第二章基因重組

第二章基因重組第1頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月

一.微生物遺傳體制的概念第一節(jié)微生物的雜交和遺傳體制1．雜交：基因不同的個(gè)體或品種間通過接觸使染色體重新搭配（組合）而產(chǎn)生新個(gè)體的過程叫雜交。而在雜交的群體中進(jìn)行選育就叫雜交育種。第2頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月基因重組涉及范供受體關(guān)系整套染色體部分染色體個(gè)別或少數(shù)基因細(xì)胞融合真菌有性生殖真菌準(zhǔn)性生殖細(xì)胞暫時(shí)溝通細(xì)菌雜交F因子轉(zhuǎn)導(dǎo)R因子轉(zhuǎn)移細(xì)胞不接觸轉(zhuǎn)導(dǎo)轉(zhuǎn)化基因重組類別2.微生物遺傳體制第3頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月對(duì)于高等動(dòng)，植物而言，他的某些細(xì)胞（精原細(xì)胞和卵原細(xì)胞都是二倍體（2n），通過減數(shù)分裂而產(chǎn)生單倍體的生殖細(xì)胞，通過受精作用又成為二倍體細(xì)胞，并進(jìn)一步發(fā)育為雙倍體的個(gè)體，這一過程稱為生活史。二、微生物雜交和他們生活史的關(guān)系所謂生活史：第4頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月（一）高等動(dòng)植物生活史雙倍體細(xì)胞減數(shù)分裂單倍體細(xì)胞雙倍體細(xì)胞減數(shù)分裂單倍體細(xì)胞個(gè)體配偶子異核體細(xì)胞（暫時(shí)存在）雙倍體細(xì)胞（結(jié)合子）(二）大腸桿菌k-12生活史單倍體細(xì)胞單倍體細(xì)胞無性繁殖系異核體細(xì)胞（暫時(shí)存在）雙倍體細(xì)胞減數(shù)分裂單倍體細(xì)胞第5頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）不完全菌生活史單倍體細(xì)胞單倍體細(xì)胞無性繁殖系異核菌絲體（暫時(shí)存在）雙倍體菌絲減數(shù)分裂單倍體細(xì)胞無性繁殖系無性繁殖系第6頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月1．高等動(dòng)植物以雙倍體為主，細(xì)菌以單倍體為主，真菌介于兩者之間，但更接近于細(xì)菌；細(xì)菌，真菌同高等動(dòng)，植物生活史的比較：2．高等動(dòng)植物的雙倍體分化形成二倍體個(gè)體，細(xì)菌的單倍體分裂而形成無性繁殖系，真菌雖是多細(xì)胞的，但他可以由單一體細(xì)胞生長成獨(dú)立的菌株，它的單倍體，雙倍體或異核體都能形成無性繁殖系；3．就“性”的分化而言，微生物中沒有嚴(yán)格的性細(xì)胞和體細(xì)胞之分（除個(gè)別能產(chǎn)生有性孢子的真菌種類之外），而高等動(dòng)植物中性，體細(xì)胞區(qū)分明顯。第7頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月一.紅色面包霉（NeurosporaCrassa）的生活史和遺傳規(guī)律第二節(jié)真菌的有性生殖1、生活史：第8頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月nAnaAaAaAAaa2n2nnnnAnAnananAnAnAnAnananana紅色面包霉雜交的遺傳分析(第一次分裂分離)2、紅色面包霉雜交的遺傳分析第9頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月1)AAAAaaaa2)aaaaAAAA3)AAaaAAaa4)aaAAaaAA5)AAaaaaAA6)aaAAAAaa第一次分裂分離第二次分裂分離為什么會(huì)出現(xiàn)第二次分裂分離的子囊呢？如下圖8個(gè)子囊孢子排列的六種方式：第10頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月nAnaAaAa2n2nnnAnanAnAnanaAaanAnanAnananAnA第二次分裂分離第11頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月在減數(shù)分裂的第一次核分裂時(shí)，如果來自一個(gè)親本的二個(gè)基因（如圖二個(gè)A）趨向一極，而來自另一個(gè)親本的二個(gè)基因（如圖二個(gè)a）趨向另一極這種分裂方式稱為還原分裂（意思是指分裂后還原到雜交之前的二個(gè)親本的狀態(tài)）。如果來自親本的各一個(gè)基因一起趨向一極，另外各一個(gè)基因（如圖中Aa）趨向另一極，意思是分裂后的二個(gè)核中各含有相等的基因這種分裂方式稱為均等分裂。還原分裂：均等分裂：第12頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月2)很容易觀測(cè)到一次減數(shù)分裂所產(chǎn)生的四分體中一對(duì)基因的分離現(xiàn)象，從而證明相對(duì)性狀的基因在數(shù)目上大致相等的；3)根據(jù)子囊排列的方式推算出某一基因與著絲粒之間的相對(duì)距離：

