2023學(xué)年貴州省六盤山育才中學(xué)高三下學(xué)期期末考試生物試題高三期末試題含解析

2023學(xué)年貴州省六盤山育才中學(xué)高三下學(xué)期期末考試生物試題高三期末試題注意事項(xiàng)：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號填寫在答題卡上。2．回答選擇題時(shí)，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對應(yīng)題目的答案標(biāo)號涂黑，如需改動(dòng)，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標(biāo)號?；卮鸱沁x擇題時(shí)，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．基因流指的是遺傳物質(zhì)在種間和種內(nèi)群體間的傳遞和交換，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．基因流發(fā)生的時(shí)間和發(fā)生的強(qiáng)度將會(huì)顯著影響物種形成的概率B．種群間的基因流被地理隔離所阻斷是形成新物種的唯一途徑C．不同物種間的基因流可以極大地豐富自然界生物多樣化的程度D．地理隔離阻止種內(nèi)群體基因流可能導(dǎo)致生殖隔離逐漸形成2．下列關(guān)于生物研究中常用的方法的敘述，正確的是（）A．加有過氧化氫溶液的試管在加入二氧化錳后，需將試管口塞上橡膠塞B．脂肪鑒定時(shí)，用蘇丹Ⅲ染液染色后，用蒸餾水洗去浮色，再進(jìn)行觀察C．深綠色的黑藻葉片較適合作為觀察葉綠體的實(shí)驗(yàn)材料D．過濾光合色素硏磨液之前，應(yīng)在玻璃漏斗基部放一片濾紙，并迅速過濾3．下列關(guān)于神經(jīng)元及其膜上動(dòng)作電位的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．神經(jīng)元膜上特定的通道蛋白是產(chǎn)生電位變化的基礎(chǔ)B．多個(gè)小電位疊加到一定閥值可以產(chǎn)生動(dòng)作電位C．動(dòng)作電位不會(huì)隨著傳導(dǎo)距離的增加而衰減D．動(dòng)作電位會(huì)因刺激強(qiáng)度的增強(qiáng)而增大4．已知a、b、c、d是某細(xì)菌DNA片段上的4個(gè)基因，下圖中W表示野生型，①、②、③分別表示三種缺失不同基因的突變體，虛線表示所缺失的基因。若分別檢測野生型和各種突變體中某種酶的活性，發(fā)現(xiàn)僅在野生型和突變體①中該酶有活性，則編碼該酶的基因是（）A．基因a B．基因bC．基因c D．基因d5．下圖是人體神經(jīng)元細(xì)胞模式圖，有關(guān)分析正確的是（）A．④中的物質(zhì)釋放到⑤的方式是自由擴(kuò)散B．神經(jīng)遞質(zhì)和其受體的化學(xué)本質(zhì)都是蛋白質(zhì)C．若刺激A點(diǎn)，圖B電表指針會(huì)發(fā)生兩次反向的偏轉(zhuǎn)D．若抑制該細(xì)胞的呼吸作用，將不影響神經(jīng)沖動(dòng)的傳導(dǎo)6．人腦內(nèi)有一種“沉默突觸”，它具有突觸結(jié)構(gòu)，但沒有信息傳遞的功能。你推測最不可能的原因是（）A．突觸小體中沒有突觸小泡 B．突觸前膜無法釋放神經(jīng)遞質(zhì)C．突觸間隙不存在水解神經(jīng)遞質(zhì)的酶 D．突觸后膜缺乏相應(yīng)的受體二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）在人體內(nèi)，胰島素基因表達(dá)后可合成出一條稱為前胰島素原的肽鏈。此肽鏈在細(xì)胞器內(nèi)加工時(shí)，切去頭部的引導(dǎo)肽及中間的C段肽后，形成由A、E兩條肽鏈組成的胰島素。請回答下列問題。（1）根據(jù)前胰島素原的氨基酸序列設(shè)計(jì)前胰島素原基因(簡稱P基因)，會(huì)設(shè)計(jì)出多種脫氧核苷酸序列，這是因?yàn)開_________________。由于P基因較小，故常用__________________法獲得該基因。（2）人們常選用大腸桿菌作為受體菌，原因是__________________。研究發(fā)現(xiàn)諸如胰島素原等小分子蛋白質(zhì)易被大腸桿菌內(nèi)的蛋白酶水解。為防止蛋白質(zhì)被降解，在生產(chǎn)時(shí)可選用__________________的大腸桿菌作為受體菌。（3）從大腸桿菌中獲取的前胰島素原無生物活性，需在體外用蛋白酶切除引導(dǎo)肽和C段肽。不能從大腸桿菌中直接獲得具有生物活性的胰島素的原因是__________________。8．（10分）錦鯉皰疹病毒是一種雙鏈DNA病毒。下圖為TaqMan熒光探針技術(shù)的原理示意圖，探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收；PCR擴(kuò)增時(shí)該探針被Taq酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴(kuò)增1個(gè)DNA分子，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。請回答下列問題：（1）在基因工程中，目前獲取目的基因的常用方法除了利用PCR技術(shù)擴(kuò)增外，還有___________和_________兩種類型。