小柴胡湯對非酒精性脂肪肝大鼠肝功能及血脂的影響

小柴胡湯對非酒精性脂肪肝大鼠肝功能及血脂的影響

肝烹飪是指由各種原因引起的肝豆積累過多的病變。脂肪性肝病正嚴重威脅國人的健康,成為僅次于病毒性肝炎的第2大肝病。其特點是肝細胞發(fā)生顯著脂肪變性,可導(dǎo)致肝細胞壞死,進一步演變?yōu)楦卫w維化、肝硬化。目前,現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對脂肪肝的治療缺乏有效的手段,而且降脂藥物有肝臟損傷的副作用。祖國醫(yī)學(xué)對肝臟的疾病有獨特的認識,認為脂肪肝多由飲食、情志所傷,日久形成“瘀、痰、脂、食、氣”五種病理改變,治療上宜給予消導(dǎo)行滯,疏理解郁治療。小柴胡湯方出自《傷寒論》,具有和樞機、解郁結(jié)、行氣機、暢三焦、化痰濁之功效,現(xiàn)代藥理研究表明其核心配伍藥柴胡-黃芩有明確的保肝作用。因此,本研究擬探討小柴胡湯治療實驗大鼠非酒精性脂肪肝的效果及其機制。1材料和方法1.1實驗動物1.2化學(xué)試劑及試劑脫氧膽酸鈉(中國醫(yī)藥(集團)上海化學(xué)制劑公司進口分裝);甘油三酯(TG)、膽固醇(TC)檢測試劑盒(上?？菩郎锛夹g(shù)研究所生產(chǎn));丙硫氧嘧啶購自國藥集團化學(xué)試劑有限公司;TC購自西安沃爾森生物技術(shù)有限公司,所有中藥材均購自西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院中藥房。1.3方法1.3.1甘草、生姜、甘草小柴胡湯的主要成分:柴胡240g,法半夏120g,黃芩120g,黨參120g,大棗120g,甘草80g,生姜64g。按照各藥在方中的比例準確稱取,混勻,加入10倍量水,浸泡6h后加熱煎煮1h,濾出藥液,再加入8倍量水,煎煮1h,過濾,將兩次煎煮所得藥液合并,水浴濃縮為含生藥1.50g/mL的液體,滅菌4℃冰箱儲存?zhèn)溆?用時微溫。1.3.2小柴胡湯灌胃脂肪肝模型大鼠的造模及給藥:實驗動物適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后,隨機分為正常對照組、脂肪肝模型組、小柴胡湯治療組和易善復(fù)治療組共4組,每組各15只。正常對照組喂食全價營養(yǎng)顆粒飼料喂養(yǎng),飲自來水;模型組和各治療組均喂食高脂飼料(膽固醇2%,膽酸鈉0.5%,丙硫氧嘧啶0.2%,蔗糖5%,豬油10%,基礎(chǔ)飼料82.3%),共8周。實驗第2天起,治療組大鼠分別給予小柴胡湯1g/(kg·d)、易善復(fù)64mg/(kg·d)灌胃;對照組和模型組給予相同體積的生理鹽水。1.3.3血脂指標的測定(1)實驗結(jié)束后停止給藥,普通喂養(yǎng)適應(yīng)l周后,禁食12h處死大鼠,稱取大鼠體重。(2)血清指標測定:心臟直接采集血樣,全自動生化分析儀測定血清TG、TC、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、血清谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)。(3)肝臟濕重及肝組織勻漿指標測定:處死大鼠后迅速完整分離肝臟,測定肝臟濕重,然后獲取肝臟右葉剪取500mg,加入9倍于肝組織體積預(yù)冷的異丙醇中冰浴勻漿,制成10%的勻漿,4℃提取24h,3000r/min離心10min,吸取上清液,全自動生化分析儀測定測定TG、TC。