3、以紅色面包霉作為遺傳分析的材料有什么優(yōu)越性1)能直接測(cè)定某個(gè)基因的存在；某一基因與著絲粒的距離=圖距單位=第二次分裂分離子囊數(shù)×1/2子囊總數(shù)4)利用測(cè)定某一基因與著絲粒的距離，從而間接測(cè)出基因與基因的距離?！?00%第13頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月1．酵母菌的生活史：二、酵母菌的雜交及遺傳分析形成成熟子囊4個(gè)單倍體的核AAaaAAaaaAaAaA出芽出芽減數(shù)分裂體細(xì)胞(2n)出芽核配質(zhì)配第14頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月

2．酵母菌的遺傳分析四分體四分體內(nèi)容

類型結(jié)合相AB×ab

排斥相Ab×aBPDABABababAbABaBaBNPDAbAbaBaBABABababTABAbaBabAbABabaB雙基因雜交的四分體類型第15頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月有連鎖關(guān)系的二個(gè)基因之間雜交產(chǎn)生的子囊類型AbAbaBaBAAbbaaBBAbAbaBaBAAbbaaBBABABababAAbbaaBBAAbbaaBBAbABabaBAbABabaB第16頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月ABab聯(lián)會(huì)AaBb第一次核分裂同源染色體分開第二次核分裂ABABababAbaBAbaBABabAAbbABABBBaabbaann2n2nnnnnAB.AB.ab.ab(PD)Ab.Ab.aB.aB(NPD)沒有連鎖關(guān)系的二個(gè)基因之間，三種子囊類型出現(xiàn)的比例：雜交型：AB×ab在染色體分離時(shí)，二個(gè)基因與著絲粒之間都未發(fā)生交換，結(jié)果只會(huì)出現(xiàn)PD和NPD兩種類型，并且比例是PD:NPD=1:1第17頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月ABab聯(lián)會(huì)AaBb第一次核分裂同源染色體分開第二次核分裂a(bǔ)BABabAbAbABabaBABabAabbBBAabbAan2n2nnnnAB.aB.Ab.ab(T)Ab.ab.AB.aB(T)nABaBn

當(dāng)二個(gè)基因有一個(gè)基因在染色體分離時(shí)與著絲粒之間發(fā)生交換，而另一個(gè)基因未發(fā)生交換，則會(huì)出現(xiàn)一種類型的子囊，即T型。第18頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月如果二個(gè)基因同時(shí)都與著絲粒發(fā)生交換，根據(jù)同樣的道理就有可能出現(xiàn)三種類型的子囊：PD:T:NPD=1:2:1基因連鎖

