第七章 動物實(shí)驗(yàn)概論

第七章動物實(shí)驗(yàn)概論第1頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第一節(jié)實(shí)驗(yàn)動物生產(chǎn)供應(yīng)管理

及使用的特點(diǎn)一、.實(shí)驗(yàn)動物繁殖生產(chǎn)的特點(diǎn)1、難以控制的繁殖規(guī)律2、對生活環(huán)境的高度依賴3、生產(chǎn)成本高4、管理要求高第2頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月二、實(shí)驗(yàn)動物供應(yīng)使用的特點(diǎn)

1、可供使用時間短

2、供應(yīng)使用的規(guī)格要求千變?nèi)f化

3、供應(yīng)使用量的峰谷落差大

第3頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月三、實(shí)驗(yàn)動物生產(chǎn)供應(yīng)的特殊管理要求1、與國際接軌的要求2、國家、地方管理法規(guī)的要求3、質(zhì)量管理要求第4頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月四、醫(yī)學(xué)研究使用實(shí)驗(yàn)動物的特點(diǎn)醫(yī)學(xué)院校科研使用實(shí)驗(yàn)動物的通常特點(diǎn)是：規(guī)格嚴(yán)，要求高，品種多，范圍廣，有諸多制約因素影響動物實(shí)驗(yàn)的順利開展；實(shí)驗(yàn)所需要的動物、品種、數(shù)量、規(guī)格、質(zhì)量要求不一；實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、要求、方法不一；?shí)驗(yàn)人員成份(有教師、醫(yī)生、研究生、技術(shù)人員)不一；操作技能參差不齊；急性實(shí)驗(yàn)少，慢性實(shí)驗(yàn)多，使用時間或集中或分散，無規(guī)律可循；第5頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月主要表現(xiàn)：1、使用時間的不確定性2、臨時計(jì)劃多3、計(jì)劃可塑性大4、科研經(jīng)費(fèi)不足5、多因素的制約

第6頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第二節(jié)實(shí)驗(yàn)動物的使用計(jì)劃編制凡涉及使用實(shí)驗(yàn)動物的課題，課題申報者在申報前應(yīng)主動與實(shí)驗(yàn)動物中心取得聯(lián)系，提出擬用實(shí)驗(yàn)動物的品種、等級、數(shù)量、規(guī)格要求等的預(yù)計(jì)劃，待課題正式立項(xiàng)后應(yīng)及時編制實(shí)驗(yàn)動物詳細(xì)使用計(jì)劃，確定使用實(shí)驗(yàn)動物的日期，交由實(shí)驗(yàn)動物中心安排生產(chǎn)及供應(yīng)。第7頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月報送計(jì)劃的時間為：使用小鼠前3個月，使用大鼠前4個月，使用狗、兔等非自繁動物之前1個月。這樣才能使實(shí)驗(yàn)動物生產(chǎn)供應(yīng)部門有充裕的時間進(jìn)行選種選配、繁殖生產(chǎn)或外出采購并按程序進(jìn)行檢疫和檢驗(yàn)。計(jì)劃一旦落實(shí)就必須嚴(yán)格執(zhí)行，任何變動都將造成經(jīng)濟(jì)損失和時間的浪費(fèi)。第8頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第三節(jié)實(shí)驗(yàn)動物的領(lǐng)取或外購一、實(shí)驗(yàn)動物的領(lǐng)取1、發(fā)放實(shí)驗(yàn)動物在每天規(guī)定的時間段內(nèi)進(jìn)行

2、根據(jù)事先所造計(jì)劃提前一天通知飼養(yǎng)員，自覺遵守領(lǐng)取時間。

3、領(lǐng)取動物必須遵守有關(guān)制度，履行登記、付款手續(xù)。第9頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月二、實(shí)驗(yàn)動物的購買1、提出外購申請，經(jīng)實(shí)驗(yàn)動物中心負(fù)責(zé)人同意；2、事先與供應(yīng)單位聯(lián)系并確認(rèn)能夠提供，并問清楚等級、價格、包裝、供應(yīng)方式，可供應(yīng)日期；

