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一種磁珠法核酸提取儀的制作方法背景和意義近年來(lái),隨著新冠疫情的暴發(fā),核酸檢測(cè)成為了防控疫情的重要手段。而核酸提取是核酸檢測(cè)的第一步,也是最為關(guān)鍵的一步。目前,常用的核酸提取方法有玻璃纖維濾板法、硅膠膜法、流式細(xì)胞術(shù)法等。這些方法雖然都有一定的提取效率,但存在操作繁瑣、成本高、易受污染等問(wèn)題。因此,磁珠法核酸提取成為了備受青睞的一種方法,具有操作簡(jiǎn)便、成本低、高效快捷等優(yōu)點(diǎn)。然而,市面上的磁珠法核酸提取儀價(jià)格昂貴,很多實(shí)驗(yàn)室或者個(gè)人并不具備購(gòu)置條件,因此自主制作一臺(tái)低成本的磁珠法核酸提取儀具有重要的意義。原理磁珠法的流程是:將核酸樣本在裂解緩沖液中完全裂解,加入磁珠和混濁液,離心,將磁珠沉淀下來(lái),去除上清液,再加入洗滌緩沖液,離心,去除上清液,最后用加熱去離子水溶解磁珠中的核酸。磁珠法有很多優(yōu)點(diǎn),比如操作簡(jiǎn)單,快速高效,且可適用于多種樣本類(lèi)型。其原理是利用磁珠表面特定的親和性固定某些生物分子,如蛋白質(zhì)、核酸等。磁珠表面修飾上相應(yīng)的配體,與待提取物質(zhì)分子發(fā)生相互作用,然后通過(guò)磁力的作用使磁珠快速定位到反磁性材料容器的一側(cè),可以方便地分離去除上清液,最后用合適的洗滌液/緩沖液洗滌去磁性粒子殘留,最終獲得純度較高的待提取物。儀器和材料制作一臺(tái)磁珠法核酸提取儀,需要以下的儀器和材料:電源適配器直流電機(jī)針孔球閥反磁性材料容器夾子磁珠和試劑盒制作步驟下面是制作磁珠法核酸提取儀的詳細(xì)步驟:1.制作反磁性材料容器反磁性材料容器是磁珠法核酸提取儀的核心部件。其制作方法如下:1.1在一個(gè)小塑料管子的旁邊搭鐵絲,并將鐵絲插在一個(gè)扁平的木塊中間。然后將鐵絲連上電源。1.2在鐵絲上融化一些塑料,用于固定制作容器時(shí)的膠管。1.3將4根膠管插入到鐵絲上,注意排列成平面的四個(gè)角上。1.4用策或其他工具,把潛入塑料管子里面的膠管切掉一小段。留出約2mm的膠管露在外面。1.5將大約為9cm的塑料管外面涂上切割掉的膠管處露出的膠管部分,做好壓緊處理。1.6使用鉤子結(jié)現(xiàn)成的支架,然后用木制夾子夾起全部的鐵絲。1.7涂上膠水,再把反磁性材料容器的支架插入進(jìn)去。2.制作磁力轉(zhuǎn)子磁力轉(zhuǎn)子是用于旋轉(zhuǎn)反磁性材料容器以實(shí)現(xiàn)核酸提取的旋轉(zhuǎn)部分,其制作方法如下:2.1.使用直徑為1cm的PVC管做管芯。2.2使用清潔紙巾擦拭干凈帶磙芯的PVC管。2.3把清潔干凈的PVC管用膠水固定在直流電機(jī)上。2.4給繞在墻上的鐵絲下線,將鐵絲扭成彎形,然后用黃油或者其他的黏性物質(zhì)將彎形鐵絲的末端粘在PVC管上。2.5在PVC管上固定一個(gè)小針孔。2.6使用PVC管和直流馬達(dá)制作的磁力轉(zhuǎn)子部分就完成了。3.安裝磁力轉(zhuǎn)子3.1使用夾子將磁力轉(zhuǎn)子安裝在反磁性材料容器的下側(cè)。確保磁力轉(zhuǎn)子不會(huì)碰到或拉扯到該容器。4.安裝球閥將球閥安裝在磁珠法核酸提取儀的下方,用以控制洗滌液或緩沖液的進(jìn)出。5.安裝電源適配器將電源適配器安裝在磁珠法核酸提取儀的底部,以便提供必要的電源。6.配置和添加試劑盒將磁珠加入到核酸樣品中,待反應(yīng)完成后離心。將離心后得到的上清液吸出,然后反復(fù)使用洗滌緩沖液進(jìn)行洗滌,將所有洗滌液吸出。最后使用合適的加熱去離子水將磁珠中的核酸溶解,即可得到純凈的核酸提取物。結(jié)論經(jīng)過(guò)以上步驟,我們就可以制作出一臺(tái)磁珠法核酸提取儀。這種方法不僅成本低,
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