（2）引物的化學(xué)本質(zhì)是_________，其與模板DNA的結(jié)合具有_________性。（3）通常情況下，探針中的GC含量比引物中的略高，這有利于保證退火時(shí)_________與模板DNA結(jié)合。（4）用TaqMan熒光探針技術(shù)檢測錦鯉皰疹病毒時(shí)，在反應(yīng)體系中要加相應(yīng)的病毒遺傳物質(zhì)、引物、探針和_________、_________酶等，其中酶發(fā)揮的具體作用是延伸DNA鏈和_________。（5）若最初該反應(yīng)體系中只有一個(gè)病毒DNA分子，經(jīng)n次循環(huán)后，需要消耗TaqMan熒光探針_________個(gè)。9．（10分）為增加油菜種子的含油量，研究人員嘗試將酶D基因與位于葉綠體膜上的轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因相連，導(dǎo)入油菜細(xì)胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種。（1）研究人員依據(jù)基因的已知序列設(shè)計(jì)引物，采用__________技術(shù)從陸地棉基因文庫中獲取酶D基因，從擬南芥基因文庫中獲取轉(zhuǎn)運(yùn)肽基因。在上述引物設(shè)計(jì)時(shí)，分別在引物中加入上圖所示酶的識(shí)別序列，這樣可以用____________________酶處理兩個(gè)基因后，得到____________端（填圖中字母）相連的融合基因。（2）將上述融合基因插入右圖所示Ti質(zhì)粒的T－DNA中，構(gòu)建_______________并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含______________的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落，再利用液體培養(yǎng)基震蕩培養(yǎng)，可以得到用于轉(zhuǎn)化的浸染液。（3）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間，此過程的目的是_________________________，進(jìn)一步篩選后培養(yǎng)獲得轉(zhuǎn)基因油菜。（4）提取上述轉(zhuǎn)基因油菜的mRNA，在____________酶的作用下獲得cDNA，再依據(jù)融合基因的DNA片段設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增，對擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行檢測，可判斷融合基因是否________。10．（10分）生物技術(shù)實(shí)踐中會(huì)涉及微生物的篩選、物質(zhì)的提取等內(nèi)容。回答下列問題：（1）從土壤中篩選纖維素分解菌時(shí)，所用培養(yǎng)基在成分上的特殊之處在于___________。（2）為分離獲得纖維素分解菌的單菌落，某同學(xué)設(shè)計(jì)了甲、乙兩種培養(yǎng)基（成分見下表）：酵母膏無機(jī)鹽淀粉纖維素粉瓊脂CR溶液水培養(yǎng)基甲++++-++培養(yǎng)基乙+++-+++注：“+”表示有，“－”表示無。據(jù)表判斷，培養(yǎng)基甲_______（填“能”或“不能”）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是______________；培養(yǎng)基乙_____（填“能”或“不能”）用于分離和鑒別纖維素分解菌，原因是________________________________。（3）采用壓榨法提取橘皮精油時(shí)，為了提高出油率，需要將新鮮的柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡。其中石灰水的作用是_______________。將橘皮壓榨后可得到糊狀液體，為了獲得乳狀液，可以先用普通布袋___________除去固體物和殘?jiān)?，然后通過___________進(jìn)一步除去質(zhì)量較小的殘留固體物。11．（15分）圖甲是某草原生態(tài)系統(tǒng)中碳循環(huán)模式圖，圖中A、B、C、D表示生態(tài)系統(tǒng)的成分，①②③為特定的生理過程，圖乙表示該系統(tǒng)中部分生物間的食物關(guān)系。請據(jù)圖分析回答：（1）圖乙中的生物對應(yīng)圖甲中的___________（用字母表示），在①、③過程中碳以___________形式進(jìn)行循環(huán)。（2）如要調(diào)查該生態(tài)系統(tǒng)中蒲公英的種群密度，通常采用_____________法。（3）圖乙中，若鼠和昆蟲糞便中的能量為M，呼吸作用消耗的能量為R，用于自身生長、發(fā)育和繁殖等生命活動(dòng)的能量為N，則圖中第二營養(yǎng)級的同化量可表示為_____________。（4）該草原曾發(fā)生過火災(zāi)，但此后又慢慢恢復(fù)，從生態(tài)系統(tǒng)的角度分析，這體現(xiàn)了生態(tài)系統(tǒng)具有自我調(diào)節(jié)能力，這種能力的大小主要取決于_____________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、B【解題分析】