1.4數(shù)據(jù)處理與分析數(shù)據(jù)分析采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理。所有數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差表示,組間比較采用單因素方差分析,并行正態(tài)性與方差齊性的檢驗,兩兩比較采用SNK-q檢驗,檢驗水準取0.05。2結(jié)果2.1體重和肝臟濕重的比較與正常對照組比較,模型組、小柴胡湯組及易善復(fù)治療組大鼠的體重及肝濕重顯著增加(P<0.05);與模型組比較,小柴胡湯治療組和易善復(fù)組的大鼠體重及肝臟濕重下降明顯(P<0.05);小柴胡湯治療組與易善復(fù)組之間的大鼠體重及肝臟濕重?zé)o顯著差別(P>0.05,表1)。2.2各組大鼠血清alt、ast、tc及tg比較與正常對照組比較,模型組、小柴胡湯治療組及易善復(fù)組大鼠血清ALT、AST、TC及TG水平均顯著升高(P<0.05);同模型組相比,易善復(fù)和小柴胡湯治療組大鼠血清ALT、AST、TC及TG水平均顯著降低(P<0.05);而小柴胡湯治療組與易善復(fù)治療組之間大鼠血清ALT、AST、TC及TG水平未見明顯差異(P>0.05,表2)。2.3各組大鼠肝組織中tc和tg水平比較與正常對照組比較,模型組、小柴胡湯治療組及易善復(fù)組大鼠肝組織中TC和TG水平均顯著升高(P<0.05);同模型組相比,易善復(fù)和小柴胡湯治療組大鼠肝組織中TC和TG水平均顯著降低(P<0.05);小柴胡湯治療組與易善復(fù)治療組之間大鼠肝組織中TC和TG水平未見明顯差異(P>0.05,表3)。3小柴胡湯治療非酒精性肝損傷的作用機制模型模型檢測據(jù)《傷寒論》記載,小柴胡湯方的證治范圍非常廣泛,涉及太陽、少陽、陽明、少陰、厥陰、差后勞復(fù)、嘔吐噦下利病、婦人產(chǎn)后病、婦人雜病等十多個病癥?，F(xiàn)代中醫(yī)在臨床上將小柴胡湯廣泛用于呼吸系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、婦科、兒科、五官科、傳染性疾病等多種疾病的治療中。自上世紀90年代起,小柴胡湯在肝臟方面的特殊作用得到國內(nèi)外學(xué)者的認可和重視。大量藥理研究也表明,小柴胡湯有明顯的抗炎、調(diào)節(jié)機體免疫平衡、改善肝功能、抗肝纖維化、促進肝組織再生等作用。脂肪肝不是一種獨立的疾病,是由多種疾病和病因引起的肝臟脂肪變性,最常見的病因有肥胖、酒精中毒,其次為營養(yǎng)失調(diào)、糖尿病、藥物中毒、妊娠、遺傳等。其中飲食所致的非酒精性脂肪肝是目前臨床上常見的疾病,而且這種肝臟的脂肪變性難以在短期內(nèi)逆轉(zhuǎn),甚至長期進展可以發(fā)展為脂肪型肝炎及肝硬化,因此對于非酒精性脂肪肝的治療有很大的需求,但目前方法有限。本研究采用的脂肪肝造模方法,是以高膽固醇、高脂肪飼料喂養(yǎng)大鼠,具有人為干擾因素少、飲食結(jié)構(gòu)接近人類日常的飲食的優(yōu)點,因而研究結(jié)果更具有說服力。本研究結(jié)果顯示,造模8周后,模型組大鼠的體重增加、肝臟增大,血清及肝組織TC、TG濃度升高,同時存在血清ALT、AST明顯增高,提示脂肪肝炎模型成功。小柴胡湯治療后大鼠的體重及肝臟濕重顯著低于模型組大鼠,血清和肝組織TC、TG含量以及血清ALT、AST活性也低于模型組大鼠,療效與臨