng)時(shí)間，但過程較麻煩，需要一定的設(shè)備。（二）菌種的保藏青霉素發(fā)酵工藝流程—典型產(chǎn)品的分離純化工藝這是發(fā)酵工序的開端?？股禺a(chǎn)量和成品質(zhì)量同菌種性能以及同孢子和種子的情況有密切關(guān)系。生產(chǎn)用的孢子需經(jīng)過純種和生產(chǎn)能力的檢驗(yàn)，符合規(guī)定的才能用來制備種子。

保藏在砂土管或冷凍干燥管中的菌種，經(jīng)無菌操作，接入適合于孢子發(fā)芽或菌絲生長(zhǎng)的斜面培養(yǎng)基中，經(jīng)培養(yǎng)成熟后挑選菌落正常的孢子可再一次接入試管斜面。對(duì)于產(chǎn)孢子能力強(qiáng)的及孢子發(fā)芽、生長(zhǎng)繁殖快的菌種可以采用固體培養(yǎng)基孢子，孢子可直接作為中子罐的種子。（三）孢子的制備青霉素發(fā)酵工藝流程—典型產(chǎn)品的分離純化工藝孢子接入種子罐后，在罐中繁殖成大量菌絲的過程。目的：使孢子發(fā)芽、繁殖和獲得足夠數(shù)量的菌絲，以便接種到發(fā)酵罐當(dāng)中去。種子制備所使用的培養(yǎng)基及其它工藝條件，都要有利于孢子發(fā)芽和菌絲繁殖。種子罐級(jí)數(shù)：制備種子需逐級(jí)擴(kuò)大培養(yǎng)的次數(shù)。

一般根據(jù)種子的生長(zhǎng)特性、孢子發(fā)芽及菌體繁殖速度，以及發(fā)酵罐的容積而定。青霉素種子制備一般為二級(jí)種子罐擴(kuò)大培養(yǎng)。（四）種子制備青霉素發(fā)酵工藝流程—典型產(chǎn)品的分離純化工藝培養(yǎng)基是供微生物生長(zhǎng)繁殖和合成各種代謝產(chǎn)物所需要的按一定比例配制的多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的混合物。培養(yǎng)基的組成和比例是否恰當(dāng)，直接影響微生物的生長(zhǎng)、生產(chǎn)和工藝選擇、產(chǎn)品質(zhì)量和產(chǎn)量等。青霉素的發(fā)酵培養(yǎng)基由碳源、氮源、無機(jī)鹽及金屬離子、添加前體、消沫劑五部分組成。（五）發(fā)酵培養(yǎng)基青霉素發(fā)酵工藝流程—典型產(chǎn)品的分離純化工藝滅菌：用化學(xué)或物理的方法殺滅或除去物料及設(shè)備中所有的有生命物質(zhì)的技術(shù)或工藝流程。

工業(yè)上常用的方法有：干熱滅菌、濕熱滅菌、化學(xué)藥劑滅菌、射線滅菌和介質(zhì)過濾除菌等幾種。在青霉素的生產(chǎn)中，對(duì)培養(yǎng)基和發(fā)酵罐主要采用的是濕熱蒸汽滅菌和空氣過濾除菌的方法。（六）滅菌青霉素發(fā)酵工藝流程—典型產(chǎn)品的分離純化工藝發(fā)酵的目的主要是為了使微生物分泌大量的抗生素。

發(fā)酵開始前，有關(guān)設(shè)備和培養(yǎng)基必須先經(jīng)過滅菌，后接入種子。

接種量一般為5～20%。發(fā)酵周期一般為4～5天，但也有少于24小時(shí)，或長(zhǎng)達(dá)二周以上的。

在整個(gè)過程中，需要不斷通氣和攪拌，維持一定的罐溫和罐壓，并隔一段時(shí)間取樣進(jìn)行生化分析和無菌試驗(yàn)，觀察代謝變化、抗生素產(chǎn)生情況和有無雜菌污染。（七）發(fā)酵藥物分離與純化技術(shù)課程典型產(chǎn)品的分離純化工藝--青霉素的精制及成品鑒定青霉素的精制及成品鑒定—典型產(chǎn)品的分離純化工藝大綱1.概述2.谷氨酸的提取3.谷氨酸的中和、精制青霉素的精制及成品鑒定—典型產(chǎn)品的分離純化工藝

青霉素的精制是青霉素生產(chǎn)的最后工序。要符合“藥品生產(chǎn)管理規(guī)范”的規(guī)定。脫色和去熱原質(zhì)是精制注射用青霉素中不可缺少的一步。

