錦瑞特定蛋白儀及試劑

特定蛋白的臨床意義與應(yīng)用

寶雞東林體外診斷試劑有限公司

李林主管檢驗(yàn)師

特定蛋白分析儀概述特定蛋白分析儀是近年來(lái)國(guó)內(nèi)常購(gòu)的臨床檢驗(yàn)設(shè)備，是各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)必備的檢測(cè)儀器。同時(shí)特定蛋白分析儀根據(jù)自動(dòng)化程度分為全自動(dòng)特定蛋白分析儀和半自動(dòng)特定蛋白分析儀，根據(jù)其用途可以分為全功能特定蛋白分析儀和只檢測(cè)幾個(gè)參數(shù)的專用特定蛋白分析儀。儀器工作原理：根據(jù)抗原抗體反應(yīng)引起光的散射，用散射比濁法來(lái)測(cè)量血清、全血或其他體液中的特定蛋白濃度。儀器預(yù)期用途：主要應(yīng)用于醫(yī)院臨床檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)對(duì)特定蛋白的檢測(cè)，特別適用于門診，急診，各級(jí)醫(yī)院的需要。特定蛋白分析儀檢測(cè)原理特定蛋白分析儀的檢測(cè)原理基本上是免疫比濁。由于比濁法檢測(cè)在醫(yī)學(xué)診斷上使用時(shí)主要用于檢測(cè)人體血液中某些特定蛋白質(zhì)的含量，因此而得名。比濁法原理：在一定條件下，透射光與微粒濃度成反比，散射光與微粒濃度成正比。我們公司儀器是散射比濁原理，根據(jù)雷利散射公式測(cè)量。散射比濁和透射比濁的比較示意圖發(fā)光器透射比濁測(cè)量器件散射比濁測(cè)量器件θ透射光散射光粒子

散射比濁比透視比濁優(yōu)越

透視比濁用于蛋白測(cè)定有一定的缺陷。1：溶液中存在的抗原-抗體復(fù)合分子應(yīng)足夠大，分子太小擋不住光線的通過(guò)。2：溶液中存在的抗原-抗體復(fù)合分子應(yīng)足夠多，如果數(shù)量少，對(duì)光線影響不大。散射光：由于光子與物質(zhì)分子相互碰撞，使光子的運(yùn)動(dòng)方向發(fā)生改變而向不同角度散射。綜上所述：散射比濁在蛋白測(cè)定時(shí)比透視比濁的測(cè)定靈敏度、精確度高。抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)遵循海德堡曲線沉淀量（結(jié)合物）檢測(cè)區(qū)間抗原量（檢測(cè)抗原濃度）

何為乳膠增強(qiáng)散射免疫比濁法？

乳膠增強(qiáng)散射免疫比濁法：是近年來(lái)出現(xiàn)的一種微量非同位素檢查技術(shù)。利用微小的乳膠顆粒（1u±）聯(lián)接抗體后，在液相中與相應(yīng)抗原結(jié)合產(chǎn)生濁度變化來(lái)測(cè)定抗原含量?？梢源蟠笤鰪?qiáng)血漿蛋白的檢測(cè)性能，檢測(cè)敏感性可＜1mg/L。目前已成為血漿蛋白檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)。二、特定蛋白市場(chǎng)現(xiàn)狀

目前國(guó)內(nèi)許多基層醫(yī)院將特定蛋白的項(xiàng)目的檢測(cè)放在了生化儀上進(jìn)行，雖然也勉強(qiáng)得到檢測(cè)結(jié)果，但是由于生化儀是透射比濁法的工作原理，這從根本上決定了它具有局限性，比如：靈敏度和精密度沒(méi)有采用散射比濁法原理工作的特定蛋白分析儀高，所以在特定蛋白領(lǐng)域，許多時(shí)候生化儀不能完全滿足醫(yī)院的檢測(cè)需求。特定蛋白檢測(cè)的臨床意義血漿蛋白成分至少200余種,己分離出的具有臨床意義的純品已有100余種。而可用特定蛋白分析儀進(jìn)行檢測(cè)的蛋白有40余種，最常用10余種，如CRP，IgG，IgM，IgA，C3，C4，RF，ASO，mALB，BMG，HbA1c，其中CRP（C-反應(yīng)蛋白）應(yīng)用最為廣泛。這些蛋白質(zhì)在血液中濃度的增加或者降低和某些疾病有一定的關(guān)系，因而進(jìn)行特定蛋白的檢測(cè)可以輔助診斷某些疾病，判斷預(yù)后，跟蹤治療效果。內(nèi)容簡(jiǎn)介C－反應(yīng)蛋白臨床意義與應(yīng)用糖化血紅蛋白臨床意義與應(yīng)用尿微量白蛋白、胱抑素C（CystatinC）臨床意義與應(yīng)用RF、ASO、CCP和CRP在RA的臨床意義與應(yīng)用D-二聚體（D-Dimer）臨床意義與應(yīng)用免疫球蛋白臨床意義與應(yīng)用補(bǔ)體C3和C4臨床意義與應(yīng)用特定蛋白推薦組合常見問(wèn)題答疑C-反應(yīng)蛋白（CRP）C-反應(yīng)蛋白簡(jiǎn)介C反應(yīng)蛋白定義：1930年，Tillett和Francis首次在急性大葉性肺炎患者的血清中發(fā)現(xiàn)一種能在Ca2+存在時(shí)與肺炎球菌細(xì)胞壁中的C－多糖發(fā)生特異性沉淀反應(yīng)的物質(zhì)。1941年Avery等測(cè)知它是一種蛋白質(zhì)，故稱為C反應(yīng)蛋白(CRP)。它是一類正急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，隨著損傷、炎癥或各類疾病迅速增加。CRP為何被臨床醫(yī)生

