g第七章雜環(huán)類藥物分析

TheAnalysisofHeterocycles

吡啶類藥物的分析

Theanalysisofpyridines

吩噻嗪類藥物的分析

TheanalysisofPhenothiazines

苯駢二氮雜卓類藥物的分析

TheanalysisofBenzodiazepine

基本要求掌握三種藥物中典型藥物的結(jié)構(gòu)特征，主要鑒別實(shí)驗(yàn)及主要含量測(cè)定方法。了解有關(guān)物質(zhì)檢查內(nèi)容及方法熟悉其它含量測(cè)定方法

FundamentalrequirementMasteringthestructurecharacteristics,mainidentificationtestsandassays.Understandingthecontentandmethodsofrelevantsubstances.Familiarizingwithotherassays.Thestructuresoftypicaldrugs

ThemainchemicalpropertiesIdentificationtestsRelevantsubstancestests

Assays

Theanalysisofpyridines

—Section1

Thestructuresoftypicaldrugs

Nikethamide（尼可剎米）Isoniazid（異煙肼）Ftivazide（異煙腙）

Protionamide（丙硫異煙胺）

WeakbasicityDeoxidization

Thecharacteristicsofpyridinering

ThemainchemicalpropertiesWeakbasicity

藥物母核吡啶環(huán)上的氮原子為堿性氮原子，吡啶環(huán)的pKb值為8﹒8(水中)。尼可剎米β位上被?；〈?，遇堿水解釋放出具有堿性的二乙胺，可進(jìn)行鑒別。

Thenitrogenonpyridineringshowsbasicity.Inwatersolution,thepKbofpyridineringis8.8.Nikethamideprocessesacylsubstituentandeasilybehydrolyzedtoformbasicdiethylamineunderbasicconditions.Thispropertycanbeusedforidentification.Deoxidization異煙肼吡啶環(huán)γ位上被酰肼取代，酰肼基具有較強(qiáng)的還原性，可與某些含羰基的試劑發(fā)生縮合反應(yīng)。

Thepyridineringofisoniazidprocesseshydrazidesubstituent,whichhasstrongreducibility.Soisoniazidcanreactwithsomereagentswhichhavecarbonylgroup.Thecharacteristicsof

pyridinering吡啶環(huán)可發(fā)生開環(huán)反應(yīng)，此為吡啶環(huán)的特性反應(yīng)。Pyridineringcanbedestroyedtoformspecificcolours.Itisthecharacteristicsreactionofpyridinering.

Identification

Ringopeningreactionofpyridinering

(吡啶環(huán)的開環(huán)反應(yīng))Thereactionofhydrazideradical

(酰肼基團(tuán)的反應(yīng))

PrecipitationreactionDecomposedproductreactionUltravioletabsorptionspectroscopiccharacteristics

(紫外吸收光譜特征)RingopeningreactionKonigreaction

(戊烯二醛反應(yīng))吡啶環(huán)

溴化氰

戊烯二醛

芳香第一胺

有色Schiff堿類（聚甲炔染料）

Pyridinering

Cyanogenbromide

Glutaconaldehyde

Aromaticprimaryamine

ColoredSchiffalkali（polymethindyes）

本反應(yīng)適用于吡啶環(huán)α、α’為未取代，以及β或γ位為烷基或羧基的衍生物。中國(guó)藥典用于尼可剎米的鑒別。

Identificationofnikethamide尼可剎米

溴化氰試液

戊烯二醛衍生物（黃色）

苯胺溶液

Nikethamide

CyanogenbromideThederivativeglutaconaldehyde（yellow）

AnilinsolutionIdentificationofisoniazid異煙肼

KMnO4或溴水

氧化

異煙酸

溴化氰

苯胺

聯(lián)苯胺

戊烯二醛衍生物（黃至黃棕色）

戊烯二醛衍生物（淡紅至紅色）

Isoniazid

KMnO4orbrominereagent

OxidationIsonicotinicacidCyanogenbromideAnilineBenzidineThederivativeglutaconaldehyde（yellowtobrown）

