第二章樣品的采集與預(yù)處理

第二章樣品的采集與預(yù)處理第1頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

一、樣品的采集

采樣——從大量的分析對(duì)象中抽取有代表性的一部分作為分析材料（分析樣品），這項(xiàng)工作叫采樣。第一節(jié)樣品的采集

第2頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月正確采樣的原則（1）采集的樣品要均勻、有代表性；能反映全部被檢食品的組成、質(zhì)量和衛(wèi)生狀況。（2）采樣方法要與分析目的一致。（3）采樣及樣品制備過(guò)程中要設(shè)法保持原有的理化指標(biāo)，避免預(yù)測(cè)組分發(fā)生化學(xué)變化或丟失。（如水分、氣味、揮發(fā)性酸等）。（4）防止帶入雜質(zhì)或污染。（5）采樣方法要盡量簡(jiǎn)單，處理裝置尺寸適當(dāng)。第3頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月檢樣由整批食物的各個(gè)部分采取的少量樣品，稱為檢樣。原始樣品把許多份檢樣綜合在一起稱為原始樣品。平均樣品原始樣品經(jīng)過(guò)處理再抽取其中一部分作檢驗(yàn)用者稱為平均樣品。應(yīng)一式三份,分別供檢驗(yàn)、復(fù)驗(yàn)及備查使用。每份樣品數(shù)量一般不少于0.5公斤。二、樣品的分類第4頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、采樣的一般方法第一種采集方法是隨機(jī)抽樣。均衡地、不加選擇地從全部產(chǎn)品的各個(gè)部分取樣。但隨機(jī)≠隨意。隨機(jī)——要保證所有物料各個(gè)部分被抽到的可能性均等。第5頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第二種采集方法是代表性抽樣：可按不同生產(chǎn)日期也可在流水線上按一定的時(shí)間間隔抽樣按分析的目的取樣第6頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

如：粘稠不好混勻的液體，從包裝內(nèi)上、中、下分別取樣。蔬菜的營(yíng)養(yǎng)成分（全菜）要從莖、枝、葉分別取，粉碎后，混勻。測(cè)魚頭部分的成分就只取魚頭?？傊鶕?jù)測(cè)定的目的而定采樣方法。第7頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月樣品的制備樣品的制備——指對(duì)樣品的粉碎、混勻、縮分等過(guò)程。四分法：第8頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月樣品的制備方法因產(chǎn)品類型不同而異液體、漿體或懸浮液體搖勻，充分?jǐn)嚢?。互不相容的液體（如油與水的混合物）先分離，再分別取樣。固體樣品切細(xì)、粉碎、搗碎、研磨等。罐頭除核、去骨、去調(diào)味品、搗碎。第9頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月樣品保存采取的樣品應(yīng)在短時(shí)間內(nèi)分析，否則應(yīng)妥善保管。放在密閉、潔凈容器內(nèi)，置于陰暗處保存。易腐敗變質(zhì)的放在0—5℃冰箱內(nèi)，保存時(shí)間也不能太長(zhǎng)。易分解的要避光保存。特殊情況下，可加入不影響分析結(jié)果的防腐劑或冷凍干燥保存。第10頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第二節(jié)樣品的預(yù)處理目的：1、測(cè)定前排除干擾組分；2、對(duì)樣品進(jìn)行濃縮。方法：主要有8種。原則：①消除干擾因素；②完整保留被測(cè)組分；③使被測(cè)組分濃縮；以便獲得可靠的分析結(jié)果。第11頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月一、粉碎法由于顆粒尺寸大，分析成分被包埋在顆粒內(nèi)部，沒有暴露出來(lái)，從而使得分析結(jié)果偏差。干樣品：谷物、飼料、油粕粉等；研缽、粉碎機(jī)、球磨機(jī)。濕樣品：禽肉、海產(chǎn)品、面糊等；絞肉機(jī)、組織磨碎機(jī)等。第12頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月二、滅酶法對(duì)于樣品含有成分含量已經(jīng)確定的，沒有必要滅酶，如果檢測(cè)糖、脂肪、蛋白質(zhì)等成分時(shí)，需要滅酶。常用滅酶手段是加熱。第13頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月三、有機(jī)物破壞法

測(cè)定食品中無(wú)機(jī)成分的含量，需要在測(cè)定前破壞有機(jī)結(jié)合體，如蛋白質(zhì)等。操作方法分為干法和濕法兩大類。1.干法灰化原理：將樣品至于電爐上加熱，使其中的有機(jī)物脫水、炭化、分解、氧化，在置高溫爐中灼燒灰化，直至殘灰為白色或灰色為止，所得殘?jiān)礊闊o(wú)機(jī)成分。第14頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