所青睞？我國(guó)抗生素應(yīng)用概況門診處方抗菌藥占24%以上，是比例最大的一類藥物。門診感冒患者約有75％應(yīng)用抗生素住院病人，抗生素使用率高達(dá)80%，外科手術(shù)達(dá)95％抗菌藥物占全部藥物份額中國(guó)：25.38％

世界：2％

銷售額前10位藥物，抗生素占中國(guó)：4種，且排名在第一、二、四、五位世界：沒(méi)有一種抗菌藥濫用抗生素的嚴(yán)重后果20萬(wàn)人/年死于藥品不良反應(yīng)，40%與抗生素相關(guān)1/3的殘疾人屬于聽力殘疾，而60％到80％的致聾原因與使用抗生素有關(guān)細(xì)菌耐藥率不斷上升，并出現(xiàn)多藥耐藥和泛耐藥菌指導(dǎo)抗生素使用的檢測(cè)指標(biāo)病原體檢測(cè)、培養(yǎng)、藥敏試驗(yàn)需要專業(yè)的設(shè)備、條件和人員結(jié)果往往48小時(shí)以后出來(lái)檢出率不是很高白細(xì)胞檢測(cè)、監(jiān)測(cè)CRP檢測(cè)、監(jiān)測(cè)白細(xì)胞檢測(cè)敏感性差白細(xì)胞總數(shù)分類計(jì)數(shù)中性粒細(xì)胞的核象變化影響因素眾多疾病初期，機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)劇烈運(yùn)動(dòng)、跑步、緊張、恐懼妊娠、腎上腺皮質(zhì)激素使用反應(yīng)速度慢、幅度小CRP的臨床優(yōu)點(diǎn)1.超出正常值的增量有巨大的潛力－－易于檢出2.病毒感染通常沒(méi)有標(biāo)志性增長(zhǎng)－－用于鑒別3.反應(yīng)速度快和迅速常態(tài)化－－升高下降都很快4.檢測(cè)方便快速CRP的特性1、CRP的理化特點(diǎn)CRP由五個(gè)相同的非共價(jià)結(jié)合的單體組成，呈環(huán)狀五聚體，其亞基由206個(gè)氨基酸殘基組成。2、CRP的合成在肝細(xì)胞內(nèi)持續(xù)合成,分泌至各種體液中由細(xì)胞因子(IL-1,IL-6,TNF-)刺激肝細(xì)胞和上皮細(xì)胞合成，由活化的吞噬細(xì)胞（巨噬細(xì)胞）釋放3.生物學(xué)特點(diǎn)反應(yīng)快速，增量大，隨著恢復(fù)下降也快；敏感！感染、創(chuàng)傷、手術(shù)等情況下快速上升，6-10hr明顯改變48hr（24-72hr）到高峰，102-103倍的變化半衰期6-7hr，較快反映病情的變化病毒感染沒(méi)有標(biāo)志性升高受影響因素少：不受生理活動(dòng)的影響，不受化療、放療和激素治療的影響能關(guān)聯(lián)疾病活動(dòng)性：CRP上升速度、幅度及持續(xù)時(shí)間與病情及組織損傷的嚴(yán)重程度密切相關(guān)健康人CRP濃度分布圖正常情況下人血清中CRP濃度很低中位數(shù)0.7mg/L90%<3mg/LC-反應(yīng)蛋白臨床意義與應(yīng)用CPR與ESR、WBCCRP在區(qū)分細(xì)菌和病毒感染方面能提供比WBC更精確的信息。革蘭氏陰性細(xì)菌性腦膜炎和病毒性腦膜炎患者血清CRP值和WBC值比較骨髓炎病人抗生素治療后30天內(nèi)CRP、ESR變化常用感染指標(biāo)WBC、ESR、CRP的比較CRPWBCESR感染時(shí)反應(yīng)速度變化快速，幾小時(shí)可見升高，平均8小時(shí)增加一倍，隨著治愈一周左右恢復(fù)正常升高較慢治療有效后變化緩慢2-3天可見升高至少2-3周恢復(fù)正常

