生化檢測中的影響因素課件

生化檢測中的影響因素一、檢測前因素二、檢測中因素三、檢測后因素生化檢測中的影響因素一、檢測前因素

檢測前的影響因素

一、

標本的因素1.生理因素對生化檢驗結(jié)果的影響影響檢驗結(jié)果的生理因素可分為可控因素和不可控因素兩種類型。主要有年齡、性別、運動、情緒、體位改變、生活方式、妊娠、季節(jié)變化、海拔高度、生理性波動等.2.飲食對生化檢驗結(jié)果的影響檢測前的影響因素3.藥物對生化檢驗結(jié)果的影響藥物引起生化檢驗結(jié)果出現(xiàn)誤差的原因可分為物理干擾和化學干擾，物理干擾是由于藥物進入體內(nèi)后使血清的物理性質(zhì)如顏色等發(fā)生變化進而影響某些項目的檢測，而化學干擾是由于藥物本身的化學性質(zhì)如藥物的強還原性等對體內(nèi)某些物質(zhì)測定的影響。此外，許多藥物的副作用使肝、腎功能發(fā)生改變而引起檢驗結(jié)果異常。值得注意的是長期靜脈點滴的病人留取標本時可使標本稀釋，造成某些項目結(jié)果偏低，又因靜點時高濃度的藥物進入標本中，使許多檢驗結(jié)果發(fā)生巨大變化。因此護理人員應避免在靜點時和用藥4h以內(nèi)采取檢驗標本，必要時停藥后再查，以防藥物的干擾作用。3.藥物對生化檢驗結(jié)果的影響藥物引起生化檢驗結(jié)果出現(xiàn)4.標本采集對生化檢驗結(jié)果的影響5.標本處理、儲存對生化檢驗結(jié)果的影響標本的離心速度、時間,離心前放置的時間、以及標本貯存的溫度、時間等都會對生化檢測結(jié)果產(chǎn)生影響。4.標本采集對生化檢驗結(jié)果的影響

6.標本狀態(tài)對生化檢驗結(jié)果的影響6.1溶血溶血是臨床生化檢驗中最常見的一種影響因素，它能引起很多指標明顯異常。溶血的干擾機理有以下三種：一是血細胞中高濃度組分逸出，使測定結(jié)果增高,血細胞內(nèi)濃度比血漿中濃度明顯高的物質(zhì)有LDH、ACP、AST、K+，只要輕微溶血就可以對這些項目產(chǎn)生很大影響。另外若某些物質(zhì)的血細胞內(nèi)濃度低于血清濃度時，則溶血相當于血清被稀釋，因而使這些血清成分特別是發(fā)生重度溶血時的檢測值降低，這類項目主要有Ca2+、Na+、Cl-、UA等。二是血細胞成分進入血清中后因化學反應而引起其他物質(zhì)的濃度改變，如溶血后紅細胞的磷脂進入血清被血清中的磷酸酯酶水解，其結(jié)果造成血清無機磷濃度顯著增高。三是血紅蛋白本身顏色對檢測的光學干擾，血紅蛋白的顏色在431nm和555nm波長附近能使比色、比濁法的吸光度增高，如溶血引起重氮單試劑法膽紅素測定結(jié)果明顯升高。實際上，以上三類干擾在溶血標本中同時存在并可相互作用，因而使受影響的檢項更為復雜，這在超微量、高精度和多指標的檢測分析中顯然不可忽視，因此，嚴控標本溶血是保證檢驗質(zhì)量的重要方面。6.標本狀態(tài)對生化檢驗結(jié)果的影響６.2脂血對生化檢測的干擾:血液脂濁可散射光線，所以對吸光度一般產(chǎn)生正向干擾，導致某些項目如ALB、UA、總蛋白（TP）[23]等測定結(jié)果。而在pH10以上的環(huán)境中，乳糜中的TG會皂化可使血清逐漸變清，使許多比色法測定如Ca2+、Cr、ALP、TP等結(jié)果產(chǎn)生負誤差。６.2脂血對生化檢測的干擾:血液脂濁可散射光線，所以對吸光度6.3黃疸膽紅素對反應結(jié)果產(chǎn)生黃色化合物的比色分析影響很大，一般可以用樣本空白或兩點比色法、連續(xù)監(jiān)測法來消除膽紅素對黃色結(jié)果的影響，但由于膽紅素不穩(wěn)定，隨著膽紅素被氧化為膽綠素、膽褐素而變色，此時如果使用兩點法、連續(xù)監(jiān)測法同樣也不能排除膽紅素對結(jié)果的干擾。此外膽紅素作為一種還原劑對氧化反應有干擾，如氧化酶法測定GLU、TG、UA、膽固醇等，因為膽紅素可以與上述過程中H2O2分解產(chǎn)生的新生態(tài)氧發(fā)生反應，從而使新生態(tài)氧與氧化酶法反應中的色源物質(zhì)結(jié)合減少，導致結(jié)果偏低。此時也可用雙波長法或設計樣本空白消除干擾，亦或當外觀檢查發(fā)現(xiàn)是黃疸血清時可先除蛋白，然后加膽紅素氧化酶預先將膽紅素氧化成較穩(wěn)定的氧化產(chǎn)物膽褐素，可大大減低甚至消除膽紅素的干擾。