為了縮短灰化時(shí)間，促進(jìn)灰化完全，防止有些元素的揮發(fā)損失，常常向樣品中加入硝酸、過(guò)氧化氫等灰化助劑，不增加殘灰質(zhì)量，可起到加速灰化的作用。有時(shí)可添加氧化鎂、碳酸鹽、硝酸鹽等助劑，可是碳粒不被覆蓋，但應(yīng)做空白試驗(yàn)。第15頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月干法灰化方法特點(diǎn)①此法基本不加或加入很少的試劑，故空白值低。②因灰分體積很小，因而可處理較多的樣品，可富集被測(cè)組分。③有機(jī)物分解徹底，操作簡(jiǎn)單。優(yōu)點(diǎn)①所需時(shí)間長(zhǎng)。②因溫度高易造成易揮發(fā)元素的損失。③坩堝對(duì)被測(cè)組分有吸留作用，使測(cè)定結(jié)果和回收率降低。缺點(diǎn)第16頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2.濕法消化原理：樣品中加入強(qiáng)氧化劑，并加熱消煮，使樣品中的有機(jī)物質(zhì)完全分解、氧化，呈氣態(tài)逸出，待測(cè)組分轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)物狀態(tài)存在于消化液中。常用的強(qiáng)氧化劑有濃硝酸、濃硫酸、高氯酸、高錳酸鉀、過(guò)氧化氫等。第17頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月濕法消化的優(yōu)缺點(diǎn)①產(chǎn)生有害氣體，需在通風(fēng)柜中進(jìn)行。②初期易產(chǎn)生大量泡沫外溢。③試劑用量大，空白值偏高。優(yōu)點(diǎn)①有機(jī)物分解速度快，所需時(shí)間短。②由于加熱溫度低，可減少金屬揮發(fā)逸散的損失。缺點(diǎn)第18頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月3.紫外光分解法高壓汞燈提供紫外光。85±5℃，加雙氧水。4.微波高壓消煮器。食品樣品最多只要10分鐘（2.5MPa);第19頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月四、蒸餾法利用液體混合物中各種組分揮發(fā)度的不同而將其分離。常壓蒸餾減壓蒸餾水蒸氣蒸餾掃集共蒸餾共沸蒸餾萃取精餾精餾第20頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第21頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第22頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月第23頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月五、溶劑抽提法浸提法溶劑萃?。↙IE）超臨界萃?。⊿CFE）（SFE）固相萃?。⊿PE）微波萃?。∕AE）超聲波萃?。║E）利用混合物中各種組分在某種溶劑中溶解度的不同而是混合物分離的方法。第24頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（一）浸提法（從固體中萃取有效成分）用適當(dāng)?shù)娜軇⒐腆w樣品中某種待測(cè)成分浸提出來(lái)，又稱“液——固萃取法”。1.提取劑的選擇由相似相溶原理選擇第25頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月選溶劑沸點(diǎn)在45～80℃之間的，低，易揮發(fā)；高，不易提純，濃縮，溶劑與提取物不好分離。選穩(wěn)定性好的溶劑。

2.提取方法：1）振蕩浸漬法2）搗碎法3）索氏提取法第26頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

（二）溶劑萃取法（溶劑分層、液液萃取、抽提）1.原理:用一種溶劑把樣品溶液中的一種組分萃取出來(lái)，這種組分在原溶液中的溶解度小于在新溶劑中的溶解度，即分配系數(shù)不同。用于原溶液中各組分沸點(diǎn)非常相近或形成了共沸物，無(wú)法用一般蒸餾法分離的物質(zhì)。新溶劑——萃取劑（新溶劑+被溶解組分）——萃取相比重（原溶液+被溶解組分）——萃余相不同第27頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2.方法：

工業(yè)上用萃取塔

實(shí)驗(yàn)室用分液漏斗3、關(guān)于萃取劑的選擇：（1）萃取劑與原溶劑不互溶且比重不同。（2）萃取劑與被測(cè)組分的溶解度要大于組分在原溶劑中的溶解度。對(duì)其它組分溶解度很小。（3）萃取相經(jīng)蒸餾可使萃取劑與被測(cè)組分分開，有時(shí)萃取相整體就是產(chǎn)品。第28頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（三）超臨界萃?。⊿FE）