3、如果系慢性實(shí)驗(yàn)，則必須首先與實(shí)驗(yàn)動物中心簽訂好動物實(shí)驗(yàn)室的使用和代養(yǎng)觀察協(xié)議，辦妥有關(guān)手續(xù)；第10頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月4、購買時要索取實(shí)驗(yàn)動物質(zhì)量合格證、許可證復(fù)印件和其他相關(guān)資料；5、選擇最快、最安全、最有效的運(yùn)輸方式；

6、遵守動物運(yùn)輸檢驗(yàn)檢疫法；

7、如需要實(shí)驗(yàn)動物中心協(xié)助，應(yīng)事先支付足額費(fèi)用。

第11頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月三、實(shí)驗(yàn)動物的運(yùn)輸

1、運(yùn)輸容器

運(yùn)輸容器應(yīng)能防止微生物污染及承受短暫性的擠壓，保證實(shí)驗(yàn)動物的健康與安全，并能防止動物逃逸運(yùn)輸無特定病原體（SPF）動物，運(yùn)輸箱更要加上一層特殊濾帽，以防止外界微生物的污染。運(yùn)輸籠盒應(yīng)考慮實(shí)驗(yàn)動物的生理、生態(tài)和習(xí)性等因素，要特別注意，在同一運(yùn)輸箱內(nèi)不能混合不同品種、不同性別或不同等級的動物。

第12頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月2、動物運(yùn)輸箱的標(biāo)簽1）、收件人姓名、地址、單位及電話。2）、寄件人姓名、地址、單位及電話（以及緊急聯(lián)絡(luò)電話號碼）。3）、裝箱時間，運(yùn)輸日期、時間。4）、動物數(shù)量、性別、品種、品系、年齡等相關(guān)資料。5）、運(yùn)輸箱件數(shù)。

6）、動物健康證明或相關(guān)資料。第13頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月3、運(yùn)輸工具運(yùn)輸工具需要有通風(fēng)和空調(diào)設(shè)備，以防運(yùn)輸中出現(xiàn)過熱或過冷引起動物的反應(yīng)與不適。第14頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月4、驗(yàn)收動物

主管獸醫(yī)或動物飼養(yǎng)管理人員應(yīng)在對外包裝消毒后小心地打開運(yùn)輸箱，檢查動物是否有任何死亡或異樣。第15頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月四、進(jìn)出口檢疫動物出入境必須取得國家出口或進(jìn)口許可證，來自特定疾病疫區(qū)的動物，不能進(jìn)口。依國際規(guī)范，野生獵捕靈長類動物需測試肺結(jié)核、皰疹B病毒和其他相關(guān)傳染病，確認(rèn)不攜帶有規(guī)定的病原微生物才能引進(jìn)。每當(dāng)引進(jìn)其他國家的實(shí)驗(yàn)動物（嚙齒類）進(jìn)入國內(nèi)時，必須經(jīng)國家檢驗(yàn)檢疫機(jī)構(gòu)批準(zhǔn)，確定符合要求的專門場所進(jìn)行飼養(yǎng)、檢疫，且要求有健康證明文件（healthcertificate）。動物于檢疫后，必須作定期微生物監(jiān)測,確認(rèn)動物健康后，才能用于繁殖生產(chǎn)或長期研究。第16頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第四節(jié)動物實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備與實(shí)施第17頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月一、動物實(shí)驗(yàn)的概念動物實(shí)驗(yàn)是根據(jù)研究目的，恰當(dāng)?shù)剡x用標(biāo)準(zhǔn)的符合實(shí)驗(yàn)要求的實(shí)驗(yàn)動物，在設(shè)計(jì)的條件下，進(jìn)行各種科學(xué)實(shí)驗(yàn)、觀察、記錄動物的反應(yīng)過程或反應(yīng)結(jié)果，以探討或檢驗(yàn)生命科學(xué)中未知因素的專門活動。動物實(shí)驗(yàn)是人類生存和發(fā)展的必要手段。第18頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月二、實(shí)驗(yàn)人員的資質(zhì)認(rèn)定動物實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)掌握實(shí)驗(yàn)動物科學(xué)基本知識，必須了解國家、省、市及所在單位實(shí)驗(yàn)動物機(jī)構(gòu)有關(guān)實(shí)驗(yàn)動物和動物實(shí)驗(yàn)的管理法規(guī)和制度，并能夠切實(shí)遵照執(zhí)行。參與動物實(shí)驗(yàn)的人員都必須通過所在省、市科技主管部門組織的實(shí)驗(yàn)動物從業(yè)人員上崗考試，并取得科技主管部門統(tǒng)一頒發(fā)的上崗資格證書。第19頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月三、動物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

