有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合藥物治療方案對(duì)心衰大鼠n-probnp及腫瘤壞死因子-的影響

有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合藥物治療方案對(duì)心衰大鼠n-probnp及腫瘤壞死因子-的影響

心力衰竭是一種由各種心臟疾病的末期，也是一種由各種心臟結(jié)構(gòu)或功能疾病引起的室空氣量增加或（或）所造成的綜合征。由于心室收縮功能下降,射血功能受損,心排血量不能滿足機(jī)體代謝需要,器官、組織血液灌注不足,具有高發(fā)病率、高死亡率、高住院率、生活質(zhì)量低下等特點(diǎn)。如何提高心衰患者生活質(zhì)量,降低其病死率,是目前研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。而運(yùn)動(dòng)藥物聯(lián)合治療方案逐漸受到廣大學(xué)者的關(guān)注,本文以大鼠腹腔注射阿霉素造模,有氧運(yùn)動(dòng)(游泳)聯(lián)合呋塞米作為干預(yù)因素,實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示對(duì)改善腦鈉肽前體(NT-proBNP)與腫瘤壞死因子-α(TNF-α)具有明顯效果,茲報(bào)道如下。1材料和方法1.1試驗(yàn)藥1.1.1動(dòng)物SPF級(jí)雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠50只,體質(zhì)量200~240g,由湖南中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供,許可證編號(hào):SYXK(湘)2013-0005,每籠3只,在實(shí)驗(yàn)期間均常規(guī)喂食,清潔水喂養(yǎng)。1.1.2試藥NT-proBNP試劑盒(批號(hào)14052001,8×12TEST)由上海拜沃生物科技有限公司提供;TNF-α試劑盒(批號(hào)050825,4×12TEST)由北京科美東雅生物技術(shù)有限公司提供;呋塞米注射液(批號(hào)H41020310,2mL,20mg×10支)由河南潤弘制藥股份有限公司提供;注射用鹽酸阿霉素(批號(hào)H33021980,10mg×5支)由浙江海正藥業(yè)股份有限公司提供。1.1.3主要儀器TKR-200C小動(dòng)物呼吸機(jī)(江蘇特力麻醉呼吸公司);XDH-3心電圖機(jī)(上海醫(yī)用電子儀器廠);H.H.S11-2B電熱恒溫水浴箱(上海醫(yī)療器械五廠);多道生理信號(hào)記錄系統(tǒng)(成都儀器廠,RM6240生物信號(hào)采集處理系統(tǒng))等。1.2大鼠nt-probnp模型及運(yùn)動(dòng)方案1.2.1模型建立與評(píng)價(jià)50只大鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法分為正常對(duì)照組(10只)與模型組(40只),模型組大鼠腹腔注射阿霉素(ADR),用生理鹽水配制成2mg/mL液體,每周按0.75mL/kg劑量腹腔注射,分2次注射,共7周,累積總量21mg/kg。正常對(duì)照組的大鼠腹腔注射等量的生理鹽水。造模完成后觀察2周,大鼠精神萎靡,食欲不振,活動(dòng)量減低,毛發(fā)枯黃無澤,腹水嚴(yán)重,行走蹣跚等癥狀;NT-proBNP檢測均大于400pg/mL,顯示造模成功,根據(jù)NYHA分級(jí)模型為二級(jí)心衰。造模期間死亡大鼠4只。再采用隨機(jī)數(shù)字表法將造模成功大鼠分為心衰模型組、有氧運(yùn)動(dòng)治療組、呋塞米治療組、運(yùn)動(dòng)呋塞米合治組,每組9只。1.2.2給藥方式造模完成后,觀察2周。呋塞米治療組大鼠腹腔注射呋塞米2mg/kg,1次/d,共4周;運(yùn)動(dòng)呋塞米合治組大鼠先腹腔注射等量呋塞米2mg/kg,每日1次,共4周,3h后,再采用有氧游泳運(yùn)動(dòng)方式;而正常對(duì)照組、有氧運(yùn)動(dòng)組、心衰模型組大鼠均腹腔注射等量生理鹽水,1次/d,共4周。1.2.3運(yùn)動(dòng)方案采用有氧游泳運(yùn)動(dòng)形式,用圓柱形游泳水桶直徑60cm,高120cm,水深70cm,水溫控制在31~36℃,每天訓(xùn)練1次,每周6次,共訓(xùn)練4周。采用遞增負(fù)荷的形式,第1周的單次訓(xùn)練時(shí)間從10min逐漸增至60min,直至第4周末;大鼠游泳過程中如發(fā)現(xiàn)有力竭表現(xiàn)(如連續(xù)5s不能浮出水面),則立即撈出水面,休息5min后再次投入水中,直至完成訓(xùn)練時(shí)間。運(yùn)動(dòng)4周后,檢測相關(guān)指標(biāo)。1.3離心液-上清液法(1)標(biāo)本采集方法:從腹主動(dòng)脈采血6mL,加入抗凝劑制成血漿,靜置2h,3000r/min離心15min;取上清液,置于-20℃保存;(2)觀察指標(biāo):采用ELISA法檢測NT-proBNP及TNF-α指標(biāo),標(biāo)本送江蘇維爾生物科技有限公司檢測。