色素是在發(fā)酵過程中所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物，它與菌種和發(fā)酵條件有關(guān)。熱原質(zhì)是在生產(chǎn)過程中由于被污染后雜菌所產(chǎn)生的一種內(nèi)毒素。

（一）脫色和去熱原質(zhì)青霉素青霉素的精制及成品鑒定—典型產(chǎn)品的分離純化工藝生產(chǎn)中一般用活性炭脫色去熱原質(zhì)，但需注意脫色時(shí)pH、溫度、活性炭用量及脫色時(shí)間等因素，還應(yīng)考慮它對(duì)抗生素的吸附問題，否則影響收率。（一）脫色和去熱原質(zhì)青霉素青霉素的精制及成品鑒定—典型產(chǎn)品的分離純化工藝抗生素精制常用結(jié)晶法來制得高純度成品。常用的幾種結(jié)晶方法有：(1)改變溫度結(jié)晶利用抗生素在溶劑中的溶解度隨溫度變化而顯著變化的這一特性來進(jìn)行結(jié)晶。(2)等電點(diǎn)結(jié)晶當(dāng)將某一抗生素溶液的pH調(diào)到等電點(diǎn)時(shí)，它在水溶液中溶解度最小，則沉淀析出。(3)加成鹽劑結(jié)晶在抗生素溶液中加成鹽劑使抗生素以鹽的形式從溶液中能夠沉淀結(jié)晶。（二）結(jié)晶青霉素的精制及成品鑒定—典型產(chǎn)品的分離純化工藝

青霉素鈉鹽在醋酸丁酯中溶解度很小，利用此性質(zhì)，再二次醋酸丁酯萃取液中加入醋酸鈉乙醇溶液，并控制溫度青霉素鈉鹽就結(jié)晶析出。反應(yīng)如下：

（二）結(jié)晶青霉素的精制及成品鑒定—典型產(chǎn)品的分離純化工藝醋酸丁酯中含水量過高會(huì)影響收率，但可提高晶體純度。水分在0.9%以下對(duì)收率影響較小。得到的晶體要求顆粒均勻，有一定的細(xì)度。顆粒太細(xì)會(huì)使過濾、洗滌困難。晶體經(jīng)丁醇洗滌，真空干燥即可等到成品。（二）結(jié)晶青霉素的精制及成品鑒定—典型產(chǎn)品的分離純化工藝成品鑒定是根據(jù)藥典的要求逐項(xiàng)進(jìn)行分析，包括效價(jià)鑒定、毒性試驗(yàn)、無菌檢查、熱源質(zhì)試驗(yàn)、水分測(cè)定、水溶液酸堿度及混濁度測(cè)定、結(jié)晶顆粒的色澤及大小的測(cè)定等。

對(duì)于藥典上未有規(guī)定的新抗生素，則可參照相近抗生素，按經(jīng)驗(yàn)規(guī)定一些指標(biāo)。（三）成品鑒定青霉素的精制及成品鑒定—典型產(chǎn)品的分離純化工藝（1）酸堿度檢測(cè)

取本品，加水制成每1ml中含30mg的溶液，測(cè)定。pH值應(yīng)為5.0～7.5。（2）溶液的澄清度與顏色

取樣品0.3g，加水5ml使溶解，溶液應(yīng)澄清無色；如顯渾濁，與濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較，均不得更濃；如顯色，與黃色或黃綠色標(biāo)準(zhǔn)比色液比較，均不得更深。（三）成品鑒定青霉素的精制及成品鑒定—典型產(chǎn)品的分離純化工藝（3）吸光度

取樣品，加水制成每1ml中含1.80mg的溶液，在280nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，不得大于0.10；在264nm的波長(zhǎng)處有最大吸收，吸光度應(yīng)為0.80～0.88。（4）細(xì)菌內(nèi)毒素

取樣品測(cè)定，每100青霉素單位中含內(nèi)毒素的量應(yīng)小于0.01EU。（5）無菌

取樣品，用青霉素酶法滅活后或用適宜溶劑溶解后，轉(zhuǎn)移至不少于500ml的0.9%無菌氯化鈉溶液中，用薄膜過濾法處理后測(cè)定。（三）成品鑒定青霉素的精制及成品鑒定—典型產(chǎn)品的分離純化工藝（6）效價(jià)測(cè)定

取本品適量，精密稱定，加水溶液并定量稀釋制成每1ml中約含0.5mg的溶液，搖勻，精密量取10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖；