返回6.3黃疸膽紅素對反應結(jié)果產(chǎn)生黃色化合物的比色分析影響二、環(huán)境的因素包括生化分析儀的用水、電源以及環(huán)境的溫濕度等方面對生化檢測的結(jié)果都會產(chǎn)生影響。

二、環(huán)境的因素包括生化分析儀的用水、電源以及環(huán)境的溫濕度等

分析中因素確立測定系統(tǒng)的概念測定系統(tǒng)包括測定原理、試劑、儀器、校準品四要素。對于一個臨床檢測項目，如果所用方法的測定原理、試劑、儀器、校準品中任何一個不同，都可能得到不同的測定結(jié)果。如果我們想要得到準確可靠的測定結(jié)果，而該結(jié)果又具有與國際、國內(nèi)其他實驗室的可比性，應該自己建立一個標準測定系統(tǒng)。分析中因素生化分析儀的校準對測定標本的儀器一定要求進行校準，校準時要選擇合適的（配套的）標準品/校準品；如有可能，校準品應能溯源到參考方法或/和參考物質(zhì)；對不同的分析項目要根據(jù)其特性確立各自的校準頻率.儀器的精密度檢查儀器的維護保養(yǎng)生化分析儀的校準用已糖激酶（HK）法則定葡萄糖標準液時，葡萄糖的消耗與NADH的生成是等摩爾關系，校準生化分析儀340nm處NAD(P)H的摩爾吸光系數(shù)。可用ALP測定試劑的緩沖液作為測定試劑，對硝基苯酚標準液作為血清標本，實際測定405nm的吸光度值，根據(jù)對硝基苯酚的濃度可計算ε值。用已糖激酶（HK）法則定葡萄糖標準液時，葡萄糖的消耗與NAD檢測方法的選擇不同的檢測方法對檢測結(jié)果的影響是不言而預的,我們應優(yōu)先選擇國際、國內(nèi)，行業(yè)內(nèi)權威機構推薦的方法，沒有推薦常規(guī)方法的，應該選擇公認的測定方法。試劑的影響生化試劑盒有許多生產(chǎn)廠家，不同廠家產(chǎn)品的質(zhì)量、技術含量等常有區(qū)別，有時即使同一廠家不同批號的同種試劑因原料來源、純度不同以及生產(chǎn)條件變動，會產(chǎn)生批間變異。同一批號的同種試劑盒在儲存、運輸時的情況有所不同，性能也可能發(fā)生變化。同項目試劑盒之間作比較，如果穩(wěn)定性好、線性范圍寬、正向型試劑空白吸光度低、反向型試劑空白吸光度高、試劑空白速率低、瓶間差小者可視為優(yōu)質(zhì)試劑。檢測方法的選擇不同的檢測方法對檢測結(jié)果的影響是不言而預的

校準品（Calibrationmaterials）含有已知量的欲測物，用以校準該測定方法的數(shù)值，它與該方法及試劑、儀器是相關聯(lián)的。校準品的作用是為了減少或消除儀器、試劑等造成的系統(tǒng)誤差。

在全自動生化分析儀上使用配套的試劑和標準品，各儀器廠家均有自己的標準測定系統(tǒng),對于校準品不能亂用。

關于酶活性測定校準問題常用K值有以下幾種：a)理論K值：根據(jù)理論摩爾消光系數(shù)（ε）來計算，如NADH為6.22×103

b)實測K值：由于儀器波長的精密及半寬度不同，而應根據(jù)實測ε值來設定K值c)廠家給的K值：廠家生產(chǎn)試劑盒說明書上提供的K值（有的廠家提供6.3×103）d)校準K值：通過校準物直接校準得到的K值。

從上述K值中不難發(fā)現(xiàn)實測K值大于理論K值，這說明生化分析儀的測光系統(tǒng)還存在著一定誤差，如波長、半寬度及光徑等偏差，使儀器達不到理論上的最佳狀態(tài)；校準K值與實測K值之間也存在一定的差距，即使指示物和儀器相同，其差異可能由試劑及校準品造成的；校準K值應有其溯源性。關于酶活性測定校準問題試劑間的相互干擾全自動生化分析儀的吸樣針、試劑針、攪拌捧及比色杯是常見交叉污染的原因，稱互為干擾的項目為交叉污染對。①測定試劑中含有下一測試所要測定的底物，直接干擾下一檢測的測定結(jié)果;②試劑中含有的某種試劑成分與下一反應所要測定的底物有作用，因而干擾下一反應的測定結(jié)果。；③該試劑中所引導的反應對下一個項目的反應進程帶來間接的干擾，下一項目所測定的是前后兩個項目反應的綜合作用結(jié)果。試劑間的相互干擾