１、選題的一般原則：①科學(xué)性。即選題應(yīng)具有明確的理論意義和實(shí)踐意義，符合科學(xué)性的原則。應(yīng)當(dāng)在理論學(xué)習(xí)、技能掌握、文獻(xiàn)檢索、研究積累的基礎(chǔ)上提出假說，設(shè)計(jì)新的實(shí)驗(yàn)。②創(chuàng)新性。創(chuàng)新性是科學(xué)的靈魂，選題能夠探索生命科學(xué)中的未知事物或未知過程，或能揭示已知事物中的未知規(guī)律，或提出新見解、新技術(shù)、新方法。③可行性。指選題應(yīng)切合研究者的學(xué)術(shù)水平、技術(shù)水平，具備開展實(shí)驗(yàn)的條件，能夠順利得以實(shí)施。第20頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月④倫理原則。實(shí)驗(yàn)動物同樣是生命體，同樣需要考慮倫理問題。動物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)按照“３R”原則進(jìn)行評估和設(shè)計(jì)。在滿足研究需要的前提下，盡可能少用實(shí)驗(yàn)動物，或?qū)ふ姨娲椒ǎ粚?shí)驗(yàn)應(yīng)當(dāng)在動物沒有痛苦的條件下進(jìn)行，需要手術(shù)或其他損傷性實(shí)驗(yàn)時，應(yīng)當(dāng)給動物麻醉或鎮(zhèn)靜。實(shí)驗(yàn)后的動物應(yīng)給予很好的護(hù)理。第21頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月⑤統(tǒng)計(jì)學(xué)考慮。動物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時應(yīng)充分考慮統(tǒng)計(jì)學(xué)原則，即對照、隨機(jī)、重復(fù)的原則。在分組、例數(shù)、采用的指標(biāo)等方面，都應(yīng)事先考慮研究結(jié)束后的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法，以及采用這些方法在設(shè)計(jì)時需要注意的問題。第22頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月２、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的幾個要素（1）處理因素人為施加不同試驗(yàn)條件（給受試對象以各種物理、化學(xué)或生物學(xué)刺激），以揭示生物體的內(nèi)在規(guī)律。控制處理水平（如劑量、時間、強(qiáng)度、頻率等）在合理的范圍。第23頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）試驗(yàn)對象選擇合適的實(shí)驗(yàn)動物或動物組織和細(xì)胞等。必須保證試驗(yàn)對象的一致性，試驗(yàn)對象應(yīng)當(dāng)對處理因素敏感，并且反應(yīng)穩(wěn)定。（3）試驗(yàn)效應(yīng)的觀察采用適當(dāng)?shù)挠^察指標(biāo)，包括定量指標(biāo)、定性指標(biāo)和半定量指標(biāo)，觀察動物對各種試驗(yàn)施加因子的反應(yīng)。選擇指標(biāo)時應(yīng)當(dāng)考慮到指標(biāo)的關(guān)聯(lián)性、客觀性、靈敏度和可用性，以提高效應(yīng)觀察的敏感性和特異性。第24頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月３、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的原則(1)對照性原則同體對照，即同一動物在施加實(shí)驗(yàn)因素前后所獲得的不同結(jié)果和數(shù)據(jù)各成一組，作為前后對照，或同一動物在施加實(shí)驗(yàn)因素的一側(cè)與不施加實(shí)驗(yàn)因素的另一側(cè)作左右對照；異體對照，即實(shí)驗(yàn)動物均分為兩組或多組，一組不施加實(shí)驗(yàn)因素，另一組或幾組施加實(shí)驗(yàn)因素。沒有對照組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果往往是難以令人信服的。對照應(yīng)在同時同地同條件下進(jìn)行。第25頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月（2）一致性原則一致性原則是指在實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)組與對照組除了處理因素不同外，非處理因素基本保證均衡一致。這是處理因素具有可比性的前提。（3）重復(fù)性原則重復(fù)性原則是指同一處理要設(shè)置多個樣本例數(shù)。重復(fù)的作用是估計(jì)試驗(yàn)誤差，降低試驗(yàn)誤差，增強(qiáng)代表性，提高精確度。重復(fù)的目的就是要保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果能在同一個體或不同個體中穩(wěn)定地再現(xiàn)。為此，必須有足夠的樣本數(shù)。樣本數(shù)過少，實(shí)驗(yàn)處理效應(yīng)將不能充分顯示；樣本數(shù)過多，又會增加工作量，也不符減少實(shí)驗(yàn)動物用量的原則。第26頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月（4）隨機(jī)性原則隨機(jī)性原則就是按照機(jī)遇均等的原則來進(jìn)行分組。其目的是使一切干擾因素造成的實(shí)驗(yàn)誤差盡量減少，防止實(shí)驗(yàn)者的主觀因素或其他偏性誤差造成的影響。（5）客觀性原則客觀性原則是指所選擇的觀測指標(biāo)盡可能不帶有主觀成分。所有觀測指標(biāo)盡可能便于定性定量，結(jié)果判斷要以客觀數(shù)據(jù)為依據(jù)。第27頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月四、動物實(shí)驗(yàn)條件的準(zhǔn)備1、實(shí)驗(yàn)場所必須持有實(shí)驗(yàn)動物使用許可證必須是標(biāo)準(zhǔn)化的條件，規(guī)范化的管理。第28頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月

