幽門螺桿菌檢查方法課件

幽門螺桿菌檢查方法金哲幽門螺桿菌檢查方法金哲1分類臨床診斷方法分類無創(chuàng)檢查血清學方法、同位素標記尿素的呼氣試驗、胃液PCR創(chuàng)傷性檢查形態(tài)學、微生物學、分子生物學技術原理微生物學方法、血清學方法、尿素酶依賴技術、形態(tài)學方法、基因診斷分類臨床診斷方法分類2一、微生物學方法主要為細菌分離培養(yǎng)技術，診斷Hp感染的“金標準”獲得抗原制備、藥敏試驗、分型和致病性研究等所需的細菌要求具有一定的厭氧培養(yǎng)條件和技術，作為常規(guī)診斷手段不易推廣一、微生物學方法主要為細菌分離培養(yǎng)技術，診斷Hp感染的“金標3二、血清學方法1、ELISA檢測：檢測外周血中Hp全菌及其組分（細胞毒素的抗體），主要用于不同人群中Hp感染情況的流行病學調查和根除治療后較長期（﹥3月）的復查一般不單獨用作醫(yī)院病人Hp感染和根除（治療后一個月）的診斷依據(jù)操作復雜但方法日益標準化，商品化試劑大大簡化了技術難度，但需昂貴的酶標儀二、血清學方法1、ELISA檢測：檢測外周血中Hp全菌及其組4二、血清學方法2、免疫酶試驗用固定于玻片中的Hp菌，與病人血清中的Hp抗體結合，經(jīng)酶標二抗顯色鏡檢進行診斷操作簡便，不需要特殊儀器，但準確性稍差，判斷需要經(jīng)驗二、血清學方法2、免疫酶試驗5二、血清學方法3、膠乳凝集試驗用結合在膠乳顆粒上的Hp檢測微量血中的抗體優(yōu)點是不需儀器，血樣需量少但結果需要經(jīng)驗且準確性不滿意二、血清學方法3、膠乳凝集試驗6二、血清學方法4、Western-blot主要用于分析感染者血中對Hp多種抗原組分的抗體產生情況可以控制抗原制備質量和分析與其他類似菌的交叉反應但操作復雜，技術難度大且不穩(wěn)定，不作常規(guī)診斷方法二、血清學方法4、Western-blot7

由于Hp感染數(shù)周后血中才出現(xiàn)特異抗體，陰性者血中也可存在交叉反應抗體（如空場彎曲菌感染），且Hp根除后血中抗體可長時間（﹥6個月）維持在陽性水平，故血清學陽性不能完全肯定病人有活動性感染；陰性不能排除初期的感染。因此，血清學抗體的檢測只能用于流行病學篩查，而不能用于臨床診斷由于Hp感染數(shù)周后血中才出現(xiàn)特異抗體，陰性者血中也可存在交8三、尿素酶依賴技術1、呼氣試驗用13C或14C同位素標記尿素讓病人口服后被Hp尿素酶分解，產生13CO214CO2，陽性者可在呼出氣中檢測出13C豐度和14C活性，從而確診Hp感染13C試驗:優(yōu)點：準確，特異，快捷，無創(chuàng)傷，無放射性缺點：儀器價格昂貴三、尿素酶依賴技術1、呼氣試驗9三、尿素酶依賴技術2、15N-尿氨排出試驗病人口服15N-尿素后，測定尿液中的15N豐度優(yōu)點:非侵襲性，無放射性，有一定定量意義，敏感性與特異性極高，能克服胃活檢標本局限性缺點：設備昂貴三、尿素酶依賴技術2、15N-尿氨排出試驗10三、尿素酶依賴技術3、快速尿素酶試驗原理:根據(jù)試劑pH值變化引起顏色變化來判斷Hp感染狀態(tài)操作簡便易行標本中細菌數(shù)104以上時才能顯示陽性，而標本的大小、反應時間、環(huán)境溫度，觀察者主觀因素等均可影響結果三、尿素酶依賴技術3、快速尿素酶試驗11四、形態(tài)學方法組織切片染色，組織學染色，免疫組化染色可在顯微鏡下直接觀察細菌，可進行胃粘膜的病理學診斷需要胃鏡檢查和觀察者經(jīng)驗四、形態(tài)學方法組織切片染色，組織學染色，免疫組化染色12五、基因診斷插胃管吸取胃液或胃鏡下取胃液或活檢組織，提取DNA做PCR擴增和探針雜交診斷Hp感染準確性好，檢測靈敏度高操作復雜，易污染，費用高，不宜作為常規(guī)檢查方法五、基因診斷插胃管吸取胃液或胃鏡下取胃液或活檢組織，提取DN13各種診斷方法優(yōu)缺點方法侵襲性快速價廉技術難度備注組織學++++++++++同時可以觀察病變分離培養(yǎng)+++++++++獲得細菌和可做藥敏血清學+++++++不能用于臨床檢診細胞學+++++++++不能單獨用于正規(guī)研究尿素酶+++++++++尤其適于治療的復查13C-UBT+++++14C-UBT---++需要昂貴的質譜儀組織PCR+++++