項目參數(shù)的設置對結(jié)果的影響

項目參數(shù)主要包括:標本用量、試劑的配比及用量、反應的溫度、延遲時間、反應時間、監(jiān)測的主波長、次波長、反應類型、監(jiān)測的時間、空白吸光度、底物耗盡及前帶現(xiàn)象的監(jiān)測、額外的清洗。必須要針對不同類型的反應，不同試劑的性質(zhì)設置合理的檢測參數(shù)。項目參數(shù)的設置對結(jié)果的影響分析后階段

目前大多數(shù)檢驗科室都實行了計算機網(wǎng)絡管理技術，病人資料、檢驗數(shù)據(jù)網(wǎng)上共享，各實驗室當天的測試結(jié)果通過聯(lián)機即時傳達電腦網(wǎng)絡，這種模式提高了工作效率，也避免了以往由人為抄錄結(jié)果時發(fā)生的誤差。由于標本量大，影響因素多而復雜，加上審核人員的經(jīng)驗等原因的影響．分析后階段生化檢驗的幾種異常結(jié)果的分析1.體檢標本中的Glu結(jié)果普遍偏低；2.體檢標本中部分TG,T-CH結(jié)果偏低;3.CK-MB大于CK;4.Mg、TBA、K等項目的結(jié)果在與其它一些項目在一起檢測的結(jié)果與單獨檢測的結(jié)果差距較大；5.黃疸標本中的UA、Cr、Glu等結(jié)果偏低；6.溶血標本中的K、LDH、AST、DBIL、CRP等結(jié)果偏高；生化檢驗的幾種異常結(jié)果的分析7.ALT檢測中原倍結(jié)果遠遠大于標本稀釋的檢測結(jié)果；血清ALT測定，血清中的內(nèi)源性丙酮酸及其它酮酸也可與試劑中的指示酶（乳酸脫氫酶）起反應，使結(jié)果偏高。若先加入缺乏α-酮戊二酸的第一試劑，使其它酮酸與指示酶反應之后再加入含有α-酮戊二酸的第二試劑，啟動真正的ALT酶促反應生成丙酮酸，而丙酮酸與乳酸脫氫酶的反應消耗的NAD＋能真正反映ALT的活性，從而消除以上副反應的影響。7.ALT檢測中原倍結(jié)果遠遠大于標本稀釋的檢測結(jié)果；8.部分項目原倍的檢測結(jié)果正常,稀釋后的結(jié)果顯著升高;9.部分免疫比濁法項目的檢測結(jié)果小于＂0＂

8.部分項目原倍的檢測結(jié)果正常,稀釋后的結(jié)果顯著升高;應對措施1.完善制度，認真實施完善的規(guī)章制度，規(guī)范的文件體系是全面質(zhì)量管理體系必須具備的要素，根據(jù)實際情況，制定各級管理制度，如:標本查對制度，儀器校準、保養(yǎng)管理制度，試劑管理制度，各種實驗的標準操作（SOP文件），新項目新方法的評價，質(zhì)量控制操作程序，實驗操作考核制度，差錯登記、安全管理制度等等。各種制度緊密結(jié)合，始終貫穿檢驗分析前、分析中、分析后的全過程。2.加強與客戶的溝通檢驗科與臨床配合的好壞直接影響診療的質(zhì)量，兩者結(jié)合是提高臨床診治水平的重要環(huán)節(jié)。因分析前質(zhì)量控制大部分是由臨床完成的，這就要求檢驗科需加強與臨床聯(lián)系，對標本正確采集及影響測定的各種因素進行告知和培訓，為臨床正確分析結(jié)果提供參考意見，促進檢驗醫(yī)學和諧發(fā)展。

應對措施4.3做好臨床常規(guī)生化的室內(nèi)質(zhì)量控制每日工作前，執(zhí)行嚴格的校準程序，先測定質(zhì)控血清以監(jiān)測儀器的工作狀態(tài)及試劑的質(zhì)量，一旦發(fā)現(xiàn)失控，及時分析原因，采取措施，改善后方可進行當天標本的檢測。在每批標本測定的同時，隨機測定質(zhì)控血清，以監(jiān)控儀器測定的漂移。為保證檢驗質(zhì)量，使用的質(zhì)控血清統(tǒng)一向臨床檢驗中心購買。使用質(zhì)控品時，實驗室要重復檢測以決定每批質(zhì)控品在本室的統(tǒng)計學參數(shù)。在報告檢驗結(jié)果前，質(zhì)控品結(jié)果必須達到實驗室設定的可接受標準。

4.3做好臨床常規(guī)生化的室內(nèi)質(zhì)量控制4.4積極參與各級臨檢中心的室間質(zhì)控評比活動室間質(zhì)控是實驗室認可的重要依據(jù)，是保證實驗室開展項目的基礎，反映了實驗室的準確度和可信度。臨床常規(guī)生化室間質(zhì)量評比活動是相互校正各參與實驗室測定結(jié)果的準確性，并使各實驗室之間的結(jié)果有可比性，減少實驗室內(nèi)的系統(tǒng)誤差等。4.5危機值報告制度的建立與應用危急值是一組代表會危及患者生命的數(shù)據(jù)，應采取及時、有效的治療措施，否則會產(chǎn)生不良后果，出現(xiàn)危急值的標本必須復查