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文檔簡介
2023屆江蘇省高級中學(xué)高三3月第二次聯(lián)考生物試題注意事項:1.答題前,考生先將自己的姓名、準(zhǔn)考證號碼填寫清楚,將條形碼準(zhǔn)確粘貼在條形碼區(qū)域內(nèi)。2.答題時請按要求用筆。3.請按照題號順序在答題卡各題目的答題區(qū)域內(nèi)作答,超出答題區(qū)域書寫的答案無效;在草稿紙、試卷上答題無效。4.作圖可先使用鉛筆畫出,確定后必須用黑色字跡的簽字筆描黑。5.保持卡面清潔,不要折暴、不要弄破、弄皺,不準(zhǔn)使用涂改液、修正帶、刮紙刀。一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1.某研究小組同學(xué)用體重等方面大體相同的三組兔子進行如下實驗:將少量含有放射性碘的注射液注射到A、B、C三組兔子的體內(nèi),然后定時測定兔子甲狀腺的放射量。4天后,分別給三組兔子注射①無放射性的甲狀腺激素,②無放射性的促甲狀腺激素,③生理鹽水,實驗結(jié)果如圖所示。據(jù)圖判斷,A、B、C三組兔子第二次注射的物質(zhì)依次是A.②③① B.②①③C.③②① D.③①②2.下列有關(guān)顫藻細胞的敘述,錯誤的是()A.含有與光合作用有關(guān)的酶和色素B.生命活動所需能量主要來自線粒體C.在核糖體中合成蛋白質(zhì)D.既含有DNA又含有RNA3.在進行“觀察植物細胞的質(zhì)壁分離及復(fù)原”的實驗時,下列相關(guān)敘述不正確的是()A.實驗材料應(yīng)選擇有活性的且有大液泡的植物細胞B.在顯微鏡下看到正常細胞后再滴加高濃度蔗糖溶液C.只有具紫色液泡的洋蔥表皮細胞才能發(fā)生質(zhì)壁分離D.本實驗不能證實溶質(zhì)分子進出細胞的方式4.下列有關(guān)細胞癌變的敘述,正確的是A.基因突變導(dǎo)致的各種細胞癌變均可遺傳B.石棉和黃曲霉素是不同類型的致癌因子C.人體的免疫系統(tǒng)對癌變細胞具有清除作用D.癌變細胞內(nèi)酶活性降低導(dǎo)致細胞代謝減緩5.下列關(guān)于免疫說法正確的是()A.效應(yīng)細胞毒性T細胞在胸腺中發(fā)育成熟,在血液中循環(huán)流動B.皮膚油脂腺分泌的油脂抑制真菌和某些細菌是非特異性反應(yīng)的體現(xiàn)C.被瘋狗咬傷后,注射狂犬病毒疫苗目的是刺激機體內(nèi)記憶細胞的增殖分化D.病原體侵入人體發(fā)生特異性免疫時,并不是所有的抗原都會被巨噬細胞降解成肽6.甲圖表示反應(yīng)物濃度對酶促反應(yīng)速率的影響;乙圖表示將A、B兩種物質(zhì)混合,再在T1時加入某種酶后,A、B兩種物質(zhì)的濃度變化曲線。實驗均在最適溫度和最適pH條件下完成,下列敘述錯誤的是()A.甲圖中反應(yīng)速率達到最大后,限制酶促反應(yīng)速率的主要因素是酶的數(shù)量B.若乙圖中的物質(zhì)A是淀粉,則B可以是麥芽糖,該酶可以是唾液淀粉酶C.乙圖中T2時刻后限制酶促反應(yīng)速率的主要因素是酶的活性D.甲、乙兩圖所示的實驗中,溫度和pH都屬于無關(guān)變量二、綜合題:本大題共4小題7.(9分)2019年新型冠狀病毒,即“2019-nCoV”,為有包膜病毒。顆粒呈圓形或橢圓形,直徑50-200nm。顆粒表面有棒狀突起,使病毒看起來如同花冠,故而得名。2019-nCoV基因組長度為29.8Kb,為單股正鏈RNA(正鏈RNA能與核糖體結(jié)合,具有mRNA的功能),結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定,容易產(chǎn)生基因突變,給疫苗研制帶來困難。其5’端為甲基化帽子,3’端有多聚腺苷酸(PolyA)結(jié)構(gòu),可直接作為翻譯的模板,其基因組特征與哺乳動物相似,此病毒已在全世界感染多人。