另取青霉素對(duì)照品適量，同法測(cè)定。

按外標(biāo)以峰面積計(jì)算，其結(jié)果乘以1.0658，即為本品效價(jià)。每1mg相當(dāng)于1670青霉素單位。（三）成品鑒定藥物分離與純化技術(shù)課程典型產(chǎn)品的分離純化工藝--青霉素的提取分離青霉素的提取分離—典型產(chǎn)品的分離純化工藝大綱1.青霉素發(fā)酵液預(yù)處理2.青霉素的提取分離青霉素的提取分離—典型產(chǎn)品的分離純化工藝

發(fā)酵液中的雜質(zhì)如高價(jià)無機(jī)離子（Fe2+、Ca2+、Mg2+）和蛋白質(zhì)在離子交換的過程中對(duì)提取影響甚大，不利于樹脂對(duì)抗生素的吸收。如用溶媒萃取法提取時(shí)，蛋白質(zhì)的存在會(huì)產(chǎn)生乳化，使溶媒和水相分離困難。

對(duì)高價(jià)離子的去除，可采用草酸或磷酸。如加草酸，則它與鈣離子生成的草酸鈣還能促使蛋白質(zhì)凝固,提高發(fā)酵濾液的質(zhì)量。（一）青霉素發(fā)酵液預(yù)處理青霉素的提取分離—典型產(chǎn)品的分離純化工藝如加磷酸（或磷酸鹽），既能降低鈣離子濃度，也利于去除鎂離子。

加黃血鹽及硫酸鋅，則前者有利于去除鐵離子，后者有利于凝固蛋白質(zhì)。此外，兩者還有協(xié)同作用。他們所產(chǎn)生的復(fù)鹽對(duì)蛋白質(zhì)有吸附作用。為了有效的去除發(fā)酵液中的蛋白質(zhì)，需加入絮凝劑。（一）青霉素發(fā)酵液預(yù)處理青霉素的提取分離—典型產(chǎn)品的分離純化工藝化學(xué)提取和分離純化的目的：從發(fā)酵液中制取高純度的、合乎藥典的抗生素成品。由于發(fā)酵液中青霉素濃度很低，僅0.1～4.5%左右，而雜質(zhì)濃度比青霉素的高幾十倍甚至幾千倍，并且某些雜質(zhì)的性質(zhì)與抗生素的非常相近，因此提取分離是一件十分重要的工作。（二）青霉素的提取分離青霉素的提取分離—典型產(chǎn)品的分離純化工藝發(fā)酵液中常見的雜質(zhì)：

菌絲、未用完的培養(yǎng)基、易污染雜菌、產(chǎn)生菌的代謝產(chǎn)物、預(yù)處理需要加入的雜質(zhì)等。在提取分離過程中要遵循下面四個(gè)原則：（1）時(shí)間短（2）溫度低（3）pH適中（4）勤清洗消毒（二）青霉素的提取分離青霉素的提取分離—典型產(chǎn)品的分離純化工藝常用的提取方法有溶媒萃取法、離子交換法和沉淀法等。1.溶媒萃取法這是利用抗生素在不同的pH值條件下，以不同的化學(xué)狀態(tài)存在時(shí)，在水及水互不相溶的溶媒中溶解度不同的特性，使抗生素從一種液相（如發(fā)酵濾液）轉(zhuǎn)移到另一種液相（如有機(jī)溶媒）中去，以達(dá)到濃縮和提純的目的。（二）青霉素的提取分離青霉素的提取分離—典型產(chǎn)品的分離純化工藝?yán)么嗽?可借助于調(diào)節(jié)pH使抗生素從一個(gè)液相中被提取到另一液相中去。所選用的溶媒與水應(yīng)是互不相溶或僅很小部分互溶，同時(shí)所選溶媒在一定的pH下對(duì)于抗生素應(yīng)有較大的溶解度和選擇性，方能用較少量的溶媒使提取完全，并在一定程度上分離掉雜質(zhì)。（二）青霉素的提取分離青霉素的提取分離—典型產(chǎn)品的分離純化工藝2.離子交換法利用離子交換樹脂和抗生素之間的化學(xué)親和力，有選擇性的將抗生素吸附上去，然后以較少量的洗脫劑將它洗下來。3.沉淀法