影響因素不受生理、免疫狀態(tài)藥物治療的影響易受年齡、日間變化、治療藥物等因素影響易受溫度、貧血、血沉管位置、異常免疫球蛋白或復(fù)合物、藥物等影響鑒別診斷能鑒別細(xì)菌或病毒感染不能鑒別細(xì)菌或病毒感染不能鑒別細(xì)菌或病毒感染相關(guān)疾病的活動(dòng)性量的動(dòng)態(tài)變化能反映病癥的活動(dòng)性量的動(dòng)態(tài)變化不能反映病癥的活動(dòng)性無(wú)相關(guān)性CRP的臨床意義鑒別細(xì)菌性或病毒性感染

--指導(dǎo)是否使用抗生素監(jiān)測(cè)和控制感染

--監(jiān)測(cè)創(chuàng)傷、手術(shù)繼發(fā)感染評(píng)估抗生素療效

--調(diào)整抗生素或及時(shí)停用抗生素一）、鑒別細(xì)菌性或病毒性感染CRP濃度在細(xì)菌感染時(shí)增高，而病毒感染時(shí)不增高.最高水平的CRP值常發(fā)生于細(xì)菌感染時(shí)，有時(shí)可高達(dá)500mg/L;細(xì)菌感染和寄生蟲感染通常引起中等程度的CRP升高，典型的是在100mg/L左右；病毒感染引起的反應(yīng)最輕，通常不超過(guò)20mg/L,極少超過(guò)50mg/L.CRP的指導(dǎo)意義CRP升高的程度反應(yīng)炎癥組織和感染的范圍、嚴(yán)重程度和活動(dòng)性。CRP值為10-20mg/L，提示輕度炎癥。CRP值升至20-50mg/L時(shí)，提示有一般細(xì)菌感染。CRP值>50mg/L，提示有嚴(yán)重細(xì)菌感染。二）、監(jiān)測(cè)和控制感染1、組織損傷廣泛燒傷時(shí)CRP顯著升高，如無(wú)感染，三天后即下降且在超過(guò)一個(gè)月的愈合期內(nèi)持續(xù)下降。如期間有感染發(fā)生，CRP又會(huì)升高，所以CRP可用來(lái)監(jiān)測(cè)整個(gè)病程。2、器官移植

移植后三天CRP開始下降，如不下降可懷疑存在

早期排異反應(yīng)腎臟功能恢復(fù)出色和無(wú)并發(fā)癥的患者血清CRP值變化和平均肌酐水平變化3.細(xì)菌性腦膜炎無(wú)并發(fā)癥細(xì)菌性腦膜炎（BM）或有并發(fā)癥細(xì)菌性腦膜炎（BM）和無(wú)菌性腦膜炎（AM）的比較三、評(píng)估抗生素療效急性感染性疾病時(shí)抗生素治療的最適化;高危患者在缺少微生物診斷報(bào)告時(shí)，確立抗生素治療方案;在CRP下降至正常時(shí)，中止抗生素治療。持續(xù)升高的CRP值一般預(yù)示治療無(wú)效，應(yīng)當(dāng)更換治療方法;在一些難以進(jìn)行臨床評(píng)估的風(fēng)濕性疾病中，快速選擇適當(dāng)?shù)目寡字委熕幬铮桓鶕?jù)CRP水平的變化來(lái)決定藥物的劑量；有效預(yù)計(jì)并發(fā)癥的發(fā)生。CRP的臨床應(yīng)用