Thederivativeglutaconaldehyde（pinktored）

Vongerichtenreaction（二硝基氯苯反應(yīng)）

Undernon-aqueousconditions:吡啶及其衍生物

2，4-二硝基氯苯

加熱或熔融

冷卻

醇制KOH液

溶液（紫紅色）

Pyridineanditsderivative2，4-dinitro-chlorobenzeneHeatingorfusing

CoolingPotassiumhydroxideSolution（mauve）

Alcohol

Theidentificationofftivazide

(Chp2000)異煙腙

2，4-二硝基氯苯

乙醇

水浴煮沸3min

NaOH溶液

靜置

溶液（紅色）

Ftivazide

2，4-dinitro-chlorobenzolEthanol

Boiling3min

SodiumhydroxidesolutionStandingSolution（red）

WaterbathIdentificationofisoniazid異煙肼乙醇液

硼砂

5%2，4-二硝基氯苯

蒸干

加熱10min

甲醇溶液（紫紅色）2，4-二硝基氯苯

加堿Isoniazidethanolsolution

Borax

5%2，4-dinitro-chlorobenzeneEvaporatetodrynessHeating10min

methanolSolution（mauve）2，4-dinitrochlorobenzolbaseThereactionofhydrazideradicalReductionreaction異煙肼加水溶解后，加氨置硝酸銀試液，即有黑色渾濁出現(xiàn)，并生成氮和金屬銀，在管壁上產(chǎn)生銀鏡。

＋AgNO3＋H2O

＋H2N－NH2＋HNO3

NH2－NH2＋4AgNO3

4Ag＋N2＋4HNO3

異煙肼與亞硒酸作用，生成紅色硒的沉淀。

＋SeO2

＋N2＋Se＋H2O

Condensationreaction異煙肼的酰肼基，可與芳醛縮合形成腙，析出結(jié)晶，測(cè)熔點(diǎn)(228-231)。

＋－H2O

Precipitationreaction尼可剎米與硫酸銅及硫氰鐵銨作用生成草綠色配位化合物沉淀。

異煙肼、尼可剎米與氯化汞形成白色沉淀。＋CuSO4＋2NH4SCN

2＋(NH4)2SO4

吡啶環(huán)可與重金屬鹽類及苦味酸等試劑形成沉淀。＋HgCl2

(green)(white)Decomposedproductreaction

尼可剎米

NaOH試液

加熱

二乙胺臭味逸出（濕潤(rùn)的紅色石蕊試紙變藍(lán)）

Nikethamide

SodiumhydroxideHeating

Diethylamineodour（makingtheredlitmuspaperblue）

丙硫異煙胺鹽酸加熱

硫化氫氣體逸出（濕潤(rùn)的醋酸鉛試紙變黑）

Prothionamide

HydrochloricacidHeating

Sulfuretedhydrogenodour（makingleadacetateblack）

UltravioletspectroscopiccharacteristicsDrugsSolventλmax（nm）λmin(nm)E1%1cmA

IsoniazidHCl(0﹒01mol/L)265—約420—NikethamideH2SO4(0﹒05mol/L)263—273—NaOH(0﹒01mol/L)255—840—260—860—ProthionamideEthanol（20ug/ml）291——0.78

Water266234378—

Relevantsubstancestests

Thetestsoffreehydrazineinisoniazid

異煙肼是一種不穩(wěn)定的藥物，其中的游離肼在制備時(shí)原料引入，或在貯存過程中降解而產(chǎn)生。肼是一種誘變劑和致癌物質(zhì)，故國(guó)內(nèi)外藥典多數(shù)規(guī)定異煙肼原料及其制劑中游離肼的檢查。常采用薄層色譜法、比濁法和差示分光光度法。

Isoniazidisunstable.Freehydrazinecouldbeintroducedbybothsyntheticandstorageprocedures.Hydrazineisamutagenandcancerinducingsubstance.TLC,turbidimetryanddifferencespectrophotometryareusuallyusedfortheexaminationofisoniazidanditspreparations.Thin-layerchromatography

中國(guó)藥典對(duì)異煙肼原料和注射用異煙肼，游離肼的檢查，均采用薄層色譜法。異煙肼斑點(diǎn)呈棕橙色的清晰斑點(diǎn)，Rf值約為0.21。游離肼斑點(diǎn)呈鮮黃色，Rf值約為0.3。檢出限量約為0.02%。本法檢出肼的靈敏度為0.1μg。BP(1993)亦采用本法檢查“游離肼及有關(guān)物質(zhì)”