(1)請參照中心法則,寫出新型冠狀病毒的遺傳信息的傳遞途徑___________________________。(2)人感染新型肺炎冠狀病毒后,經(jīng)常出現(xiàn)發(fā)熱癥狀,原因之一是淋巴因子刺激了下丘腦中的____________中樞,使有關(guān)腺體分泌的___________激素和腎上腺素的量增加,從而使產(chǎn)熱增加。(3)感冒發(fā)熱飲水較多后血漿滲透壓下降,會刺激下丘腦中的________________興奮進而導(dǎo)致尿量增加,利于毒素排出體外。(4)科研工作者正努力研制預(yù)防新冠肺炎疫苗,從免疫學(xué)角度講,疫苗相當(dāng)于_______________。將疫苗注射人體后會進入血液循環(huán),病毒選擇性的入侵肺部細胞,說明它能夠____________并結(jié)合肺部細胞表面受體,從而寄生在宿主細胞中,_____________能識別被寄生的宿主細胞,并與之密切接觸,使其裂解死亡;新型冠狀病毒被釋放出來,而后被__________(填“細胞”或“體液”)免疫產(chǎn)生的抗體所凝集,使之失去感染能力,最后被吞噬細胞吞噬消化。(5)新冠肺炎是一種_______________(填“遺傳病”或“傳染病”),請說出預(yù)防該種疾病的兩種有效措施:①___________________________;②__________________________。(6)通過研究科學(xué)家推測新型冠狀病毒的原始宿主可能是蝙蝠。蝙蝠是多種人畜共患病毒的天然宿主,由于它有特殊的免疫系統(tǒng)“隨時戒備”、“調(diào)控得當(dāng)”,才有效遏制了病毒在體內(nèi)泛濫,也成功避免了在對抗病毒過程中的傷害。既然蝙蝠攜帶那么多病毒,那么危險,是否應(yīng)該大量消滅蝙蝠以確保人類的安全呢?請從生物學(xué)的角度解釋一下原因?__________________________8.(10分)Ⅰ、凝乳酶是奶酪生產(chǎn)中的關(guān)鍵性酶。培育產(chǎn)高酶活力凝乳酶微生物菌種是目前最有前途的發(fā)展方向。圖1為產(chǎn)高酶活力凝乳酶的枯草芽孢桿菌培育過程。(1)圖1所示的b過程的目的是為________,接種用的方法是_______。培養(yǎng)過程需要將平板倒置目的是_____。Ⅱ、在35℃、40分鐘內(nèi)能凝固1mL10%奶粉所需的酶量為一個酶活力單位(U)。圖2表示圖1中提取得到的各種凝乳酶活力檢測結(jié)果。(2)據(jù)圖2所示,酶催化能力最強的是_______組,而各組酶催化能力存在差異的原因是______。(3)在實際生產(chǎn)中,將凝乳酶進行固定化,固定化酶技術(shù)的優(yōu)點是_________,與固定化酶技術(shù)相比,固定化細胞的特點是______。(4)分離純化特定的酶,常使用的方法是凝膠色譜法和電泳法。使用凝膠色譜法分離酶,最先分離出來的是分子量________(大或小)的酶分子。9.(10分)甲醇酵母菌是基因工程中常用的受體菌,研究人員將人的膠原蛋白基因?qū)爰状冀湍妇胁⒊晒Ρ磉_?;卮鹣铝袉栴}。(1)獲取目的基因是實施基因工程的第一步,獲取目的基因的方法有_____、__________(答出兩種)。(2)要使膠原蛋白基因在甲醇酵母菌中表達,需要先構(gòu)建基因表達載體而不是直接將基因?qū)胧荏w細胞,原因是_________________和_________________。(3)甲醇酵母菌可高效表達外源蛋白質(zhì)并分泌到細胞外,但自身蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中的很少,這一特點的優(yōu)點在于_____________,甲醇酵母菌分泌的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)與人的幾乎完全相同,從細胞結(jié)構(gòu)的角度分析,其原因可能是_______。