基因不連鎖交換四分體類型和著絲粒的交換四分體類型不交換PD

二個(gè)染色體都不交換1PD:1NPD單交換T

一個(gè)發(fā)生交換T

雙交換1PD:2T:1NPD二個(gè)同時(shí)交換1PD:2T:1NPD多交換1PD:4T:1NPD

第19頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月PD(AbAbaBaB)PD(AbAbaBaB)NPD(abABabAB)AabBAabBAabBabBAbBAabBAa不交換單交換二線雙交換三線雙交換三線雙交換四線雙交換T(AbabABaB)T(abABAbaB)T(AbaBabAB)0%50%0%50%50%100%交換類型染色體圖象重組四分體類型

染色體交換和重組及四分體類型的關(guān)系第20頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月第三節(jié)、真菌的準(zhǔn)性生殖一、準(zhǔn)性生殖的概念：

準(zhǔn)性生殖是指真菌中，不通過減數(shù)分裂而導(dǎo)致基因重組的一種生殖方式。他的整個(gè)過程包括幾個(gè)相互聯(lián)系的階段，即：異核體的形成，雜合二倍體的形成，體細(xì)胞雜交及染色體單倍化。第21頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月（一）異核體的形成（二）雜和二倍體的形成1.互養(yǎng)解釋的排除2.單倍重組體和二倍體的排除（三）體細(xì)胞重組1.染色體交換2.染色體單倍化二、準(zhǔn)性生殖過程第22頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月三、準(zhǔn)性生殖和有性生殖的異同點(diǎn)準(zhǔn)性生殖和有性生殖的共同點(diǎn)：

準(zhǔn)性生殖和有性生殖有類似的遺傳現(xiàn)象。如：核融合，形成雜合二倍體、隨后染色體再分離、染色體之間進(jìn)行交換，出現(xiàn)重組體等。由此可見，準(zhǔn)性生殖和有性生殖最根本的相同之處就是均能導(dǎo)致基因重組，從而豐富遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)，出現(xiàn)子代多樣性。準(zhǔn)性生殖和有性生殖的不同點(diǎn)：1.有性生殖導(dǎo)致產(chǎn)生有性孢子，有性孢子在形態(tài)、生理上與體細(xì)胞有一定的區(qū)別，且基因重組一般是發(fā)生在性細(xì)胞中；準(zhǔn)性生殖的細(xì)胞與體細(xì)胞無區(qū)別，基因重組是發(fā)生在有絲分裂的體細(xì)胞交換中，沒有性過程,沒有性孢子。

2.有性生殖是通過減數(shù)分裂進(jìn)行基因重組，減數(shù)分裂是一個(gè)有規(guī)律的協(xié)調(diào)的過程；準(zhǔn)性生殖過程中染色體交換和染色體單倍體化都是不規(guī)律的偶然發(fā)生的過程，且頻率極低。第23頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月ABCabcABCabcABCabcABCabcABCabcABCabcABCAbcaBCabc體細(xì)胞交換模式圖(A)(B)

(A)不發(fā)生交換(B)發(fā)生交換第24頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月ABCabcEDFedfGHTghtEDFedfGHTghtABCabcABCabcEDFedfGHTGHTghtABCabcEDFedfght

染色體的不分離行為第25頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月2．異核體可以作為細(xì)胞質(zhì)基因測(cè)定的工具。四、研究異核體的意義1．異核體在遺傳分析中可以用來測(cè)定等位基因和非等位基因；第26頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月第四節(jié)細(xì)菌的接合作用一、細(xì)菌基因重組的發(fā)現(xiàn)和證實(shí)（一）細(xì)菌基因重組的發(fā)現(xiàn)（二）細(xì)菌基因重組的證實(shí)標(biāo)記：以基因發(fā)生突變的特點(diǎn)來標(biāo)記某菌株的性質(zhì)，這種突變的基因就稱為該菌株的標(biāo)記（簡單的說突變的基因表型就是標(biāo)記）。第27頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月完全培養(yǎng)基A-B+lac-STT1SA+B-lac+SST1T2×1061061062×106基本培養(yǎng)基大腸桿菌k-12菌株的基因重組第28頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月1.排除遺傳物質(zhì)的滲入非選擇標(biāo)記：在某種培養(yǎng)條件下，可能起到排除親本的某些基因標(biāo)記。雜交個(gè)體單倍體的證實(shí)：2.排除細(xì)胞的互養(yǎng)3.排除回復(fù)突變菌株A菌株B通過濾器圖一種U型管，一臂放菌株A,一臂放菌株B，中間由濾器隔開，未發(fā)現(xiàn)有原養(yǎng)型細(xì)胞出現(xiàn)第29頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月二、致育因子和細(xì)菌雜交F因子的基因結(jié)構(gòu)如下：（一）F因子：第一區(qū)段：控制自主復(fù)制的區(qū)段第二區(qū)段：控制細(xì)菌間傳遞作用的區(qū)段第三區(qū)段：重組區(qū)段