BP與中國(guó)藥典的檢查方法有什么不同？

檢查方法取本品，加水制成每1ml中含有50mg的溶液，作為供試品溶液。另取硫酸肼加水制成每1ml中含有0.20mg（相當(dāng)于游離肼50μg）的溶液，作為對(duì)照液。吸取供試品溶液10μl與對(duì)照溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠薄層板（用羧甲基纖維素鈉溶液制備）上，以異丙醇-丙酮（3:2）為展開劑，展開后，涼干，噴以乙醇制對(duì)二甲氨基苯甲醛試液，15min后檢視，在供試品主斑點(diǎn)前方與硫酸肼斑點(diǎn)相應(yīng)的位置上，不得顯黃色斑點(diǎn)。CarryoutthemethodforTLC,usingsilicagelGF254asthecoatingsubstanceandamixtureof50volumesofethylacetate,20volumesofacetone,20volumesofmethanoland10volumesofwaterasthemobilephase。Applyseparatelytothechromatoplate5ulofeachofthefollowingsolutions。Afterremovaloftheplate,allowittodryinairandexamineunderultra-violetlight(254nm)。Anysecondaryspotinthechromatogramobtainedwithsolution(1)isnotmoreintensethanthespotinthechromatogramobtainedwithsolution(2).——Chp——BP（1993）Forsolution(1)dissolve1.0gofthesubstancebeingexaminedinamixtureofequalvolumesofacetoneandwateranddiluteto10mlwiththesamesolvent。Forsolution(2)dissolve50mgofhydrazinesulphatein50mlofwateranddiluteto100mlwithacetone;to10mlthissolutionadd0.2mlofsolution(1)anddiluteto100mlwithamixtureofequalvolumesofacetoneandwater.TurbidimetryJP（13）采用樣品中加水楊醛的乙醇溶液觀察混濁的方法來控制游離肼的限量。本法操作簡(jiǎn)便，專屬性差，放置時(shí)間過長(zhǎng)，異煙肼的反應(yīng)產(chǎn)物也會(huì)產(chǎn)生渾濁。游離肼可與水楊醛反應(yīng)生成不溶于水的水楊醛腙，呈現(xiàn)混濁。

Differencespectrophotometry

利用游離肼于對(duì)-二甲氨基苯甲醛可形成黃色縮合產(chǎn)物，在456nm波長(zhǎng)處有最大吸收；而異煙肼與上述試劑形成的縮合產(chǎn)物在此波長(zhǎng)處無吸收，運(yùn)用差示分光光度法檢測(cè)游離肼。

對(duì)-二甲氨基苯甲醛連氮(3.125umol/L，虛線）與異煙肼的對(duì)-二甲氨基芐叉衍生物（3.65mmol/L,實(shí)線)的可見光區(qū)吸收光譜圖Differencespectrophotometry差示分光光度法：同時(shí)制備等摩爾濃度的供試品溶液與參比溶液，二者經(jīng)不同試劑處理后，使干擾組分的吸收度差值ΔA為零，待測(cè)組分的ΔA作為定量信息的方法。

Indifferencespectroscopy,acomponentinamixtureisanalyzedbycarryingoutareactionwhichisselectivefortheanalyte.ThiscouldbesimplybringingaboutashiftinwavelengththroughadjustmentofthepHofthesolutioninwhichtheanalyteisdissolvedorachemicalreactionsuchasoxidationorreduction.Relevantsubstancestestsinnikethamide

尼可剎米在生產(chǎn)和貯存過程中易引入有關(guān)物質(zhì)，結(jié)構(gòu)不清，藥典采用薄層色譜法中的高低濃度對(duì)照法進(jìn)行檢查。

Whenpreparingandreservingnikethamide,relevantsubstancesareeasilyproduced。Becauseoftheunclearstructures,aTLClimittestbasedonthecomparisonbetweenaconcentratedsolutionofananalyteandadilutesolutionofanimpurityisadopted.AssaysAssaysofIsoniazid

——Potassiumbromatetitration——Bromometrictitration——Iodometrictitration——Non-aqueoustitration

Theassaysofisoniazoneandnikethamide

——Non-aqueoustitration——Ultravioletspectrophotometry

Theassaysofprothionamide

——Non-aqueoustitration——ArgentimetictitrationPotassiumbromatetitration強(qiáng)酸性溶液中用溴酸鉀滴定液直接滴定法，用指示劑甲基橙指示終點(diǎn)。每1ml的溴酸鉀滴定液（0﹒01667mol/L）相當(dāng)于3﹒492mg的C6H7N3O。本法用于異煙肼片和注射劑的含量測(cè)定。