(4)在構(gòu)建基因表達載體時,用兩種不同的限制酶分別切割目的基因的兩端和質(zhì)粒,使目的基因和質(zhì)粒獲得不同的黏性末端,其目的是______________。10.(10分)微生物的生長繁殖需要不同種類的碳源、氮源、無機鹽、生長因子等營養(yǎng)物質(zhì),若培養(yǎng)基中的某種營養(yǎng)物質(zhì)不能被微生物利用,微生物便不能生長。根據(jù)這一特性,可將微生物接種在只缺少某種營養(yǎng)物質(zhì)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,再將所缺的營養(yǎng)物質(zhì)點植于平板上,該營養(yǎng)物質(zhì)便逐漸擴散于植點周圍。該微生物若需要此種營養(yǎng)物質(zhì),便在這種營養(yǎng)物質(zhì)擴散處生長繁殖,形成肉眼可見的菌落圈,這種測定微生物營養(yǎng)需求的方法稱為生長譜法。某興趣小組嘗試用生長譜法測定某種大腸桿菌對糖類(碳源)的需求情況,操作流程如下:Ⅰ.培養(yǎng)基的制備。該小組所用無碳培養(yǎng)基配方如下(加水定容至1L):成分NaClKH2PO4K2HPO4(NH4)2SO4MgSO4·7H2O瓊脂質(zhì)量(g)11.51.521.221同時配制質(zhì)量分?jǐn)?shù)為11%的葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖溶液各51mL。Ⅱ.將大腸桿菌懸液與溶化并冷卻至51℃的固體培養(yǎng)基混勻,倒平板。Ⅲ.將已凝固的平板背面用記號筆劃分為四個區(qū),并注明要點植的糖類名稱。Ⅳ.通過無菌操作分別加入蘸有不同糖類的無菌濾紙片,待平板吸收干燥后倒置培養(yǎng)24小時。結(jié)合所學(xué)知識回答相關(guān)的問題:(1)無碳培養(yǎng)基配方中加入(NH4)2SO4的目的是___________。對培養(yǎng)基及糖溶液通常采用的滅菌方法是___________。倒平板后用___________法進行接種。(2)該小組發(fā)現(xiàn)最終在培養(yǎng)基的四個區(qū)內(nèi)均有菌落圈產(chǎn)生,但大小不同,據(jù)此得到的初步結(jié)論是___________。(3)如果在此實驗中發(fā)現(xiàn)某一不被該大腸桿菌利用的碳源的點植區(qū)域也長出菌落圈,試分析可能的原因(寫出2條即可)______。(4)生長譜法還可用于某些營養(yǎng)缺陷型菌株(失去合成某種生長因子能力的菌株)的篩選和鑒定,例如大腸桿菌經(jīng)紫外線誘變處理后會產(chǎn)生一些營養(yǎng)缺陷型突變個體,現(xiàn)已純化并制備出某營養(yǎng)缺陷型的菌懸液,但不清楚是氨基酸缺陷型、維生素缺陷型還是氨基酸—維生素缺陷型,請簡要寫出用生長譜法進行鑒定的思路,并預(yù)期可能的結(jié)果及結(jié)論_____。11.(15分)VNN1基因(1542bp)與炎癥相關(guān)性疾病有關(guān),GFP基因(4735bp)控制綠色熒光蛋白的合成,該蛋白可在相應(yīng)波長的紫外光激發(fā)下發(fā)出綠色熒光。某研究小組進行鼠源GFP-VNNI重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其功能研究,回答下列問題:(l)為構(gòu)建重組質(zhì)粒,研究小組從數(shù)據(jù)庫查找到VNNl的DNA序列,并設(shè)計引物。上游引物:5?-AAGCTTCCGCTGCACCATGACTACTC-3?下劃線為HindⅢ酶切位點),下游引物:5?-GGATCCGCTCGAGCTACCAACTTAATGA-3?(下劃線為BamHI酶切位點),之后進行PCR擴增,PCR的原理是________。