種群是生物進(jìn)化的基本單位，生物進(jìn)化的實(shí)質(zhì)是種群基因頻率的改變。突變和基因重組，自然選擇及隔離是物種形成過程的三個(gè)基本環(huán)節(jié)，通過它們的綜合作用，種群產(chǎn)生分化，最終導(dǎo)致新物種形成。在這個(gè)過程中，突變和基因重組產(chǎn)生生物進(jìn)化的原材料，自然選擇使種群的基因頻率定向改變并決定生物進(jìn)化的方向，隔離是新物種形成的必要條件?！绢}目詳解】A、基因流發(fā)生的時(shí)間和發(fā)生的強(qiáng)度將會(huì)顯著影響物種形成的概率，A正確；B、地理隔離不是形成新物種的唯一途徑，B錯(cuò)誤；C、不同物種間的基因流可以極大地豐富自然界生物多樣化的程度，C正確；D、長期的地理隔離阻止種內(nèi)群體基因流可能導(dǎo)致生殖隔離，D正確。故選B。2、A【解題分析】

色素提取和分離步驟1.用新鮮的菠菜葉（或刺槐葉等）放入40～50益的烘箱中烘干，粉碎后取2g干粉放入研缽中，加入少許二氧化硅和碳酸鈣，再加入2～3mL95%的乙醇，充分、迅速研磨成勻漿。2.在一小玻璃漏斗基部放一塊單層尼龍布，將研磨液迅速倒入漏斗中。收集濾液到一個(gè)試管中，及時(shí)用棉塞將試管口塞緊。3.制備濾紙條。將一張預(yù)先干燥過的定性濾紙剪成長10cm、寬1cm的紙條，在距濾紙條一端1cm處用鉛筆畫一條細(xì)的橫線。4.點(diǎn)樣。用毛細(xì)吸管吸取少量濾液，沿鉛筆畫的橫線均勻地畫出一條細(xì)而直的濾液細(xì)線。待濾液干后再畫一次，共畫3～4次。5.分離葉綠體中的色素。6.觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果?！绢}目詳解】A、二氧化錳能催化過氧化氫的水解，故加有過氧化氫溶液的試管在加入二氧化錳后會(huì)產(chǎn)生較多的氣泡，為防止氧氣溢出，需將試管口塞上橡膠塞，A正確；B、脂肪鑒定時(shí)，用蘇丹Ⅲ染液染色后，用50%的酒精洗去浮色，再進(jìn)行觀察，B錯(cuò)誤；C、黑藻幼嫩的小片較適合作為觀察葉綠體的實(shí)驗(yàn)材料，C錯(cuò)誤；D、過濾光合色素硏磨液之前，應(yīng)在玻璃漏斗基部放一塊單層尼龍布，并迅速過濾，D錯(cuò)誤。故選A。3、D【解題分析】