repincoriVreporiTfinP復(fù)制自主復(fù)制fexIS3rδIS2IS3插入與切除重組區(qū)段ZIDTSGHOFNUCWV轉(zhuǎn)移操縱子傳遞大腸桿菌F質(zhì)粒的基因圖第30頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月點(diǎn)樣法（—）（—）+A(—）+B(—）+A+B依次點(diǎn)種①②③④一.四種都不長A+B+二.1.3不長，2.4長A-B+三.1.2不長，3.4長，A+B-四.1.2.3不長，4長A-B-

A-B+A+B-第31頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月第一區(qū)段：控制自主復(fù)制的區(qū)段第二區(qū)段：控制細(xì)菌間傳遞作用的區(qū)段第三區(qū)段：重組區(qū)段

repincoriVreporiTfinP復(fù)制自主復(fù)制fexIS3rδIS2IS3插入與切除重組區(qū)段ZIDTSGHOFNUCWV轉(zhuǎn)移操縱子傳遞大腸桿菌F質(zhì)粒的基因圖第32頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月(二)三種狀態(tài)的E.coli細(xì)菌之間的關(guān)系1、F+和F-能雜交，Hfr和F-也能雜交，F(xiàn)-和F-則不能雜交，說明F-不同于F+與Hrf，F(xiàn)+與Hfr有相同的地方；2、從F+細(xì)胞群中可以得到Hfr菌株，從Hfr菌株中也可以得到F+的菌株，而從F-中則不可能得到Hfr和F+菌株，說明F+與Hrf都含有F因子，而F-沒有；3、F+和F-雜交后，后代轉(zhuǎn)變?yōu)镕+，在雜交過程中出現(xiàn)的重組頻率大約只有10-6；而Hfr與F-和F-雜交后，后代仍然是F-，但重組頻率都高于上種好多倍。這說明F+與Hrf雖然都能導(dǎo)致基因重組，但它們是有區(qū)別的；4、F+細(xì)胞經(jīng)吖啶類藥物處理后轉(zhuǎn)變成F-（這種藥物濃度很低，不致于抑制細(xì)菌生長）；而Hfr細(xì)胞經(jīng)同樣處理后性質(zhì)仍然不變。這說明F+與Hrf雖都含有F因子，但它們?cè)诩?xì)胞中存在的狀態(tài)不一樣。第33頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月(三)大腸桿菌雜交的幾種可能1.F+×F-雜交2.Hfr×F-雜交3.F’×F-雜交利用Hfr×F-的二個(gè)菌株結(jié)合，在連續(xù)間斷的不同時(shí)間內(nèi)取樣，放在中斷器內(nèi)，以人為機(jī)械的方法，中斷Hfr×F-的接合，分別將接合子涂在一系列不同的選擇培養(yǎng)基上，通過在不同的選擇培養(yǎng)基上在不同時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)的重組子，可以將某一基因的位置確定下來。這一方法稱為中斷雜交。利用中斷雜交可以進(jìn)行基因定位。三、中斷雜交第34頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月F-F+F自然丟失自主復(fù)制F+F重組脫離FHfrFFF’細(xì)菌染色體DNA第35頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月F+F-性纖毛F+×F-F質(zhì)粒第36頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月F++F-F+F-5’F+F-5’F+F-性傘毛F+×F-的接合作用第37頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月123456123456123456123456123456metstrserhisgallacproleuthrmetstrserhisgallacproleuthrmetstrserhisgalleuthrprolac123456metstrserhisgalthr123456lacproleu（A）（B）（C）（D）（E）第38頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月