擴增后的VNNI基因要與含GFP基因的載體連接,需用________(填具體酶)切割VNNI基因和含GFP基因的載體,再用________酶處理,構(gòu)建重組質(zhì)粒。(2)GFP基因在重組質(zhì)粒中可作為________________,其作用是________。用之前相同的限制酶對GFP-VNNI重組質(zhì)粒切割后,進行電泳鑒定時得到如圖1所示的部分條帶,結(jié)果表明________。(3)IL-6為體內(nèi)重要的炎癥因子,能與相應(yīng)的受體結(jié)合,激活炎癥反應(yīng)。圖2為GFP-VNNI重組質(zhì)粒對細胞分泌IL-6的影響,由此說明________________,同時發(fā)現(xiàn)與正常組比較,空質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組IL-6的表達有輕微升高,造成這種現(xiàn)象的可能原因是________________________。
參考答案一、選擇題:(共6小題,每小題6分,共36分。每小題只有一個選項符合題目要求)1、C【解題分析】碘是合成甲狀腺激素的原料,進入人體后會逐漸被甲狀腺吸收利用,題圖的縱坐標(biāo)為甲狀腺的放射量,第一次注射后4天的曲線先上升后下降,說明甲狀腺激素合成后逐漸釋放進入血液,4天后注射無放射性甲狀腺激素,血液中甲狀腺激素含量升高,通過反饋調(diào)節(jié)使甲狀腺合成分泌甲狀腺激素的量減少,故甲狀腺內(nèi)的放射量下降最慢,維持較高水平,對應(yīng)圖中的C組曲線;若4天后注射無放射性的促甲狀腺激素,會促進甲狀腺激素的合成與分泌,所以甲狀腺內(nèi)放射量下降最快,對應(yīng)圖中的B組曲線;A組為對照組,C正確?!究键c定位】甲狀腺激素的調(diào)節(jié)。2、B【解題分析】
顫藻屬于藍細菌的一種,為原核生物,不含細胞核和復(fù)雜的細胞器,只含核糖體一種細胞器?!绢}目詳解】A、顫藻為自養(yǎng)的原核生物,含有與光合作用有關(guān)的酶和色素,能進行光合作用,A正確;B、顫藻為原核生物,不含線粒體,B錯誤;C、顫藻為原核生物,含核糖體,核糖體是細胞生物蛋白質(zhì)合成的場所,C正確;D、顫藻為原核細胞構(gòu)成的原核生物,細胞中既含有DNA又含有RNA,D正確。故選B。3、C【解題分析】
成熟的植物細胞構(gòu)成滲透系統(tǒng),可發(fā)生滲透作用。質(zhì)壁分離的原因:外因:外界溶液濃度>細胞液濃度;內(nèi)因:原生質(zhì)層相當(dāng)于一層半透膜,細胞壁的伸縮性小于原生質(zhì)?!绢}目詳解】A、大液泡中含有大量的水,當(dāng)外界溶液濃度高于細胞液濃度時,大量水外流,可出現(xiàn)明顯的質(zhì)壁分離現(xiàn)象;只有活細胞的原生質(zhì)層才具有選擇透過性,才能出現(xiàn)質(zhì)壁分離,所以實驗材料應(yīng)選擇有活性的且有大液泡的植物細胞,A正確;B、該實驗的第一次顯微觀察是裝片制作完成后,觀察活細胞的正常形態(tài),目的是與滴加蔗糖溶液后發(fā)生質(zhì)壁分離的細胞形態(tài)進行對照,所以應(yīng)在顯微鏡下看到正常細胞后再滴加高濃度蔗糖溶液,B正確;C、理論上具有大液泡的成熟植物活細胞在一定濃度的蔗糖溶液中都可以發(fā)生質(zhì)壁分離,具紫色液泡的洋蔥表皮細胞因液泡為紫色,在實驗過程中更容易觀察到液泡體積的變化。并非只有液泡有顏色的植物細胞才能發(fā)生質(zhì)壁分離,C錯誤;D、溶質(zhì)分子進出細胞的方式有自由擴散、主動運輸?shù)?,不能通過植物細胞的質(zhì)壁分離及復(fù)原實驗來證實,D正確。故選C。4、C【解題分析】本題考查的是細胞癌變的有關(guān)內(nèi)容?;蛲蛔儗?dǎo)致的體細胞癌變不可遺傳,A錯;石棉和黃曲霉素均是化學(xué)致癌因子,B錯;人體的免疫系統(tǒng)對癌變細胞具有清除作用,C正確;癌變細胞內(nèi)酶活性增強導(dǎo)致細胞代謝增強,D錯。故本題選C。5、D【解題分析】