+2

KBrO3HCl3+3N2

+3H2O+2KBrBromometrictitration中國(guó)藥典（1963年版）采用此法測(cè)定異煙肼的含量。溴在稀鹽酸介質(zhì)中氧化能力強(qiáng)，可使反應(yīng)快速而定量的進(jìn)行。剩余溴用碘量法進(jìn)行測(cè)定。每1ml的溴液（0﹒1mol/L）相當(dāng)于3﹒429mg的C6H7N3O。

KBrO3

+5KBr+6HCl3Br2

+6KCl+3H2O+2Br2

+H2OHCl+N2+4HBrIodometrictitration異煙肼在弱堿性溶液中被過量碘液氧化，反應(yīng)完成后，酸化，剩余的碘液用硫代硫酸鈉液回滴定。每1ml的碘液（0.1mol/L）相當(dāng)于3﹒492mg的C6H7N3O。

+5I2

+5NaHCO3+

N2+4NaI+5CO2+4H2ONon-aqueoustitration

Non-aqueousalkalimetrictitration

異煙肼分子中吡啶環(huán)具有堿性，可用非水堿量法進(jìn)行含量測(cè)定。在冰醋酸中用高氯酸滴定液滴定，以結(jié)晶紫為指示劑；或以高氯酸的二氧六環(huán)液滴定，以甲紅為指示劑

。

Non-aqueousacidometrictitration異煙肼可采用酸量法測(cè)定其含量。以二甲基甲酰胺為溶劑，O-硝基苯胺為指示劑，用甲醇納的苯-甲醇溶液滴定至鮮紅色即為終點(diǎn)。

Non-aqueoustitration

我國(guó)與國(guó)外大多數(shù)藥典，對(duì)異煙腙及其片劑和尼可剎米原料藥的含量測(cè)定，均采用非水溶液滴定法。

Methodofisoniazonedetermination以玻璃-甘汞電極指示終點(diǎn)，結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml的高氯酸鹽滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于98.93mg的C14H13N3O3H2O。此法也用于異煙腙片的含量測(cè)定。

本品約0.15g

精密稱定

+冰醋酸10ml+醋酐10ml

微熱溶解放冷滴定Methodofnikethamidedetermination：

溶液顯綠色，結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml的高氯酸鹽滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于17.82mg的C10H14N2O。

本品約1.5g精密稱定

+冰醋酸10ml+結(jié)晶紫指示劑1滴

滴定

Ultravioletspectrophotometry

尼可剎米注射液，國(guó)內(nèi)外藥典多采用紫外分光光度法測(cè)定其含量。

測(cè)定方法：用內(nèi)容量移液管精密量取本品1ml，置100ml量瓶中，用0.5％硫酸溶液分次洗滌移液管內(nèi)壁，洗液并入量瓶中，加0.5％硫酸溶液稀釋至刻度，搖勻，精密量取適量，加0.5％硫酸溶液稀釋成每1ml中約含尼可剎米20μg的溶液，在263nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，按C10H14N2O的吸收系數(shù)為292計(jì)算，即得。Theassaysofprothionamide

Non-aqueoustitration

丙硫異煙胺的原料藥的含量測(cè)定采用本法。每1ml的高氯酸鹽滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于18.03mg的丙硫異煙胺。

Argentimetictitration

丙硫異煙胺片的含量測(cè)定用此法。每1ml的硝酸銀滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于9.014mg的丙硫異煙胺。

TheAnalysisofPhenothiazines

Thestructuresoftypicaldrugs

ThemainchemicalpropertiesIdentification

testsRelevantsubstancestests

Assays—Section2

Thestructuresoftypicaldrugs

Generalstructure

CommonlyusedPhenothiazines

Drugs

R

R′

HXPerphenazine－Cl

Fluphenazinehydrochloride－CF3HClPromethazinehydrochloride－HHClChlorpromazinehydrochloride

－ClHClUltravioletandinfraredabsorptioncharacteristics

具有紫外和紅外吸收光譜特征Easilyoxidation

易氧化呈色Complexationwithmetalions

與金屬離子絡(luò)合呈色ThemainchemicalpropertiesIdentificationtests紫外特征吸收和紅外吸收光譜

UVandIR顯色反應(yīng)