利用超臨界流體SCF作為溶劑，用來(lái)有選擇性地溶解液體或固體混合物中的溶質(zhì)。對(duì)溶質(zhì)的溶解度大大增加。

超臨界流體——流體的溫度、壓力處于臨界狀態(tài)以上。常用CO2作為超臨界流體（臨界溫度為31.05℃，臨界壓力7.37Mpa）,不可燃、無(wú)毒、廉價(jià)易得、化學(xué)穩(wěn)定性好。第29頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月溫度壓力固體液體氣體流體CTAB第30頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月六、色層分離法又稱色譜分離、色層分析、層析、層離法。色層分析——使多種組分混合物在不同的載體上進(jìn)行分離。第31頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1906年，俄國(guó)植物學(xué)家茨威特分離植物葉綠體中色素而得名，玻璃管中裝CaCO3,石油醚溶解植物葉綠體倒入管內(nèi)，再用石油醚做淋洗劑，結(jié)果，柱子中被分成幾個(gè)不同顏色的譜帶。第32頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月兩相物質(zhì)：固定相流動(dòng)相樣品要制備成液體或氣體。按固定相材料及使用形式分類柱色譜——固定相裝在色譜柱中紙色譜——層析濾紙為支持劑，濾紙上結(jié)合水為固定相。薄層色譜（TLC）——將固定相粉末制成薄層。氣相色譜（GC）——流動(dòng)相為氣體。液相色譜（HPLC）——流動(dòng)相為液體。第33頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月按不同的分離原理分：吸附層析分配層析離子交換層析凝膠層析（一）吸附色譜——利用吸附劑對(duì)不同組分的物理吸附性能的差異進(jìn)行分離。吸附力相差越大分離效果越好。固定相——固體吸附劑流動(dòng)相——?dú)怏w或液體第34頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月（二）分配色譜

利用不同組分在兩相中的不同分配系數(shù)來(lái)進(jìn)行分離。（溶解度的不同）固定相——固體支持劑（擔(dān)體）+固定液流動(dòng)相——?dú)怏w或液體（與固定相不相溶）紙層析：紙是支持劑，結(jié)合水為固定相，溶劑作為流動(dòng)相。第35頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月

（三）離子交換色譜法——利用各組分與離子交換樹脂的親和力的不同來(lái)分離。陽(yáng)離子交換：R—H+M+X-R—M+HX陰離子交換：R—OH+M+X-R—X+MOH第36頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月七、化學(xué)分離法（一）磺化法和皂化法用來(lái)除去樣品中脂肪或處理油脂中其它成分，使本來(lái)憎水性油脂變成親水性化合物，從樣品中分離出去。第37頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月1.硫酸磺化法（磺化法）用濃硫酸處理樣品，引進(jìn)典型的極性官能團(tuán)SO3使脂肪、色素、蠟質(zhì)等干擾物質(zhì)變成極性較大，能溶于水和酸的化合物，與那些溶于有機(jī)溶劑的待測(cè)成分分開。主要用于有機(jī)氯農(nóng)藥殘留物的測(cè)定。第38頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月2.皂化法原理:酯+堿酸或脂肪酸鹽+醇（1）用于白酒中總酯的測(cè)定，用過(guò)量的NaOH將酯皂化掉，過(guò)量的堿再用酸滴定，最后由用堿量來(lái)計(jì)算總酯。（2）用于植物油的皂化價(jià)的測(cè)定。（皂化價(jià)高示含游離脂肪酸量大。常用堿為NaOH或KOH，NaOH直接用水配制，而KOH易溶于乙醇溶液。第39頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月(二）沉淀分離法利用沉淀反應(yīng)進(jìn)行分離。在試樣中加入適當(dāng)?shù)某恋韯?，使被測(cè)組分沉淀下來(lái)或?qū)⒏蓴_組分沉淀下來(lái)，再經(jīng)過(guò)濾或離心把沉淀和母液分開。常用的沉淀劑：堿性硫酸銅、堿性醋酸鉛等。第40頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月例如，測(cè)冷飲中糖精鈉含量時(shí)，，加入堿性硫酸銅，將蛋白質(zhì)及其它干擾物、雜質(zhì)沉淀出來(lái)，而糖精鈉留在試液中，取濾液進(jìn)行分析。（三）掩蔽法向樣品中加入一種掩蔽劑使干擾成分仍在溶液中，而失去了干擾作用，多用于絡(luò)合滴定中。第41頁(yè)，課件共44頁(yè)，創(chuàng)作于2023年2月八、濃縮為了提高待測(cè)組分的濃度，常對(duì)樣