2、儀器、藥品、試劑儀器要校準(zhǔn)，好用、會用；藥品、試劑要提前預(yù)定，按照說明書進(jìn)行配制，特別注意的是，生物試劑要在確認(rèn)有合格的實(shí)驗(yàn)動物和其它條件都具備的情況下才可配制；各種實(shí)驗(yàn)器械要消毒、配套。第29頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月

3、實(shí)驗(yàn)動物實(shí)驗(yàn)動物是特殊的材料，是有生命的物質(zhì)。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)了解實(shí)驗(yàn)動物品種、品系、等級、許可證、動物質(zhì)量合格證情況，進(jìn)一步提交詳細(xì)的使用計(jì)劃。對本單位不能提供的實(shí)驗(yàn)動物，則必須聯(lián)系購買，購買的程序、要求、運(yùn)輸?shù)榷家J(rèn)真考慮第30頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月4、實(shí)驗(yàn)人員實(shí)驗(yàn)人員是實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵因素。是否取得動物實(shí)驗(yàn)上崗資格證書對實(shí)驗(yàn)內(nèi)容是否熟悉實(shí)驗(yàn)操作是否熟練時間安排是否有保證第31頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月五、預(yù)實(shí)驗(yàn)檢查各項(xiàng)準(zhǔn)備工作是否完備實(shí)驗(yàn)方法和步驟是否切實(shí)可行測試指標(biāo)是否穩(wěn)定可靠可初步了解實(shí)驗(yàn)結(jié)果與預(yù)期結(jié)果的距離，從而為正式實(shí)驗(yàn)提供補(bǔ)充、修正、完善的意見和經(jīng)驗(yàn)第32頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月六、動物實(shí)驗(yàn)的實(shí)施

動物實(shí)驗(yàn)的實(shí)施就是動物實(shí)驗(yàn)按照整個實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的技術(shù)路線付諸行動的過程。應(yīng)對相關(guān)人員作出合理分工，明確職責(zé)實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員要認(rèn)真履行職責(zé)，對實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)的各種問題要認(rèn)真分析，及時匯報，提出處理方案。實(shí)驗(yàn)過程中的觀察結(jié)果與預(yù)期不符時，要及時作出分析和調(diào)整，避免人、財、物力的不必要浪費(fèi)。在實(shí)驗(yàn)過程中，要敢于舍棄原設(shè)計(jì)中不盡合理的部分，仍要不斷修正和完善實(shí)驗(yàn)方案。要對手術(shù)后的動物勤加觀察，精心護(hù)理.第33頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月七、實(shí)驗(yàn)記錄與資料整理1、檢查資料：完整性、準(zhǔn)確性、及時性、真實(shí)性2、設(shè)計(jì)分組：合理分組、科學(xué)分組（質(zhì)量、數(shù)量分組）