靜息電位是指細(xì)胞膜未受刺激時(shí)，存在于細(xì)胞膜內(nèi)外兩側(cè)的外正內(nèi)負(fù)的電位差。動(dòng)作電位是指可興奮細(xì)胞受到刺激時(shí)在靜息電位的基礎(chǔ)上產(chǎn)生的可擴(kuò)布的電位變化過程。刺激神經(jīng)元，神經(jīng)元會(huì)興奮，達(dá)到閾刺激，會(huì)引起膜去極化，Na+內(nèi)流，膜內(nèi)正電荷越來越多，導(dǎo)致膜內(nèi)為正膜外為負(fù)的反極化狀態(tài)，這樣的一種電位變化稱為動(dòng)作電位，到達(dá)動(dòng)作電位的峰值后，Na+通道關(guān)閉，K+通道打開，K+外流，使得膜內(nèi)外重新恢復(fù)為外正內(nèi)負(fù)的極化狀態(tài)，該過程稱為復(fù)極化，有時(shí)K+外流過多，還會(huì)發(fā)生超極化?！绢}目詳解】A、神經(jīng)元膜上特定的通道蛋白是產(chǎn)生電位變化的基礎(chǔ)，鈉離子通道蛋白使得膜外的鈉離子內(nèi)流，鉀離子通道蛋白使得膜內(nèi)的鉀離子外流，A正確；B、小電位不能傳播，多個(gè)小電位疊加到一定閥值可以產(chǎn)生動(dòng)作電位，B正確；C、動(dòng)作電位的傳導(dǎo)具有不衰減性，不會(huì)隨著傳導(dǎo)距離的增加而衰減，C正確；D、動(dòng)作電位的“全或無”是指只要達(dá)到閾刺激，動(dòng)作電位便可產(chǎn)生，而再增大刺激強(qiáng)度，動(dòng)作電位的峰值也不會(huì)改變，若達(dá)不到閾刺激，不會(huì)產(chǎn)生動(dòng)作電位，D錯(cuò)誤。故選D。4、B【解題分析】

因?yàn)樵撁竷H在野生型和突變體①中有活性，說明編碼該酶的基因存在于野生型和突變體①中，且不存在于突變體②和突變體③中，由圖比較觀察知，野生型和突變體①同時(shí)含有且突變體②和突變體③同時(shí)不含有的基因?yàn)榛騜。所以，答案為基因b，正確選項(xiàng)是B。5、C【解題分析】

根據(jù)題意和圖示分析可知：圖左側(cè)為神經(jīng)元細(xì)胞的胞體，①②③分別為線粒體、高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)；圖右側(cè)為突觸結(jié)構(gòu)，①②④⑤分別為線粒體、高爾基體、突觸小泡、突觸間隙?！绢}目詳解】A、④突觸小泡中的物質(zhì)釋放到⑤突觸間隙的方式是胞吐，A錯(cuò)誤；B、神經(jīng)遞質(zhì)受體的化學(xué)本質(zhì)一定是蛋白質(zhì)，但神經(jīng)遞質(zhì)不一定是蛋白質(zhì)，B錯(cuò)誤；C、若刺激A點(diǎn)，興奮在神經(jīng)纖維上以電信號的形式雙向傳導(dǎo)，興奮會(huì)先后傳過電流表的右側(cè)和左側(cè)，所以圖B電表指針會(huì)發(fā)生兩次反向的偏轉(zhuǎn)，C正確；D、由于神經(jīng)遞質(zhì)通過胞吐釋放要利用細(xì)胞膜的流動(dòng)性，需要消耗能量，同時(shí)動(dòng)作電位恢復(fù)為靜息電位時(shí)通過主動(dòng)運(yùn)輸將鈉離子排出細(xì)胞需要消耗能量，所以若抑制該細(xì)胞的呼吸作用，將影響神經(jīng)興奮的傳導(dǎo)，D錯(cuò)誤。故選C。6、C【解題分析】