作為一種炎癥篩選指標(biāo)，CRP檢測(cè)特別對(duì)不能表達(dá)癥狀的病人(嬰兒、昏迷、癡呆病人等)，有很好的提示作用。

超敏C-反應(yīng)蛋白HS-CRP隨著檢測(cè)技術(shù)的不斷發(fā)展，常規(guī)CRP檢驗(yàn)方法可在感染或組織損傷時(shí)檢測(cè)出CRP>8或10mg/L,但不能檢測(cè)出低濃度的CRP變化?，F(xiàn)醫(yī)學(xué)一般把濃度<3mg/L的CRP稱為超敏CRP（HS-CRP）。檢測(cè)超敏CRP（HS-CRP）方法的引入，CRP不僅可作為一種急性炎癥的標(biāo)志物，而且可區(qū)別在正常范圍內(nèi)低程度炎癥反應(yīng)中的CRP的水平.該濃度的CRP與心血管疾病的發(fā)生及新生兒、嬰幼兒的感染有著密切的關(guān)系1在冠心病、中風(fēng)、周圍血管栓塞等疾病診斷和預(yù)測(cè)中發(fā)揮重要的作用。甚至被認(rèn)為是心血管疾病危險(xiǎn)評(píng)估的“金標(biāo)準(zhǔn)”。部分學(xué)者認(rèn)為超敏CRP可以作為心血管疾?。ɡ纾盒募」Ｈ┪ｋU(xiǎn)評(píng)估的一項(xiàng)獨(dú)立指標(biāo)。●近年來(lái)研究提示，慢性炎癥在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用●動(dòng)脈粥樣硬化又是造成心血管疾病重要病因：如冠狀動(dòng)脈粥樣硬化著，若管徑狹窄達(dá)75％以上，則可發(fā)生心絞痛、心肌梗塞、心律失常，甚至猝死?！衩绹?guó)疾病控制和預(yù)防中心（CDC）和美國(guó)心臟協(xié)會(huì)（AHA）建議C-反應(yīng)蛋白作為一種獨(dú)立的危險(xiǎn)因素，能更有效地預(yù)示心血管疾病發(fā)生2新生兒的CRP水平通常很低（<1-2mg/L），由于新生兒的細(xì)菌感染發(fā)展很快，沒(méi)有足夠時(shí)間產(chǎn)生大量CRP，所以大于此值時(shí)與細(xì)菌感染的嚴(yán)重程度有關(guān)。用常規(guī)CRP的檢測(cè)反應(yīng)不出微小的變化。而超敏CRP可滿足兒科感染診斷的需求，監(jiān)測(cè)小兒病情變化。五：糖化血紅蛋白與血糖水平存在差異性的原因1、HbAlc代表的是檢測(cè)前120天的血糖平均水平，而血糖僅代表當(dāng)時(shí)的血糖水平，具有片面性，波動(dòng)大；2、HbAlc測(cè)定不受患者治療的影響，而血糖測(cè)定受治療的影響大；3、測(cè)定標(biāo)本放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)影響血糖的測(cè)定值而HbAlc受其影響不大；4、某些糖尿病患者病情變化迅速，導(dǎo)致血糖值迅速改變，而糖化血紅蛋白的形成是個(gè)持續(xù)，緩慢的過(guò)程，因此其值相對(duì)穩(wěn)定；5、糖化血紅蛋白會(huì)受到某些疾病的干擾，尤其是一些血液病容易導(dǎo)致紅細(xì)胞壽命縮短，引起測(cè)定結(jié)果的不準(zhǔn)確。尿微量白蛋白（Microalbumin,MALB）白蛋白(Alb)正常情況下可有少量被濾過(guò)，但95%的Alb又在近曲小管被重吸收,故尿中Alb含量很低。如果腎臟因疾病或損傷而異常時(shí)，蛋白可滲漏到尿液中，特別是白蛋白,尿微量白蛋白是指尿中含有少量但屬于不正當(dāng)情況下分泌出的白蛋白，是腎臟功能變差的最早信號(hào)。尿微量白蛋白（Microalbumin,MALB微量白蛋白尿成因可能是腎小球性的（例如：糖尿病性微血管病、高血壓、小腎小球損害），腎小管性的（重吸收障礙）或者腎后性的（腎臟病變累及腎小球和腎小管）。MALB臨床應(yīng)用：1.mALB可反映腎小球?yàn)V過(guò)性早期的一些改變，各種原因的腎病，常見升高，特別適用于糖尿病患者的腎病損害的監(jiān)測(cè)和療效判斷，以及高血壓、心血管疾病、腎病的病變程度及預(yù)后的臨床參考。因此微量白蛋白尿癥是預(yù)報(bào)腎病和心血管疾病危險(xiǎn)的指標(biāo)及預(yù)后的臨床參考。2.糖尿?。?/p>

（a）微量白蛋白尿癥最早出現(xiàn)，是糖尿病腎病和終末腎病的早期預(yù)測(cè)指標(biāo)；

（b）微量白蛋白尿癥1型或2型糖尿病人心血管發(fā)病率和死亡率增高的預(yù)兆指標(biāo)。3.高血壓和心血管病： （c）在高血壓患者中進(jìn)行微量白蛋白尿癥篩選，鑒別出有靶器官損害危險(xiǎn)的高危人群；（d）在非糖尿病人中，微量白