Colorreaction分解產(chǎn)物的反應(yīng)

Decomposedproductreaction

UltravioletcharacteristicabsorptionNamesSolventconcentrationλmaxAE1%

1cm

Perphenazinenon-aqueousethanol72580.65－（ug/ml）

(nm)

Fluphenazineethanol10260－－decanoateFluphenazineHCl(9→1000)10255－553～593HydrochlorideTrifluoperazineHCl(1→20)10256－630hydrochloridePromethazineHCl(0.01mol/L)6249－883～937

hydrochlorideChlorpromazineHCl(9→1000)52540.46915Hydrochloride306－－Colorreaction

氧化劑氧化顯色Namessulfuricacidnitricacidhydrogenperoxide

奮乃靜－－顯深紅色；放置后紅色漸退去

鹽酸異丙嗪

顯櫻紅色，放置后生成紅色沉淀，加熱即溶解，－顏色漸變深溶液有紅色轉(zhuǎn)變?yōu)槌燃t色

鹽酸氟奮乃靜顯淡紅色，溫?zé)幔笞兂杉t褐色

鹽酸氯丙嗪－顯紅色，漸變淡黃色－

鹽酸三氟拉嗪－生成微帶紅色的白色沉淀；－放置后，紅色變深，加熱后變?yōu)辄S色

吩噻嗪類藥物分子結(jié)構(gòu)中的未被氧化的二價(jià)S能與金屬鈀離子絡(luò)合形成有色絡(luò)合物。

與鈀離子絡(luò)合顯色+

PdCl2+22(Fluphenazinedecanoate)(red)Decomposedproductreaction

癸氟奮乃靜

碳酸鈉及碳酸鉀

600℃熾灼

氟化物

酸性茜素鋯試液

[ZrF6]2-配位離子（溶液由紅色→黃色）

Fluphenazinedecanoate

Sodiumcarbonateandpotassiumcarbonate600℃igniting

Fluoride

酸性茜素鋯試液

[ZrF6]2-coordinatingion（solutionfromredtoyellow）

Relevantsubstancestests常用的吩噻嗪類藥物，除鹽酸奮乃靜未列此項(xiàng)檢查外，其余六種原料藥與其余部分制劑中都規(guī)定了該項(xiàng)檢查。癸氟奮乃靜及其注射液采用薄層色譜法，以鹽酸奮乃靜為對(duì)照品，其它均采用薄層色譜法高低濃度對(duì)比法檢查。

AlimittestmightbeconductedforrelevantsubstancesinrawmaterialsofcommonlyusedPhenothiazinesanditspartialpreparationsexceptforfluphenazinehydrochloride.ATLClimittest,basedoncomparisonbetweenaconcentratedsolutionofananalyteandadilutesolutionofanimpurity,isusedformostphennothiazinedrugs.Thesyntheticprocedureandsourceofimpurityofpromethazinehydrochloride

Syntheticprocedure

Sourcesofimpurities

Method

Attentions

Syntheticprocedure++HCl,HCl·Sourcesofimpurities中間體（Ⅱ）在強(qiáng)堿條件下，能形成中間體季銨離子，由于親核性進(jìn)攻，轉(zhuǎn)位成2-二甲氨基碳正離子，水解為2-二甲基-1-丙醇。再與吩噻嗪母體結(jié)合時(shí)，主要生成異丙嗪，也有少量N，N，β-三甲基-10H-吩噻嗪-10-乙胺異構(gòu)體。其結(jié)構(gòu)為：+H2OMethod

薄層色譜法高低濃度對(duì)比法檢查，該法的靈敏度為0.5μg。Attentions

異丙嗪遇光不穩(wěn)定，上述檢查應(yīng)在避光條件下操作；溶液應(yīng)臨用時(shí)配制，否則，雜質(zhì)斑點(diǎn)增多。

AssaysNon-aqueoustitration

（非水溶液滴定法）Ultravioletspectroscopy（紫外分光光度法）Ceriumetrictitration

（鈰量法）Colorimetricmethods（比色法）Non-aqueoustitration

（吩噻嗪類原料藥物國(guó)內(nèi)外藥典多采用此法）Themainconditionsofnon-aqueousalkalimetrictitration