“沉默突觸”只有突觸結(jié)構(gòu)而沒有傳遞功能，表明興奮無法在突觸中傳遞，造成原因有兩種，一種是突觸無法釋放相應(yīng)的神經(jīng)遞質(zhì)，另一種是突觸前膜可以釋放神經(jīng)遞質(zhì)，但由于突觸后膜上沒有相應(yīng)的受體。【題目詳解】A、神經(jīng)遞質(zhì)只存在于突觸前膜的突觸小泡內(nèi)，突觸小體中沒有突觸小泡可能會(huì)造成沉默突觸，A正確；B、神經(jīng)遞質(zhì)只能由突觸前膜釋放，然后作用于突觸后膜上，突觸前膜無法釋放神經(jīng)遞質(zhì)可能會(huì)造成突觸沉默，B正確；C、突觸間隙不存在水解神經(jīng)遞質(zhì)的酶，不影響神經(jīng)遞質(zhì)傳遞信息，C錯(cuò)誤，D、神經(jīng)遞質(zhì)只有與突觸后膜上的特異性受體結(jié)合才能使下一個(gè)神經(jīng)元產(chǎn)生興奮或抑制，因此突觸后膜缺乏相應(yīng)的受體，則突觸沒有信息傳遞的功能，D正確。故選C?！绢}目點(diǎn)撥】熟記并理解神經(jīng)元的結(jié)構(gòu)、興奮在神經(jīng)元之間傳遞的過程是正確解答此類問題的前提。在此基礎(chǔ)上以題意“沉默突觸具有突觸結(jié)構(gòu)，但沒有信息傳遞的功能”為解題的切入點(diǎn)進(jìn)行分析，即可作出準(zhǔn)確的判斷。二、綜合題：本大題共4小題7、密碼子具有簡并現(xiàn)象(存在多種密碼子決定同一種氨基酸的現(xiàn)象)人工合成單細(xì)胞、繁殖快、遺傳物質(zhì)少蛋白酶缺陷型大腸桿菌為原核細(xì)胞，缺少加工修飾蛋白質(zhì)的細(xì)胞器(內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體)【解題分析】

1、獲得目的基因的方法：①從基因文庫中獲取，②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，③人工合成（反轉(zhuǎn)錄法、根據(jù)已知的氨基酸序列合成DNA法）。

2、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取，②基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，④目的基因的檢測與鑒定。

3、蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過基因修飾或基因合成，對現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類的生產(chǎn)和生活的需要。【題目詳解】（1）由于密碼子具有簡并現(xiàn)象，因此根據(jù)氨基酸序列設(shè)計(jì)DNA堿基序列時(shí)會(huì)有多種設(shè)計(jì)。對于較小的基因(如P基因)，可用人工方法合成。（2）由于大腸桿菌繁殖快，遺傳物質(zhì)少，因此一方面蛋白質(zhì)的產(chǎn)量高，同時(shí)，由于產(chǎn)物少，目的蛋白易于提純。為防止菌體內(nèi)蛋白質(zhì)被降解，在生產(chǎn)時(shí)可選用蛋白酶缺陷型的大腸桿菌作為受體菌。（3）大腸桿菌是原核細(xì)胞，無內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體等細(xì)胞器，不能對前胰島素原進(jìn)行加工?！绢}目點(diǎn)撥】本題考查蛋白質(zhì)工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記蛋白質(zhì)工程的原理、操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。8、從基因文庫中獲取人工合成DNA單鏈特異探針先于引物4種脫氧核苷酸（或Mg2+）Taq將探針?biāo)?n-1【解題分析】

PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因（1）原理：DNA雙鏈復(fù)制（2）過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成?！绢}目詳解】（1）在基因工程中，目前獲取目的基因的常用方法有：利用PCR技術(shù)擴(kuò)增、從基因文庫中獲取、人工合成。（2）引物的化學(xué)本質(zhì)是DNA單鏈，其與模板DNA的結(jié)合具有特異性。（3）通常情況下，探針中的GC含量比引物中的略高，這有利于保證退火時(shí)探針先于引物與模板DNA結(jié)合。（4）PCR擴(kuò)增所需的條件包括：模板DNA、四種脫氧核苷酸、一對引物、熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶），結(jié)合圖中信息可知，用TaqMan熒光探針技術(shù)檢測錦鯉皰疹病毒時(shí)，在反應(yīng)體系中要加相應(yīng)的病毒遺傳物質(zhì)、引物、探針和4種脫氧核苷酸、Taq酶等；由圖可知，酶發(fā)揮的具體作用是延伸DNA鏈和將探針?biāo)?。?）根據(jù)題干信息可知，“熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物數(shù)量完全同步”，因此計(jì)算時(shí)需要去除原來親代的DNA分子，因此若最初該反應(yīng)體系中只有一個(gè)病毒DNA分子，經(jīng)n次循環(huán)后，需要消耗TaqMan熒光探針2n-1個(gè)?！绢}目點(diǎn)撥】本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識(shí)記PCR技術(shù)的條件，能結(jié)合圖中信息準(zhǔn)確答題。9、PCRClaⅠ（限制酶）和DNA連接A、D表達(dá)載體（或“重組質(zhì)?！保┧沫h(huán)素利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄【解題分析】