此題考查的知識點是三道防線的組成。解答時可以從人體的三道防線的組成、功能方面來切入?!绢}目詳解】A、免疫細胞集中分布于免疫器官中,因此效應(yīng)細胞毒性T細胞不在血液中循環(huán)流動,A錯誤;B、油脂腺分泌的油脂對某些細菌具有抑制作用,不能看成是非特異性的表現(xiàn),B錯誤;C、注射狂犬疫苗,目的是刺激機體抗體和記憶細胞的產(chǎn)生,C錯誤;D、抗原的化學(xué)本質(zhì)并非都是蛋白質(zhì),因此并不是所有的抗原都會被巨噬細胞降解成肽,D正確。故選D。6、C【解題分析】
影響酶促反應(yīng)速率的因素有:溫度、pH、酶濃度、底物濃度等。甲圖中,反應(yīng)速率隨反應(yīng)物濃度增加而增加,當(dāng)反應(yīng)速率達到一定值時,此時再增加反應(yīng)物濃度,反應(yīng)速率不再增加,是因為起催化作用的酶已經(jīng)飽和。乙圖中,隨著反應(yīng)進行,濃度不斷增加的是生成物即B,濃度不斷減少的是反應(yīng)物即A,T1時刻反應(yīng)開始,T2時刻反應(yīng)速度變緩,A反應(yīng)物的含量趨于0,直到最后生成物和反應(yīng)物的濃度不再變化,此時限制酶促反應(yīng)的因素為底物濃度?!绢}目詳解】A、甲圖中反應(yīng)速率達到最大后,此時再增加反應(yīng)物濃度,反應(yīng)速率不再增加,限制酶促反應(yīng)速率的主要因素是酶的數(shù)量,A正確;B、若乙圖中的物質(zhì)A是淀粉,則B可以是麥芽糖,該圖表示的反應(yīng)為A(淀粉)B(麥芽糖),該酶可以是唾液淀粉酶,B正確;C、乙圖中T2時刻后限制酶促反應(yīng)速率的主要因素是底物濃度,C錯誤;D、甲、乙兩圖所示的實驗探究均在最適溫度和最適pH條件下完成,溫度和pH都屬于無關(guān)變量,D正確。故選C?!绢}目點撥】本題以曲線圖為載體,考查了影響酶促反應(yīng)因素的知識,要求考生具有一定的曲線分析能力和理解判斷能力。二、綜合題:本大題共4小題7、體溫調(diào)節(jié)甲狀腺滲透壓感受器抗原識別效應(yīng)T細胞體液傳染?、倏刂苽魅驹矗虎谇袛鄠鞑ネ緩剑槐Wo易感人群不能。①首先有它的生態(tài)價值。②其次是它的科學(xué)價值。③另外還有經(jīng)濟價值。【解題分析】
該題屬于信息題,首先需要結(jié)合題干給出的信息推測得知新型肺炎冠狀病毒的遺傳物質(zhì)為RNA,且單股正鏈可以直接作為模板進行翻譯,因此新型肺炎冠狀病毒屬于RNA病毒,且能直接進行復(fù)制和翻譯。人體的體溫調(diào)節(jié)中樞位于下丘腦,下丘腦可以通過神經(jīng)調(diào)節(jié)和體液調(diào)節(jié)進而促進甲狀腺和腎上腺分泌相關(guān)激素?!绢}目詳解】(1)由題干信息可知,新型肺炎冠狀病毒的遺傳物質(zhì)為RNA,可以直接進行翻譯,因此其在遺傳信息的傳遞過程中可以發(fā)生自我復(fù)制和翻譯,不需要逆轉(zhuǎn)錄為DNA,可以用中心法則總結(jié)RNA的自我復(fù)制和翻譯過程;(2)發(fā)熱癥狀的產(chǎn)生與體溫調(diào)節(jié)有關(guān),下丘腦是人體的體溫調(diào)節(jié)中樞;其可以支配甲狀腺和腎上腺分泌甲狀腺激素和腎上腺素來調(diào)節(jié)體溫;(3)血漿滲透壓降低,會刺激下丘腦的滲透壓感受器,引起機體減少分泌抗利尿激素,從而使尿量增多;(4)疫苗的本質(zhì)是滅活的抗原;由于病毒選擇性的入侵肺部細胞,證明其對細胞具有識別功能;當(dāng)它進入宿主細胞以后,主要依靠細胞免疫產(chǎn)生的效應(yīng)T細胞對宿主細胞進行識別,并使宿主細胞裂解死亡,使得抗原暴露出來;暴露出來的抗