一、轉(zhuǎn)化的定義：（一）體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)第五節(jié)細(xì)菌的轉(zhuǎn)化把一個(gè)細(xì)胞的遺傳物質(zhì)抽提出來轉(zhuǎn)移到另一個(gè)受體細(xì)胞中，使其能在受體細(xì)胞中表達(dá)的過程。二．轉(zhuǎn)化現(xiàn)象的發(fā)現(xiàn)SⅢ（活）小白鼠死亡RⅡ（活）小白鼠存活SⅢ（加熱）小白鼠存活RⅡ（活）+SⅢ（加熱）小白鼠死亡SⅢ（活）注射注射注射注射分離第39頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月（二）體外實(shí)驗(yàn)蛋白質(zhì)+RⅡ→RⅡ

RNA+RⅡ→RⅡ

多糖+RⅡ→RⅡ

其它+RⅡ→RⅡ

DAN+RⅡ→RⅡ（大量）+SⅢ（少量）SⅢ細(xì)胞抽提物

分離第40頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月理化分析結(jié)果：

1．在理論上，它證實(shí)了在生物（包括微生物）中，DNA是決定遺傳的主要物質(zhì)；（三）細(xì)菌轉(zhuǎn)化現(xiàn)象發(fā)現(xiàn)的意義1．所含元素在成份和重量上與DNA相似；2．只有DNA酶才能降解這種物質(zhì)；3．電泳的位置與DNA相同，對(duì)紫外線的吸收峰與DNA一致。2．運(yùn)用轉(zhuǎn)化作用可以深入研究遺傳物質(zhì)的本質(zhì)，作用方式以及結(jié)構(gòu)與功能等問題之間的關(guān)系，從而更好地去認(rèn)識(shí)基因的物質(zhì)基礎(chǔ)。3．在育種實(shí)踐上，為定向培育提供了一條新的育種途徑。第41頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月三、轉(zhuǎn)化過程（一）感受態(tài)的出現(xiàn)感受態(tài)：細(xì)菌能夠從周圍環(huán)境中吸取DNA分子，使之不被DNA酶破壞，能接受轉(zhuǎn)化因子的這一時(shí)刻，細(xì)菌出現(xiàn)的一種生理狀態(tài)。第42頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月這種假設(shè)認(rèn)為細(xì)菌表面的細(xì)胞壁是阻礙轉(zhuǎn)化因子進(jìn)入細(xì)胞的障礙，在某些情況下，當(dāng)細(xì)菌局部失去了細(xì)胞壁，轉(zhuǎn)化因子能通過膜而進(jìn)入細(xì)菌。關(guān)于感受態(tài)出現(xiàn)的假說：1.局部原生質(zhì)化假說：

這一假說認(rèn)為感受態(tài)細(xì)胞的特征是細(xì)胞表面出現(xiàn)DNA的結(jié)合位點(diǎn)，這種結(jié)合位點(diǎn)能吸附游離的DNA，實(shí)驗(yàn)證明它只能與雙鏈DNA結(jié)合不能與單鏈DNA結(jié)合，并且證明這種結(jié)合能力是受一種酶的作用。2．酶受體假說：第43頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月1051041031022040608010012014010010細(xì)菌的生長量培養(yǎng)時(shí)間（min)

肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化鏈霉素抗性的感受態(tài)曲線虛線表示受體細(xì)菌的生長曲線；實(shí)線表示每毫升中轉(zhuǎn)化子的變化。第44頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月（三）轉(zhuǎn)化因子的整合（二）轉(zhuǎn)化因子的結(jié)合與進(jìn)入1．表面結(jié)合的證實(shí)2．轉(zhuǎn)化因子的進(jìn)入1．整合前轉(zhuǎn)化因子的狀態(tài)第45頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月2．轉(zhuǎn)化因子整合的過程123456

轉(zhuǎn)化過程第46頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月1．受體細(xì)胞的感受態(tài)，它決定轉(zhuǎn)化因子能否進(jìn)入細(xì)胞；轉(zhuǎn)化效率決定下列三個(gè)內(nèi)在因素：2．受體細(xì)胞的限制酶系統(tǒng)，它決定轉(zhuǎn)化因子在整合前是否被分解；3．受體和供體的同源性，它決定轉(zhuǎn)化因子的整合。第47頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月經(jīng)噬菌體為媒介，把一個(gè)細(xì)菌的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)到另一個(gè)細(xì)胞中去表達(dá)的過程。

感染細(xì)菌后，宿主體內(nèi)很快繁殖，最后使宿主細(xì)胞裂解的噬菌體。第六節(jié)細(xì)菌的轉(zhuǎn)導(dǎo)（一）噬菌體的概念感染細(xì)菌后，能與宿主細(xì)胞的DNA整合在一起，并以原噬菌體的狀態(tài)存在細(xì)胞內(nèi)。一、轉(zhuǎn)導(dǎo)的概念：1．烈性噬菌體：2．溫和噬菌體：第48頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月在溶源性細(xì)胞中沒有感染力的噬菌體，這種噬菌體是以整合在宿主染色體上的形式存在。1．在遺傳上是穩(wěn)定的；（三）“λ”噬菌體使大腸桿菌形成溶源性細(xì)菌的原因帶有原噬菌體的細(xì)菌。（二）溶源性細(xì)菌的遺傳特征2．可以自然裂解，但裂解頻率很低，在約只有10-2-10-5，經(jīng)過誘導(dǎo)后（如經(jīng)U.V處理）裂解率可以提高到90%以上；3．對(duì)于外來同源噬菌體的感染具有免疫力。3．原噬菌體：4．溶源性細(xì)菌：第49頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月1．“λ”的基因結(jié)構(gòu)及其功能把環(huán)狀“λ”DNA拉成直線可以變成如下圖：左段AWBCDEFZUVGTHMLKJG5’中段b2PP’attIntxisredβγcⅡNnexcⅠcrocⅡOP右段QSRA5’第50頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月A-F7個(gè)基因：形成“λ”頭部蛋白的結(jié)構(gòu)基因；Z-J11個(gè)基因：形成“λ”尾部蛋白的結(jié)構(gòu)基因：int:編碼的酶控制“λ”的整合；xis:編碼剪切酶,int和xit共同作用控制“λ”原噬菌體的切割；att：整合區(qū)，大約15bp；red：它包括redα、redβ、redγ三個(gè)部分，它們的功能是促進(jìn)一般性重組；左段AWBCDEFZUVGTHMLKJG5’中段b2PP’attIntxisredβγcⅡNnexcⅠcrocⅡOP右段QSRA5’第51頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月N：起促進(jìn)轉(zhuǎn)錄的作用；ci:產(chǎn)生阻遏蛋白，阻遏“λ”的整個(gè)基因駔轉(zhuǎn)錄；rex：產(chǎn)生免疫蛋白；cro：關(guān)閉ci基因，促進(jìn)裂解作用；o、p：起調(diào)控作用；Q：促進(jìn)R2轉(zhuǎn)錄子的轉(zhuǎn)錄；s.R:直接與裂解反應(yīng)有關(guān)；m——m/：粘性末端約12bp。左段AWBCDEFZUVGTHMLKJG5’中段b2PP’attIntxisredβγcⅡNnexcⅠcrocⅡOP右段QSRA5’第52頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月PLOLPRORN左右rexcⅠcro2．產(chǎn)生溶源化的大致過程如下圖：第53頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月K2(裂解區(qū)段）R1L1L2(重組區(qū)段）L1(免疫區(qū)）AttintxisredcⅢNJLZFIAMM’RSQPOrexcⅠ