1、基因文庫包括cDNA文庫、基因組文庫等。某個(gè)群體包含一種生物所有的基因的文庫叫基因組文庫，而用某種生物發(fā)育的某個(gè)時(shí)期的mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的多種互補(bǔ)DNA片段屬于cDNA文庫。2、限制酶能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。同種限制酶切割能夠產(chǎn)生相同的黏性末端，便于質(zhì)粒和目的基因連接?！绢}目詳解】（1）擴(kuò)增目的基因常用PCR技術(shù)。切割獲得酶D基因和轉(zhuǎn)基因肽基因時(shí)，應(yīng)該用同種限制酶，以獲得相應(yīng)的黏性末端。因此，可用ClaⅠ限制酶和DNA連接酶處理兩個(gè)基因后，得到A、D端相連的融合基因。

（2）將上述融合基因插入右圖所示Ti質(zhì)粒的T-DNA中，構(gòu)建基因表達(dá)載體即重組質(zhì)粒并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。由于質(zhì)粒上含有四環(huán)素抗性基因作為標(biāo)記基因，所以將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落。（3）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時(shí)間，此過程的目的是利用農(nóng)桿菌將融合基因?qū)胗筒思?xì)胞。

（4）提取上述轉(zhuǎn)基因油菜的mRNA，在逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下獲得cDNA，再依據(jù)融合基因的DNA片段設(shè)計(jì)引物進(jìn)行擴(kuò)增，對擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行檢測，可判斷融合基因是否完成轉(zhuǎn)錄?！绢}目點(diǎn)撥】本題以增加油菜種子的含油量為材料背景，考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生能夠掌握目的基因獲取的方法，能夠結(jié)合圖解中限制酶切點(diǎn)選擇合適的工具酶獲得融合基因，同時(shí)掌握目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞以及目的基因檢測與鑒定的方法等。10、以纖維素為唯一碳源不能培養(yǎng)基甲為液體培養(yǎng)基，不能用于分離單菌落不能培養(yǎng)基乙中不含纖維素，不能用于分離和鑒別纖維素分解菌破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，分解果膠，防止橘皮壓榨時(shí)滑脫過濾離心【解題分析】

1.土壤中存在著大量纖維素分解菌，包括真菌、細(xì)菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復(fù)合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進(jìn)一步分解為葡萄糖供微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。纖維素分解菌鑒別培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基。2.植物芳香油的提取方法有蒸餾法、壓榨法和萃取法，由于橘皮精油的有效成分在水蒸氣蒸餾時(shí)會(huì)發(fā)生部分水解，使用水中蒸餾法又會(huì)產(chǎn)生原料焦糊的問題，所以一般采用壓榨法；新鮮的橘皮中含有大量的果蠟、果膠和水分，如果直接壓榨出油率低，為了提高出油率，需要將橋皮干燥去水，并用石灰水浸泡。對橘皮壓榨后到的糊狀液體可采用過濾和離心的方法除去其中的固體物?！绢}目詳解】（1）分離纖維素分解菌，宜從富含纖維素的土壤中取樣。因此用于篩選纖維素分解菌的培養(yǎng)基必須以纖維素為唯一碳源。（2）分析表格可知，培養(yǎng)基甲為液體培養(yǎng)基，不能用于分離和鑒別纖維素分解菌，纖維素分解菌鑒別培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基；培養(yǎng)基乙中沒有纖維素，因此也不能用于分離和鑒別纖維素分解菌。（3）根據(jù)以上分析可知，采用壓榨法提取橘皮精油時(shí)，使用石灰水浸泡，其作用是破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，分解果膠，防止橘皮壓榨時(shí)滑脫。將橘皮壓榨后可得到糊狀液體，為了獲得乳狀液，可以先用普通布袋進(jìn)行過濾，除去固體物和殘?jiān)?，然后通過離心進(jìn)一步除去質(zhì)量較小的殘留固體物?！绢}目