是一種分離抗生素簡(jiǎn)單而經(jīng)濟(jì)的方法，濃縮倍數(shù)高，因而也是很有效的方法。（二）青霉素的提取分離青霉素的提取分離—典型產(chǎn)品的分離純化工藝青霉素的提取,采用溶媒萃取法。青霉素游離酸易溶于有機(jī)溶劑，而青霉素鹽易溶于水。利用這一性質(zhì)，在酸性條件下,青霉素轉(zhuǎn)入有機(jī)溶媒中，調(diào)節(jié)pH，再轉(zhuǎn)入中性水相，反復(fù)幾次萃取，即可提純濃縮。選擇對(duì)青霉素分配系數(shù)高的有機(jī)溶劑。工業(yè)上通常用醋酸丁酯和戊酯。萃取2－3次。從發(fā)酵液萃取到乙酸丁酯時(shí)，pH選擇2.8-3.0，從乙酸丁酯反萃到水相時(shí)，pH選擇6.8-7.2。

（二）青霉素的提取分離青霉素的提取分離—典型產(chǎn)品的分離純化工藝

為了避免pH波動(dòng)，采用硫酸鹽、碳酸鹽緩沖液進(jìn)行反萃。所得濾液多采用二次萃取，用10%硫酸調(diào)pH2.8~3.0，加入醋酸丁酯。在一次丁酯萃取時(shí)，由于濾液含有大量蛋白，通常加入破乳劑防止乳化。第一次萃取，存在蛋白質(zhì)，加0.05-0.1%乳化劑PPB。溶媒萃取法，課實(shí)現(xiàn)對(duì)青霉素的提取和分離。（二）青霉素的提取分離藥物分離與純化技術(shù)課程典型產(chǎn)品的分離純化工藝--青霉素簡(jiǎn)介青霉素簡(jiǎn)介—典型產(chǎn)品的分離純化工藝大綱1.青霉素的發(fā)現(xiàn)2.青霉素分類及分子結(jié)構(gòu)3.青霉素的單位4.作用機(jī)理5.應(yīng)用青霉素簡(jiǎn)介—典型產(chǎn)品的分離純化工藝

1928年，英國(guó)細(xì)菌學(xué)家Fleming發(fā)現(xiàn)污染在培養(yǎng)葡萄球菌的雙蝶上的一株霉菌能殺死周圍的葡萄球菌。他將此霉菌分離純化后得到的菌株經(jīng)鑒定為點(diǎn)青霉，并將這菌所產(chǎn)生的抗生物質(zhì)命名為青霉素。（一）青霉素的發(fā)現(xiàn)Fleming青霉素簡(jiǎn)介—典型產(chǎn)品的分離純化工藝

1940年，英國(guó)的病理學(xué)家H.W.Flory和德國(guó)的生物化學(xué)家E.B.Chian進(jìn)一步研究此菌，并從培養(yǎng)液中制出了干燥的青霉素制品。經(jīng)實(shí)驗(yàn)和臨床試驗(yàn)證明，它毒性很小，并對(duì)一些革蘭氏陽性菌所引起的許多疾病有卓越的療效。

（一）青霉素的發(fā)現(xiàn)英國(guó)的病理學(xué)家H.W.Flory青霉素簡(jiǎn)介—典型產(chǎn)品的分離純化工藝青霉素是6－氨基青霉烷酸（6-aminopenicillanicacid,6-APA）苯乙酰衍生物。側(cè)鏈基團(tuán)不同，形成不同的青霉素，主要是青霉素G。工業(yè)上應(yīng)用的有鈉、鉀、普魯卡因、二芐基乙二胺鹽。（二）青霉素分類及分子結(jié)構(gòu)青霉素青霉素簡(jiǎn)介—典型產(chǎn)品的分離純化工藝青霉素發(fā)酵液中含有5種以上天然青霉素（如青霉素F、G、X、K、F和V等），它們的差別僅在于側(cè)鏈R基團(tuán)的結(jié)構(gòu)不同，其中青霉素G在醫(yī)療中用得最多，它的鈉或鉀鹽為治療革蘭氏陽性菌的首選藥物，對(duì)革蘭氏陰性菌也有強(qiáng)大的抑制作用。青霉素的結(jié)構(gòu)通式如圖：（二）青霉素分類及分子結(jié)構(gòu)青霉素結(jié)構(gòu)通式青霉素簡(jiǎn)介—典型產(chǎn)品的分離純化工藝目前國(guó)際上青霉素活性單位表示方法有兩種：一是指定單位（unit）；二是活性質(zhì)量（μg），最早為青霉素規(guī)定的指定單位是：50mL肉湯培養(yǎng)基中恰能抑制標(biāo)