原最終依然需要體液免疫產(chǎn)生的抗體對其進行特異性結(jié)合,從而消滅抗原;(5)遺傳病的定義要求患者的遺傳物質(zhì)被改變從而造成了疾病,但新冠肺炎病毒并未改變?nèi)梭w的遺傳物質(zhì),只是對人體細胞造成了破壞,同時具有高度的散播和傳染能量,所以屬于傳染病;預(yù)防傳染病一般從三個方面進行:①控制傳染源;②切斷傳播途徑;保護易感人群;(6)雖然蝙蝠攜帶有較多的病原體,但蝙蝠作為生態(tài)系統(tǒng)的食物鏈的一環(huán),具有很重要的生態(tài)價值,并且通過蝙蝠研究超聲波發(fā)明了雷達等,表明其具有較高的科研價值,還有其它的經(jīng)濟價值,因此不能將其大量殺害?!绢}目點撥】該題重點考察了新冠病毒的特征,以信息題的形式給出了該病毒的結(jié)構(gòu)和遺傳特征,需要學(xué)生結(jié)合所學(xué)病毒的遺傳信息傳遞過程、免疫、生態(tài)價值等進行逐步分析,考察了學(xué)生獲取信息結(jié)合知識點分析問題的能力。8、獲得單個菌落稀釋涂布平板培養(yǎng)防止水分的蒸發(fā)和冷凝水滴入培養(yǎng)基A6基因突變具有多向性酶既能與反應(yīng)物接觸,又容易與產(chǎn)物分離,且能反復(fù)利用多酶系統(tǒng)(一系列、多種酶)大【解題分析】
據(jù)圖分析:圖1所示的b過程為菌落的稀釋,培養(yǎng)基中含有多種酶活力不同的突變芽孢桿菌。圖2中,凝固1mL10%脫脂奶粉的酶量最少的是第6組?!绢}目詳解】(1)圖1所示的b過程為菌落的稀釋,目的是為獲得單個菌落。由圖示接種培養(yǎng)過程可判斷,該接種用的方法是稀釋涂布平板培養(yǎng)。培養(yǎng)過程需要將平板倒置目的是防止水分的蒸發(fā)和冷凝水滴入培養(yǎng)基。(2)據(jù)圖2所示,凝固1mL10%脫脂奶粉的酶量最少的是A6組,故酶催化能力最強的是A6組。由于基因突變具有不定向性(多向性),故各組酶催化能力存在差異。(3)固定化酶技術(shù)的優(yōu)點是:酶既能與反應(yīng)物接觸,又容易與產(chǎn)物分離,且能反復(fù)利用;與固定化酶技術(shù)相比,固定化細胞的特點是成本更低,操作更容易,可催化一系列的化學(xué)反應(yīng)即一系列、多種酶(多酶系統(tǒng))。(4)電泳利用了待分離樣品中各種分子帶電性質(zhì)的差異以及分子本身的大小、形狀的不同,使帶電分子產(chǎn)生不同的遷移速度,從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離。使用凝膠色譜法分離酶,最先分離出來的是分子量大的酶分子?!绢}目點撥】本題結(jié)合圖示主要考查微生物的培養(yǎng)、固定化酶技術(shù)等相關(guān)知識,意在強化相關(guān)知識的識記、理解與運用。9、從基因文庫中獲取人工合成目的基因無表達所需的啟動子目的基因無復(fù)制原點(目的基因不能在受體細胞中穩(wěn)定存在)便于目的蛋白的分離和純化甲醇酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質(zhì)粒反向連接【解題分析】
基因工程是狹義的遺傳工程,基因工程的基本原理是讓人們感興趣的基因(即目的基因)在宿主細胞中穩(wěn)定高效地表達。為了實現(xiàn)基因工程的目標(biāo),通常要有多種工具酶、目的基因、載體和宿主細胞等基本要素,并按照一定的程序進行操作,它包括目的基因的獲得、重組DNA的形成,重組DNA導(dǎo)入受體細胞也稱(宿主)細胞、篩選含有目的基因的受體細胞和目的基因的表達等幾個方面?;虮磉_載體的構(gòu)建(即目的基因與運載體結(jié)合)是實施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。