NamesAmountof

AmountofglacialAmountofmercuric

Colorof

sampling（g）aceticacid（ml）acetate（ml）ending-pointPerphenazine

FluphenazinehydrochloridePromethazinehydrochlorideChlorpromazinehydrochloride0.150.30.30.2202010aceticanhydride10

－545crystalvioletcrystalvioletcrystalvioletorangeⅣ

cyancyanbluerosebengal

Indicator當(dāng)某些吩噻嗪類藥物在冰醋酸和醋酸汞介質(zhì)中用高氯酸標(biāo)準(zhǔn)液滴定時(shí)，往往會(huì)產(chǎn)生紅色的氧化物，干擾結(jié)晶紫指示劑終點(diǎn)顏色變化的觀察?？杉尤肟箟难嵯蓴_。用電位法指示終點(diǎn)時(shí)，加抗壞血酸可使滴定終點(diǎn)的電位突躍更為敏銳。

PrecautionsUltravioletspectroscopy吩噻嗪類藥物基于母核三環(huán)π系統(tǒng)產(chǎn)生紫外特征吸收光譜，在其最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，利用百分吸收系數(shù)計(jì)算；或與對(duì)照品溶液同時(shí)測(cè)定，計(jì)算含量。

直接分光光度法：鹽酸異丙嗪片的測(cè)定方法、鹽酸異丙嗪注射液的含量測(cè)定萃取后分光光度法：鹽酸氯丙嗪注射液的測(cè)定二階導(dǎo)數(shù)分光光度法：鹽酸氯丙嗪注射液的測(cè)定

鹽酸氯丙嗪與抗氧劑的二階導(dǎo)數(shù)光譜為鹽酸氯丙嗪··············為抗氧劑Ceriumetrictitration

基于吩噻嗪類藥物在酸性介質(zhì)中，可被硫酸鈰定量氧化進(jìn)行容量測(cè)定。滴定開始時(shí)，吩噻嗪先失去一個(gè)電子形成一種紅色的自由基，到達(dá)終點(diǎn)時(shí)，溶液中的被測(cè)吩噻嗪均失去兩個(gè)電子，而紅色消退，借以指示終點(diǎn)。此法也可采用電位法或永停法指示終點(diǎn)。

Colorimetricmethods

鈀離子比色法

Palladiumioncolorimetry本法可選擇性地用于未被氧化的吩噻嗪藥物的測(cè)定。因?yàn)镻b2+只與未被氧化的硫共價(jià)，當(dāng)硫原子已被氧化為亞砜或砜時(shí)，則不與Pb2+絡(luò)合。因此，可利用空白對(duì)照的方法，消除本類藥物中氧化物的干擾。

三氯化鐵比色法

Hydrochloricacidcolorimetry

利用吩噻嗪類藥物與三氯化鐵試液呈色，可進(jìn)行比色測(cè)定。方法系以供試品溶液與0.2％三氯化鐵的鹽酸（0.1mol/L)溶液，等體積混合后，在一定時(shí)間內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。TheanalysisofBenzodiazepine

Thestructuresoftypicaldrugs

ThemainchemicalpropertiesIdentificationtestsSpecificimpuritytests

Assays—Section3Thestructureoftypicaldrugs

(diazepam)(chlordiazepoxide)

Chemicalproperties

兩個(gè)藥物二氮雜卓環(huán)上的氮原子具有堿性，故可以和某些有機(jī)堿沉淀試劑反應(yīng)，還可以用非水滴定法測(cè)定含量。本類藥物具較長(zhǎng)的共軛體系，具紫外吸收，溶于硫酸在365nm紫外光下可顯不同顏色。

IdentificationtestsPrecipitationreactionDiazotisationreactionafterhydrolyzing

(水解后重氮化-偶合反應(yīng))Sulfuricacid-fluorescencereaction

(硫酸-熒光反應(yīng))

DecomposedproductreactionTheabsorptionspectrumofUVandIRTLC

Precipitationreaction碘化鉍鉀試液氯氮卓阿普唑侖鹽酸溶液（9→1000）橙紅色沉淀鹽酸氟西泮水溶液BismuthpotassiumiodidesolutionChlordiazeposideAlprazolamHydrochloricacid（9→1000）SalmonprecipitateFlurazepamhydrochlorideaqueoussolution

氯硝西泮的稀鹽酸溶液

碘化鉍鉀試液

橙紅色沉淀

放置

沉淀顏色變深Dilutehydrochloricacidsolutionofclonazepam

Bismuthpotassiumiodidesolution

SalmonprecipitateStanding

ThecolorofprecipitateisdarkerThisreactionisusedfordistinguish.

