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文檔簡介

大腸桿菌的培養(yǎng)和分離1、微生物病毒細菌放線菌真菌原生動物一、微生物的基礎知識(1)定義(2)種類(3)用途2、菌落（1）概念（2）菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)。菌落細菌的菌落特征因種而異3、培養(yǎng)基（1）成分細菌培養(yǎng)：蛋白胨、酵母提取液、氯化鈉霉菌培養(yǎng)：無機物或添加蔗糖的豆芽汁（2）種類分離(純化)細菌、保存菌種固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基凝固劑瓊脂作用擴大培養(yǎng)細菌液體培養(yǎng)基：表面生長均勻混濁生長沉淀生長固體培養(yǎng)基：菌落，菌苔4、生活環(huán)境霉菌：中性偏酸細菌：中性偏堿二、無菌技術1.無菌操作的目的防止培養(yǎng)基被其他微生物污染(及避免操作者被微生物感染)2、無菌技術包括(1)將實驗器具和培養(yǎng)基：高壓蒸汽滅菌

(2)接種環(huán)(針)、試管口:

灼燒滅菌(3)實驗操作空間：酒精+紫外線消毒（接種室(箱)、超凈工作臺）(4)雙手:酒精消毒(5)實驗操作應在酒精燈火焰旁進行(6)避免已滅菌處理的材料用具與周圍物品相接觸。(7)棉塞(封口膜):只讓空氣通過，而空氣中的微生物不能通過。灼燒滅菌高壓蒸汽滅菌鍋

（１）消毒定義：利用化學或物理方法，殺死大部份致病微生物的過程。3.消毒與滅菌

（2）滅菌的定義：

以化學劑或物理方法消滅所有微生物，包括所有細菌的繁殖體、芽孢、霉菌及病毒，而達到完全無菌之過程。

滅菌與消毒技術是微生物有關工作中最普通也是最重要的技術。三、分離細菌方法2、涂布分離法1、劃線分離法★1、劃線分離法2、涂布分離法2、涂布分離法2、培養(yǎng)：在LB液體培養(yǎng)基上擴大培養(yǎng)四、大腸桿菌的培養(yǎng)和分離1、大腸桿菌(1)特性：革蘭氏陰性、兼性厭氧的腸道桿菌(2)用途：基因工程技術中被廣泛采用的工具3、分離滅菌↓倒平板↓培養(yǎng)↓劃線分離

LB液體和固體培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿高壓蒸汽滅菌將固體培養(yǎng)基倒入4個滅菌后的培養(yǎng)皿中，制備平面培養(yǎng)基在裝有液體培養(yǎng)基的三角瓶中接種大腸桿菌，培養(yǎng)12h平板劃線法培養(yǎng)皿倒置，37℃恒溫培養(yǎng)12~24小時倒平板技術倒平板操作接種到固體斜面培養(yǎng)基

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