pbs-緩沖液的配置

1、0.01M磷酸鹽緩沖液(PBS)配制方法稱取8gNaCl、0.2gKC1、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸餾水中,用HCl調(diào)節(jié)溶液的pH值至7.4，最后加蒸餾水定容至1L即可。在151bf/in2(1034x105Pa)高壓下蒸氣滅菌(至少20分鐘)，保存存于室溫或4°C冰箱中。需要注意的是，通常所說(shuō)的濃度0.01M指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度，而非Na離子或K離子的濃度，Na離子和K離子只是用來(lái)調(diào)節(jié)滲透壓的。如果是用于免疫組化的話，則需要在配置的時(shí)候分別加入100u/ml青霉素和鏈霉素之后再調(diào)PH、定容、滅菌消毒?！癙BS喙沖液PH7.67.47.27.0H2O1000100010001000mlNaCl8.58.58.58.5gNa2HPO42.22.22.22.2gNaH2PO40.10.20.30.4g2、磷酸鹽緩沖液(PhosphateBuffer,PB)試劑：NaH2PO4?2H2ONa2HPO4?12H2O配制方法：配制時(shí)，常先配制0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,兩者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸鹽緩沖液(PB)，根據(jù)需要可配制不同濃度的PB和PBS。0.2mol/L的Na2HPO4；稱取Na2HPO4.12H2O31.2g(或NaH2PO4?H2O27.6g)加重蒸水至1000m1溶解。0.2mol/L的Na2HPO4：稱取NaHPO4.?12H2O71.632g(或Na2HPO4?7H2O53.6g或Na2HPO4?2H2O35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。0.2mol/LpH7.4的PB的配制：取19ml0.2mol/L的NaH2PO4和81ml0.2mo1/L的Na2HPO4?12H2O,充分混合即為0.2mo1/L的PB(pH約為7.4?7.5)。若pH偏高或偏低，可通過(guò)改變二者的比例來(lái)加以調(diào)整，室溫保存即可。

0.2mol/L磷酸鹽緩沖液（pH5.7?8.0）pH0.2mol/LNaH2PO4(ml)0.2mol/LNa2HPO4(ml)5.793.56.55.892.08.05.990.010.06.087.712.36.185.015.06.281.518.56.377.522.56.473.526.56.568.531.56.662.537.56.756.543.56.851.049.06.945.055.07.039.061.07.133.067.07.228.072.07.323.067.07.419.081.07.516.084.07.613.087.07.710.589.57.88.591.57.97.093.08.05.394.73、0.1mol/L磷酸鹽緩沖生理鹽水(PBS)的配制方法一1、首先配制0.2mol/L磷酸鹽緩沖液(PB)試劑：NaH2PO4?2H2ONa2HPO4?12H2O配制方法：先配制0.2mol/L的NaH2PO4(A液)和0.2mol/L的Na2HPO4(B液)，兩者按一定比例混和即成0.2mol/L磷酸鹽緩沖液。A液：稱取NaH2PO4?2H2O31.2g，加雙蒸水充分溶解定容至1000ml；B液：稱取Na2HPO4?12H2O71.632g，加雙蒸水充分溶解定容至1000ml；2、0.2mol/L磷酸鹽緩沖液(PB)的配制：A液為堿性,B液為酸性;取A液和B液在pH計(jì)的監(jiān)測(cè)下按一定比例進(jìn)行混和,可得到所需的不同pH的0.2mol/L的PB。pH7.4所需A液和B液為19.0ml和81.0ml0.2mol/L磷酸鹽緩沖液(pH5.7?8.0)(PB)pH0.2mol/LNaH2PO4(ml)0.2mol/LNa2HPO4(ml)5.793.56.55.892.08.05.990.010.06.087.712.36.185.015.06.281.518.56.377.522.56.473.526.56.568.531.56.662.537.56.756.543.56.851.049.06.945.055.07.039.061.07.133.067.07.228.072.07.323.067.07.419.081.07.516.084.07.613.087.07.710.589.57.88.591.57.97.093.08.05.394.73、0.1mol/L磷酸鹽緩沖生理鹽水（PBS）:試劑：0.2mol/LPB500mlNaCl8.5?9.0g(約0.15mol/L)雙蒸水加至1000ml配制方法：取0.2mol/LPB500m1,加入300ml雙蒸水及NaCl8.5?9.0g，充分?jǐn)嚢枞芙夂蠹尤腚p蒸水定容至1000ml。一般情況下，0.2mo1/LPB的pH值稍微高些，稀釋成0.1mo1/LPBS時(shí)，?？蛇_(dá)到要求的pH；若需調(diào)整pH,通常是調(diào)PB的pH。4、參考：朱立平，陳學(xué)清主編，免疫學(xué)常用實(shí)驗(yàn)方法，北京:人民軍醫(yī)出版社，2000.3方法二1．PBS（0.1M，pH7.4）貯存液配方（10倍濃縮）TOC\o"1-5"\h\zNaCl80gNa2HPO4.12H2O32.3gNaH2PO4.2H2O4.5g加蒸餾水至1000ml或者NaCl80gNa2HPO4.2H2O11.5gKH2PO42gKCl2g加蒸餾水至1000ml貯存液室溫下保存一個(gè)月2.PBS工作液(0.01M,pH7.4)取貯存液10倍稀釋后24小時(shí)內(nèi)使用方法三溶液A：0.2mol/LNaH2PO4（27.8gNaH2PO4；或者36.14g2水合NaH2PO4溶于1000ml水中）溶液B：0.2mol/LNa2HPO4（53.65g7水合Na2HPO4或者71.7g12水合Na2HPO4溶于1000ml水中）溶液A與B按下表比例混合后，用水稀釋至終體積為200ml體積A(ml)體積B(ml)pH87.7－－－－－－－12.3－－－－－－6.085.0－－－－－－－15.0－－－－－－6.181.5－－－－－－－18.5－－－－－－6.277.5－－－－－－－22.5－－－－－－6.373.5－－－－－－－26.5－－－－－－6.468.5－－－－－－－31.5－－－－－－6.562.5－－－－－－－37.5－－－－－－6.656.5－－－－－－－43.5－－－－－－6.751.0－－－－－－－49.0－－－－－－6.845.0－－－－－－－55.0－－－－－－6.939.0－－－－－－－61.0－－－－－－7.033.0－－－－－－－67.0－－－－－－7.128.0－－－－－－－72.0－－－－－－7.223.0－－－－－－－77.0－－－－－－7.319.0－－－－－－－81.0－－－－－－7.416.0－－－－－－－84.0－－－－－－7.513.0－－－－－－－8