crocⅡpreλ第54頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月包括局限轉(zhuǎn)導(dǎo)和普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)（完全轉(zhuǎn)導(dǎo)、流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)）兩個(gè)類型。

只能使供體性狀的一種或少數(shù)幾種以噬菌體為媒介轉(zhuǎn)移到受體中表達(dá)的過程稱為局限轉(zhuǎn)導(dǎo)。二、轉(zhuǎn)導(dǎo)的發(fā)現(xiàn)三、轉(zhuǎn)導(dǎo)的類型（一）局限轉(zhuǎn)導(dǎo)第55頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月K12菌株溶源細(xì)菌裂解液感染不同的缺陷的大腸桿菌，涂選擇平板（-）gal。gal-大腸桿菌形成淺色菌苔加裂解液1．局限轉(zhuǎn)導(dǎo)的發(fā)現(xiàn)和證實(shí)第56頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月2．“λ”噬菌體轉(zhuǎn)導(dǎo)gal基因的過程坎貝爾模型（campbell）解釋局限轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制galchlDattNRm’mλjatt

biochlA

BP’PB’BP’PB’NRmmAjbiochlABB’PP’NRmmAjbiochlA

細(xì)菌染色體attmAj

NRm’λ染色體溶源性細(xì)菌染色體galchlDgalchlDPP’第57頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月attattBP’PB’attBP’轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體的形成galbioattBP’galgalmm’mm’NNRm’mAAR第58頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月4．低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)和高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)低頻轉(zhuǎn)導(dǎo)：由單重溶源化細(xì)菌導(dǎo)致的轉(zhuǎn)導(dǎo)作用?！唉恕鞭D(zhuǎn)導(dǎo)的gal+基因的頻率大約只有10-6。3．轉(zhuǎn)導(dǎo)導(dǎo)致的結(jié)果1）穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導(dǎo)2）不穩(wěn)定的轉(zhuǎn)導(dǎo)高頻轉(zhuǎn)導(dǎo)：由雙重溶源化細(xì)菌導(dǎo)致的轉(zhuǎn)導(dǎo)作用，轉(zhuǎn)導(dǎo)的頻率占50%。第59頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月ABC+gal+PP’BP’gal-BB’BP’BP’gal+gal-PB’BP’gal+gal-PB’BP’λgalλ第60頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月1．普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)的機(jī)理（二）普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)：凡是染色體上的各個(gè)單基因或是緊密聯(lián)系鎖的兩個(gè)基因都有可能被某一種噬菌體轉(zhuǎn)導(dǎo)的作用。普遍性轉(zhuǎn)導(dǎo)的機(jī)理是由選擇性包裹模型進(jìn)行解釋。第61頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月選擇性包裹模型Leu+Leu-Leu+Leu+Leu-Leu+Leu-Leu-第62頁，課件共74頁，創(chuàng)作于2023年2月1）完全轉(zhuǎn)導(dǎo)：2．普遍轉(zhuǎn)導(dǎo)的結(jié)果2）流產(chǎn)轉(zhuǎn)導(dǎo)：由轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體導(dǎo)入的片段與寄主染色體發(fā)生交換，整合在寄主染色體上，并和寄主染色體同步復(fù)制，在細(xì)胞分裂時(shí)，每一個(gè)子細(xì)胞都獲得有導(dǎo)入的DNA，從而恢復(fù)每一細(xì)胞的正常生長。由轉(zhuǎn)導(dǎo)噬菌體導(dǎo)入的片段，并不與