阿普唑侖的鹽酸溶液（9→1000）

硅鎢酸試液

白色沉淀

Thehydrochloricacidsolutionofalprazolam（9→1000）

Silicotungsticacidsolution

whiteprecipitate

Thisreactionisusedforidentificationinpharmacopoeia.Diazotisationreactionafter

hydrolyzing氯氮卓

艾司唑侖

奧沙西泮

鹽酸溶液（1→2）

加熱煮沸

放冷

加亞硝酸鈉

加堿性β-萘酚

橙紅色

沉淀（奧沙西泮放置后顏色變暗）Chlordiazeposide

Estazolam

Oxazepam

Heatingtoboil

Cooling

Addingsodiumnitrite

Addingβ-naphthol

Salmonprecipitate（afterstandingthecolorofoxazepamisdarker）Hydrochloricacid（1→2）Sulfuricacid-fluorescencereaction

苯駢二氮雜卓類藥物溶于硫酸后，在紫外燈（365nm）下，呈現(xiàn)不同顏色的熒光。地西泮為黃綠色；氯氮卓為黃色；艾司唑侖呈現(xiàn)亮綠色；硝西泮顯淡藍(lán)色。若在稀硫酸中，則地西泮為黃色；氯氮卓為紫色；硝西泮為藍(lán)綠色；艾司唑侖為天藍(lán)色；奧沙西泮為淡黃綠色。

Decomposedproductreaction

本類藥物均為有機(jī)氯化合物，經(jīng)氧瓶燃燒法破壞，生成氯化氫，以5％NaOH液吸收，加硝酸酸化，顯氯化物反應(yīng)。中國(guó)藥典用于地西泮和三唑侖藥物的鑒別。

Organochloriccompound

DestroyedbyoxygenflaskcombustionHydrogenchloride

Absorbingby5%sodiumhydroxidesolutionAcidifyingbynitricacidReactionaschlorideItisusedfortheidentificationofdiazepamandtriazolaminChp.

Specificimpuritytests

RelevantsubstancestestsRelevantsubstancesindiazepamRelevantsubstancesinchlordiazepoxideReverse-phaseHPLCofrelevantsubstancesinchlordiazepoxideDegradationproducttests地西泮中有關(guān)物質(zhì)的檢查

雜質(zhì)來源：

合成過程中因副反應(yīng)較多，可能引入N-去甲基苯甲二氮卓和化學(xué)結(jié)構(gòu)不清的有關(guān)物質(zhì)。檢查方法：薄層色譜法的高低濃度對(duì)照法

Relevantsubstancesindiazepam

Thesourcesofimpurities：Becauseofmanysidereactions,N-nor-methyl-phenymethyl-diazepineandrelevantsubstanceswhichstructuresareunclearmightbeconductedwhensynthesizingdiazepam.Methodofexamination:Alimittestbasedoncomparisonbetweenaconcentratedsolutionofananalyteandadilutesolutionofanimpurityisused.RelevantsubstancesinchlordiazepoxideUSP(23)用薄層色譜法檢查氯氮卓中的有關(guān)物質(zhì)；BP（1993）以高低濃度對(duì)照控制有關(guān)物質(zhì)；中國(guó)藥典僅以“溶液的澄清度”檢查中間體2-氯甲基-4-苯基-6-喹唑啉-3-氧化物等水不溶性雜質(zhì)。

Reversed-phaseHPLCofrelevant

substancesinchlordiazepoxideConditionsofchromatographyColumn:Nuclcosil10C18(250nm×2.6mm);Thenumberoftheoreticalplates:3000;Mobilephase:methanol-phosphateacidsolution(0.05mol/L)(60:40);Flowrate:1ml/min;Detector:UVdetector;Wavelength:254nm;氯氮卓供試品的HPLC色譜圖Ⅰ氯氮卓Ⅱ氨基物Ⅲ氧化物Ⅳ~Ⅵ未知物Degradationproducttests注射劑主要檢查2-甲氨基-5-氯二苯酮等分解產(chǎn)物。注射劑采用高效液相色譜法測(cè)定含量，采用主成分自身對(duì)照法檢查分解產(chǎn)物。

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：用十八硅烷鍵和硅膠為填充劑；甲醇-