1.4方差齊時(shí)用單因素方差分析法采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件分析,數(shù)據(jù)以“x±s”表示,方差齊時(shí)用單因素方差分析法,方差不齊時(shí)用Tambane’sT2法,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1大鼠致內(nèi)臟器損傷的造模與施加影響因素的關(guān)系由于阿霉素是一種抗腫瘤抗生素,具有一定毒副作用,腹腔注射導(dǎo)致內(nèi)臟器官的損傷,在造模與施加影響因素過程中,大鼠病死率高,這與文獻(xiàn)結(jié)果一致。其中心衰模型組死亡4只,有氧運(yùn)動(dòng)治療組死亡3只,呋塞米治療組死亡3只,運(yùn)動(dòng)呋塞米合治組死亡2只。2.2各組大鼠血清nt-probnp的變化比較與正常對(duì)照組比較,其他4組NT-proBNP明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),說明造模成功;與心衰模型組比較,有氧運(yùn)動(dòng)治療組、呋塞米治療組、運(yùn)動(dòng)呋塞米合治組3組血清NT-proBNP明顯降低,呈逐漸下降趨勢,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),且運(yùn)動(dòng)呋塞米合治組最低;與運(yùn)動(dòng)呋塞米合治組比較,有氧運(yùn)動(dòng)治療組、呋塞米治療組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表1。2.3組tnf-的比較與正常對(duì)照組比較,其他4組TNF-α明顯增高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01);與心衰模型組比較,有氧運(yùn)動(dòng)治療組、呋塞米治療組、運(yùn)動(dòng)呋塞米合治組3組TNF-α呈逐漸下降趨勢,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),且運(yùn)動(dòng)呋塞米合治組最低;與運(yùn)動(dòng)呋塞米合治組比較,有氧運(yùn)動(dòng)治療組、呋塞米治療組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見表2。3清除速度和速度有氧運(yùn)動(dòng)是指人體在氧氣充分供應(yīng)的情況下進(jìn)行的體育鍛煉;在有氧運(yùn)動(dòng)過程中,人體吸入的氧氣與需求相等,達(dá)到生理上的平衡狀態(tài)。有氧運(yùn)動(dòng)可以增強(qiáng)每搏輸出量與射血分?jǐn)?shù),改善心臟功能,提高心指數(shù)和生物電穩(wěn)定性等。呋塞米又稱速尿,是一種強(qiáng)有力的利尿劑,是加速排泄毒物,消除水腫,減輕心臟負(fù)擔(dān)的臨床常用藥物。而心衰主要是心臟功能下降,射血分?jǐn)?shù)低下,水腫突出,導(dǎo)致患者生活質(zhì)量降低,病死率與住院率高,因此,改善心臟功能、消除水腫是治療心衰的關(guān)鍵。3.1對(duì)心功能分級(jí)的影響NT-proBNP是心力衰竭診斷和評(píng)估的重要生物標(biāo)志物,是近20年發(fā)現(xiàn)的一類具有多種生物活性的多肽,其半衰期長達(dá)120min,且穩(wěn)定性佳,能維持循環(huán)系統(tǒng)容量和滲透壓的穩(wěn)定。NT-proBNP濃度的測定可幫助臨床客觀評(píng)價(jià)患者的心功能,是目前測定心衰程度的重要指標(biāo)。TNF-α又稱惡液質(zhì)素,是由激活的單核或巨噬細(xì)胞分泌的一種具有多種生物活性的細(xì)胞因子,與受體結(jié)合能產(chǎn)生多種生物效應(yīng);心衰患者血清或血漿中TNF水平越高,心功能不全越嚴(yán)重。臨床已證明心衰尤其心衰晚期患者血清TNF的水平明顯升高;研究發(fā)現(xiàn),血清TNF水平與心衰臨床功能分級(jí)呈正相關(guān)。因此,NTproBNP與TNF-α可能是評(píng)價(jià)心衰的客觀指標(biāo),實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,有氧運(yùn)動(dòng)(游泳)聯(lián)合呋塞米能明顯改善心衰大鼠NT-proBNP與TNF-α水平,顯著改善心功能狀態(tài),因此,NT-proBNP與TNF-α可能是評(píng)價(jià)心衰的重要客觀指標(biāo)之一。3.2靜脈血栓形成因力在上世紀(jì)80年代,心衰患者需要絕對(duì)臥床休息,從而減輕心臟負(fù)擔(dān),促進(jìn)利尿,可是過度臥床休息又會(huì)導(dǎo)致肌肉萎縮,肌張力下降,導(dǎo)致靜脈血栓形成,從而加重心臟負(fù)擔(dān),造成惡性循環(huán)。而長時(shí)間臥床休息還會(huì)導(dǎo)致胃腸蠕動(dòng)緩慢,食欲下降,情緒消極等問題,最新臨床研究顯示,臥床休息并非最佳措施,本項(xiàng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn),有氧運(yùn)動(dòng)特別是有氧運(yùn)動(dòng)聯(lián)合呋塞米治療方案,能明顯改善心衰大鼠NT-proBNP與TNF-α水平,降低病死率,顯著改善心功能狀態(tài)和心衰大鼠癥狀,提高生存質(zhì)量。3.3呋塞米尿,共混兩心衰大鼠心功能低下,往往伴有嚴(yán)重腹水,外周阻力增加,心臟負(fù)擔(dān)加重,并形成惡性循環(huán),導(dǎo)致活動(dòng)不便。而呋塞米作為心衰治療的首選藥物,能加速排泄毒物,消除水腫,減輕心臟負(fù)擔(dān)。實(shí)驗(yàn)過程發(fā)現(xiàn)