3、表格整理：整理、歸納

4、統(tǒng)計(jì)分析：統(tǒng)計(jì)學(xué)原理、應(yīng)用軟件第34頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月八、動物實(shí)驗(yàn)報告與論文撰寫1、實(shí)驗(yàn)動物種系名稱實(shí)驗(yàn)動物品種、品系名稱必須準(zhǔn)確、規(guī)范，避免使用通俗稱謂，如SD大鼠不要寫成SD大白鼠，昆明種小鼠應(yīng)寫成“KM小鼠”（已獲國際認(rèn)可），BALB/c小鼠不能寫成Balb/c小鼠，更不能寫成B小鼠。2、背景資料動物從何處獲得，遺傳學(xué)分類屬于哪一類，微生物等級屬于哪一級，必須交代清楚。實(shí)驗(yàn)動物供應(yīng)單位的生產(chǎn)許可證編號及合格證情況。避免使用模糊的描述，如將封閉群日本大耳白兔描述成純種大白兔或純種兔等錯誤概念。第35頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月

3、性別和規(guī)格應(yīng)準(zhǔn)確描述實(shí)驗(yàn)所使用實(shí)驗(yàn)動物的雌雄性別數(shù)量、年齡、體重等。

4、動物實(shí)驗(yàn)條件實(shí)驗(yàn)動物使用許可證編號，實(shí)驗(yàn)動物飼養(yǎng)方式（飼料來源、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、飼喂方式、飲水方式、飼養(yǎng)密度、籠具與墊料種類等），實(shí)驗(yàn)觀察環(huán)境的級別，都應(yīng)作出詳盡的描述。

5、動物的處理方式動物實(shí)驗(yàn)使用的麻醉劑的種類、劑量與方法、給藥途徑與方法、動物的標(biāo)本采集方式、動物的處死方式等都要盡可能注明。第36頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月例題：綜合題

小張已經(jīng)完成動物實(shí)驗(yàn)，論文初稿也寫好了，這是其中的部分內(nèi)容：材料和方法實(shí)驗(yàn)動物：ICR小白鼠共40只，體重20g，購自南通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心。實(shí)驗(yàn)鼠飼養(yǎng)在本實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，飼喂全價小鼠顆粒飼料，自由采食和飲用自來水。實(shí)驗(yàn)方法：將40只小白鼠分成4組，每組10只*************。實(shí)驗(yàn)第7天，處死動物，******。請你運(yùn)用所學(xué)的實(shí)驗(yàn)動物學(xué)知識幫助分析并進(jìn)行修改。第37頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月例題：簡答題若大鼠表現(xiàn)為情緒暴躁、易咬人，可能的原因是什么？

D2FVBF1是哪一類動物？其含義是什么？在做動物實(shí)驗(yàn)時，一定要在領(lǐng)取實(shí)驗(yàn)動物后，再配制生物試劑，理由是什么？

第38頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月第五節(jié)影響動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素第39頁，課件共46頁，創(chuàng)作于2023年2月一、動物因素

（一）、種屬不同種屬的哺乳動物的生命現(xiàn)象，特別是一些最基本的生命過程，有一定共性，這是醫(yī)學(xué)研究中應(yīng)用動物實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)。但不同種屬的動物在對各種實(shí)驗(yàn)施加因子的反應(yīng)上，又各有不同：

1．不同種屬動物對同一致病因素的易感性不同。

2．不同種屬動物的基礎(chǔ)代謝率相差很大。

3．不同種屬動物對藥物的反應(yīng)有明顯差異。

4．不同種屬動物所進(jìn)行的