其構(gòu)建目的是使目的基因能在受體細胞中穩(wěn)定存在,并且可以遺傳給下一代,同時,使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。【題目詳解】(1)獲取目的基因是實施基因工程的第一步,獲取目的基因的方法有從基因文庫中獲?。康幕蛐蛄形粗?、人工合成(目的基因序列已知)。(2)單獨的目的基因容易丟失,且目的基因的表達需要啟動子和終止子,目的基因的復(fù)制需要復(fù)制原點,因此要使膠原蛋白基因在甲醇薛母菌中表達,需要先構(gòu)建基因表達載體而不是直接將基因?qū)胧荏w細胞。(3)甲醇酵母菌可高效表達外源蛋白質(zhì)并分泌到細胞外,但自身蛋白質(zhì)分泌到培養(yǎng)基中的很少,這樣分泌到細胞外的蛋白主要是我們需要的目的蛋白,這一特點的優(yōu)點在于便于目的蛋白的分離和純化。甲醇酵母菌分泌的膠原蛋白的結(jié)構(gòu)與人的幾乎完全相同,從細胞結(jié)構(gòu)的角度分析,其原因可能是甲醇酵母菌有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體,可以對表達出的蛋白質(zhì)進行進一步的加工、運輸。(4)用一種酶切質(zhì)粒和目的基因,可能會引起質(zhì)?;蚰康幕蜃陨憝h(huán)化。在構(gòu)建基因表達載體時,用兩種不同的限制酶分別切割目的基因的兩端和質(zhì)粒,使目的基因和質(zhì)粒獲得不同的黏性末端,其目的是防止目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化、防止目的基因與質(zhì)粒反向連接?!绢}目點撥】本題重點在基因工程的步驟及原理,須在理解的基礎(chǔ)上加強識記。10、提供氮源高壓蒸汽滅菌稀釋涂布平板大腸杄菌可以利用四種糖類(葡萄糖、麥芽糖、蔗糖、乳糖)作為碳源,但利用的程度不同有雜菌混入;該大腸桿菌發(fā)生了突變;該大腸桿菌可能會利用瓊脂多糖將菌懸液與溶化并冷卻至51℃的不含氨基酸和維生素的基礎(chǔ)培養(yǎng)基混勻,倒平板;將培養(yǎng)基劃分成兩個相等的區(qū)域A、B;A區(qū)點植氨基酸、B區(qū)點植維生素;在適宜溫度下培養(yǎng),觀察菌落產(chǎn)生的區(qū)域。若菌落只在A區(qū)產(chǎn)生,則為氨基酸缺陷型;若菌落只在B區(qū)產(chǎn)生,則為維生素缺陷型;若菌落產(chǎn)生在AB交界處,則為氨基酸—維生素缺陷型【解題分析】
培養(yǎng)基一般含有水、碳源、氮源、無機鹽等。常用的接種方法:平板劃線法和稀釋涂布平板法。常用的滅菌方法:干熱滅菌法、灼燒滅菌法、高壓蒸汽滅菌法?!绢}目詳解】(1)培養(yǎng)基中的(NH4)2SO4可以提供氮源。常用高壓蒸汽滅菌法對培養(yǎng)基及糖溶液進行滅菌。倒平板后常用稀釋涂布平板法進行接種。(2)培養(yǎng)基的四個區(qū)中含有不同的糖類,若在培養(yǎng)基的四個區(qū)內(nèi)均有菌落圈產(chǎn)生,說明大腸桿菌可以利用四種糖類,但大小不同,說明大腸桿菌對四種糖類的利用程度不同。(3)如果在此實驗中發(fā)現(xiàn)某一不被該大腸桿菌利用的碳源的點植區(qū)域也長出菌落圈,可能是有雜菌混入或該大腸桿菌發(fā)生了突變。(4)要通過生長譜法探究大腸桿菌屬于氨基酸缺陷型、維生素缺陷型還是氨基酸—維生素缺陷型,可以將菌懸液與溶化并冷卻至51℃的不含氨基酸和維生素的基礎(chǔ)培養(yǎng)基混勻,倒平板;將培養(yǎng)基劃分成兩個相等的區(qū)域A、B;A區(qū)點植氨基酸、B區(qū)點植維生素;在適宜溫度下培養(yǎng),觀察菌落產(chǎn)生的區(qū)域。若菌落只在A區(qū)產(chǎn)生,則為氨基酸缺陷型;若菌落只在B區(qū)產(chǎn)生,則為維生素缺陷型;若菌落產(chǎn)生在A
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